八角 (Illicium verum Hook. f.) 为木兰科八角属植物,是我国南方重要的“药食同源”经济树种,具有开胃、抗菌、镇痛等作用,主要含有反式茴香脑、草蒿脑和大茴香醛等成分[1-4]。八角精油 (essential oil) 是用水蒸气蒸馏法从八角中提取的一种提取物,主要含有反式茴香脑。因其具有天然性、多功能性、无毒副作用和无抗药性等优点,已广泛用于医药、食品等行业。八角残渣是八角提取精油之后的剩余部分,相比于精油而言,残渣占主要部分,而对这部分残渣的作用,现在缺少相应的研究。此外,天然植物及其相应提取物在饲料添加剂方面也有广泛的应用价值,被认为是一类潜在的天然植物抗生素和药物生长促进剂的替代品[1, 3],日益成为人们研究的重点。以往的研究中有关于八角及其提取物在畜禽上应用的报道,主要用于刺激食欲、抑制细菌和改善抗氧化性能[4-7],但关于其对肉仔鸡肠道发育和养分利用率的研究却很少。同时,对于八角及其精油和残渣作用效果的对比鲜有人研究。本研究通过在饲粮中添加相同反式茴香脑含量的八角和八角精油,以及八角提取八角精油后剩余的八角残渣,研究其对肉仔鸡生长性能、肠道发育和养分利用率的影响,旨在为八角及其精油和残渣在肉仔鸡生产上的对比应用提供理论依据。
1 材料与方法 1.1 试验材料肉仔鸡:购自山东省泰安市宁阳西岭家庭农场。
八角:购自山东省泰安市泰山区五马市场,经65 ℃烘干后粉碎过60目筛。
八角精油、八角残渣:山东农业大学动物营养与代谢研究室制备。八角精油由水蒸气蒸馏法提取所得。称150 g (精确至0.1 g) 粉碎烘干后的八角置于平底烧瓶中,加入1 500 mL水,持续蒸馏3 h至馏出液中无明显油迹,馏出液中加入少量氯化钠,静置分层,取上层淡黄色油状液体,收集于棕色精油瓶中,4 ℃保存备用。八角残渣为八角经水蒸气蒸馏提取精油后的剩余物65 ℃烘干所得。
八角及其精油和残渣中有效成分含量见表 1。
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表 1 八角及其精油和残渣中有效成分含量 Table 1 Active component contents of star anise and its essential oil and leavings |
选取健康1日龄爱拔益加 (AA) 肉仔鸡384只,随机分为4个组,每个组12个重复,每个重复8只鸡 (公母各占1/2),重复之间初始体重接近 (P>0.05)。试验采用单因素完全随机试验设计,对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,基础饲粮参照NRC (1994) 和我国《鸡饲养标准》(NY/T 33-2004) 配制,其组成及营养水平见表 2。试验组分别饲喂在基础饲粮的基础上添加5 g/kg八角 (八角组)、0.2 g/kg八角精油 (精油组) 和5 g/kg八角残渣 (残渣组) 的饲粮。八角组和精油组饲粮中反式茴香脑的含量为0.204 g/kg,对照组和残渣组饲粮中反式茴香脑含量低于0.005 g/kg。试验期21 d。肉仔鸡采用舍内笼养,自由饮水和采食,按照常规免疫程序免疫。
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表 2 基础饲粮组成及营养水平 (风干基础) Table 2 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) |
试验第21天,每个重复选取1只体重接近平均体重的健康肉仔鸡,空腹12 h,颈静脉放血处死,分离肠道,去除食糜,测定各肠段长度和重量。然后取十二指肠、空肠和回肠中部约3 cm左右肠段,用生理盐水缓缓冲洗干净,放置于固定液中保存,用于肠道形态学分析。
试验第16天,从各重复中挑选体重接近 (P>0.05) 的健康肉仔鸡4只进行代谢试验,采用全收粪法,用可替换不锈钢收粪板连续收集各重复的排泄物,代谢试验期间准确记录进食量和排粪尿量,连续收集72 h。从备用鸡中挑选体重接近 (P>0.05) 的健康肉仔鸡18只,收集内源排泄物,相同饲养条件下禁食24 h,再继续禁食48 h,收集48 h排泄物。试验结束后,将每个重复的72 h排泄物混合均匀。取部分排泄物 (总排粪尿量的10%) 加10%硫酸10 mL固氮,用于粗蛋白质 (CP) 含量的测定,剩余排泄物烘干粉碎,用于干物质 (DM) 含量和总能 (GE) 的测定。
1.4 检测指标 1.4.1 生长性能每周测定肉仔鸡体重和采食量,计算平均日采食量 (ADFI)、平均日增重 (ADG) 和料重比 (F/G)。
1.4.2 肠道发育指标各肠段长度与肉鸡活体重的比值为各肠段相对长度,各肠段重量 (同一人相同力度去除食糜) 与肉鸡活体重的比值为各肠段相对重量。
1.4.3 肠道形态学指标取固定24 h的肉仔鸡十二指肠、空肠和回肠,经过冲水、梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋等处理后,以5 μm厚度切片,常规苏木精-伊红染色,显微镜下观察,用专业软件DigiLab-C进行绒毛高度和隐窝深度测量,每张切片取5个视野,取平均值作为最终结果,并记录数据,计算绒腺比 (即绒毛高度/隐窝深度)。小肠绒毛高度为肠腺开口至绒毛顶端的垂直高度距离;隐窝深度为从隐窝开口至隐窝基部的垂直距离。
1.4.4 养分利用率采用凯氏定氮法 (GB/T 6432-1994) 测定饲粮及排泄物中CP的含量,使用WHR-15氧弹热量仪 (湖南省长沙市长兴高教仪器设备开发有限公司) 测定饲粮及排泄物中GE。参照文献[8]的方法计算CP、GE的利用率及代谢能,计算公式如下:
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试验数据采用SAS 9.2广义线性模型进行单因素方差分析 (one-way ANOVA) 和Duncan氏法多重比较,显著水平为P < 0.05。
2 结果与分析 2.1 八角及其精油和残渣对肉仔鸡生长性能的影响由表 3可见,八角组和精油组肉仔鸡ADG和ADFI显著高于对照组 (P < 0.05),残渣组与对照组没有显著差异 (P>0.05)。与对照组和残渣组相比,饲粮中添加八角和八角精油显著提高了肉仔鸡21日龄体重 (P < 0.05)。与对照组相比,残渣组肉仔鸡F/G显著提高 (P < 0.05), 其他组间均无显著差异 (P>0.05)。
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表 3 八角及其精油和残渣对肉仔鸡生长性能的影响 Table 3 Effects of star anise and its essential oil and leavings on growth performance of broilers |
由表 4可见,八角组和精油组空肠的相对长度显著高于对照组和残渣组 (P < 0.05),空肠的相对重量显著高于对照组 (P < 0.05)。与残渣组相比,八角组和精油组十二指肠的相对重量显著提高 (P < 0.05),对照组与各试验组没有显著差异 (P>0.05)。与对照组和残渣组相比,精油组小肠的相对重量显著提高 (P < 0.05)。十二指肠的相对长度、回肠的相对长度和相对重量、小肠的相对长度各组间差异均不显著 (P>0.05)。
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表 4 八角及其精油和残渣对肉仔鸡肠道发育指标的影响 Table 4 Effects of star anise and its essential oil and leavings on intestinal development indices of broilers |
由表 5可见,八角组和精油组十二指肠的绒毛高度和空肠的绒毛高度和绒腺比均显著高于对照组和残渣组 (P < 0.05),且八角对空肠绒毛高度的增加作用最明显。八角组十二指肠的绒腺比较对照组和残渣组显著提高 (P < 0.05),其余3组间差异不显著 (P>0.05)。与残渣组相比,精油组回肠的绒毛高度显著提高 (P < 0.05)。十二指肠、空肠和回肠的隐窝深度以及回肠的绒腺比各组间差异均不显著 (P>0.05)。
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表 5 八角、精油和残渣对肉仔鸡肠道形态学指标的影响 Table 5 Effects of star anise and its essential oil and leavings on intestinal morphology indices in broilers |
由表 6可见,精油组CP表观和真实利用率显著高于对照组、残渣组和八角组 (P < 0.05)。精油组AME和TME显著高于对照组和残渣组 (P < 0.05),但与八角组差异不显著 (P>0.05)。与残渣组相比,精油组GE的表观利用率显著提高 (P < 0.05),其余各组差异不显著 (P>0.05)。
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表 6 八角及其精油和残渣对肉仔鸡养分利用率的影响 Table 6 Effects of star anise and its essential oil and leavings on nutrient digestibility of broilers |
八角作为一种芳香型中草药,具有诱发食欲、刺激胃液分泌、兴奋肠道蠕动的作用[4, 9],从而诱导动物采食,提高动物的生长性能。目前,关于八角及其提取物精油在肉鸡生产中的应用报道较少。Osman等[7]研究表明,八角、丁香和牛至提取物混合添加可显著提高肉仔鸡的ADG和F/G;Soltan等[10]研究表明,饲粮中添加0.50和0.75 g/kg八角均能提高肉仔鸡的ADG;Ghalib等[11]研究表明,八角和迷迭香混合添加可提高肉仔鸡的ADFI。本研究结果显示,饲粮中添加八角及其精油显著提高了肉仔鸡的ADG和21日龄体重,而八角残渣则显著提高了F/G,这与Osman等[7]和Soltan等[10]的研究结果一致,这可能与八角及其精油具有茴香特征香气[12],从而诱导肉仔鸡采食有关,采食量增加相应的就会提高ADG,而八角残渣因为其中的有效成分被分离出来,而剩余的成分不具有茴香特征香气,又不利于肉仔鸡的消化吸收,从而导致肉仔鸡F/G升高,降低生长性能。
3.2 八角及其精油和残渣对肉仔鸡肠道发育的影响肉仔鸡营养物质的消化和吸收主要在小肠中进行,因此肉仔鸡肠道发育情况将直接影响到其对营养物质的消化、吸收和利用,从而影响到肉仔鸡的生长性能[13-14]。小肠是机体营养物质消化、吸收和利用的主要部位,良好的肠道形态对完善消化功能,促进机体生长发育至关重要[14]。绒毛高度和隐窝深度是反映小肠消化吸收功能的主要指标,绒毛高度影响小肠吸收面积,绒毛高度越高,吸收面积越大,从而利于营养物质吸收;隐窝深度影响消化液分泌,隐窝越浅,分泌能力越强;绒腺比综合反映小肠的功能状态,绒腺比升高,表明小肠消化吸收能力增强,肠黏膜结构改善[15]。Reisinger等[16]研究表明,饲粮中添加八角、牛至和柑橘果混合精油显著提高了肉仔鸡回肠的隐窝深度和空肠的绒毛高度;Hong等[17]研究发现,饲粮中添加八角和牛至显著提高了肉仔鸡十二指肠的绒毛高度。本试验结果表明,八角及其精油和残渣对肉仔鸡回肠发育无显著影响,但是八角及其精油均不同程度地改善了空肠的发育,并且八角显著提高了小肠的相对重量,而八角残渣对十二指肠相对重量产生了不利影响;同时,八角及其精油显著提高十二指肠的绒毛高度和空肠的绒毛高度和绒腺比,八角还显著提高了十二指肠的绒腺比,而八角残渣显著降低了回肠的绒毛高度,这与八角及其精油对肉仔鸡肠道相对重量的影响结果基本一致。八角及其精油的这种促进肠道发育的现象可能与八角具有改善肠道菌群结构[4-7]的作用密切相关。而八角及其精油对肉仔鸡不同肠段产生不同的影响,这可能是由于小肠各段的形态结构存在差异造成的。八角残渣不利于肉仔鸡肠道发育可能与其有效成分被分离出来,而剩余成分不能被利用有关,这也进一步影响了肉仔鸡的生长性能。
3.3 八角及其精油和残渣对肉仔鸡养分利用率的影响芳香类植物具有刺激食欲和促进消化的作用,它们通过刺激肝脏、胰腺和肠黏膜消化酶的产生来增加胆汁流量,从而促进小肠对营养物质的消化吸收[7, 16]。八角作为一种芳香型中草药,具有诱发食欲、刺激胃液分泌、兴奋肠道蠕动的作用[4, 9],从而提高营养物质的消化吸收。
本试验研究发现,饲粮中添加八角精油显著提高了肉仔鸡对CP的表观和真实利用率,并且显著提高肉仔鸡的AME和TME,而八角的作用效果不明显。Amad等[18]研究表明,饲粮中添加150、750、1 500 mg/kg八角和百里香混合精油均能显著提高肉鸡对CP和粗脂肪的表观利用率,作用效果随着添加量的提高线性提高;Cho等[19]研究表明,饲粮中添加八角和百里香混合精油能显著提高肉仔鸡对DM和GE的利用率。上述研究结果与本试验所得结果类似,八角这种改善养分利用率的作用与其诱发食欲、刺激胃液分泌并兴奋肠道蠕动的作用[4, 9]密切相关。八角改善肉仔鸡养分利用率的作用效果没有八角精油明显,这可能是因为八角精油的有效成分纯度更高,特征性风味明显,更能刺激肉仔鸡采食,改善养分利用率;而八角残渣的作用效果不明显与其有效成分被分离密切相关。同时,肉仔鸡对养分利用率的提高也与肠道发育的改善密切相关。
4 结论①饲粮中添加八角及其精油可以不同程度地改善肉仔鸡的生长性能,但是添加八角残渣反而会造成生长性能的下降。
②饲粮中添加八角及其精油可以不同程度地改善肉仔鸡肠道发育情况和肠道形态,从而提高小肠的功能,而添加八角残渣没有此作用效果。
③饲粮中添加八角及其精油可以不同程度地改善肉仔鸡对CP和GE的消化利用,而添加八角残渣没有此作用效果。
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