目前,我国大中型奶牛场基本都已采用全混合日粮(TMR)饲喂技术,TMR的搅拌时间对粒度大小有明显的影响。国内外许多研究表明TMR粒度,尤其是粗饲料粒度,对奶牛的干物质(DM)摄入量、反刍活动和养分的消化率有一定影响,但得到的结论并不统一。孔庆斌等[1]认为TMR粒度会通过影响奶牛的瘤胃充盈度、食糜与瘤胃微生物的接触面积、瘤胃中食糜的外流速度,进而影响到瘤胃的发酵类型和最终产物以及饲料成分消化部位的转移(淀粉的消化部位由瘤胃转移到小肠),并最终影响到养分的消化率和动物生产性能。贺鸣[2]研究发现,经过机械加工后2、4、8 cm的长苜蓿奶牛DM摄入量分别为12.61、11.65、9.41 kg/d;李胜利等[3]认为,当奶牛饲喂过多粗饲料时,DM摄入量会受到瘤胃大小的限制,小的饲料颗粒可以加快瘤胃外流速度,使奶牛采食更多的饲粮,从而提高DM摄入量。张骞[4]研究发现,经过机械加工后1、3、5 cm长苜蓿对奶牛DM摄入量无显著的影响,但能增加物理有效纤维(peNDF)的摄入量,提高标准乳产量和乳脂率,对乳蛋白率影响却不显著。Yansari等[5]、Einarson等[6]、Kononoff等[7]和Alamouti等[8]认为降低饲料粒度奶牛采食量会提高;但Beauchemin等[9]、Yang等[10]、Yang等[11]和Beauchemin等[12]研究认为粒度降低不影响奶牛的采食量;Kahyani等[13]通过试验发现精饲料超过一定比例后降低TMR粒度对DM摄入量没有影响。Leonardi等[14]和Alamouti等[8]认为TMR粒度与奶牛挑食有很大关系,而Bhandari等[15]研究认为TMR粒度对挑食没有影响。关于奶牛饲料适宜粒度的研究未取得一致的结果。
之前的研究多采用铡草机作为改变TMR粒度的方式,但是在实际的生产过程当中,TMR在混合的过程中搅拌时间也可进一步影响饲草颗粒。国内外关于TMR粒度对奶牛采食、咀嚼活动和生产性能影响的研究文献很多,但通过TMR搅拌时间来改变TMR粒度,从而研究对奶牛采食、咀嚼活动和生产性能影响的文献很少。本试验是通过改变TMR搅拌时间去改变TMR粒度,研究对奶牛采食、咀嚼活动和生产性能的影响,为确定规模化牛场TMR适宜的粒度和搅拌时间提供一定的参考。
1 材料与方法 1.1 试验动物与饲养管理选用4头泌乳中期经产荷斯坦奶牛,平均始重为(616.8±44.3) kg,泌乳时间为(85±7) d。每日分别在06:00和18:00投喂1次TMR,剩料量控制在10%以内。
1.2 TMR各组TMR采用相同配方,其组成及营养水平见表 1。TMR中各原料的营养水平测定采用实验室常规分析方法,TMR营养水平根据原料中的养分含量和原料在TMR中的比例计算得出。产奶净能(MJ/kg)=0.550 1×消化能(MJ/kg)-0.390 5,消化能=饲料总能×能量消化率,能量消化率(%)=94.280 8-61.573 0[中性洗涤纤维(NDF)/有机物(OM)][16]。
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表 1 TMR组成及营养水平(干物质基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the TMR (DM basis) |
TMR制作一般坚持先粗后精、先干后湿的原则,首先搅拌羊草和苜蓿,搅拌时间控制在10~20 min。与苜蓿相比,羊草质地更为粗糙,纤维含量更高,因此TMR机处理粗饲料时,羊草的搅拌时间更长。作者在参观学习了澳亚牧场、佳宝牧场和鲁宝牧场的TMR制作后,设计了羊草和苜蓿不同的搅拌时间梯度,以此来改变TMR粒度。
试验按4×4的拉丁方设计进行,分为细颗粒牧草(FH)组[苜蓿搅拌12 min,羊草搅拌20 min]、中细颗粒牧草(MFH)组[苜蓿搅拌9 min,羊草搅拌15 min]、中长颗粒牧草(MLH)组[苜蓿搅拌6 min,羊草搅拌10 min]、长颗粒牧草(LH)组[苜蓿搅拌3 min,羊草搅拌5 min]。共进行4期试验,每期19 d,前14 d为预试期,后5 d为采样期。TMR搅拌采用9JSG-10卧式搅拌机,由泰安意美特机械有限公司生产。
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表 2 TMR的粒度分布 Table 2 The particle sizes of TMR |
采样期每天记录饲喂量、剩料量,采集TMR样品和剩料样品,65 ℃烘干,粉碎,4 ℃冷藏保存。
1.4.2 奶样的采集每期试验第15、16、17天记录产奶量,分别在07:00和19:00挤奶,按早晚比例4:6共取样500 mL,取样前用搅拌器把奶充分搅拌,使奶的组成均匀一致。每100 mL奶样加入33%的H2O2溶液2~3滴防腐,-20 ℃冷冻保存,用于乳成分分析。
1.4.3 血样的采集每期试验第16、17天晨饲前、饲喂后6 h尾根静脉采血,注射器及离心管均用2 500 IU/mL的肝素钠溶液抗凝,503×g下离心15 min,分离血浆,-20 ℃冷冻保存。
1.4.4 粪样的采集每期试验第18、19天连续2 d采集粪样。粪样:每6 h采集并称重1次,搅拌均匀,取总量的10%,加入20%的硫酸(10 mL每100 g粪样)固氮。65 ℃烘干,测定初水分,粉碎,-20 ℃保存。
1.5 测定指标及方法 1.5.1 营养水平的测定TMR、剩料、粪尿中粗蛋白质(CP)含量的测定采用凯氏定氮法,NDF含量的测定方法采用Van Soest提出的洗涤纤维分析方法,DM、OM、粗灰分(ash)含量的测定参考张丽英主编的《饲料分析与饲料质量检测技术》,总能采用PARR公司的6200氧弹量热仪测定。剩料中peNDF含量采用以下公式计算:
peNDF=NDF×物理有效系数(pef)(>1.18 mm)。
1.5.2 粒度的测定TMR和剩料粒度的测定采用BX-4型奶牛便携式分级筛,由中国农业大学奶牛研究中心和北京戴瑞利德科技发展有限公司研制生产。
1.5.3 血浆生化指标的测定血浆谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶活性,葡萄糖、尿素氮、尿酸、甘油三酯浓度均采用日本和光纯药工业株式会社提供的试剂盒测定,按说明书操作,在日立7020型全自动分析仪上进行测定。
1.5.4 乳成分的测定乳脂率、乳蛋白率、乳糖率使用乳成分分析仪(78110,Foss)测定。
1.5.5 奶牛咀嚼活动的测定在试验场地根据奶牛位置安装带有8个摄像头的视频系统对奶牛的咀嚼活动录像2 d,根据获得的视频,连续的24 h内以每5 min为间隔单位记录其采食和反刍时间。动物停止采食后20 min内不再继续采食,则认为采食停止;一次反刍结束后5 min内不开始下一次反刍,则认为反刍结束。咀嚼时间以采食时间+反刍时间的形式表示。
1.6 数据处理试验原始数据在Excel电子表格整理后,使用SAS 8.2软件中GLM过程进行方差分析和Duncan氏法多重比较,P < 0.05为差异显著,0.05≤P < 0.10为存在差异趋势。
2 结果 2.1 养分表观消化率由表 3可见,不同TMR粒度对奶牛DM、OM、NDF、peNDF和氮(N)的摄入量没有显著影响(P > 0.05),但对奶牛DM、OM、NDF和N的全消化道表观消化率有显著的影响(P < 0.05)。与MLH组和LH组相比,FH组和MFH组的DM全消化道表观消化率显著提高(P < 0.05),FH组和MFH组之间、MLH组和LH组之间没有显著差异(P>0.05);FH组的OM全消化道表观消化率显著高于LH组(P < 0.05),MFH组显著高于MLH组和LH组(P < 0.05),FH组和MFH组之间、MLH组和LH组之间、FH组和MLH组之间的没有显著差异(P>0.05);与MLH组和LH组相比,FH组和MFH组的NDF全消化道表观消化率显著提高(P < 0.05),FH组和MFH组之间、MLH组和LH组之间NDF没有显著差异(P>0.05);FH组和MFH组的N全消化道表观消化率显著高于LH组(P < 0.05),FH组、MFH组和MLH组之间没有显著差异(P>0.05),MLH组和LH组之间没有显著差异(P>0.05)。
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表 3 TMR粒度对奶牛养分表观消化率的影响 Table 3 Effects of particle size of TMR on nutrient apparent digestibility in dairy cows |
由表 4可见,TMR粒度对剩料中粒度≥19.00 mm、8.00~( < 19.00) mm、1.18~( < 8.00) mm的DM比例及粒度≥19.00 mm、1.18~( < 8.00) mm的NDF比例有显著影响(P < 0.05), 随着TMR粒度的增加,剩料中粒度8.00~( < 19.00) mm的NDF比例有增加的趋势(0.05≤P < 0.10)。FH组剩料中粒度≥19.00 mm的DM比例显著低于另外3组(P < 0.05),MFH组、MLH组和LH组差异不显著(P>0.05);FH组剩料中粒度8.00~( < 19.00) mm的DM比例显著高于另外3组(P < 0.05),MFH组、MLH组和LH组之间差异不显著(P>0.05);FH组剩料中粒度1.18~( < 8.00) mm的DM比例显著高于另外3组(P < 0.05),MFH组、MLH组和LH组之间差异不显著(P>0.05);FH组剩料中粒度≥19.00 mm的NDF比例显著低于另外3组(P < 0.05),MFH组、MLH组和LH组之间差异不显著(P>0.05);FH组的粒度1.18~( < 8.00) mm的NDF比例显著高于另外3组(P < 0.05),MFH组、MLH组和LH组之间差异不显著(P>0.05);FH组剩料中粒度8.00~( < 19.00) mm的NDF比例有高于其他3组的趋势(0.05≤P < 0.10)。
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表 4 TMR粒度对奶牛剩料粒度分布的影响 Table 4 Effects of particle size of TMR on particle size distribution of orts in dairy cows |
由表 5可见,TMR粒度对奶牛每天的采食、反刍和咀嚼时间,每千克DM和NDF的采食、反刍和咀嚼时间都没有显著影响(P>0.05)。
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表 5 TMR粒度对奶牛咀嚼活动的影响 Table 5 Effects of particle size of TMR on chewing activity in dairy cows |
由表 6可见,TMR粒度对奶牛产奶量、乳脂率和乳脂产量、乳糖率和乳糖产量、乳蛋白率和乳蛋白产量都没有显著影响(P>0.05)。
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表 6 TMR粒度对奶牛产奶量和乳成分的影响 Table 6 Effects of particle size of TMR on milk production and composition in dairy cows |
由表 7可见,TMR粒度对奶牛血浆中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶活性,葡萄糖、尿素氮、尿酸、甘油三酯浓度都没有显著影响(P>0.05)。
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表 7 TMR粒度对奶牛血浆生化指标的影响 Table 7 Effects of particle size of TMR on plasma biochemical indicators in dairy cows |
本试验采用拉丁方设计,以不同的TMR粒度作为唯一的处理,随着TMR中粗饲料搅拌时间的增加带来的TMR粒度的降低,奶牛的DM摄入量并没有显著地增加,这与Beauchemin等[9]、Yang等[17]、Soita等[18]的试验结果一致。Belyea等[19]认为对于只饲喂饲草的奶牛,粒度的降低会提高采食量;对于饲喂饲草和精饲料饲粮的奶牛,粒度不会对采食量有影响,这是因为瘤胃充盈度不再是奶牛DM摄入量的限制性因素,奶牛自身的新陈代谢成为DM摄入量的主要限制性因素。Rode等[20]认为只有长饲草才会影响到采食量,而切短的饲草或草粉并不会影响到采食量。但是Jaster等[21]、Allen[22]、Kononoff等[7]、Yansari等[5]、Einarson等[6]更多的研究结果表明,粒度的降低会提高采食量。Allen[22]的研究结果表明,奶牛的采食量和养分的供给会被瘤胃充盈度和食糜的外流速度所限制,粒度的降低会降低饲草对瘤胃充盈度的影响并且会提高瘤胃的外流速度,导致奶牛采食更多的饲粮。Shaver等[23]和Beauchemin等[24]指出当奶牛采食低质高纤维的饲粮时,饲草粒度的降低会提高奶牛DM摄入量,当饲喂较为平衡的饲粮时,饲草的粒度对奶牛的DM摄入量影响较小。
本试验并没有观察到粒度的降低对奶牛DM摄入量的显著影响,可能存在2方面的原因:一方面试验TMR较为均衡,饲料种类较多,精粗比55.03:44.97(毛棉籽作为精饲料),且粗饲料品质较好,对奶牛大量饲喂进口苜蓿和东北羊草、青贮玉米,粒度的降低对奶牛DM摄入量的影响并不显著;另一方面考虑到一些粒度的降低显著提高采食量的试验,如Yansari等[5]使用的试验饲粮pef (>1.18 mm)变化范围为0.46~0.71,Einarson等[6]使用的试验饲粮pef (>1.18mm)变化范围为0.776~0.952,受TMR搅拌机动力及刀片的影响,该试验使用的饲粮在一般的搅拌时间内pef (>1.18 mm)的变化范围较小(0.83~0.90),可能也是粒度降低对奶牛DM摄入量影响不显著的原因之一。
Mertens[25]研究发现随着TMR粒度的降低,瘤胃微生物附着饲粮的表面积增加,最终会导致瘤胃发酵的速度加快,对消化有着促进作用;同时,粒度的降低会带来外流速度的加快,食糜在瘤胃中滞留的时间较短,对养分的消化有着负面作用;Yansari等[5]和Einarson等[6]试验结果却表明, 粒度的降低会降低瘤胃液pH,使瘤胃内微生物的消化能力下降。可见,粒度对饲粮消化率的影响是多方面的,最终的消化率变化是多种因素综合作用的结果。
本试验的研究结果表明,随着粗饲料搅拌时间的增加带来的TMR粒度的降低,奶牛DM、OM、NDF和N的表观消化率受到显著的影响,且搅拌时间最长的2组饲粮的DM和NDF的全肠道表观消化率显著高于搅拌时间最短的2组饲粮,搅拌时间最短的1组饲粮N的表观消化率低于其他3组饲粮,OM的全肠道表观消化率在组间也存在差异。Yang等[17]的研究结果表明,粒度的降低对OM的瘤胃消化率和全肠道消化率都没有影响,NDF的在瘤胃和肠道的消化率都有所降低,N的全肠道表观消化率随着粒度的降低而降低。另外,Yansari等[5]的研究结果表明,粒度的降低对DM、OM、N的表观消化率都没有影响,但是降低了NDF的表观消化率。Belyea等[19]、Shaver等[23]和Grant等[26]的研究指出,粒度的下降会带来纤维消化率的下降,原因是粒度的下降通常会带来采食量的提高和外流速度的加快。导致试验研究结果同国外研究结果不一致的原因可能有2个方面:首先本试验中粒度的降低并没有对DM、OM、NDF、peNDF和N的摄入量产生影响,消化率不会因养分摄入量的增加而下降;其次该试验使用的饲粮在一般的搅拌时间内pef (>1.18mm)的变化范围较小(0.83~0.90),粒度的下降可能对瘤胃酸度和外流速度的影响不如对瘤胃微生物消化的影响那么明显。
3.2 不同TMR粒度对奶牛咀嚼活动的影响Calberry等[27]、Kononoff等[7]和Krause等[28]许多研究表明,饲粮的NDF含量和粒度是影响奶牛咀嚼活动的重要因素。Beauchemin等[9]、Krause等[28]发现随着粒度的降低,奶牛采食时间没有受到影响但反刍时间减少了,Yansar等[5]的研究结果表明,细度降低后总的咀嚼、反刍和采食时间都降低了。值得注意的是,Yansari等[5]的试验中,随着粒度的降低,奶牛的DM摄入量增加了,但是peNDF的摄入量减少了,而在Beauchemin等[9]的试验中,随着粒度的降低,奶牛的DM摄入量没有受到影响但peNDF的摄入量减少了,peNDF的摄入量可能是反映奶牛反刍活动的重要指标。可以肯定的是,奶牛采食量和peNDF的摄入量的提高必然会带来奶牛反刍活动的增加,但是采食时间可能不会受到影响。
在本试验中,奶牛每天的采食、反刍、咀嚼时间(采食+反刍时间),每千克DM的采食、反刍和咀嚼时间,每千克NDF的采食、反刍和咀嚼时间等多项指标均没有收到TMR粒度的影响,这与Clark等[29]的研究结果相一致。另外,在本试验中,由TMR搅拌机搅拌时间的增加带来的TMR粒度的降低并没有对奶牛DM、NDF和peNDF的摄入量产生影响,可能是奶牛采食、反刍、咀嚼时间多项指标差异不显著的原因。
3.3 不同TMR粒度对奶牛产奶量和乳成分的影响一般来说,TMR粒度主要通过对采食量和消化率的影响来引起产奶量的变化。Einarson等[6]、Kononoff等[7]、Yang等[10]、Calberry等[27]、Krause等[30]和Yang等[31]的多项研究表明,粒度的降低对产奶量没有显著影响,并且在这些试验中,奶牛的DM摄入量都增加了,产奶量并没有显著提高的原因可能是养分消化率的下降。Beauchemin等[9]的试验结果表明,粒度的降低对奶牛的DM摄入量和产奶量没有显著影响。值得注意的是,Yansari等[5]的试验结果中,随着粒度的降低,奶牛的DM摄入量显著提高,DM、N的表观消化率没有显著变化,产奶量也没有显著提高。在本试验中,随着TMR搅拌机搅拌时间的增加带来的TMR粒度的降低对奶牛的养分摄入量没有显著影响,而奶牛DM、OM、NDF和N的表观消化率受到显著的影响,而产奶量在不同组间却没有显著性的差异,可能在实际的试验过程中,影响产奶量的因素比影响采食量和消化率的因素要复杂得多,奶牛配方、饲养管理、场地的舒适程度、天气变化、挤奶管理多种因素都会影响到产奶量。
Shaver等[23]、Armentano等[32]、Mertens[25]认为粒度下降引起的纤维消化率的下降,瘤胃液pH的下降,反刍和咀嚼时间的下降,乙酸/丙酸的下降最终都会影响到乳脂率和乳蛋白率;Armentano等[32]认为对于泌乳中期的奶牛,乳脂率是反映瘤胃发酵状况、瘤胃液pH和peNDF含量的良好指标。本试验没有观察到由TMR搅拌机搅拌时间的增加带来的TMR粒度的降低对奶牛乳成分的影响,与Krause等[30]、Beauchemin等[9]、Calberry等[27]、Einarson等[6]的研究结果基本一致,但是,Yansari等[5]的试验结果表明:随着粒度的降低,NDF和peNDF的摄入量显著降低,奶牛的DM摄入量显著提高,DM、N的表观消化率没有显著影响,但NDF的表观消化率下降,最终粒度的降低对产奶量影响不显著,乳脂率降低了,乳蛋白率提高了。尽管不同的研究结果存在争议,但是对于粒度的下降和peNDF摄入量的减少会降低乳脂率这一结论是被普遍认可的,Mertens[25]和Beauchemin等[33]认为粒度对乳脂率的影响在饲粮NDF含量(19.7%)低于NRC (1989)最低需要量的情况下更易被观察到。本试验没有观察到乳成分变化的可能原因有3方面因素:首先试验的周期较短(每期试验19 d),试验动物少(4头奶牛);其次试验TMR中包含苜蓿(18.28%)等具有缓冲作用的物质;另外饲粮中的毛棉籽也会直接影响乳脂率。
3.4 不同TMR粒度对奶牛血浆生化指标的影响国内外关于TMR粒度对奶牛血浆生化指标影响的研究很少。Bhandari等[34]研究发现, 降低苜蓿和玉米青贮的长度对血浆葡萄糖和尿素的浓度没有影响,Bhandari等[15]的试验结果也表明, 降低苜蓿和燕麦的长度后,奶牛血浆葡萄糖和尿素的浓度差异不显著,这与本试验的结果一致。Kahn[35]认为奶牛血浆葡萄糖和尿素的正常浓度分别为2.4~4.2 mmol/L和2.8~8.8 mmol/L。Plaizier[36]发现用切碎的苜蓿代替苜蓿青贮来降低TMR粒度能增加血浆葡萄糖的浓度和降低血浆尿素的浓度,但造成这种差异的主要原因是饲料种类而不是TMR粒度。本试验中粒度的降低并没有对DM、OM、NDF、peNDF和N的摄入量产生影响,这可能是造成血浆生化指标差异不显著的原因。
4 结论①牧草搅拌时间的适度延长会显著影响TMR的粒度,提高养分的消化率。
②在本试验条件下,TMR适宜的粒度分布如下:≥19.00 mm、8.00~( < 19.00) mm、1.18~( < 8.00) mm和 < 1.18 mm的干物质比例分别为45.20%、25.50%、16.55%和12.75%;TMR中苜蓿和羊草适宜搅拌时间分别为9和15 min。
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