梅花鹿作为我国保护动物之一，分布于东北、四川等少数地区。梅花鹿全身上下都是宝，鹿茸、鹿胎、鹿鞭、鹿血、鹿肉等都具有很高的经济价值。梅花鹿在饲养过程中对饲粮中蛋白质的质量要求很高，然而我国是一个蛋白质饲料相对较匮乏的国家，再加上近些年畜禽饲养量的不断增加，使得蛋白质饲料的使用量也逐年增加，造成了蛋白质饲料的短缺；同时，环境污染、温室效应等问题不断加剧，畜牧业对环境的污染已经成为继工业污染和生活污染之后又一环境污染的重要源头[1]。蛋白质的基本组成单位是氨基酸，因此研究氨基酸营养对于提高梅花鹿价值、降低饲料蛋白质水平及减少动物氮排泄量、降低环境污染具有重要意义。自20世纪中叶起就有学者对动物体内的氨基酸营养进行研究，不少学者认为蛋氨酸和赖氨酸是动物饲粮中的限制性氨基酸[2-3]。研究表明，不同水平的蛋氨酸对埋植褪黑激素母貂的营养物质消化率和血清生化指标均有不同程度的影响[4]；氨基酸平衡饲粮不仅对奶牛的生产性能有影响，而且对其血清生化指标以及经济效益均有影响[5]；在低蛋白质饲粮中添加不同水平的必需氨基酸对生长肥育猪的生长性能、血清生化指标及肉品质均有影响[6]；在饲粮中添加包被蛋氨酸后，随着包被蛋氨酸添加量的增加，肉鸡生长性能逐渐改善，氨基酸的回肠消化率也逐渐提高[7]；在蛋白质水平为29.31%的饲粮中添加0.52%的蛋氨酸，对配种前期雌性蓝狐的营养物质消化率和血清生化指标来说较为理想，且能够满足配种前期雌性蓝狐的蛋氨酸需要量[8]；饲粮蛋氨酸水平为0.3%时，仔猪的平均日增重、粗蛋白质及蛋氨酸的消化率达到最高，同时料重比达到最低[9]。有关蛋氨酸在单胃动物上的研究有很多，且取得了很大成就，但是其在反刍动物尤其是梅花鹿上的研究却较少。因此，在梅花鹿饲粮中添加蛋氨酸是否也能取得类似的效果值得深入研究。本试验在低蛋白质饲粮中添加不同水平的蛋氨酸，研究其对梅花鹿仔鹿生长性能及血清生化指标的影响，探讨低蛋白质饲粮添加蛋氨酸代替高蛋白质饲粮的可行性。
1 材料与方法 1.1 试验动物试验动物选用吉林农业大学鹿场刚离乳分窝的梅花鹿仔鹿24只，随机分成3组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组)，每组8个重复，每个重复1只。
1.2 试验设计Ⅰ组饲喂蛋白质水平为14.16%(此为吉林农业大学鹿场饲粮蛋白质基础水平)的饲粮，Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂添加了0.16%、0.12%蛋氨酸(黄健等[1]研究表明，在低蛋白质饲粮中添加0.12%的蛋氨酸后饲粮蛋氨酸水平接近适宜阈值，所以本试验设计的蛋氨酸添加量分别为0.16%、0.12%)的蛋白质水平为12.46%(在Ⅰ组饲粮基础上蛋白质水平降低1.7%)的低蛋白质饲粮。
1.3 饲粮配制以吉林农业大学鹿场的常规饲粮配方为基础，饲粮中各营养水平是根据试验动物平均日采食精饲料与粗饲料比例计算得来，粗饲料为柞树叶，精饲料组成及饲粮营养水平见表 1。
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表 1 精饲料组成及饲粮营养水平(干物质基础) Table 1 Composition of concentrates and nutrient levels of diets (DM basis) |
饲养试验于2015年10月2日开始，至2015年10月24日结束，精饲料准确饲喂(即按照试验动物重量变化调整饲喂量)，并记录实际饲喂量，粗饲料每天每只试验动物饲喂3 kg左右，自由饮水。
1.5 样品采集与处理于2015年10月24日早饲前对试验动物进行颈静脉采血。血液采集后分装于不含抗凝剂收集管中，于4 000 r/min离心10 min，并收集血清于1.5 mL EP管中，-20 ℃保存，待测。
1.6 测定指标 1.6.1 生长性能的测定于饲养试验开始和结束时分别称重，以计算其增重、平均日增重；记录其每天每顿的采食量，以计算其平均日采食量。根据饲养期内所耗标准饲粮量和同期增重计算料重比。
料重比=饲养期内所耗标准饲粮量(kg)/同期增重(kg)。
1.6.2 血清生化指标的测定总蛋白(TP)含量采用双缩脲法测定；白蛋白(ALB)含量采用溴甲酚绿法测定；球蛋白(GLOB)含量是通过TP与ALB含量作差求得；尿素氮(UN)含量采用酶两点动力法测定；天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性采用连续监测法测定；丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性采用速率法测定；葡萄糖(GLU)含量采用葡萄糖氧化酶法测定；碱性磷酸酶(AKP)活性采用速率法测定。
1.7 统计方法试验结果以“平均值±标准差”形式表示，所有数据用SPSS 22.0统计软件进行统计分析，并用ANOVA程序进行差异显著性检验，使用Excel 2010绘制图表，P>0.05为差异不显著，P < 0.05为差异显著。
2 结果 2.1 梅花鹿仔鹿的生长性能梅花鹿仔鹿的生长性能试验结果如表 2所示。在饲养试验中各组梅花鹿仔鹿的增重、平均日增重及料重比在数值上均有差异，但各组之间差异均不显著(P>0.05)；精饲料平均日采食量各组间亦差异不显著(P>0.05)。从表中数据可以看出Ⅱ组的增重效果最好，料重比最低。
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表 2 梅花鹿仔鹿的生长性能 Table 2 Growth performance of sika deer fawns |
梅花鹿仔鹿血清生化指标的试验结果如表 3所示。各组仔鹿血清中TP、GLOB、UN、GLU含量及ALT、AST、AKP活性均无显著差异(P>0.05)。Ⅱ组血清中GLOB、GLU含量及ALT、AKP活性最高；Ⅲ组血清中TP含量及ALB、AST活性最高，且ALB含量显著高于Ⅰ组(P < 0.05)。
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表 3 梅花鹿仔鹿的血清生化指标 Table 3 Serum biochemical indices of sika deer fawns |
杨维仁[10]在研究瘤胃保护性氨基酸对肉牛消化代谢影响时发现投喂动物油包被蛋氨酸能显著提高肉牛的平均日增重。Hussein等[11]与杨魁[12]研究均表明给反刍动物添加瘤胃保护性蛋氨酸和瘤胃保护性赖氨酸可以提高其平均日增重。秦应和等[13]研究发现，随着饲粮中蛋氨酸水平的提高，獭兔的平均日增重及平均日采食量均显著提高，且料重比极显著降低。有学者研究发现，在6周龄新西兰肉兔的饲粮中添加不同水平的蛋氨酸，结果表明蛋氨酸添加量为0.6%时，肉兔的增重最高[14]。张建等[15]研究发现，饲粮中添加蛋氨酸可以提高1~21日龄肉仔鸡的平均日增重。El Boushy等[16]在蛋白质水平分别为19%、23%的饲粮中添加蛋氨酸和赖氨酸，结果发现19%蛋白质水平添加蛋氨酸和赖氨酸组肉仔鸡的平均日增重相对较高。研究发现，饲粮中添加蛋氨酸对3月龄肉兔的平均日增重、平均日采食量及料重比影响不显著[17]。另有研究发现，在每只公羊的饲粮中每天添加6 g过瘤胃蛋氨酸，其平均日增重均高于对照组，但是差异不显著[18]。上述研究结果一致，本试验中蛋氨酸添加量为0.16%的组平均日增重最高，且料重比最低，但是组间差异不显著，这一方面可能是由于试验动物梅花鹿虽然已经是驯化的野生动物，但是还存在着一定的野性，虽然已经在试验饲喂过程中极力避免外界因素对试验动物的刺激，但是不能保证一点影响也没有；另一方面可能是试验范围内的蛋氨酸的添加量较低所致。
黄健等[19]与余红心等[20]认为血清ALB与TP含量随着饲粮蛋白质水平的提高而增加。本试验研究结果与上述结果不一致，将饲粮蛋白质水平从14.16%降低至12.46%，Ⅱ、Ⅲ组血清ALB含量均高于Ⅰ组，可能原因是Ⅱ、Ⅲ组试验动物的饲粮中添加了蛋氨酸。血清GLOB是免疫蛋白的主要组成部分，在一定程度上能够反映动物的免疫能力[21]。本研究结果表明，各组血清GLOB含量差异不显著，但随着蛋氨酸添加量的增加有升高趋势。易雪静[22]研究发现，饲粮蛋氨酸水平对山羊各时间点血清GLU含量无显著影响，并认为限制性氨基酸对GLU代谢影响不大。夏科等[23]研究发现，饲粮中添加氨基酸对奶牛血清中GLU、UN等含量均无显著影响，但血清UN含量有降低趋势。毕晓华等[24]在研究过瘤胃保护性蛋氨酸对奶牛氨基酸代谢和血清生化指标的影响时也发现瘤胃保护性蛋氨酸对血浆中甘油三酯、GLU等含量均无显著影响。有研究表明，奶牛饲粮中氨基酸的添加降低了血清中UN的含量[5]。本研究发现饲粮中添加蛋氨酸对梅花鹿仔鹿的血清GLU、UN含量无显著影响，但UN含量随着蛋氨酸添加量的增加而降低。这一结果与上述研究结果一致。AKP、ALT与AST是参与氨基酸代谢的重要酶类。本试验将饲粮蛋白质水平从14.16%降到12.46%并添加蛋氨酸，各组血清AKP、ALT与AST活性无显著差异，说明在本试验范围内，在低蛋白质饲粮中添加蛋氨酸没有对试验动物血清中AKP、ALT与ASP活性产生显著影响。
4 结论与蛋白质水平为14.16%的饲粮相比，在蛋白质水平为12.46%的低蛋白质饲粮中添加0.16%蛋氨酸对梅花鹿仔鹿的生长性能及血清生化指标均无显著影响，且其增重效果好，料重比降低，说明在本试验范围内利用低蛋白质饲粮添加蛋氨酸代替高蛋白质饲粮是可行的。
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