2. 乐达 (广州) 香味剂有限公司, 广州 510730
2. Lucta (Guangzhou) Flavors Co., Ltd., Guangzhou 510730, China
仔猪的生长性能与其采食量直接相关，而饲粮的适口性是影响采食量的关键因素。哺乳动物采食过程主要依靠食物的视觉和味觉刺激，动物的唇、舌、齿等采食器官将食物送进口腔后，还会依靠食物的味觉、嗅觉刺激以及口腔对食物的触觉进行食物评定，把包含在食物当中不适合的物质排出口腔[1]。因此，提高动物的采食量就是尽量满足动物的视觉、嗅觉和味觉的喜好。诱食剂能够通过自身散发的香气吸引动物的注意，诱使动物对饲粮进行采食；通过自身具备的味道保证动物采食的持续性。另外，诱食剂还可以刺激动物的感知器官对食物做出反应，大脑将收到的信息处理后传递给消化系统，提高动物的消化功能，增加采食量。试验证明，饲粮添加诱食剂中的香味剂能提高猪的食欲，增加其采食量[2-3]。Rezaei等[4]在断奶仔猪饲粮中添加不同浓度的谷氨酸进行试验，结果显示仔猪的日增重和饲料利用率与谷氨酸的浓度呈正相关，且安全有效添加谷氨酸的最高浓度是4%。目前，对香味剂、甜味剂和鲜味剂的应用比较成熟，但主要集中在单一使用或两两使用上，三者配合使用的报道较少。因此，本试验旨在通过研究饲粮中添加香甜鲜复合诱食剂 (aromatic, sweetener and flavor enhancer compound feeding attractant, ASF-CFA) 对保育仔猪生长性能、血清生化指标、养分表观消化率和粪便微生物菌群的影响，为香甜鲜复合诱食剂在保育仔猪饲粮中的使用提供科学依据。
1 材料与方法 1.1 试验材料香甜鲜复合诱食剂由乐达 (广州) 香味剂有限公司提供 (产品编号78456Z)，试验中复合诱食剂香型为奶酪香，甜味由糖精钠提供，鲜味由谷氨酸钠、氨基酸、核苷酸、植物提取物、酵母降解物等复合物提供。
1.2 试验设计试验采用完全随机区组设计，选取72头 (43±4) 日龄、体重 (8.07±2.05) kg的体况良好的21日龄断奶大白仔猪，随机分为3个组，每组3个重复，每个重复8头猪。对照组饲喂基础饲粮，试验组分别在基础饲粮中添加1和2 kg/t的香甜鲜复合诱食剂。试验期28 d。参照NRC (1998) 早期断奶仔猪营养需要配制并制成颗粒料，基础饲粮组成及营养水平见表 1。
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表 1 基础饲粮组成及营养水平 (风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) |
本试验于2015年4月28日至2015年5月25日在辽宁艾德蒙种猪繁育有限公司完成，试验期间猪舍温度为 (26±3) ℃。供试猪只在同一栋猪舍内饲喂，自由采食、自由饮水，按照猪场常规程序进行饲养。
1.4 样品采集 1.4.1 粪样的采集每个组选取生长较好、体况相近的仔猪各4头，于试验结束前3 d每日07:00-09:00收集粪样，每头猪采集新鲜粪样2份，每份200 g，用无菌器械采集，无菌塑料袋封装，其中一份加入体积分数为10%的酒石酸水溶液20 mL (防止氨气挥发)，用于养分含量分析；另外一份-20 ℃冷冻保存，用于微生物数量测定。实验室测定前，将每头猪3 d所采粪样混合均匀后取样进行测定。试验结束当天每重复收集1头仔猪的新鲜粪便约30 g，保存于冰箱中备用。
1.4.2 血样的采集试验结束当天同一时间每个重复随机选取4头仔猪，空腹前腔静脉采血10 mL，静置15 min后，3 000 r/min离心10 min，取血清，-20 ℃条件下保存待测。
1.5 检测指标 1.5.1 生长性能指标试验第1天和第29天清晨进行空腹称重，计算平均日采食量 (average daily feed intake, ADFI)、平均日增重 (average daily gain, ADG) 和料重比 (feed to gain ratio, F/G)。
每天清晨观察仔猪粪便软硬稀度，判断是否腹泻并且做好记录。按正常、稀软、黏稠、水样4个等级进行划分，分别用0、1、2、3分表示，最后统计各组腹泻指数。腹泻率以圈为单位作为1个重复进行统计分析。
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通过放射免疫分析法测定血清生长激素 (growth hormone, GH)、瘦素 (leptin, Lep) 和胆囊收缩素 (cholecystokinin, CCK) 含量，试剂盒分别购自天津九鼎医学生物工程有限公司、北京华埠力特生物技术研究所和上海第二军医大学神经生物学教研室，分别按其说明书通过Sn-69513型免疫计数器测定。通过酶联免疫分析法测定胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide 1, GLP-1) 和胃饥饿素 (ghrelin) 含量，试剂盒购自南京贝森伽生物技术有限公司，按其盒说明书通过Multiskan MK3酶标仪测定。
1.5.3 粪便中微生物数量本试验主要以平板计数法测定供试猪只粪便中大肠杆菌、双歧杆菌和乳酸杆菌的数量。将采集好的粪样在超净操作台中配成10-1的稀释液 (将1.0 g的样品加入9 g灭菌生理盐水中，比例为1 : 10)。振荡摇匀后，以1 mL的稀释液与9 mL的灭菌生理盐水配制成10-2的稀释液。用相同的方法配制10-3~10-7的稀释液。将稀释液分别接种在LBS培养基 (HB0385)、麦康凯培养基 (HB6238-1) 和BL培养基 (HB0395) 中用以乳酸杆菌、大肠杆菌和双歧杆菌的选择和计数，所用培养基购自于青岛海博生物技术有限公司。其中大肠杆菌有氧条件下培养24 h，乳酸杆菌和双歧杆菌在无氧条件下分别培养36和48 h。各个稀释梯度进行3次重复计数，取其平均值作为最终结果，结果均以每克粪便中含有的菌群总数的常用对数值[lg (CFU/g)]表示。
1.5.4 养分表观消化率采用内源指示剂法，参照《饲料分析及饲料检测技术》[5]测定饲料和粪样中的粗蛋白质 (CP)、粗脂肪 (EE)、钙 (Ca)、磷 (P)、粗灰分 (Ash) 含量，并计算养分表观消化率。
1.6 数据处理及分析数据采用SPSS 22.0软件的一般线性模型的单变量程序进行完全区组方差分析，用Duncan氏法进行多重比较，结果以“平均值±标准差”表示，P < 0.05为差异显著。
2 结果 2.1 饲粮中添加香甜鲜复合诱食剂对断奶仔猪生长性能的影响如表 2所示，与对照组相比，饲粮中添加2 kg/t的香甜鲜复合诱食剂显著提高了断奶仔猪平均日采食量和平均日增重 (P＜0.05)，分别提高了14.8%和18.8%；饲粮中添加香甜鲜复合诱食剂对断奶仔猪料重比、腹泻率和腹泻指数均没有显著影响 (P>0.05)。与对照组相比，饲粮中添加1 kg/t的香甜鲜复合诱食剂的断奶仔猪平均日采食量、平均日增重、料重比、腹泻率和腹泻指数均没有显著变化 (P>0.05)。
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表 2 饲粮中添加香甜鲜复合诱食剂对断奶仔猪生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary ASF-CFA on growth performance of weaning piglets |
如表 3所示，饲粮中添加香甜鲜复合诱食剂对断奶仔猪血清生长激素、瘦素、胆囊收缩素、胰高血糖素样肽-1和胃饥饿素含量的影响均不显著 (P>0.05)。
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表 3 饲粮中香甜鲜复合诱食剂对断奶仔猪血清指标的影响 Table 3 Effects of dietary ASF-CFA on serum biochemical indices of weaning piglets |
如表 4所示，饲粮中添加香甜鲜复合诱食剂对断奶仔猪粪便中大肠杆菌、双歧杆菌和乳酸杆菌数量的影响均不显著 (P>0.05)。
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表 4 饲粮中添加香甜鲜复合诱食剂对断奶仔猪粪便微生物数量的影响 Table 4 Effects of dietary ASF-CFA on fecal microbe number of weaning piglets |
如表 5所示，饲粮中添加香甜鲜复合诱食剂对断奶仔猪粗蛋白质、粗脂肪、有机物、钙和磷的表观消化率的影响均不显著 (P>0.05)。
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表 5 饲粮中添加香甜鲜复合诱食剂对断奶仔猪养分表观消化率的影响s Table 5 Effects of dietary ASF-CFA on nutrient apparent digestibility of weaning piglets |
关于诱食剂对猪采食量的影响已经有很多报道，但往往是针对某一单一味道的研究。高剑蓉等[6]认为，香味剂能够提高仔猪的生长性能；很多关于仔猪的研究证明，饲粮中添加甜味剂能够提高其平均日采食量和平均日增重[7-9]。将甜味剂与香味剂在仔猪饲粮中复合使用，同样能够增加仔猪的平均日采食量和平均日增重[10]。鲜味剂可以增强其他诱食剂的诱食效果，其中谷氨酸钠主要是在胃酸作用下转化为谷氨酸后起作用，在仔猪饲粮中添加谷氨酸后，提高了断奶仔猪的平均日增重[11-12]。本试验断奶仔猪饲粮中添加香甜鲜复合诱食剂后的结果与上述试验结果相似，香甜鲜复合诱食剂对断奶仔猪平均日采食量和平均日增重有提高作用，这可能与香甜鲜复合诱食剂中的香味剂改善了饲粮的气味、甜味剂和鲜味剂改善了饲粮的适口性有关，三者共同增加了饲粮对断奶仔猪的诱食能力，从而提高了断奶仔猪的生长性能。
而鲜味剂中的谷氨酸钠在胃酸作用下转化成谷氨酸，谷氨酸可以维持断奶仔猪肠道正常的生理功能功能和结构[13]。而且谷氨酸还能进一步转化成谷胱甘肽，谷胱甘肽可以在肠道黏膜受到氧化损伤时提供保护作用[14]。吕继蓉等[15]发现，在断奶仔猪饲粮中添加香味剂和甜味剂可以改善其腹泻率；彭彰智[16]也发现饲粮中添加鲜味剂可改善断奶仔猪的腹泻情况。断奶仔猪肠道内的微生物菌群平衡也对腹泻率有一定的参考意义，本试验中饲粮添加香甜鲜复合诱食剂并未对断奶仔猪腹泻率及粪便微生物数量产生影响，这可能是由于试验开始时断奶仔猪已经渡过断奶应激期，适应了保育料，其肠道的生理状态已经基本恢复到正常水平，致使香甜鲜复合诱食剂促进断奶应激后仔猪胃肠道的发育和微生物菌群平衡的作用没有得到完全发挥有关。
血清生化指标能够在一定程度上反映机体的生理状况，会随着动物的生理状态在一定范围内发生动态变化，只要这些指标的值在正常区间内，都表示动物机体处于正常状态。本试验的结果表明，饲粮中添加香甜鲜复合诱食剂对仔猪的血清生化指标均未产生显著的影响。
饲粮中养分的消化率除了与饲料原料配比、加工工艺有关之外，还和动物的自身状况有关。本试验结果与陈娥英等[17]和朱文涛等[18]的结果相比养分表观消化率偏低，可能与猪品种及采样方式有关，本试验选取统一品种仔猪、采取同一种采样方法，结果仍有一定的参考意义。饲粮中添加香甜鲜复合诱食剂对断奶仔猪养分表观消化率均没有显著影响，这与刘涛等[11]在断奶仔猪饲粮中添加谷氨酸后对饲料利用率没有影响的结论类似。
4 结论饲粮中添加2 kg/t奶酪香型的香甜鲜复合诱食剂能显著提高仔猪平均日采食量和平均日增重。本试验条件下仔猪饲粮中添加2 kg/t的香甜鲜复合诱食剂为宜。
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