母猪健康一直是影响养猪业发展的重要因素。过去几十年，我国繁殖母猪养殖一直遭受诸多疫病威胁，严重制约了其生产潜力，影响生猪养殖业的可持续发展；随着抗生素的发现与使用，大大缓解了这一突出性问题。有报道指出，繁殖母猪配种期添加低剂量抗生素，提高了其窝产仔数^[1]；许青华等^[2]研究发现，母猪断奶至配种和分娩前至后2个阶段的饲粮添加泰妙菌素+金霉素，能有效地预防配种及分娩过程中母猪生殖道病菌感染，从而提高发情母猪受胎率及胚胎成活率。但抗生素大量使用所带来的问题也越发突出，如细菌耐药性、药物残留和宿主菌群紊乱等，这些都对畜禽及人体健康造成严重危胁^[3]。2006年，欧盟全面禁止畜禽上使用任何含抗生素类药物。因此，寻找更安全、有效的替代物成了目前最迫切的研究工作之一。

精油是一类由萜烯类、醛类、酯类及醇类等化学分子组成挥发性芳香物质。研究表明，精油具有替代抗生素的潜力^[4]。目前，精油分为天然型与合成型2种。天然型精油主要来源于植被的次级代谢产物^[5]，也称为植物精油 (plant essential oils, PEO)。PEO成分复杂，具有广泛的生物学效应，如抗菌、抗炎、抗氧化、抗腐败、抗癌以及杀虫等功效^[6]。近年来，精油已在医药、化妆品、食品等诸多领域广泛使用。另外，断奶仔猪饲粮添加0.01%精油，显著提高了其仔猪平均日增重及肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 水平^[7]；黄国清等^[8]研究发现，肉鸡饲粮添加牛至油能提高肉鸡饲料转化率、日增重及肠道的乳酸杆菌和双歧杆菌数目，降低大肠杆菌数目，且机体抗病能力有所提升；Michiels等^[9]研究表明，大蒜精油有抑制胃肠道产甲烷菌活性，减轻甲烷排放的功效。但目前国内外关于PEO在妊娠母猪上的应用却鲜有报道。因此，本文旨在通过考察饲粮中添加酒石酸泰万菌素 (tylvalosin tartrate, TT) 与PEO对母猪生产性能、免疫功能及乳成分的影响，以评估其是否具有替代抗生素在母猪生产上应用的潜力。

1 材料与方法 1.1 试验材料

TT有效含量为20%，PEO主要有效成分为4.5%百里香酚、13.5%肉桂醛，均由中牧股份成都华罗生物科技有限公司提供。

猪酶联免疫吸附测定 (ELISA) 试剂盒 (北京诚林生物科技有限公司)；酶标仪[Molecular Devices，SpectraMaxM2，美谷分子仪器 (上海) 有限公司]；乳成分分析仪 (LM61-MILKYWAY-CP2，北京思普特科技有限公司)。

1.2 试验设计及饲粮

本试验于四川蓝雁集团养殖基地进行，共选用3~4胎次体重接近的24头“长×大”繁殖母猪，依据体重将其随机分成3组，每组8个重复，每个重复1头猪。试验期为妊娠第96天至断奶，采用单笼饲养，各组分别饲喂基础饲粮 (对照组)、基础饲粮+100 mg/kg TT和基础饲粮+200 mg/kg PEO；每天分3次进行饲喂，分别为08：00、14:00和20：00。试验开始至分娩前1天限饲处理 (3.5 kg/d)，分娩当天不喂料，随后每天采食量增加1 kg，至分娩第5天母猪开始自由采食。

母猪饲粮分为妊娠期饲粮和泌乳期饲粮，其配方均是参照NRC (2012) 母猪营养需求，并依据妊娠、哺乳母猪营养需要进行设计 (表 1)。

1.3 检测指标 1.3.1 生产性能

仔猪出生后记录各母猪总产仔数、活仔数、健仔数、死胎率及木乃伊胎率。仔猪出生后均于采食母乳前进行称重，并记录。仔猪出生第2天进行调窝，并记录调窝个体重、带仔数；第3天剪断尾、犬齿、补铁和保健；第7天阉割；第21天断奶，断奶当天对所有仔猪再次称重，并记录断奶时所带仔数，计算出断奶存活率和个体平均日增重。

母猪分娩当天各组选取5头母猪称重，断奶再次进行称重，计算其泌乳损失；断奶后记录各母猪发情间隔。记录哺乳期各母猪日采食量，断奶当天结料，计算母猪平均日采食量。

1.3.2 血清免疫球蛋白

母猪分娩当天 (第1天)、分娩后第14和21天，采用耳缘静脉采血，收集2管血液于抗凝管中，静置0.5 h，离心机下3 500 r/min离心10 min；小心吸取上清液，分装于0.5 mL离心管，-20 ℃保存；

另取部分血清置于冰上，待其溶解后，摇匀，依据猪ELISA试剂盒操作指南测定其血清免疫球蛋白A (IgA)、免疫球蛋白G (IgG) 和免疫球蛋白M (IgM) 含量。

1.3.3 乳清免疫球蛋白

血样采集后，耳缘静脉注入适量催乳素，收集母猪分娩当日、分娩后第14和21天乳样 (各20 mL)，-20 ℃保存；另取5 mL乳样，于4 ℃ 8 000 r/min离心10 min，小心收集上清液于0.5 mL离心管，-80 ℃超低温冰箱保存。

取适量乳清置于冰上，待其溶解后，摇匀，依据猪ELISA试剂盒操作指南测定其乳清IgA、IgG和IgM含量。

1.3.4 乳成分

取10 mL冻存乳样，冰上缓慢解冻，再转移至20 mL烧杯，上机 (乳成分分析仪) 测定乳脂、非脂固形物、乳蛋白和乳糖含量。

1.4 数据统计与分析

实验数据采用Excel 2010进行初步统计，用SPSS 21.0进行单因素方差分析，Duncan氏法进行多重比较，结果以平均值±标准差表示，P < 0.05为差异显著，P < 0.01为差异极显著。

2 结果 2.1 TT和PEO对母猪生产性能的影响

由表 2可知，PEO组总产仔数、活仔数、初生窝重均较对照组、TT组有所增加，但差异不显著 (P>0.05)；同对照组相比，PEO组和TT组健仔数、断奶体重、个体平均日增重、母猪平均日采食量均有所增加，但各组之间均无显著差异 (P>0.05)；另外，PEO组死胎率同对照组、TT组相比分别降低了71.43%和53.33%(P>0.05)，断奶存活率分别提高了1.17%和1.60%(P>0.05)，发情间隔分别降低了0.42和0.29 d (P>0.05)，木乃伊率较对照组降低了50.00%(P>0.05)。

2.2 TT和PEO对母猪血清免疫球蛋白含量的影响

由表 3可知，PEO组母猪分娩第1、14和21天血清IgA含量均显著高于对照组 (P < 0.05)，与TT组相比无显著差异 (P>0.05)；TT组母猪分娩第21天血清IgA含量显著高于对照组 (P < 0.05)；但对照组母猪粪便第1和14天血清IgG含量显著高于PEO组与TT组 (P < 0.05)。

2.3 TT和PEO对母猪乳清免疫球蛋白含量的影响

由表 4可知，对照组母猪分娩第1天乳清IgA含量显著高于其他2组 (P < 0.05)，PEO组与TT组之间无显著差异 (P>0.05)；PEO组母猪分娩第14天乳清IgG、IgM含量显著高于对照组与TT组 (P < 0.05)；PEO组母猪分娩第21天乳清IgG含量也显著高于对照组 (P < 0.05)。

2.4 TT和PEO对母猪乳成分的影响

由表 5可知，各组母猪分娩第1天乳成分之间均无显著差异 (P>0.05)；TT组母猪分娩第14天乳中非脂固形物、乳蛋白和乳糖含量均显著高于对照组 (P < 0.05)，但与PEO组相比差异不显著 (P>0.05)；PEO组母猪分娩第21天乳脂含量显著高于对照组 (P < 0.05)。

3 讨论

过去几十年，我国繁殖母猪生产成绩一直处于较低水平。通过品种改良、营养调控、疾病防控等多种手段，母猪繁殖成绩得到了较大改善。但研究表明，窝产仔数增加，将降低仔猪初生重^[10]，而仔猪初生重很大程度上决定了其后期发育情况。孙素玲等^[11]研究发现，繁殖母猪配种期与哺乳期饲粮添加金霉素，其窝产仔数、初生活仔数均显著提高，泌乳损失显著降低，仔猪初生重略有增加。然而近年来，畜禽上抗生素滥用所导致的问题，如：细菌耐药性、药物残留、宿主菌群紊乱等也越发突出^[3]。阮存鑫^[12]、王瑞等^[13]报道，目前养殖领域抗生素使用的有效剂量大大超出了动物机体适应水平，其未能完全吸收利用的抗生素类物质绝大多数以原药或代谢产物形式随粪便排到体外，给环境造成了巨大危害。有研究表明，精油的有效成分可全部经动物胃、肠壁进入机体，最终以安全代谢产物形式排出体外^[14]；另外，妊娠母猪饲粮添加精油能增加窝产仔数，对仔猪初生重无显著影响^[15]。本研究表明，PEO组母猪总产仔数及产活仔数、健仔数均较对照组有所增加，初生死亡率 (死胎与木乃伊率) 分别较对照组有所下降，这与钟铭^[16]所报道的在妊娠母猪饲粮添加0.02%的植物提取物的结果相一致。

金立志^[17]报道，母猪饲粮添加精油可以通过刺激其味觉，增强母猪食欲，提高采食量。另外有研究表明，母猪采食量很大程度上影响着乳质量、乳分泌量和发情间隔^[18-19]。本试验中，与对照组相比，PEO组母猪平均日采食量、断奶存活率均有所提高，泌乳损失、发情间隔略有降低，但均未达显著水平，这与钟铭^[16]研究结果大体一致。

血清免疫球蛋白是人、动物体内普遍存在的一种具有抗体活性、能专一性与其相对应抗原结合的一类蛋白质，也是反映机体免疫能力的重要性指标。Foroughi等^[20]研究发现，PEO对机体具有免疫调节的功效。本试验PEO组母猪分娩第1、14和21天血清IgA含量与对照组相比均显著提高，Li等^[21]也得到相似的研究结果；此外，本试验母猪饲粮添加PEO、TT均显著降低了母猪分娩第1和14天血清IgG含量。但有研究表明，猪饲粮中添加精油并不影响血清中IgG和IgM含量^[21-22]；相反，Zhong等^[23]研究发现，繁殖母猪饲粮添加0.04%精油显著提升了血清IgG含量，但0.02%、0.04%和0.06%精油对血清IgA和IgM含量无显著影响。本文中，对照组母猪分娩第1天血清IgM含量高于PEO组与TT组，而第14和21天IgM含量均为最低值，这与Allan等^[15]报道结果有所不同。这些都有可能与母猪饲粮添有效成分的剂量与组成不同，对机体的作用效果产生差异有关。另外，有研究表明，多种PEO能够通过抑制TNF-α等细胞因子的产生和阻断TNF-α诱导中性粒细胞黏附在炎症反应的相关靶标上，起到抗炎保护作用^[24]。相关报道也指出，PEO具有加速肠绒毛表面上皮细胞更新，稳定肠道菌群，减少有害微生物数量和病原菌黏附机会，同时增加消化道黏液和胆汁酸产量，并加强胰酶活性 (如脂肪酶、淀粉酶、蛋白酶)，提高饲料消化率，促进营养物质吸收的作用，进而改善了母猪健康，有效地降低了免疫反应延迟和产后子宫白细胞活力下降的不利影响，对母猪起到了激活产后免疫系统的作用^{[17, 25]}。因此，PEO组产活仔数、健仔数及断奶存活率增加，泌乳损失和发情间隔的缩短，很大程度上与其抗炎能力增强，采食量和机体对饲料利用率提高及免疫系统作用加强有关，进而改善了分娩后母猪体况。

母乳对于新生幼畜是一种十分重要且复杂的高营养物质，尤其是初乳。在初乳中除了丰富的营养物质外，还含有大量促进新生仔猪肠道更快生长的非营养成分[如IgA、IgG、IgM和胰岛素生长因子-1(IGF-1) 等]。一般幼畜出生后前2 d，初乳大多数免疫物质可通过肠壁直接进入其机体，起到免疫防御作用。研究表明，初生仔猪自身所储备能值低，且免疫防御能力匮乏，仔猪及时吮吸母乳显得尤为重要^[26]；另外，母猪哺乳期间，乳液对仔猪存活及生长发育也起着至关重要作用^[15]。King′ori^[27]研究发现，母猪饲粮添加精油能有效地提高母乳质量和产量；纪少丽等^[28]研究表明，妊娠-哺乳期母猪饲粮中添加精油，提高了母猪血清IGF-1含量，且显著提高了哺乳仔猪生长速和断奶重；另外，Zhong等^[23]研究表明母乳饲喂能更好地改善幼儿健康以及其生长速率。本试验中，母猪饲粮添加PEO，仔猪平均日增重与对照组相比略有增加；PEO组仔猪断奶存活率分别较对照组、TT组增加了1.17%和1.60%。类似报道也表明，母猪饲粮添加精油有利于增加仔猪平均日增重^[22]；Matysiak等^[29]研究表明，母猪饲粮添加精油能降低哺乳期间仔猪死亡率。同时，有报道表明，精油饲粮有利于改善母乳免疫球蛋白含量^[30]。本试验中，PEO组母猪分娩第14天乳清IgM含量，第14和21天乳清IgG含量均显著高于对照组；PEO组母猪分娩第1和14天乳非脂固形物、第14天乳蛋白与乳糖含量均略高于对照组，第21天乳脂含量显著高于对照组。Zhong等^[23]研究发现，母猪饲粮中添加0.02%和0.06%精油能显著提高分娩第7天乳糖含量，同时0.02%和0.04%精油提高了乳清IgG含量。但Tan等^[22]研究表明，母猪饲粮添加精油并不影响乳成分及其免疫球蛋白的含量。也有报道表明，精油添加到母猪饲粮能有效地增加其乳糖含量，但不影响其他组分^{[29, 31]}。由此可知，母猪饲粮添加PEO (百里香酚+肉桂醛) 能有效地提高母乳质量，尤其是IgG的含量，进而影响哺乳期仔猪健康。

4 结论

①饲粮添加TT和PEO可改善母猪生产性能，且在不同程度上有改善母猪免疫及乳有效成分含量的功能。

②同TT相比，PEO效果更好, 因此PEO能在妊娠母猪上安全应用。