蛋白质是反刍动物必不可少的营养物质，而动物所需的营养物质主要通过饲粮获得，饲粮蛋白质水平、蛋白质来源等直接影响动物对蛋白质的消化代谢与吸收利用，从而制约着动物的生长发育[1-2]。对于快速生长的藏羔羊来说，饲粮蛋白质水平是影响其生长速度的重要因素[3]。饲粮蛋白质水平过低，不利于其生长；饲粮蛋白质水平过高，会诱发羔羊的代谢病。目前有关动物饲粮蛋白质水平方面的研究较多[4-6]，但关于羔羊蛋白质需要的研究较少，且研究结果不一，且藏羔羊蛋白质需要还没有现行的饲养标准。基于以上研究，本试验在舍饲条件下，以2月龄早期断奶藏羔羊为试验对象，通过研究不同蛋白质水平饲粮对藏羔羊日增重、料重比、血清生化指标等的影响，并对经济效益进行分析，以确定藏羔羊早期饲粮最适蛋白质水平，为藏羔羊的蛋白质需要研究及经济养殖提供科学依据。
1 材料与方法 1.1 试验时间与地点本试验于2016年1月11日至2016年5月18日在青海省海北州高原动物实习生产基地进行。
1.2 试验动物及试验设计选取体况良好、体重 (20.80±2.75) kg的2月龄断奶藏公羔羊90只，采用单因素随机试验设计，按体重均衡原则随机分成3组，每组30个重复，每个重复1只羊。3组试验藏羔羊分别饲喂蛋白质水平为10.8%(LG组)、12.0%(MG组) 和13.2%(HG组) 的饲粮。试验期为127 d，其中预试期7 d，正试期120 d。
1.3 试验饲粮根据羔羊体重和营养需要特点，参照NRC (2007)[7]绵羊营养需要量标准和我国《肉羊饲养标准》[8]，进行藏羔羊早期断奶饲粮配方的设计，试验饲粮组成及营养水平见表 1。
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表 1 试验饲粮组成及营养水平 (风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) |
试验藏羔羊采用全舍饲饲养，羊舍为半开放式，避风、向阳、干燥、通风良好。试验羔羊进圈舍前对圈舍进行消毒处理，以后每天进行清扫，隔天进行消毒；所有试验藏羔羊30 d内用羊四联干粉灭活疫苗肌肉注射进行免疫 (1 mL/只)，试验第30天时使用吡喹酮对藏羔羊进行驱虫 (1片/只)。各组饲喂时间、饲喂方式和饲喂量相同，每天08：30、12：00、17：00进行饲喂，自由饮水。饲喂量每周调整1次，调整时以MG组的最大采食量为依据。料槽、水槽每天清理1次。
1.5 血样采集在正试期第30、60、90、120天采集血样。血液采集当天，于早上饲喂前将藏羔羊侧卧保定，采血部位剪毛，用75%酒精消毒，用手指压迫颈静脉，待血管怒张后刺入一次性采血器采血约5 mL。血液采集后管口向上垂直放置，避免振荡而造成溶血。在室温条件下放置30~60 min，待析出血清后，3 500 r/min离心15 min，收集血清，于-20 ℃冷冻保持，待测。
1.6 测定指标与方法 1.6.1 生长性能测定藏羔羊正试期第0(试验开始前)、30、60、90、120天的体重 (称重均在清晨第1次饲喂前空腹进行) 及精料补充料采食量 (feed intake of concentrate supplements, CSFI)、燕麦青干草采食量 (feed intake of oat hay, OHFI)，并计算总采食量 (total feed intake, TFI)、阶段日增重 (stage daily gain, SDG)、平均日增重 (average daily gain, ADG)、平均日采食量 (average daily feed intake, ADFI) 及料重比 (feed to gain ratio, F/G)。
平均日采食量=总采食量/(试验总天数×试验羊只数)；
料重比=平均日采食量/平均日增重。
1.6.2 腹泻率及尿道感染率记录藏羔羊腹泻只数、尿道感染只数，并计算腹泻率及尿道感染率。
1.6.3 血清生化指标血清生化指标包括总蛋白 (total protein, TP)、葡萄糖 (glucose, GLU)、总胆固醇 (total cholesterol, TC) 含量，其中TP含量由青海大学附属医院用Olymyus 640全自动生化分析仪测定，GLU和TC含量采用试剂盒测定，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
1.7 数据处理采用Excel 2003对数据进行初步整理，SAS 9.1统计软件进行单因素方差分析和显著性检验，Duncan氏法进行组间多重比较，结果以“平均值±标准差”表示，P < 0.05为差异显著。
2 结果与分析 2.1 不同蛋白质水平饲粮对藏羔羊生长性能的影响由表 2可以看出，在试验第0、30、60天，藏羔羊的体重在3组之间没有显著差异 (P>0.05)；在试验第90天，MG组和HG组藏羔羊的体重差异不显著 (P>0.05)，二者均较LG组高7.65%，且差异显著 (P < 0.05)；在试验第120天，以MG组藏羔羊的体重最高，HG组次之，2组之间差异不显著 (P>0.05)，但分别较LG组高11.98%和10.37%，且差异显著 (P < 0.05)。
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表 2 藏羔羊各阶段的体重及日增重 Table 2 BW and daily gain in each stage of Tibetan lambs |
在试验第0~30天和第30~60天，藏羔羊的日增重以HG组最高，MG组次之，LG组最低，组间差异显著 (P < 0.05)；在试验第60~90天，藏羔羊的日增重则表现为LG组 < HG组 < MG组，组间差异显著 (P < 0.05)，且LG组和HG组分别比MG组低21.02%、16.52%；在试验第90~120天，藏羔羊的日增重表现为MG组显著高于LG组和HG组 (P < 0.05)，且LG组稍低于HG组，但2组之间差异不显著 (P>0.05)。
在试验第0~120天，藏羔羊的平均日增重表现为MG组 < LG组 < HG组，组间差异显著 (P < 0.05)，且LG组和HG组分别比MG组低19.39%和6.39%。
由图 1和图 2可以看出，试验期间，3组羔羊的体重均表现出线性增加，且MG组和HG组的线性几乎合为一条，略高于LG组；3组羔羊的日增重均在第60~90天达到最大值，之后开始下降，且表现为MG组高于HG组和LG组。
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图 1 藏羔羊体重变化趋势 Figure 1 Change trend of BW for Tibetan lambs |
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图 2 藏羔羊日增重变化趋势 Figure 2 Change trend of daily gain for Tibetan lambs |
由表 3可以看出，精料补充料采食量、燕麦青干草采食量、总采食量均以MG组最高，LG组次之，HG组最低；平均日增重以MG组最高，LG组、HG组分别比MG组低19.39%、6.39%；料重比以MG组最低，为6.91，LG组最高，HG组比MG组高6.80%，比LG组低13.99%。
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表 3 藏羔羊的采食量及料重比 Table 3 Feed intake and F/G of Tibetan lambs |
由表 4可以看出，随着饲粮蛋白质水平的升高，羔羊的腹泻率呈下降趋势，尿道感染率逐渐增加；而死亡率LG组和HG组都较高，MG组最低，LG组只有腹泻死亡，没有尿道感染死亡，HG组则相反；只有HG组出现了结石羊，且为膀胱结石。
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表 4 藏羔羊的腹泻及尿道感染情况 Table 4 Conditions of urethral infection and diarrhea of Tibetan lambs |
由表 5可以看出，在各阶段，随着饲粮蛋白质水平的升高，血清TP含量呈上升趋势。在试验第30天，血清TP含量在3组之间没有显著差异 (P>0.05)；在试验第60天，MG组血清TP含量与LG组、HG组均没有显著差异 (P>0.05)，但LG组与HG组之间差异显著 (P < 0.05)；在试验第90、120天，血清TP含量在MG组与HG组之间差异不显著 (P>0.05)，但二者均显著高于LG组 (P < 0.05)。
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表 5 藏羔羊各阶段的血清生化指标 Table 5 Serum biochemical parameters at each stage of Tibetan lambs |
在各阶段，随着饲粮蛋白质水平的升高，血清GLU和TC含量均没有显著发生变化 (P>0.05)，血清GLU含量以MG组、HG组较高，而血清TC含量则以LG组、MG组较高。
2.4 经济效益分析由表 6可以看出，随着饲粮蛋白质水平的升高，精料单价、精料成本及饲料总成本逐渐增加，总增重和单位成本增重以MG组最高，单位成本增重达到73.05 kg/元，LG组、HG组依次为61.49、63.85 kg/元。总收入和净收入均以MG组最高，其净收入达到7 800.51元，LG组、HG组净收入分别比MG组低了36.77%、25.50%。
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表 6 经济效益分析 Table 6 Analysis of economic benefits |
大量研究表明，在一定的饲粮蛋白质水平下，提高饲粮蛋白质水平可以促进早期断奶羔羊的生长发育[9-11]。本试验研究发现，在试验第0~60天，随着饲粮蛋白质水平的升高，藏羔羊的体重和日增重逐渐增加，且3组之间差异不显著，说明此阶段饲粮蛋白质水平对羔羊的生长没有明显影响；而在试验第90~120天，随着饲粮蛋白质水平的升高，藏羔羊的体重和日增重表现出先增加后降低的趋势，以蛋白质水平为12.0%的组最高，且与蛋白质水平为10.8%和13.2%的组差异达到了显著水平；此外，整个试验期内藏羔羊的平均日增重也以蛋白质水平为12.0%的组最高。其原因可能是10.8%蛋白质水平不仅满足不了此阶段藏羔羊生长发育的需求，还可能影响了饲粮其他营养物质消化代谢过程中关键酶的合成，从而导致机体营养“供不应求”，致使藏羔羊生长缓慢；而13.2%蛋白质水平过高，可能会通过三羧酸循环降低藏羔羊对其他营养物质的吸收和利用，造成体内营养不平衡，致使日增重降低，从而抑制了藏羔羊的生长。这与前人的研究结果[12-14]一致，故12.0%蛋白质水平的饲粮更有利于早期断奶藏羔羊的生长。本研究还发现，随着试验天数的增加，3组藏羔羊的体重均表现出线性增加，且MG组和HG组线性几乎合为一条，略高于LG组；3组羔羊的日增重均在试验第60~90天达到最大值，之后开始下降，且MG组高于HG组和LG组，表明在试验第60~90天适当提高藏羔羊的饲粮蛋白质水平可以更好地促进其生长。
3.2 不同蛋白质水平饲粮对藏羔羊采食量及料重比的影响饲粮组成及精粗比，饲粮适口性 (抗营养因子及可溶性糖含量)，饲粮营养水平 (能量浓度，蛋白质及氨基酸、脂肪、某种元素的含量)，饲喂技术 (饲料形态、饲喂方式和时间等)，试验羔羊的性别、年龄和健康状况，饲养环境及饮水因素等均可影响羔羊的采食量[15]。本试验中，平均日采食量随饲粮蛋白质水平的升高而降低，料重比表现为LG组>HG组>MG组，平均日增重表现为LG组 < HG组 < MG组，这与Walz等[16]、吕凯[17]和刘立刚等[18]的研究结果基本一致。这表明过高的饲粮蛋白质水平不能促进藏羔羊的生长，甚至还会抑制其生长，从而增加了料重比；而饲粮蛋白质水平过低则不能满足藏羔羊的营养需要，也不利于其生长。故认为12.0%蛋白质水平的饲粮不仅可以促进藏羔羊的生长发育，还可提高饲料的利用率，降低料重比，从而降低饲料成本，提高养殖效率。
3.3 不同蛋白质水平饲粮对藏羔羊腹泻率及尿道感染率的影响羔羊腹泻主要是因应激或饮食不当造成消化系统机能紊乱，从而引发羔羊拉稀，严重的会脱水、死亡。吕凯[17]研究发现，断奶料蛋白质水平在15%~21%范围内时，蛋白质水平越高，腹泻率越小；而余康等[19]则发现，高蛋白质水平饲粮易引发羔羊腹泻，且母羊的腹泻率较公羊高。本研究发现，随着饲粮蛋白质水平的升高，藏羔羊的腹泻率逐渐降低，可能是由于采食高蛋白质水平饲粮增加了血清免疫球蛋白含量，提高了机体的免疫力，从而降低了腹泻率。
尿道感染是由于饲粮搭配不合理造成系统组织损伤，甚至出现结石的现象，从而引发羔羊排尿困难、血尿，甚至尿闭，直至死亡。本研究发现，随着饲粮蛋白质水平的升高，藏羔羊尿道感染率逐渐增加，且HG组出现结石羊，这可能是过高的蛋白质水平 (13.2%) 增加了基质蛋白的含量，而基质蛋白是尿结石基质成分的主要组成部分，从而增加了尿道感染率；此外，还可能是高蛋白质水平的饲粮通过脱氨基途径，增加了血清中氨的含量，进而增加了肾脏的负担，也提高了尿液的浓度和pH，致使尿液过饱和，从而使晶体析出，形成结石。综上，采食12.0%蛋白质水平饲粮的藏羔羊死亡率最低，羔羊最健康。
3.4 不同蛋白质水平饲粮对藏羔羊血清生化指标的影响血清中TP含量在一定程度上反映了饲粮中蛋白质的营养水平及动物对蛋白质的消化吸收程度，当体内蛋白质的合成作用增强时，血清中TP含量较高[20]。本研究发现，不同蛋白质水平饲粮对血清TP含量有明显影响，在试验第0~90天，随着饲粮蛋白质水平的升高，血清TP含量均呈上升趋势，但3组之间差异不显著；在试验第120天，血清TP含量在MG组和HG组相当，二者均显著高于LG组。这表明高蛋白质水平可以加速氨基酸的脱羧基作用，促进蛋白质的消化代谢，有利于藏羔羊的生长发育。本研究还发现，随着试验天数的增加，3组羔羊的血清TP含量均表现出先上升后下降的趋势，在试验第90天达到最高，表明试验第90天时藏羔羊对蛋白质的同化作用最强，其生长速度最快[3]。
血清GLU作为重要的营养性单糖，是大脑神经系统、肌肉等机体代谢的主要能量来源[21]，血清GLU含量越高，表明机体的代谢越旺盛，生长越快。血清TC含量反映了羔羊对脂类的利用情况，脂类吸收越低，瘦肉率越高。本研究发现，随着饲粮蛋白质水平的升高，血清GLU和TC含量没有发生显著变化，表明不同蛋白质水平对二者的含量没有显著影响，说明机体可以通过三羧酸循环和自身的调节来实现体内营养的平衡。这与吴敏等[22]和司丙文等[23]的研究结果一致，却与Sahlu等[24]和高庆等[25]的研究结果不同，这可能与试验动物的种类及试验时间不同有关。虽然血清GLU和TC含量3组间没有显著差异，但血清GLU含量以MG组和HG组较高，而血清TC含量以LG组和MG组较高，故可认为采食12.0%蛋白质水平饲粮的羔羊对血清GLU和TC的利用较好，有利于其生长发育，并能提高瘦肉率。
4 结论①采食12.0%蛋白质水平饲粮的藏羔羊的阶段日增重和平均日增重较高，料重比最低，表明12.0%蛋白质水平可以促进藏羔羊生长，并能提高饲料利用率，降低料重比。
②采食12.0%蛋白质水平饲粮的藏羔羊的腹泻率及尿道感染率较低，死亡率最低，表明12.0%蛋白质水平不仅可促进新陈代谢，改善消化系统机能，还可降低泌尿系统疾病的发病率，从而改善藏羔羊的健康。
③血清TP、GLU及TC含量均以12.0%蛋白质水平组较好，表明12.0%蛋白质水平可以通过提高营养物质的消化利用率，促进羔羊的生长发育。
④ 12.0%蛋白质水平组的单位成本增重最高，达到73.05 kg/元，总收入和净收入最高，净收入达到7 800.51元。
⑤本试验条件下，饲粮蛋白质水平影响早期断奶藏羔羊的生长发育，12.0%蛋白质水平可提高藏羔羊的日增重，降低料重比和死亡率，改善血清生化指标，提高生长性能，并降低饲养成本。
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