引用本文

陈冠华, 张金龙, 王建国, 张宁, 瞿红侠, 王志祥, 闫永峰, 韩进诚. 肉仔鸡对25-羟基维生素D₃的需要量[J]. 动物营养学报, 2017, 29(7): 2335-2347. 复制到剪切板

CHEN Guanhua, ZHANG Jinlong, WANG Jianguo, ZHANG Ning, QU Hongxia, WANG Zhixiang, YAN Yongfeng, HAN Jincheng. Requirement of 25-Hydroxycholecalciferol for Broilers[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2017, 29(7): 2335-2347. 复制到剪切板

肉仔鸡对25-羟基维生素D₃的需要量

陈冠华^1,2, 张金龙^1,2, 王建国^1,2, 张宁^1,2, 瞿红侠¹, 王志祥², 闫永峰¹, 韩进诚¹

1. 商丘师范学院生命科学学院, 商丘 476000;
2. 河南农业大学牧医工程学院, 郑州 450002

收稿日期: 2016-12-14

基金项目: 国家自然科学基金项目（31101732）；河南省教育厅项目（16A230003）

作者简介: 陈冠华(1988—), 男, 河南杞县人, 硕士研究生, 从事动物营养与饲料科学研究。E-mail:chenguanhua2014@126.com

通信作者: 韩进诚, 副教授, 硕士生导师, E-mail:hjincheng@126.com

摘要: 本试验旨在研究1~21日龄和1~42日龄罗斯308肉仔鸡对饲粮25-羟基维生素D₃（25-OH-D₃）的适宜需要量。选取500只1日龄罗斯308肉仔鸡公雏，随机分成10个组，每组5个重复，每个重复10只鸡。10组肉仔鸡分别饲喂25-OH-D₃水平为50、100、200、400、600、800、1 600、2 400、3 200和4 000 IU/kg的饲粮。试验期42 d。结果表明：1）饲粮25-OH-D₃水平由50 IU/kg提高到600 IU/kg时，1~21日龄和1~42日龄肉仔鸡的体重、平均日增重和平均日采食量显著提高（P < 0.05），料重比和死亡率显著降低（P < 0.05）；进一步提高饲粮25-OH-D₃水平到4 000 IU/kg对生长性能指标无显著影响（P>0.05）。2）饲粮25-OH-D₃水平由50 IU/kg提高到600 IU/kg时，21日龄和42日龄肉仔鸡的骨骼（股骨、胫骨和跖骨）强度、重量、长度、灰分重量以及灰分、钙和磷含量显著提高（P < 0.05）；进一步提高饲粮25-OH-D₃水平到4 000 IU/kg对骨骼参数无显著影响（P>0.05）。3）饲粮25-OH-D₃水平由50 IU/kg提高到600 IU/kg时，21日龄和42日龄肉仔鸡的血浆钙含量显著提高（P < 0.05）；进一步提高饲粮25-OH-D₃水平到4 000 IU/kg对血浆钙含量无显著影响（P>0.05）。饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡的血浆无机磷含量无显著影响（P>0.05）。4）饲粮25-OH-D₃水平由50 IU/kg提高到800 IU/kg时，11~14日龄和31~34日龄肉仔鸡的钙和总磷沉积率显著提高（P < 0.05）；进一步提高饲粮25-OH-D₃水平到4 000 IU/kg对钙和总磷沉积率无显著影响（P>0.05）。综合本试验结果，以生长性能指标和骨骼参数为评价指标，采用折线回归模型分析得出，1~21日龄肉仔鸡饲粮25-OH-D₃的需要量为476 IU/kg，1~42日龄肉仔鸡饲粮25-OH-D₃的需要量为448 IU/kg。

关键词: 25-羟基维生素D₃ 需要量生长性能骨骼参数肉仔鸡

Requirement of 25-Hydroxycholecalciferol for Broilers

CHEN Guanhua^1,2, ZHANG Jinlong^1,2, WANG Jianguo^1,2, ZHANG Ning^1,2, QU Hongxia¹, WANG Zhixiang², YAN Yongfeng¹, HAN Jincheng¹

1. College of Life Science, Shangqiu Normal University, Shangqiu 476000, China;
2. College of Animal Husbandry and Veterinary Science, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China

Corresponding author: HAN Jincheng, associate professor, E-mail: hjincheng@126.com

Abstract: This experiment was conducted to investigate the dietary optimum requirement of 25-hydroxycholecalciferol (25-OH-D₃) for Ross 308 broilers aged from 1 to 21 days and 1 to 42 days. Five hundred one-day-old male Rose 308 broilers were randomly assigned to ten groups with five replicates per group and ten birds per replicate. Dietary 25-OH-D₃ levels were 50, 100, 200, 400, 600, 800, 1 600, 2 400, 3 200, and 4 000 IU/kg, respectively. The experiment lasted for 42 days. The results showed as follows: 1) the body weight (BW), average daily gain (ADG) and average daily feed intake (ADFI) of broilers aged from 1 to 21 days and 1 to 42 days were significantly increased but the ratio of feed to gain (F/G) and mortality significantly decreased when dietary 25-OH-D₃ level increased from 50 to 600 IU/kg (P < 0.05). No significant differences in growth performance indexes were observed when dietary 25-OH-D₃ level increased from 600 to 4 000 IU/kg (P>0.05). 2) The bone (femur, tibia and metatarsus) strength, weight, length, ash weight and ash, calcium, and phosphorus contents of broilers aged at 21 and 42 days were significantly increased when dietary 25-OH-D₃ level increased from 50 to 600 IU/kg (P < 0.05). No significant differences in bone parameters were found when dietary 25-OH-D₃ level increased from 600 to 4 000 IU/kg (P>0.05). 3) Plasma calcium content of broilers aged at 21 and 42 days was significantly increased when dietary 25-OH-D₃ level increased from 50 to 600 IU/kg (P < 0.05). No significant difference in plasma calcium content was found when dietary 25-OH-D₃ level increased from 600 to 4 000 IU/kg (P>0.05). Dietary 25-OH-D₃ level had no significant effect on the plasma inorganic phosphorus content of broilers (P>0.05). 4) The depositions of calcium and total phosphorus of broiler aged from 11 to 14 days and 31 to 34 days were significantly increased when dietary 25-OH-D₃ level increased from 50 to 800 IU/kg (P < 0.05). No significant differences in depositions of calcium and total phosphorus were found when dietary 25-OH-D₃ level increased from 800 to 4 000 IU/kg (P>0.05). In conclusion, dietary requirement of 25-OH-D₃ of broilers aged from 1 to 21 days is 476 IU/kg and dietary requirement of 25-OH-D₃ of broilers aged from 1 to 42 days is 448 IU/kg based on broken-line regression model analysis using the growth performance indexes and bone parameters as criteria.

Key words: 25-hydroxycholecalciferol requirement growth performance bone parameters broilers

维生素D₃在肝脏中经25-羟化酶的羟化作用转化为25-羟基维生素D₃(25-OH-D₃)，再经肾脏中1α-羟化酶的羟化作用转化为最终的活性形式1, 25-二羟维生素D₃[1, 25-(OH)₂-D₃]来调节家禽体内钙(Ca)和磷(P)的动态平衡。现代集约化饲养条件下，家禽缺乏紫外线照射，因此必须添加外源性维生素D₃或其同功体来维持肉仔鸡的正常生长^[1-2]。家禽饲粮中25-OH-D₃的生物学效价高于维生素D₃，而且肠道吸收效率更高^[3-5]，饲粮中用25-OH-D₃代替维生素D₃可增加肉仔鸡的体增重^[6]、提高胸肉率^[7-8]、改善骨骼的矿化^[9]、促进肠道发育^[10]和提高免疫力^[11]。我国已将25-OH-D₃列入《饲料添加剂品种目录(2013) 》，准许在家禽生产中将25-OH-D₃作为维生素类饲料添加剂使用。Yarger等^[12-13]推荐商品肉仔鸡饲粮中25-OH-D₃的添加水平为2 760 IU/kg；也有研究表明，饲粮中添加较低剂量25-OH-D₃即可满足家禽的生长需要^[14-16]。因此，本试验旨在研究饲粮25-OH-D₃水平对1~21日龄和1~42日龄罗斯308肉仔鸡生长性能、骨骼(股骨、胫骨和跖骨)矿化、血浆指标及钙和磷沉积率的影响，为生产中合理使用25-OH-D₃提供科学依据。

1 材料与方法 1.1 试验动物

选取500只1日龄、体重[(43.84±0.22) g]相近的健康罗斯308肉仔鸡公雏，随机分为10个组，每组5个重复，每个重复10只鸡。试验期42 d。肉仔鸡进行笼养，每个重复的肉仔鸡饲养于同一笼中(200 cm×50 cm×35 cm)。饲喂粉状配合饲粮，自由采食，充足饮水，按常规免疫程序进行免疫接种。

1.2 试验饲粮与试验设计

基础饲粮营养水平参考NRC (1994) ^[17]和《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004) ^[18]中肉仔鸡营养需要推荐值。在基础饲粮中分别添加10个水平的25-OH-D₃构成10种试验饲粮，饲粮25-OH-D₃添加水平分别为50、100、200、400、600、800、1 600、2 400、3 200和4 000 IU/kg。基础饲粮组成及营养水平见表 1。25-OH-D₃添加剂购自山东海能生物工程有限公司，该公司采用高效液相色谱法测定25-OH-D₃含量为5.0×10⁵ IU/g。

表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-day basis)

1.3 检测指标和方法 1.3.1 生长性能

分别于21日龄和42日龄时空腹称重肉仔鸡，每天记录各重复肉仔鸡的采食量和死亡鸡只数，死亡鸡只称重扣除采食量。统计试验期采食量，计算平均日采食量(g/d)、平均日增重(g/d)、料重比(平均日采食量/平均日增重)和死亡率。

1.3.2 代谢试验

分别于11~14日龄和31~34日龄收集全部粪尿排泄物，进行钙磷代谢试验。以每个重复笼为试验单元，连续收集96 h新鲜排泄物，收集的排泄物在剔除毛屑杂物后，立即放入-20 ℃冰箱冷冻保存，用于分析排泄物中钙和磷含量。饲粮和排泄物样品分别采用乙二胺四乙酸(EDTA)滴定法测定钙含量，钼黄比色法测定总磷(TP)含量。钙和总磷沉积率计算公式为：

营养物质沉积率(%)=[(食入营养物质的量-

排出营养物质的量)/食入营养物质的量]×100。

1.3.3 血浆生化指标

分别于21和42日龄时，每重复随机选取接近该重复平均体重的1只肉仔鸡进行屠宰试验。用1 mg/mL肝素钠溶液润湿注射器，心脏采血5 mL，3 000 g离心10 min，制备血浆，于-20 ℃冷冻保存。血浆钙和无机磷(Pi)含量采用岛津CL-8000全自动生化分析仪测定。

1.3.4 骨骼指标

屠宰试验中，剥离两侧股骨、胫骨和跖骨。将骨骼放入样品袋密封，于-20 ℃冷冻保存。将左侧腿部骨骼(股骨、胫骨和跖骨)在沸水中煮3~5 min，去除残余肌肉、腓骨，剥离干净后，无水乙醇浸泡36 h，无水乙醚浸泡36 h，除去水分和脂肪；105 ℃烘干24 h，用分析天平称量骨骼重量。用游标卡尺测定左侧腿部骨骼长度和直径(骨骼长度1/2处)。将骨骼压碎，放入坩埚，在600 ℃灰化36 h，以测定灰分含量。骨骼样品分别采用EDTA滴定法测定钙含量，钼黄比色法测定磷含量。右侧腿部骨骼(股骨、胫骨和跖骨)折断力(即骨骼强度)采用西北农林科技大学数显万能试验机(CMT-5504，深圳市新三思材料检测有限公司)测定，参数设置：跨度40 mm，单位负荷50 kg，位移速度10 mm/min。

1.4 统计分析

以每重复为试验单元，用SAS 9.0数据统计软件对试验数据采用一般线性模型(GLM)程序进行分析，采用Duncan氏法进行多重比较，并进行线性和二次曲线趋势分析，P＜0.05为差异显著。

利用SAS 9.0软件中的PROC NLIN程序进行折线回归模型参数分析，建立折线回归方程^[19-20]：当X＜R时，Y=L+U×(R-X)；当X≥R时，Y=L。其中，Y为平均日增重等评价指标；L为25-OH-D₃添加水平达到需要量时肉仔鸡的生长效应；U值为模型的斜率；X值为各组饲粮中对应的25-OH-D₃水平；R值为肉仔鸡对25-OH-D₃的需要量。

2 结果与分析 2.1 饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡生长性能的影响

由表 2可知，饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡的体重、平均日增重、平均日采食量、料重比和死亡率均有显著影响(P＜0.05)。饲粮25-OH-D₃水平为50 IU/kg时，肉仔鸡的体重、平均日增重和平均日采食量显著低于其他组(P＜0.05)，料重比显著高于其他组(P＜0.05)；饲粮25-OH-D₃水平由50 IU/kg提高到200 IU/kg时，肉仔鸡的体重、平均日增重和平均日采食量显著提高(P＜0.05)，料重比显著降低(P＜0.05)；饲粮25-OH-D₃水平为600 IU/kg时，肉仔鸡的体重和平均日增重达到最大值；进一步将饲粮25-OH-D₃水平由600 IU/kg提高到4 000 IU/kg时，肉仔鸡的生长性能指标无显著变化(P>0.05)。

表 2 饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary 25-OH-D₃ level on growth performance of broilers

2.2 饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡骨骼参数的影响

由表 3、4和5可知，饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡的股骨、胫骨和跖骨参数(除直径外)均有显著影响(P＜0.05)。饲粮25-OH-D₃水平为50 IU/kg时，肉仔鸡的骨骼参数(除直径外)均显著低于其他组(P＜0.05)；饲粮25-OH-D₃水平由50 IU/kg提高到400 IU/kg时，肉仔鸡的股骨、胫骨和跖骨强度、重量、长度、灰分重量、灰分含量、钙含量和磷含量均显著提高(P＜0.05)；饲粮25-OH-D₃水平为600 IU/kg时，42日龄肉仔鸡骨骼重量和灰分重量达到最大值；进一步将饲粮25-OH-D₃水平由600 IU/kg提高到4 000 IU/kg时，肉仔鸡的骨骼参数无显著变化(P>0.05)。饲粮25-OH-D₃水平对21和42日龄肉仔鸡跖骨直径以及21日龄股骨直径无显著影响(P>0.05)。

表 3 饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡股骨参数的影响 Table 3 Effects of dietary 25-OH-D₃ level on femur parameters of broilers

25-羟基维生素D₃水平 25-OH-D₃ level/(IU/kg)	强度 Strength/N		重量 Weight/g		长度 Length/cm		直径 Diameter/cm		灰分重量 Ash weight/g		灰分含量 Ash content/%		钙含量 Ca content/%		磷含量 P content/%
25-羟基维生素D₃水平 25-OH-D₃ level/(IU/kg)	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days
50	—	74.12^d	0.90^e	2.00^c	3.99^c	4.91^c	0.61	0.85^d	0.32^e	0.66^e	34.91^d	33.38^c	11.87^c	11.28^d	6.36^c	5.63^e
100	—	170.22^c	1.15^d	3.02^b	4.50^b	6.02^b	0.63	0.86^cd	0.48^d	1.28^d	41.16^c	43.31^b	14.94^b	15.50^c	7.18^b	7.65^d
200	—	214.04^bc	1.41^c	4.48^a	4.82^a	7.14^a	0.62	0.94^bc	0.63^c	1.97^c	45.10^b	43.90^ab	17.04^a	15.66^c	7.83^a	7.97^bcd
400	—	233.22^ab	1.57^abc	4.65^a	4.94^a	7.47^a	0.64	0.97^ab	0.73^ab	2.11^abc	46.45^ab	45.63^ab	17.40^a	16.67^ab	8.27^a	8.11^bcd
600	—	273.36^a	1.59^ab	5.02^a	4.93^a	7.52^a	0.62	1.04^a	0.74^ab	2.34^a	46.53^ab	46.74^a	17.15^a	17.44^a	8.03^a	9.01^a
800	—	252.24^ab	1.43^bc	4.93^a	4.85^a	7.36^a	0.57	1.02^ab	0.68^bc	2.17^abc	47.10^ab	43.99^ab	16.94^a	16.21^bc	8.33^a	7.77^cd
1 600	—	276.46^a	1.70^a	4.71^a	5.01^a	7.14^a	0.64	0.95^ab	0.81^a	2.15^abc	47.40^ab	45.78^ab	17.32^a	17.20^a	8.27^a	8.57^abc
2 400	—	262.38^ab	1.54^abc	4.63^a	4.96^a	7.31^a	0.59	0.94^abc	0.73^ab	2.05^bc	47.63^ab	44.35^ab	17.34^a	16.16^bc	8.25^a	8.04^bcd
3 200	—	235.98^ab	1.52^abc	4.88^a	4.91^a	7.40^a	0.63	1.02^ab	0.73^ab	2.27^ab	47.97^a	46.48^a	17.72^a	17.20^a	8.35^a	8.70^ab
4 000	—	214.64^bc	1.62^a	4.84^a	4.80^a	7.32^a	0.63	1.02^ab	0.76^ab	2.12^abc	47.09^ab	43.86^ab	16.52^a	16.20^bc	8.03^a	8.22^abcd
标准误SE	—	9.56	0.04	0.14	0.05	0.12	0.01	0.02	0.02	0.08	0.60	0.58	0.27	0.25	0.10	0.15
P值P-value	—	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	0.166 9	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1
线性Linear	—	＜0.000 1	0.000 5	＜0.000 1	0.000 2	0.000 2	0.336 7	0.025 0	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	0.001 2	＜0.000 1	0.000 2	＜0.000 1	0.003 2
二次曲线 Quadratic	—	0.001 0	0.025 0	0.005 8	0.007 7	0.004 4	0.491 0	0.293 2	0.030 4	0.004 5	0.060 1	0.016 0	0.014 3	0.009 1	0.032 6	0.120 1

表 3 饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡股骨参数的影响 Table 3 Effects of dietary 25-OH-D₃ level on femur parameters of broilers

表 4 饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡胫骨参数的影响 Table 4 Effects of dietary 25-OH-D₃ level on tibia parameters of broilers

25-羟基维生素D₃水平 25-OH-D₃ level/(IU/kg)	强度 Strength/N		重量 Weight/g		长度 Length/cm		直径 Diameter/cm		灰分重量 Ash weight/g		灰分含量 Ash content/%		钙含量 Ca content/%		磷含量 P content/%
25-羟基维生素D₃水平 25-OH-D₃ level/(IU/kg)	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days
50	36.26^d	81.18^c	1.19^e	2.44^f	5.43^d	6.86^c	0.48^c	0.67^c	0.41^e	0.87^d	33.89^d	36.03^e	11.61^d	12.53^d	6.03^d	6.31^b
100	63.78^c	188.93^b	1.46^d	4.08^e	5.97^c	8.13^b	0.53^b	0.74^bc	0.57^d	1.80^c	39.04^c	44.16^d	13.72^c	16.15^c	6.87^c	8.08^a
200	109.54^b	201.74^b	2.01^c	6.17^d	6.43^b	9.65^a	0.57^ab	0.81^ab	0.87^c	2.86^b	43.17^b	46.70^abc	15.70^b	17.19^ab	7.47^b	8.10^a
400	126.20^ab	261.52^ab	2.10^bc	6.60^bcd	6.55^ab	10.11^a	0.54^ab	0.78^abc	0.96^abc	3.11^ab	45.87^a	47.37^abc	16.93^a	17.80^a	8.14^a	8.73^a
600	126.60^ab	316.52^a	2.21^abc	7.61^a	6.62^ab	10.09^a	0.57^ab	0.88^a	0.99^ab	3.50^a	44.79^ab	46.12^abcd	16.26^ab	17.58^a	8.00^a	8.44^a
800	120.36^ab	274.84^a	2.04^c	7.21^ab	6.50^ab	9.82^a	0.54^ab	0.84^ab	0.91^bc	3.25^ab	44.89^ab	45.33^bcd	16.74^a	16.57^bc	8.13^a	8.05^a
1 600	135.12^a	320.42^a	2.35^a	6.53^bcd	6.77^a	9.64^a	0.58^a	0.80^ab	1.06^a	3.10^ab	45.22^a	47.58^ab	16.60^a	17.69^a	8.18^a	8.83^a
2 400	119.58^ab	253.06^ab	2.12^bc	6.24^cd	6.64^ab	9.98^a	0.53^ab	0.76^bc	0.98^abc	2.98^b	46.27^a	47.76^a	16.97^a	17.56^a	8.06^a	8.47^a
3 200	129.58^ab	249.42^ab	2.13^abc	6.82^abcd	6.62^ab	10.04^a	0.55^a	0.83^ab	0.98^abc	3.21^ab	46.00^a	47.18^abc	16.98^a	17.80^a	8.17^a	8.80^a
4 000	124.92^ab	292.10^a	2.27^ab	7.04^abc	6.52^ab	9.93^a	0.57^ab	0.83^ab	1.01^ab	3.17^ab	44.70^ab	45.14^cd	16.64^a	16.36^bc	8.12^a	8.72^a
标准误SE	4.89	11.71	0.05	0.23	0.06	0.16	0.01	0.01	0.03	0.12	0.56	0.51	0.25	0.23	0.10	0.13
P值P-value	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	0.001 2	0.011 0	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1
线性Linear	＜0.000 1	0.018 1	0.000 1	0.000 3	＜0.000 1	0.000 1	0.303 0	0.145 4	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	0.000 2	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	0.018 9
二次曲线 Quadratic	0.015 1	0.011 7	0.018 7	0.001 8	0.012 2	0.009 2	0.084 7	0.091 0	0.019 6	0.001 9	0.018 4	0.015 6	0.023 7	0.004 2	0.021 1	0.396 1

表 4 饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡胫骨参数的影响 Table 4 Effects of dietary 25-OH-D₃ level on tibia parameters of broilers

表 5 饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡跖骨参数的影响 Table 5 Effects of dietary 25-OH-D₃ level on metatarsus parameters of broilers

25-羟基维生素D₃水平 25-OH-D₃ level/(IU/kg)	强度 Strength/N		重量 Weight/g		长度 Length/cm		直径 Diameter/cm		灰分重量 Ash weight/g		灰分含量 Ash content/%		钙含量 Ca content/%		磷含量 P content/%
25-羟基维生素D₃水平 25-OH-D₃ level/(IU/kg)	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days	21日龄 Aged at 21 days	42日龄 Aged at 42 days
50	—	68.34^c	0.84^c	1.77^d	4.16^c	5.13^d	0.47	0.60	0.25^c	0.62^d	29.99^c	35.28^c	10.18^c	11.52^c	5.09^c	5.91^d
100	—	106.36^b	1.00^b	2.44^c	4.43^b	6.46^c	0.47	0.67	0.38^b	1.04^c	38.27^b	42.33^b	13.47^b	14.98^b	6.46^b	7.44^c
200	—	118.13^ab	1.23^a	3.59^b	4.85^a	7.17^b	0.48	0.68	0.53^a	1.62^b	42.91^a	44.97^ab	15.47^a	16.60^a	7.48^a	7.58^bc
400	—	123.74^ab	1.27^a	3.95^ab	4.88^a	7.60^ab	0.47	0.68	0.55^a	1.81^ab	43.55^a	45.75^a	15.73^a	17.01^a	7.69^a	7.94^abc
600	—	144.88^a	1.33^a	4.16^a	4.86^a	7.64^a	0.50	0.72	0.58^a	1.91^a	44.11^a	45.90^a	16.11^a	16.71^a	7.52^a	8.0^abc
800	—	145.08^a	1.21^a	3.83^ab	4.78^a	7.39^ab	0.46	0.70	0.52^a	1.74^ab	43.19^a	45.34^a	16.23^a	16.45^a	7.55^a	8.28^ab
1 600	—	147.64^a	1.35^a	3.60^b	4.97^a	7.26^ab	0.48	0.69	0.59^a	1.62^b	43.46^a	45.16^a	15.83^a	16.55^a	7.51^a	8.61^a
2 400	—	130.58^ab	1.29^a	3.65^b	4.90^a	7.42^ab	0.46	0.68	0.56^a	1.65^b	43.79^a	45.23^a	16.24^a	16.57^a	7.68^a	8.13^abc
3 200	—	143.22^a	1.26^a	3.98^ab	4.81^a	7.49^ab	0.47	0.68	0.56^a	1.75^ab	44.46^a	43.85^ab	16.34^a	16.31^a	7.98^a	8.00^abc
4 000	—	129.03^ab	1.34^a	4.07^ab	4.86^a	7.52^ab	0.46	0.72	0.58^a	1.73^ab	43.62^a	42.42^b	16.12^a	15.86^ab	7.69^a	7.95^abc
标准误SE	—	4.39	0.03	0.11	0.04	0.11	0.01	0.01	0.02	0.06	0.65	0.50	0.28	0.24	0.13	0.12
P值P-value	—	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	0.513 5	0.127 6	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1	＜0.000 1
线性Linear	—	0.574 8	0.001 9	0.000 7	0.001 9	0.001 1	0.354 5	0.296 4	0.000 3	0.000 3	0.000 3	0.001 5	0.000 1	0.001 6	0.000 2	0.000 7
二次曲线Quadratic	—	0.292 9	0.044 1	0.012 9	0.016 0	0.009 9	0.988 3	0.273 5	0.025 4	0.001 3	0.021 7	＜0.000 1	0.026 7	0.000 7	0.093 1	0.024 2

表 5 饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡跖骨参数的影响 Table 5 Effects of dietary 25-OH-D₃ level on metatarsus parameters of broilers

2.3 饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡血浆钙和无机磷含量以及钙和总磷沉积率的影响

由表 6可知，饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡的血浆钙含量及钙和总磷沉积率有显著影响(P＜0.05)，但对血浆无机磷含量无显著影响(P>0.05)。饲粮25-OH-D₃水平为50 IU/kg时，21日龄肉仔鸡的血浆钙含量显著低于其他组(P＜0.05)；饲粮25-OH-D₃水平由50 IU/kg提高到600 IU/kg时，42日龄肉仔鸡的血浆钙含量显著提高(P＜0.05)；进一步提高饲粮25-OH-D₃水平到4 000 IU/kg时，肉仔鸡的血浆钙含量无显著变化(P>0.05)。饲粮25-OH-D₃水平由50 IU/kg提高到800 IU/kg时，肉仔鸡的钙和总磷沉积率显著提高(P＜0.05)；进一步提高饲粮25-OH-D₃水平到4 000 IU/kg时，肉仔鸡的钙和总磷沉积率无显著变化(P>0.05)。

表 6 饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡血浆钙和无机磷含量以及钙和总磷沉积率的影响 Table 6 Effects of dietary 25-OH-D₃ level on plasma Ca and Pi contents and Ca and TP deposition rates of broilers

2.4 肉仔鸡对饲粮25-OH-D₃的需要量

由表 7和表 8可知，以肉仔鸡的生长性能指标(平均日增重、平均日采食量)和骨骼参数(股骨、胫骨和跖骨重量及其灰分重量)为评价指标，采用折线回归模型评估饲粮25-OH-D₃的适宜需要量，结果显示，1~21日龄肉仔鸡饲粮25-OH-D₃需要量为476 IU/kg，1~42日龄肉仔鸡饲粮25-OH-D₃的需要量为448 IU/kg。

表 7 折线模型评定1~21日龄肉仔鸡对饲粮25-OH-D₃的需要量 Table 7 Dietary 25-OH-D₃ requirement of broilers aged from 1 to 21 days estimated based on broken-line model

表 8 折线模型评定1~42日龄肉仔鸡对饲粮25-OH-D₃的需要量 Table 8 Dietary 25-OH-D₃ requirement of broilers aged from 1 to 42 days estimated based on broken-line model

3 讨论 3.1 饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡生长性能的影响

本试验结果显示，饲粮25-OH-D₃水平为50 IU/kg时，肉仔鸡生长缓慢，死亡率高，骨骼强度、重量、长度、灰分重量及灰分、钙和磷含量低。饲粮25-OH-D₃水平由50 IU/kg提高到600 IU/kg时，1~21日龄和1~42日龄肉仔鸡的体重和平均日增重与饲粮25-OH-D₃水平呈线性关系。结果表明，当饲粮维生素D不足时，肉仔鸡的生长性能下降；饲粮添加适宜水平的25-OH-D₃后，生长性能得到改善。饲粮25-OH-D₃水平由600 IU/kg提高到4 000 IU/kg时，饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡的生长性能无显著影响。数据表明，钙和磷充足的饲粮中，添加高剂量25-OH-D₃对肉仔鸡的生长并无益处。

课题组研究显示，当饲粮25-OH-D₃水平由50 IU/kg提高到400 IU/kg时显著提高了肉仔鸡的体增重和采食量，降低了料重比和死亡率^[4]。研究也发现，1~21日龄肉仔鸡饲粮25-OH-D₃水平由125 IU/kg提高到500 IU/kg时，肉仔鸡的体重显著提高；当饲粮25-OH-D₃水平由500 IU/kg提高到4 000 IU/kg时，肉仔鸡的生长性能无显著变化^[6]。Goodgame等^[15]的研究得到相似结果，7~21日龄肉仔鸡饲粮25-OH-D₃水平由100 IU/kg增加到800 IU/kg时，显著提高了肉仔鸡的体重和采食量，对料重比无显著影响；当继续提高饲粮25-OH-D₃水平至3 200 IU/kg时，肉仔鸡的生长性能无显著变化。

3.2 饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡骨骼参数的影响

骨骼(股骨、胫骨和跖骨)矿化是评定家禽维生素D作用效果的敏感指标，比生长性能指标更敏感^{[4, 15]}。本试验结果显示，饲粮25-OH-D₃水平为50 IU/kg时，肉仔鸡的骨骼强度、重量、长度、灰分重量及灰分、钙和磷含量最低。饲粮25-OH-D₃水平由50 IU/kg提高到600 IU/kg时，肉仔鸡的骨骼矿化指标迅速提高；但继续提高饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡的骨骼矿化指标无显著影响。课题组研究显示，饲粮中25-OH-D₃水平由50 IU/kg提高到400 IU/kg时，显著提高了21日龄肉仔鸡的股骨和胫骨重量、长度、灰分重量及灰分、钙和磷含量^[4]。研究也发现，饲粮25-OH-D₃水平由100 IU/kg提高到800 IU/kg时能显著提高肉仔鸡的骨骼强度、胫骨和趾骨灰分含量；继续提高饲粮25-OH-D₃水平对骨骼矿化指标无显著影响^[15]。以上数据表明，饲粮25-OH-D₃水平为400~800 IU/kg时，已能满足肉仔鸡股骨、胫骨和跖骨矿化对维生素D的需求，继续提高饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡的骨骼矿化指标无显著影响。

3.3 饲粮25-OH-D₃水平对肉仔鸡血浆指标及钙和总磷沉积率的影响

本试验结果显示，饲粮25-OH-D₃水平显著影响肉仔鸡的血浆钙含量，但对血浆无机磷含量无显著影响。研究表明，饲粮25-OH-D₃水平对21和42日龄北京鸭血浆无机磷含量无显著影响^[15]。

前期代谢试验结果显示，饲粮25-OH-D₃水平由50 IU/kg提高到800 IU/kg时，显著提高了11~14日龄肉仔鸡的钙和磷沉积率；继续提高饲粮25-OH-D₃水平对钙和磷沉积率无显著影响。后期代谢试验结果发现，饲粮25-OH-D₃水平由50 IU/kg提高到4 000 IU/kg时，31~34日龄肉仔鸡的钙和磷沉积率呈先提高后降低的趋势。Applegate等^[21]研究表明，7~21日龄肉仔鸡饲粮添加25-OH-D₃能促进植酸磷水解，进而提高总磷的沉积率。肉仔鸡饲粮中25-OH-D₃的生物学效价为维生素D₃的2倍^[3-4]。对家禽维生素D₃的研究显示，饲粮维生素D₃水平由300 IU/kg提高到1 200 IU/kg时，35日龄肉仔鸡排泄物中钙和总磷含量线性降低^[22]。

3.4 肉仔鸡对饲粮25-OH-D₃的适宜需要量

本试验以肉仔鸡的生长性能指标(平均日增重、平均日采食量)和骨骼参数(股骨、胫骨和跖骨重量及其灰分重量)为评价指标进行曲线拟合，发现折线模型符合本试验的研究结果。根据折线模型回归方程评定1~21日龄肉仔鸡饲粮25-OH-D₃的最适需要量为476 IU/kg，1~42日龄肉仔鸡饲粮25-OH-D₃的最适需要量为448 IU/kg。

目前关于肉仔鸡饲粮25-OH-D₃最适需要量的研究结果存在差异。Yarger等^[12-13]认为，以体增重和饲料效率为评价指标，肉仔鸡饲粮25-OH-D₃的需要量为2 760 IU/kg。研究也发现，饲粮25-OH-D₃的最适添加量可能低于Yarger等^[12-13]的推荐量。Fritts等^[6]报道，以42日龄肉仔鸡的体重和胫骨灰分含量为评价指标，肉仔鸡对饲粮25-OH-D₃的需要量为500 IU/kg。Goodgame等^[15]以体重、胫骨灰分和强度为评价指标，肉仔鸡饲粮25-OH-D₃的需要量为400~800 IU/kg。《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004) ^[18]中推荐肉仔鸡维生素D₃添加量为1 000 IU/kg。本课题组研究表明，肉仔鸡饲粮中25-OH-D₃的生物学效价约为维生素D₃的2倍^[3-4]。依此推测，肉仔鸡饲粮对25-OH-D₃的需要量约为500 IU/kg。该推测值与本试验结果较为接近。另外，石文标等^[16]对北京鸭的研究显示，以日增重和胫骨指标为评价指标，1~21日龄北京鸭对饲粮25-OH-D₃的需要量为342 IU/kg，22~42日龄北京鸭对饲粮25-OH-D₃的需要量为316 IU/kg。

4 结论

① 饲粮中添加适宜水平25-OH-D₃可改善肉仔鸡的生长性能，增强骨骼(股骨、胫骨和跖骨)矿化，提高血浆钙含量及钙、磷沉积率。

② 以生长性能指标和骨骼参数为评价指标，采用折线回归模型分析，1~21日龄肉仔鸡对饲粮25-OH-D₃的需要量为476 IU/kg，1~42日龄肉仔鸡对饲粮25-OH-D₃的需要量为448 IU/kg。

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