2. 浙江省湖州市吴兴区畜牧兽医局, 湖州 313000
2. Bureau of Animal Husbandry and Veterinary of Wuxing District, Huzhou 313000, China
饲粮中常用的钙源为石粉(主要成分CaCO3),钙含量为35%左右,但重金属含量偏高[1-2]、适口性差,且有较强的系酸力特性,会破坏胃内的酸性环境[3],降低动物对营养物质的消化吸收。有机酸钙如甲酸钙、乳酸钙、柠檬酸钙等不仅是优质的钙源,还可以提供有机酸,且对胃肠道刺激性小[4-5],安全性高,在养殖业中可作为饲料添加剂用于畜禽等动物的钙质补充。
甲酸钙、柠檬酸钙和乳酸钙等已被列入农业部2045号公告《允许使用的饲料添加剂品种目录》[6],具有较为广阔的应用前景。但有关复合有机酸钙在肉鸡饲粮中的使用尚处于探索阶段,关于其添加效果也有待进一步研究。本试验以肉鸡为研究对象,探讨复合有机酸钙对肉鸡生长性能、胫骨发育及血清指标的影响,旨在为复合有机酸钙在畜禽生产中的应用提供科学依据。
1 材料与方法 1.1 试验材料试验所用复合有机酸钙由杭州果谷生物科技有限公司提供,有效成分为甲酸钙、柠檬酸钙和乳酸钙,总钙含量≥26%。
1.2 试验设计采用单因子随机试验设计,选取体重相近的1日龄科宝-500(Cobb-500)肉公鸡900只,随机分为3个组,每组6个重复,每个重复50只鸡。对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,试验1和2组饲喂在基础饲粮中分别添加0.4%和0.8%复合有机酸钙(替换部分无机钙源)的试验饲粮,各组饲粮钙、磷水平保持一致,试验期42 d。
试验选用玉米-豆粕型基础饲粮,参照NRC (1994)鸡的营养需要和NY/T 33-2004《鸡饲养标准》,分1~21日龄和22~42日龄2个阶段配制成粉料,试验饲粮组成及营养水平见表 1和表 2。
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表 1 1~21日龄试验饲粮组成及营养水平(饲喂基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets at 1 to 21 days of age (as fed-basis) |
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表 2 22~42日龄试验饲粮组成及营养水平(饲喂基础) Table 2 Composition and nutrient levels of experimental diets at 22 to 42 days of age (as fed-basis) |
饲养试验在农业部华东动物营养与饲料重点实验室研究试验基地进行,试验季节为夏季,所有试验鸡均在同一栋鸡舍内。采用地面平养的饲养方式,饲养期间自由采食和饮水,连续光照,自然通风,定期打扫鸡舍,保持清洁卫生。鸡只免疫按鸡场常规程序进行。
1.4 测定指标及方法 1.4.1 生长性能分别于21和42日龄08:00,以重复为单位空腹称重;记录每个重复的喂料量和剩料量;计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。
1.4.2 胫骨指标分别于21和42日龄时,每个重复选取1只体重接近平均体重的健康肉鸡,屠宰后取左、右两侧胫骨。去除表面筋膜组织,称重,游标卡尺测量胫骨长度,嫩度仪(TMS-Pro型质构仪)测定胫骨强度。将胫骨经干燥脱脂粉碎后,测定胫骨的灰分、钙和磷含量。
1.4.3 血清指标分别于21和42日龄时,每个重复选取1只体重接近平均体重的健康肉鸡,屠宰取颈静脉血液,于37 ℃水浴静置,4 ℃下3 000 r/min离心15 min,取上清用于测定血清生化及抗氧化指标。采用甲基百里香酚蓝(MTB)比色法测定血清钙含量,采用磷钼酸法测定血清磷含量,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)和降钙素(calcitonin,CT)含量,采用赖氏法测定血清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性,采用4-氨基安替吡啉比色法测定血清碱性磷酸酶(AKP)活性,采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定血清丙二醛(MDA)含量,采用比色法测定血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和总抗氧化能力(T-AOC),采用羟胺法测定血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性。试剂盒均购自南京建成生物工程研究所,严格按照说明书进行操作。
1.5 数据统计分析数据经Excel 2003初步整理后,用SPSS 16.0统计软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA),并对结果进行Duncan氏法多重比较检验,P < 0.05为差异显著。
2 结果 2.1 复合有机酸钙对肉鸡生长性能的影响由表 3可知,与对照组相比,1~21日龄时,试验1和2组肉鸡的ADG分别提高了7.22%和6.13%(P < 0.05),F/G分别降低了3.47%和4.05%(P < 0.05);22~42日龄时,试验1和2组肉鸡的ADG分别提高了7.84%和7.86%(P < 0.05),F/G分别降低了5.24%和4.76%(P < 0.05);在肉鸡生长全期(1~42日龄),试验1和2组肉鸡的ADG分别提高了7.60%和7.23%(P < 0.05),F/G分别降低了5.08%和4.57%(P < 0.05)。饲粮中添加复合有机酸钙对试验各期肉鸡的ADFI均无显著影响(P>0.05)。
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表 3 复合有机酸钙对肉鸡生长性能的影响 Table 3 Effects of compound organic acid calcium on growth performance of broilers |
由表 4可知,与对照组相比,21日龄时,试验1和2组肉鸡的胫骨钙含量分别提高了8.44%和7.06%(P < 0.05);42日龄时,试验1和2组肉鸡的胫骨长度分别提高了10.05%和8.74%(P < 0.05),钙含量分别提高了8.20%和1.86%(P < 0.05)。42日龄时,试验1组肉鸡的胫骨灰分和钙含量显著高于试验2组(P < 0.05),试验1组胫骨磷含量较对照组和试验2组分别提高了3.73%和3.03%(P>0.05)。
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表 4 复合有机酸钙对肉鸡胫骨指标的影响 Table 4 Effects of compound organic acid calcium on tibia indices of broilers |
由表 5可知,饲粮中添加复合有机酸钙对21和42日龄肉鸡的血清PTH、CT、钙和磷含量以及GPT和AKP活性均无显著影响(P>0.05)。与对照组相比,42日龄时,试验1和2组肉鸡的血清GOT活性分别降低了46.32%和45.61%(P < 0.05)。
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表 5 复合有机酸钙对肉鸡血清生化指标的影响 Table 5 Effects of compound organic acid calcium on biochemical indices in serum of broilers |
由表 6可知,与对照组相比,饲粮中添加复合有机酸钙对21和42日龄肉鸡的血清T-AOC、T-SOD和GSH-Px活性以及MDA含量均无显著影响(P>0.05)。
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表 6 复合有机酸钙对肉鸡血清抗氧化指标的影响 Table 6 Effects of compound organic acid calcium on antioxidant indices in serum of broilers |
复合有机酸钙具有双重营养功能,在提供有机酸的同时也提供了优质的钙源。肉鸡饲粮中添加酸化剂或有机酸盐,有利于改善饲粮的适口性,进入机体后能参与机体代谢反应,加速机体对营养物质的吸收[7-9],进而促进肉鸡增重,降低F/G,改善肉鸡的生长性能。Chowdhury等[10]和Adil等[11]报道有机酸能显著提高肉鸡的日增重和饲料转化率。刘娇等[12]报道在肉鸡饲粮中分别添加0.375%、0.500%和0.625%的有机酸可以不同程度地提高肉鸡体重,且以添加量为0.500%时效果最佳。本试验结果表明,饲粮中添加0.4%和0.8%的复合有机酸钙均显著提高了肉鸡的ADG和降低了F/G,与上述报道结果相似。复合有机酸钙对动物的促生长作用还与其生物特性密切相关,有机酸钙具有很高的生物学吸收特性,其中柠檬酸钙的吸收率是无机钙的2.6倍[5, 13],这对肉鸡增重也有良好的促进作用。
本试验饲粮中添加0.4%或0.8%复合有机酸钙对肉鸡的ADFI无显著影响,与Sultan等[14]和Gunal等[15]的研究报道相一致。而Chowdhury等[10]和Haque等[16]研究表明,饲粮中添加有机酸可提高肉鸡的采食量,也有研究发现饲粮中添加有机酸反而降低了肉鸡的采食量[9, 17],与本试验结果存在差异,这可能与有机酸的种类、添加量、饲养环境及饲养方式不同有关[14, 16, 18]。
3.2 复合有机酸钙对肉鸡胫骨发育的影响Chowdhury等[10]、Snow等[19]和Liem等[20]研究显示,饲粮中添加有机酸可显著提高肉鸡的胫骨灰分含量。Brenes等[21]研究也表明,饲粮中添加柠檬酸能提高肉鸡的胫骨灰分、钙和磷含量,提高矿物质的利用率。可见,有机酸的添加可提高矿物质的利用率,改善肉鸡的胫骨发育,这可能是因为矿物质与有机酸结合后更利于其在机体的吸收。本试验中饲粮添加复合有机酸钙显著影响了肉鸡胫骨长度以及钙和灰分含量,其对胫骨的促进效果与以上报道相似。可溶性钙(通常以Ca2+形式存在)是动物有效吸收的主要形式,有研究报道认为有机酸钙的溶解吸收率高,能促进骨骼的生长发育,提高骨组织的钙含量,是一种良好的钙营养强化剂[5, 22]。本试验中使用的钙源为甲酸钙、柠檬酸钙和乳酸钙按一定比例配比制成的复合有机酸钙,其在提供有机酸的同时也提供了优质的钙源(Ca2+)。目前国内有关复合有机酸钙在肉鸡上的应用鲜见报道,关于其促进胫骨生长的作用机理还有待深入研究。
3.3 复合有机酸钙对肉鸡血清指标的影响GOT和GPT是动物体内的2种重要转氨酶,在正常范围内,转氨酶活性的降低表明机体对蛋白质的利用率提高[23],当组织受损时,会引起生物膜通透性增加,导致血清GOT和GPT活性升高[24]。本试验结果显示,与对照组相比,饲粮中添加复合有机酸钙使肉鸡的血清GOT活性降低,间接表明添加复合有机酸钙能提高肉鸡对蛋白质的利用率。血清AKP活性是几种同工酶活性的综合值,这些同功酶主要来自于骨骼、肝脏及小肠,来自于肝脏和小肠的AKP活性相对稳定,因此,血清AKP活性可以间接反映骨骼成骨细胞AKP的活性状况及骨骼代谢状况[25]。本试验结果显示,饲粮中添加复合有机酸钙肉鸡的血清AKP活性无显著影响。而许丽惠等[7]在饲粮中添加0.1%的包被酸化剂能显著影响肉鸡血清AKP的活性。出现上述不同试验结果可能与酸的种类及饲养环境有关[26]。
机体钙代谢受多种激素的影响,PTH和CT是调解细胞外液中Ca2+浓度的2种主要激素,通过拮抗作用共同维持血钙含量稳定。PTH由甲状旁腺产生,可减少骨钙转移,促进前破骨细胞和新破骨细胞的生成;CT可抑制溶骨、破骨细胞活性,促进破骨细胞转变为成骨细胞,具有降低血清钙含量的作用[27]。本试验结果显示,饲粮中添加复合有机酸钙对肉鸡的血清PTH和CT含量无显著影响;与对照组相比,血清钙和磷含量也无显著差异,这可能与PTH和CT对钙、磷的调节有关。关于复合有机酸钙对PTH、CT的作用机制还需进行深入探讨。
机体内的抗氧化防御体系(抗氧化物质、抗氧化酶)有较为强大的抗氧化损伤能力[7]。T-SOD和GSH-Px是机体内重要的抗氧化酶,能有效清除超氧自由基、过氧化物及减少羟基自由基的形成,MDA是衡量氧自由基介导的脂质过氧化程度的指标[28]。刘娇等[12]和许丽惠等[7]在饲粮中添加有机酸和酸化剂有利于提高肉鸡的机体抗氧化能力。本试验中,饲粮中添加复合有机酸钙对21和42日龄肉鸡的血清T-AOC、T-SOD和GSH-Px活性及MDA含量均无显著影响。
4 结论饲粮中添加适量的复合有机酸钙可以有效改善肉鸡的生长性能,促进胫骨发育,且添加量以0.4%较为适宜。
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