2. 湖南省畜牧兽医研究所, 长沙 410131;
3. 济南诺能生物工程有限公司, 济南 250003
2. Hunan Institute of Animal Science and Veterinary Medicine, Changsha 410131, China;
3. Jinan Nornoon Biological Engineering Co., Ltd., Ji'nan 250003, China
断奶仔猪肠道形态发育不完善，各种消化酶分泌量少，营养物质消化率低，抵抗力差，容易受食源性病菌的感染，腹泻率和死亡率均较高。目前，生产上主要采取在饲粮中添加抗生素或高剂量氧化锌来预防仔猪断奶后生长性能下降、腹泻率和死亡率升高等问题，但抗生素的添加会引起药物残留和耐药性的增加[1]，氧化锌的过量添加不但会造成仔猪消化道损伤并且会影响后期生长，而且还会造成严重的环境污染[2]。葡萄糖氧化酶(GOD)是一种还原酶，在体内可催化葡萄糖的氧化过程，生成葡萄糖酸和过氧化氢，葡萄糖酸可以调节仔猪胃肠道的pH，抑制有害菌的生长，促进有益菌的繁殖，而过氧化氢也具有杀菌的作用。葡萄糖氧化酶是国家农业部1999年认定的新型饲料添加剂，在动物饲料中使用越来越广泛[3-4]。研究表明，在饲粮中添加葡萄糖氧化酶可降低仔猪感染病原菌的风险，提高仔猪的生长性能及健康水平[5-7]。本试验旨在研究饲粮添加葡萄糖氧化酶对28日龄断奶仔猪生长性能、血清生化指标和抗氧化功能及养分消化率的影响，确定葡萄糖氧化酶的最佳添加剂量，为其在猪生产中应用提供理论依据和技术参数。
1 材料与方法 1.1 葡萄糖氧化酶试验用葡萄糖氧化酶为粉状固体，活性为1 200 U/g，由济南诺能生物工程有限公司提供。
1.2 试验动物及试验设计试验在湖南省邵阳市太阳农业发展有限公司猪场进行，选用遗传背景、批次相同，发育正常的28日龄断奶仔猪150头，公母各占1/2，采用单因子试验设计，随机分为5组，每组3个重复，每个重复10头。对照组饲喂基础饲粮，试验Ⅰ组~Ⅳ组分别饲喂在基础饲粮中添加120、180、240和300 U/kg葡萄糖氧化酶的试验饲粮。试验期30 d。
1.3 基础饲粮组成及营养水平基础饲粮参照NRC(2012) 猪营养需要，以玉米、豆粕为基础配制，基础饲粮组成及营养水平见表 1。
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表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) |
试验仔猪在保育舍内(塑料漏缝地板栏舍)饲养，每栏10头，公母各占1/2，饲喂颗粒型饲粮，自由采食和饮水(计量但不限量)。记录舍内温度、湿度及各项试验数据，按常规免疫程序免疫接种和饲养管理。
1.5 测定指标与方法 1.5.1 生长性能指标试验开始和结束时对仔猪进行空腹称重；每日观察试验仔猪生长和健康状况，记录各栏饲粮消耗量、死亡仔猪数和死亡仔猪只重。最后计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。
每天上午和下午分别观察仔猪粪便和腹泻发生情况，计算腹泻率，公式如下：
腹泻率(%)=100×腹泻头次/(试验猪总数×试验天数)。
1.5.2 血清生化指标和抗氧化指标第30天，从各组的每个重复分别随机选取1头接近该组平均体重的仔猪(每组3头)，利用真空血清生化采血管通过前腔静脉采血，每头每次10 mL，3 000 r/min离心5 min，取上层血清，于-20 ℃保存，备测。利用全自动生化分析仪(迈瑞，BS-408) 测定血清中总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、尿素氮(UN)、葡萄糖(GLU)和总胆固醇(TC)含量。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
1.5.3 养分消化率采用收粪法测定仔猪对饲粮中养分的利用效率，在试验结束前3天，以重复为单位，将粪便收到保鲜袋中，样品保存及测定方法参照文献[8]。测定饲粮及粪便中干物质(DM)、粗蛋白质(CP)含量及总能(GE)，酸不溶灰分含量测定参照GB/T 23742—2009/ISO 5985 : 2002。养分表观消化率计算公式如下：
养分表观消化率(%)=100-[(粪中养分含量×饲粮中酸不溶灰分含量)/(饲粮中养分含量×粪中酸不溶灰分含量)]×100。
1.6 数据处理及统计试验数据采用SPSS 21.0进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，以P < 0.05为显著水平，差异显著者用Duncan氏法进行多重比较；试验结果用平均值和标准误表示。
2 结果与分析 2.1 葡萄糖氧化酶对断奶仔猪生长性能的影响由表 2可知，与对照组相比，添加葡萄糖氧化酶对仔猪末重、ADG、ADFI和F/G无显著性影响(P>0.05)。试验Ⅱ组腹泻率显著低于对照组(P < 0.05)，其他各组之间差异不显著(P > 0.05)。
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表 2 葡萄糖氧化酶对断奶仔猪生长性能的影响 Table 2 Effects of GOD on growth performance of weaned piglets |
由表 3可知，试验组血清TP、GLB、GLU和TC含量均高于对照组，但差异不显著(P>0.05)。试验Ⅳ组肉鸡血清ALB含量显著高于对照组(P < 0.05)，与其他试验组之间差异不显著(P>0.05)。试验Ⅲ组和Ⅳ组血清中UN含量显著高于对照组(P < 0.05)，与其他试验组之间差异不显著(P>0.05)。
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表 3 葡萄糖氧化酶对断奶仔猪血清生化指标的影响 Table 3 Effects of GOD on serum biochemical indexes of weaned piglets |
由表 4可知，试验Ⅱ组仔猪血清SOD活性显著高于试验Ⅲ组和Ⅳ组(P < 0.05)，但与对照组和试验Ⅰ组之间差异不显著(P>0.05)。试验Ⅱ组仔猪血清GSH-Px活性高于其他各组，但各组之间差异均不显著(P>0.05)。对照组仔猪血清MDA含量高于试验组，且显著高于试验Ⅱ组和Ⅲ组(P < 0.05)，但与试验Ⅰ组和Ⅳ组之间差异不显著(P>0.05)。
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表 4 葡萄糖氧化酶对断奶仔猪血清抗氧化功能的影响 Table 4 Effects of GOD on serum antioxidant function of weaned piglets |
由表 5可知，试验Ⅱ组仔猪干物质消化率显著高于对照组和试验Ⅰ组(P < 0.05)。试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组粗蛋白质消化率显著高于对照组(P < 0.05)。试验Ⅱ组和Ⅲ组总能消化率显著高于对照组(P < 0.05)。
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表 5 葡萄糖氧化酶对断奶仔猪养分消化率的影响 Table 5 Effects of GOD on nutrient digestibility of weaned piglets |
葡萄糖氧化酶可以降低机体胃肠道的pH，有效抑制有害菌生长，促进有益菌生长，提高机体免疫力，改善肠道菌群平衡，维持肠道形态结构，改善动物肠道的健康水平，促进动物生长[6, 9-10]。诸多关于葡萄糖氧化酶对断奶仔猪生产性能影响的研究表明，添加葡萄糖氧化酶能够显著提高仔猪ADG，并能显著降低F/G和腹泻率[11-14]。本试验研究发现，添加葡萄糖氧化酶对仔猪末重、ADG、ADFI和F/G影响差异不显著，但添加葡萄糖氧化酶有提高仔猪末重和ADG的趋势，显著降低了仔猪腹泻率，与前人研究基本一致。这说明饲粮中添加葡萄糖氧化酶对提高仔猪ADG、降低F/G、促进仔猪生长、减少腹泻率等方面有较好效果。
3.2 葡萄糖氧化酶对断奶仔猪血清生化指标的影响血清中TP和ALB、GLB含量反映机体蛋白质的吸收和代谢状况，血清蛋白系数(A/G)可以看出动物的健康状况[15]，当血液中TP和ALB含量升高表明机体代谢活动旺盛。血清中GLU主要是参与糖代谢途径，其含量高低反映动物糖代谢活力大小，正常范围内含量高，说明能够促进机体糖原的合成。TC含量反映出动物机体脂质代谢的状况，当机体对体脂分解代谢较多时，血清中其含量等可能会相对较高。血清中UN含量与机体蛋白质合成代谢和氨基酸平衡状况呈负相关，与蛋白质分解代谢呈正相关。汤海鸥等[16-17]研究发现，对照组和葡萄糖氧化酶组间仔猪血清生化指标GLU、ALB、GLB、TP含量和A/G未出现显著性差异，饲粮中添加葡萄糖氧化酶能使仔猪保持良好的健康状况，但并没有显著影响动物对葡萄糖的转化吸收。杨久仙等[6]研究发现，葡萄糖氧化酶降低仔猪血清尿素氮含量，氮存留增加、氨基酸合成蛋白质的效率提高。本试验结果表明，添加葡萄糖氧化酶可以不同程度提高血清中ALB、GLB、GLU和TC含量，并且能显著提高血清ALB和UN含量，但各指标均在正常生理水平[18-19]，与汤海鸥等[16-17]研究结果一致。Tancin等[20]研究发现，机体血清TP、ALB含量有一定升高，可增强能量动员和体液免疫功能。说明添加葡萄糖氧化酶能够提高机体蛋白质、糖和脂质代谢，并能在一定程度上提高仔猪的生长性能和免疫力。
3.3 葡萄糖氧化酶对断奶仔猪血清抗氧化功能的影响机体内酶类氧自由基清除剂SOD和GSH-Px构成酶促抗氧化体系，总抗氧化能力(T-AOC)代表体内酶性和非酶性抗氧化物的总体水平，MDA是脂质过氧化的代谢产物，间接反映氧自由基对细胞的损伤程度，当机体内自由基增多，机体组织将使内源性抗氧化剂系统活力增强，防止自由基损伤产生[21]。宋海彬[22]发现葡萄糖氧化酶不同程度地提高了肉鸡血清SOD活性，降低了血清MDA含量，具有一定抗氧化和抗应激作用。本试验研究发现，饲粮添加葡萄糖氧化酶显著性提高了仔猪血清SOD活性，不同程度提高了血清GSH-Px活性，试验Ⅲ组、Ⅳ组血清MDA含量比对照组显著降低。这表明在热应激条件下，仔猪能够调动体内内源性酶类抗氧化系统去抵御热应激，葡萄糖氧化酶的添加能减轻热应激对仔猪的影响，降低仔猪体内自由基产生，极有效地抑制血液内MDA生成，减少机体一连串损伤，提高其抗氧化功能，与前人研究一致。
3.4 葡萄糖氧化酶对断奶仔猪养分消化率的影响养分表观代谢率是衡量饲料营养价值的重要指标。消化率受饲料本身的性质、加工饲喂方法、动物种类与年龄、测定分析方法等因素影响。葡萄糖氧化酶在胃肠道内发挥酸化剂的作用，能够激活胃蛋白酶，加快饲料中粗蛋白质的消化[7]。杨久仙等[5]、陈清华等[23]研究发现，仔猪饲粮中添加葡萄糖氧化酶可以显著提高干物质和粗蛋白质的消化率。本试验发现，饲粮中添加180 U/kg葡萄糖氧化酶能够显著提高仔猪对干物质、粗蛋白质和总能的消化率，与前人研究结果一致，说明饲粮中添加葡萄糖氧化酶能够提高仔猪对饲粮养分的消化吸收，从而提高生长性能。
4 结论在饲粮中添加葡萄糖氧化酶，能改善断奶仔猪的抗氧化功能，增强免疫力，降低断奶仔猪腹泻率，促进养分的消化吸收，从而提高仔猪生长性能。在生产中，可推广葡萄糖氧化酶作为氧化锌的替代品使用，建议添加量为180 U/kg。
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