动物的采食量在实际生产中起着重要的作用，在养猪生产中，其与仔猪的增重潜力具有很强的线性相关性^[1]。因此，提高断奶仔猪的采食量是保证其生长性能的重要措施。因为猪的味觉敏感，所以常在仔猪饲粮中添加各种风味剂以提高其采食量。研究表明，在断奶仔猪饲粮中添加甜味剂不仅能够防止仔猪断奶后的采食抑制^[2]，还能够提高断奶仔猪的生长性能^[3-6]。现以甜味剂在仔猪饲粮中运用较多，而目前市场上的甜味剂多以糖精钠为主，但糖精钠本身具有金属苦味，会影响饲粮的适口性；鲜味剂在仔猪饲粮中的应用多为谷氨酸钠 (sodium glutamate, MSG)，但MSG使用过量反而会阻碍仔猪生长^[7]，而本试验所用的新型甜味剂及鲜味剂均为植物提取物，其安全性更高。且现已知的关于甜味剂与鲜味剂的报道大多数都是在断奶仔猪生长性能方面的研究，而对于血清胃肠肽指标、养分消化率及粪便微生物数量方面的报道则较少。故本试验以断奶仔猪为研究对象，通过在饲粮中添加新型甜味剂及鲜味剂，考察新型甜味剂及鲜味剂对断奶仔猪生长性能、血清胃肠肽指标、养分消化率及粪便微生物数量的影响

1 材料与方法 1.1 试验材料

本试验所用的糖精钠、鲜味组合物 (编号为79021Z，含植物提取物、酵母降解物、核苷酸、氨基酸及MSG) 及植物甜味提取物 (编号为79028Z，含植物提取物、酵母降解物、核苷酸及氨基酸) 均由乐达 (广州) 香味剂有限公司提供。

1.2 试验设计

本试验采用单因素完全随机设计，选取体况良好、体重 (7.81±0.82) kg、(28±2) 日龄的大白断奶仔猪128头，按性别和平均体重一致性原则随机分为4个组，每组4个重复，每个重复8头仔猪。新型甜味剂及鲜味剂的添加方案见表 1。试验期为28 d。

1.3 饲养管理

试验在辽宁德宝农牧集团艾德蒙种猪繁育场进行，供试仔猪由艾德蒙种猪繁育有限公司提供。本试验的4个组在同一栋猪舍内进行，猪舍温度控制在 (25±3) ℃，并保持良好的通风。试验管理按照常规管理规程及正常免疫程序进行饲养。试验期间断奶仔猪自由饮水、自由采食。

1.4 试验饲粮

本试验选用玉米-豆粕型基础饲粮，参照NRC (1998) 猪的营养需要，基础饲粮组成及营养水平见表 2。

1.5 测定指标及方法 1.5.1 生长性能

分别于试验当天、第15天以及试验结束当天晨饲前对试验猪逐头进行空腹称重，计算试验期平均日增重 (average daily gain, ADG)。试验过程中以重复为单位记录采食量，根据每日记录的给料量、剩余料、损耗料，计算试验期平均日采食量 (average daily feed intake, ADFI)。根据ADFI和ADG计算料重比 (feed/gain, F/G)。在试验期间，每天观察仔猪排粪情况，记录腹泻个体，计算腹泻率 (diarrhea rate)。记录试验猪的死亡和淘汰情况，发生死淘猪时需及时结料，并对死淘猪进行称重。

1.5.2 血清胃肠肽指标

于试验结束当天，每个重复随机选取1头供试仔猪，用真空采血管进行空腹前腔静脉采血5 mL，采血后静置30 min以上，待血凝后，于离心机中以3 000 r/min离心15 min，分离血清，置于-20 ℃冰箱冻存待测。测定的指标包括：胆囊收缩素 (cholecystokinin, CCK)、瘦素 (leptin，LP)、胰高血糖素样肽-1(glucagon-likepeptide 1, GLP-1) 和胃饥饿素 (ghrelin)。用放射免疫分析法测定CCK含量，按试剂盒说明书用Sn-69513型免疫计数器进行测定，试剂盒购自上海第二军医大学神经生物学教研室。用酶联免疫吸附试验法测定LP、GLP-1和胃饥饿素含量，按试剂盒说明书通过Multiskan MK3酶标仪进行测定，试剂盒均购自南京贝森伽生物技术有限公司。

1.5.3 养分消化率

于试验结束当天，从每个重复中采粪样约200 g，同一重复仔猪的粪便混匀，加入体积分数为10%的盐酸溶液以防止氨气的挥发，并做好记录，将样品置于-20 ℃冰箱冷冻保存。饲粮和粪中有机物 (OM)、粗蛋白质 (CP)、粗脂肪 (EE)、钙 (Ca) 和磷 (P) 含量的测定均按照饲料常规分析方法^[8]进行。

养分的表观消化率采用内源指示剂法进行计算，使用2 mol/L-盐酸不溶灰分 (2N-AIA) 作为指示剂。

计算公式为：X=100-[(b×c)/(a×d)]×100。

式中：X为养分消化率 (%)；a为饲粮中某养分含量 (%)；b为粪样中某养分含量 (%)；c为饲粮中2N-AIA含量 (%)；d为粪样中2N-AIA含量 (%)。

1.5.4 粪便微生物数量

于试验结束当天，每个重复随机选取1头供试仔猪，分别使用无菌自封袋采集其新鲜粪便，封装、记录好后，置于4 ℃冰箱内，保存待测，测定指标包括大肠杆菌、乳酸杆菌以及双歧杆菌的数量，采用平板涂布法计数。试验所用的培养基均购自青岛高科园海博生物技术有限公司，不同菌种用不同的培养基进行培养，大肠杆菌是麦康凯培养基 (HB6238-1)，乳酸杆菌是乳酸杆菌选择性琼脂培养基 (LBS培养基，HB0385)，而双歧杆菌则是双歧杆菌琼脂培养基 (BBL培养基，HB0395)。其中大肠杆菌的培养条件为37 ℃有氧24 h；而乳酸杆菌和双歧杆菌的培养条件为37 ℃厌氧48 h，结果均采用每克粪样中所含有的菌落个数的对数[lg (CFU/g)]进行表示。

1.6 数据处理与统计分析

试验数据经Excel处理后，采用SPSS 19.0软件进行单因素方差分析 (one-way ANOVA)，差异显著时采用Duncan氏法进行多重比较，设定P < 0.05为差异显著，P < 0.01为差异极显著，数据结果以“平均值±标准差”表示。

2 结果 2.1 饲粮中添加新型甜味剂及鲜味剂对断奶仔猪生长性能的影响

由表 3可知，与对照组相比，各试验组断奶仔猪的ADFI和ADG在试验各阶段均差异不显著 (P>0.05)。与对照组相比，各试验组断奶仔猪的F/G在试验各阶段均有所降低，其中，各试验组断奶仔猪在试验第1~14天及第1~28天的F/G均极显著降低 (P < 0.01)，B组断奶仔猪的F/G最低，较对照组分别降低了16.87%和15.05%；在试验第15~28天，各试验组断奶仔猪的F/G与对照组相比均差异不显著 (P>0.05)。与对照组相比，各试验组断奶仔猪的腹泻率均差异不显著 (P>0.05)。

2.2 饲粮中添加新型甜味剂及鲜味剂对断奶仔猪血清胃肠肽指标的影响

由表 4可知，与对照组相比，各试验组断奶仔猪血清CCK、LP和胃饥饿素含量差异不显著 (P>0.05)。与对照组相比，C组断奶仔猪血清GLP-1含量显著降低 (P < 0.05)，降低了38.03%。

2.3 饲粮中添加新型甜味剂及鲜味剂对断奶仔猪养分消化率的影响

由表 5可知，与对照组相比，各试验组断奶仔猪的OM、CP、EE、Ca和P消化率均差异不显著 (P>0.05)。

2.4 饲粮中添加新型甜味剂及鲜味剂对断奶仔猪粪便微生物数量的影响

由表 6可知，与对照组相比，各试验组的断奶仔猪粪便大肠杆菌、乳酸杆菌和双歧杆菌数量均差异不显著 (P>0.05)。

3 讨论 3.1 饲粮中添加新型甜味剂及鲜味剂对断奶仔猪生长性能的影响

仔猪因断奶、换料等因素极易产生应激，从而使其发生腹泻。而在断奶仔猪饲粮中添加各种风味剂，可以促进断奶仔猪的采食，从而减缓其应激状况，改善断奶仔猪腹泻的情况。甜味剂和鲜味剂提高断奶仔猪采食量的主要途径是通过刺激其味觉，促进断奶仔猪的食欲，以达到增加饲料采食的效果^[9]。Rezaei等^[10]研究表明，饲粮添加鲜味剂可以改善断奶仔猪的生长性能，提高其日增重以及饲料转化效率，降低其腹泻率。将0.1%的MSG添加到育肥猪的饲粮中，能增加其采食量，缩短育肥期，提高8%的日增重^[11]。彭彰智^[12]和肖英平等^[13]研究发现，断奶仔猪饲粮中添加鲜味剂可以提高其生长性能，降低腹泻率。杨慧等^[14]研究表明，饲粮中添加甜味剂后断奶仔猪的采食量与增重均能够显著提高，具有改善断奶仔猪生长性能的作用，且对断奶仔猪腹泻也有改善作用。牟永斌^[15]研究表明，饲粮中添加甜味剂能够刺激断奶仔猪采食，并且还能促进其生长。张飞^[16]研究表明，饲粮中添加甜味剂能够改善断奶仔猪的腹泻情况。本试验结果显示，饲粮中添加糖精钠、鲜味组合物和植物甜味提取物极显著降低了断奶仔猪试验第1~14天及第1~28天的F/G，这与前人的研究结果一致。可见，断奶仔猪饲粮中添加新型甜味剂及鲜味剂对其生长性能具有改善作用。

3.2 饲粮中添加新型甜味剂及鲜味剂对断奶仔猪血清胃肠肽指标的影响

GLP-1是由胰高血糖素原裂解所产生的肽类物质，由远端小肠和结肠的L细胞所合成与分泌^[17]。它能够增强胰岛素的合成与分泌，对胰高血糖素的合成及分泌产生抑制作用，并延缓胃的排空，对于动物的能量以及物质代谢也具有调控的作用。GLP-1能够通过迷走神经、GLP-1受体以及传入神经纤维对动物胃肠道的排空产生抑制作用^[18]；而胃排空抑制则会减缓营养物质进入到小肠当中的速度，并且使小肠对营养物质的吸收减慢，从而使进食量减少^[19]。研究发现，对人给予外源性的GLP-1，不论是健康或者肥胖者对于食物的摄取量均有所减少^[20]。Näslund等^[21]研究表明，给健康的肥胖受试者在用餐时进行GLP-1注射，注射5 d发现其体重降低了0.55%。Meeran等^[22]研究表明，对大鼠进行GLP-1外周灌注，能够降低其对食物的摄取，其体重也有所减轻。本试验中，糖精钠组及植物甜味提取物组的血清GLP-1含量与对照组相比均有所降低，与ADFI和ADG的结果相吻合；鲜味组合物组显著降低了血清GLP-1含量，这虽然也与ADFI和ADG的结果相吻合，但其ADFI和ADG低于糖精钠组及植物甜味提取物组，而其血清GLP-1含量也低于这2组，这可能是因为添加的风味剂不同或者断奶仔猪对血清GLP-1含量存在个体差异的原因，具体原因还有待进一步的研究。

3.3 饲粮中添加新型甜味剂及鲜味剂对断奶仔猪养分消化率的影响

仔猪因其品种、性别及日龄等条件的差异，对于饲粮中各养分的消化利用情况有所不同^[23-24]。而饲粮本身组成成分的不同，仔猪对其吸收水平的不同，还有代谢类型不同等，各种不能确定的因素会对CP、EE等养分的消化吸收水平产生很大的影响。而生长性能与消化率之间又有着极为紧密的联系，因而，饲料中养分的消化率如若能够提高，则仔猪的生长性相对的也会有所增加。牟永斌^[15]研究表明，饲粮中添加甜味剂能够显著提高仔猪干物质 (DM)、CP、EE以及OM的消化率；刘爽^[25]研究表明，饲粮中添加甜味剂可以显著提高仔猪对总能 (GE)、CP、DM的消化率，本试验中，饲粮中添加糖精钠、鲜味组合物和植物甜味提取物组的OM、CP、EE、Ca和P消化率差异不显著，可能是由于所选用的甜味剂及鲜味剂类型不同。

3.4 饲粮中添加新型甜味剂及鲜味剂对断奶仔猪粪便微生物数量的影响

仔猪断奶后所面临的最常见的、最大的危害就是腹泻的问题，其中由于肠毒性大肠杆菌所引发的腹泻占仔猪断奶腹泻的80%^[26]。而仔猪的腹泻是产生经济损失的主要因素。导致断奶仔猪腹泻的一类大肠杆菌具有黏附因子能使其定植到仔猪的肠上皮，而酵母提取物对其定植具有抑制的作用，进而使断奶仔猪腹泻减少；且对于肠道微生态的平衡也具有调节的作用^[27]。乳酸杆菌和双歧杆菌作为肠道中的有益菌，若大量增殖，则会对大肠杆菌的增殖产生竞争性的抑制作用，从而调节仔猪肠道当中微生物的菌群结构，以保证肠道微生态的平衡，但本试验中，饲粮中添加糖精钠、鲜味组合物和植物甜味提取物对粪便微生物数量的影响未达到显著水平。

4 结论

①饲粮中添加糖精钠、鲜味组合物及植物甜味提取物对断奶仔猪的生长性能均有改善作用，在试验第1~14天及第1~28天均极显著降低了F/G。

②饲粮中添加鲜味组合物显著降低了断奶仔猪血清GLP-1含量。