2. 山西省右玉县畜牧局, 右玉 037200
2. Animal Husbandry Bureau of Youyu County, Youyu 037200, China
沙棘(Hippophae rhamnoides Linn.)是一种落叶性灌木,沙棘果中含有多种营养物质和活性成分,主要包括维生素、类胡萝卜素、矿物质、黄酮、甾醇、多酚以及沙棘精油等[1],具有广泛的食用与药用价值。研究发现,饮用沙棘果汁能提高人血浆中高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)和甘油三酯(TG)含量,降低低密度脂蛋白(LDL)氧化易感性[2]。沙棘中黄酮类化合物能抑制脂肪细胞前体分化,从而减少细胞内脂质积累,对机体脂代谢具有一定的调节作用[3-4],并对氧化应激有显著的改善作用[5]。
羊肉作为一种优质畜产品,因瘦肉多、脂肪少、胆固醇低而倍受人们喜爱[6]。然而,羊肉的饱和脂肪酸含量相对较高,对人体健康无益[7]。我国规模化肉羊生产中多为舍饲,饲养密度较高,容易对动物造成氧化应激[8],导致生长性能下降,发病率升高。
沙棘果渣(sea buckthorn pomace)是沙棘果经榨汁加工后剩余的残渣,仍含有大量的营养物质[9],是一种潜在的饲料资源。沙棘果渣已广泛应用于单胃动物生产中[10-11],但其在反刍动物中的研究报道很少。鉴于沙棘果渣的高营养价值及山西省丰富的沙棘果渣资源,如果沙棘果渣能在肉羊生产中得以应用,必将有广阔的推广价值。因此,本研究以杜泊×小尾寒羊杂一代公羔为试验动物,在饲粮中添加不同水平的沙棘果渣进行育肥试验,从生长性能、器官指数、血清生化指标和肌内脂肪酸组分等方面进行研究,旨在为沙棘果渣在肉羊生产中的应用提供依据。
1 材料与方法 1.1 试验设计本试验所用的沙棘果渣由山西省朔州市右玉县沙棘饮料厂提供,其沙棘原料来自右玉本地,品种为中国沙棘(H.r. subsp. sinensis)。沙棘果渣的营养水平见表 1。
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表 1 沙棘果渣的营养水平 Table 1 Nutrient levels of sea buckthorn pomace |
基础饲粮参照NRC(2007) 绵羊营养需要中体重25 kg、平均日增重200 g公羔营养需要量设计,其他3种饲粮中分别添加10%、20%和30%的沙棘果渣,同时调整玉米、豆粕及粗饲料的比例,使这3种饲粮能量、蛋白质含量与基础饲粮基本一致。试验饲粮均制成全混合颗粒饲粮。试验饲粮组成及营养水平见表 2。试验选用体重[(25±1) kg]接近、体况良好的3月龄杜泊×小尾寒羊杂交公羔24只,随机分为4组,每组6只羊。各组分别饲喂含有0(对照)、10%、20%和30%沙棘果渣的试验饲粮。
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表 2 试验饲粮组成及营养水平 Table 2 Composition and nutrient levels of experimental diets |
试验于2015年5—8月在山西省右玉县宏宇牧业有限公司进行饲养试验共进行65 d,其中预试期15 d,正试期50 d。试验前对试验羊舍进行消毒和清扫,并对试验羊进行检验检疫。在预试期进行驱虫和分组工作。正试期内,试验羊每天饲喂2次,分别为08:00和18:00,自由采食饮水。
1.3 样品采集与指标测定正试期第1天和最后1天早上对所有试验羊空腹称重,记录每只羊每日采食量、初始体重和宰前活重,计算平均日增重、平均日采食量和料重比。
试验结束当日16:00对所有试验羊禁水禁食,次日08:00称重后进行采血,每只羊采血10 mL于洁净的离心管中,室温静置1 h,3 000 r/min离心10 min,分离血清并分装于1.5 mL EP管中,冷冻保存,血清生化指标由北京华英生物技术研究所公司测定。。
屠宰取样:取左侧背最长肌,液氮内冷冻保存;将心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏等器官分离、称重并记录;将消化器官包括瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃、大肠和小肠洗净称重并记录。计算器官指数:
器官指数(mg/kg)=器官重(mg)/活体重(kg)。
背最长肌中36种脂肪酸组分由青岛科标检测公司测定。
1.4 数据处理数据采用Excel 2013初步整理后,应用SPSS 22.0数据统计分析软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA),并进行Duncan氏法多重比较。数据以“平均值±标准差”表示。
2 结果 2.1 沙棘果渣对育肥羔羊生长性能和器官指数的影响由表 3可知,各组羔羊初始体重无显著差异(P>0.05),试验结束时,10%与20%水平组羔羊的宰前活重显著高于对照组和30%水平组(P < 0.05)。10%水平组羔羊的平均日增重最高,显著高于其他各组(P < 0.05),20%水平组显著高于对照组和30%水平组(P < 0.05)。羔羊的平均日采食量随饲粮沙棘果渣水平的升高表现为先升后降的趋势,20%水平组最高,显著高于其他各组(P < 0.05);30%水平组最低,显著低于其他各组(P < 0.05)。10%水平组羔羊的料重比最低,显著低于其他各组(P < 0.05);30%水平组最高,显著高于其他各组(P < 0.05)。
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表 3 沙棘果渣对育肥羔羊生长性能的影响 Table 3 Effects of sea buckthorn pomace on growth performance of fattening lambs |
由表 4可知,各组羔羊的心脏、肺脏、脾脏指数无显著差异(P>0.05),但30%水平组羔羊的肝脏、肾脏指数显著高于其他各组(P < 0.05)。各组羔羊的瘤胃、瓣胃、皱胃指数无显著差异(P>0.05)。20%水平组羔羊的网胃指数最高,显著高于其他各组(P < 0.05);30%水平组最低,显著低于其他各组(P < 0.05)。10%、20%和30%水平组羔羊的大肠和小肠指数均显著高于对照组(P < 0.05)。
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表 4 沙棘果渣对育肥羔羊器官指数的影响 Table 4 Effects of sea buckthorn pomace on organ indexes of fattening lambs |
由表 5可知,各组血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯、低密度脂蛋白、葡萄糖(GLU)、钙(Ca)和磷(P)含量无显著差异(P>0.05),但30%水平组的血清高密度脂蛋白(HDL)含量显著高于其他各组(P < 0.05)。动脉粥样硬化指数(atherosclerosis index,AI)[12]随饲粮沙棘果渣水平的提高逐渐降低,30%水平组显著低于其他各组(P < 0.05)。30%水平组的血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和乳酸脱氢酶(LDH)活性均显著高于其他各组(P < 0.05)。各组血清碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转移酶(G-GT)、过氧化氢酶(CAT)和肌酐激酶(CK)活性无显著差异(P>0.05)。10%、20%和30%水平组的血清总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于对照组(P < 0.05)。30%水平组的血清肌酐(CRE)和尿素氮(UN)含量显著高于其他各组(P < 0.05)。
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表 5 沙棘果渣对育肥羔羊血清生化指标的影响 Table 5 Effects of sea buckthorn pomace on serum biochemical parameters of fattening lambs |
由表 6可知,20%和30%水平组的背最长肌棕榈油酸(C16.1) 比例显著高于其他2组(P < 0.05)。10%、20%和30%水平组的背最长肌油酸(C18:1N9C)比例显著低于对照组(P < 0.05),而反油酸(C18:1N9T)比例显著高于对照组(P < 0.05)。10%、20%和30%水平组的背最长肌亚油酸(C18:2N6C)和花生四烯酸(C20:4N6) 比例显著高于对照组(P < 0.05)。10%、20%和30%水平组的背最长肌总饱和脂肪酸(σSFA)和总单不饱和脂肪酸(σPUFA)比例显著低于对照组(P < 0.05),而总多不饱和脂肪酸(σMUFA)、总不饱和脂肪酸(σUFA)比例与不饱和指数显著高于对照组(P < 0.05)。
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表 6 沙棘果渣对育肥羔羊背最长肌肌内脂肪酸组分的影响 Table 6 Effects of sea buckthorn pomace on intramuscular fatty acid composition in longissimus dorsi of fattening lambs |
前人研究表明,沙棘果渣在单胃动物生长中作用效果显著[10-11],关于其在反刍动物中的应用研究目前还鲜有报道。本试验中,饲粮添加10%和20%的沙棘果渣可显著提高平均日增重,而饲粮添加30%的沙棘果渣则显著降低了平均日增重,说明饲粮中添加适量沙棘果渣有利于羔羊增重,而过量反而导致生长性能下降。本试验结果与Nuernberg等[13]用沙棘果渣在猪育肥试验的结果一致。本研究中,10%水平组的料重比最小,经济效益最高。
沙棘在肝脏保护方面具有显著疗效,其主要得益于其中所含的沙棘果油[14]。研究发现,沙棘果对高脂膳食大鼠肝细胞具有保护作用[15],并对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)/D-氨基半乳糖(D-galactosamine, D-GalN)诱导的肝损伤有一定程度的预防和保护作用[16]。羔羊育肥中采食量较大,获得的营养物质较为丰富,增重较快,使得消化系统,血液循环系统以及各个内脏器官等承担了较大的压力。本试验中,10%与20%水平组的羔羊在提高增重效果的同时未对血清肝肾脏指标和肝脏、肾脏器官指数造成显著影响。
沙棘对动物胃肠道环境具有一定改善作用。李新平等[17]在研究沙棘籽油对小鼠肠炎的保护机制时发现,沙棘籽油中的活性抗氧化物质可以明显改善小鼠的肠道形态。申雪丽等[18]证明了沙棘中的活性物质能够在小肠特定部位被有效的吸收,从而起到改善肠道环境的目的。杜延萍等[19]发现,饲粮中添加沙棘果渣可以显著影响蛋鸡的肠道环境,促进肠道中有益菌的生长繁殖,抑制有害细菌的生长。左金国等[20]在饲粮中添加沙棘提取物,显著提高了断奶仔猪消化酶活性以及空肠和回肠的绒毛高度。Jing等[21]的研究证明,沙棘果油对于辐射引起的急性肠道损伤有很好的修复和保护作用。本试验中,10%、20%和30%水平组的大肠和小肠指数显著高于对照组,说明饲粮中的沙棘果渣对肠道发育有积极作用。
3.2 沙棘果渣对育肥羔羊血清生化指标的影响谷草转氨酶和谷丙转氨酶是常用的体现肝脏功能的指标[22]。正常生理条件下,谷丙转氨酶主要分布在肝细胞浆中,谷草转氨酶主要分布在肝细胞浆和肝细胞的线粒体中。当肝脏发生严重坏死或破坏时,引起谷草转氨酶和谷丙转氨酶在血清中活性偏高[23-24]。本试验中,30%水平组的血清谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性显著高于其他组,说明30%的沙棘果渣添加水平可能使羔羊肝脏受到损伤。
乳酸脱氢酶是一种糖酵解酶,存在于机体所有组织细胞的胞质内,其中以肾脏含量较高。当机体出现肝脏损伤或肾脏损伤时乳酸脱氢酶活性就会升高[25-26]。肌酐是小分子物质,可通过肾小球滤过,在肾小管内很少吸收,每日体内产生的肌酐,几乎全部随尿排出,一般不受尿量影响。肾功能不全时,肌酐在体内蓄积过量便成为有害的毒素,影响消化系统和呼吸系统等代谢。血清尿素氮是蛋白质代谢的最终产物,一般情况下也会通过肾小球排出体外,在肾功能出现障碍时才会积累,并导致更加严重的肾功能损伤[27]。本试验中,30%水平组的乳酸脱氢酶活性及肌酐、尿素氮含量都偏高,而其他组和对照组无显著差异,说明30%沙棘果渣添加水平过高,可能对肾功能造成了不利影响。
此外,30%水平组的增重显著偏低,采食量也显著偏低,且该组肝脏和肾脏的指数也偏大。当肝肾等器官发生损伤而影响其代谢功能时,损伤的器官就会代偿性的增大,引起器官指数偏大[28]。因此可以推测,30%组的沙棘渣添加水平使得该组的绵羊出现了一定程度的肝肾损伤,生长发育受到了影响。关于沙棘果渣的过量摄入会引起肝肾损伤的研究尚未见报道。
总抗氧化能力、过氧化物酶、谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶是反映机体抗氧化能力的直接指标。在本试验中,沙棘果渣可以提高绵羊血清总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性,说明沙棘果渣有较好的抗氧化性,与前人报道[29-31]一致。Rashid等[29]证明了沙棘是一种无毒性的植物性抗氧化补充剂。胡芳等[30]发现沙棘果渣醇提物可显著提高小鼠血清总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性。焦岩等[31]也通过小鼠试验证实了沙棘黄酮可以提高血清的总抗氧化能力。抗氧化性的提高可能间接导致了生长性能的提升。
马建爽等[32]通过利用沙棘黄酮调控肉仔鸡的肌内脂肪沉积研究时发现,沙棘黄酮通过调控肉仔鸡胰岛素和脂联素水平来改变低密度脂蛋白和甘油三酯含量,从而调控肌内脂肪沉积。本试验中,30%水平组血清高密度脂蛋白含量偏高,而血清总胆固醇含量在各组之间并没有出现显著差异,10%、20%和30%水平组的AI显著低于对照组。AI动是国际医学界制定的一个衡量动脉硬化程度的指标。AI越高,表示动脉粥样硬化程度越高[33]。10%、20%和30%水平组的AI显著低于对照组,说明沙棘果渣在防治动脉粥样硬化中有一定的作用。
3.3 沙棘果渣对于育肥羔羊肌内脂肪酸组分的影响关于沙棘果渣对肌肉中脂肪酸组分的影响已有多篇报道。王捷思等[34]以小鼠为研究对象,证明了沙棘黄酮能显著促进不饱和脂肪酸的形成。王艳波[35]证明了沙棘提取物会促进脂肪的分解并降低肉鸡的肌内脂肪酸含量。Nuernberg等[13]证实了沙棘果渣会使猪肌内饱和脂肪酸比例升高,同时油酸比例也显著提高。本试验中,10%、20%和30%水平组的油酸比例显著低于对照组,而且10%、20%和30%水平组的亚油酸比例显著高于对照组,饱和脂肪酸的比例显著下降。出现这种差异可能是反刍动物特有的瘤胃结构造成的。沙棘果渣中的脂肪含量较高,饲粮中的脂肪酸主要以甘油酯的形式为主,甘油酯被瘤胃微生物如Anaerovibro lipolytica分泌的酯解酶作用下分解为甘油和脂肪酸[36]。酯解的脂肪酸主要通过丁酸弧菌属(Butyrivibrio)细菌转化为硬脂酸[37],与此同时瘤胃中的原虫等其他微生物也将不饱和脂肪酸进行了不同程度的氢化[38],使得饲粮中的大部分不饱和脂肪酸变成了饱和脂肪酸。而单胃动物中没有瘤胃器官,不饱和脂肪酸在进入真胃之前没有氢化过程。此外,沙棘果渣中含有的芦丁、槲皮素等黄酮类活性物质会影响机体的脂肪代谢,从而影响机体各组脂肪酸的合成[39-40]。王颖超[41]指出,沙棘黄酮会减少小鼠的脂肪积累并提高其抗氧化性。张志宏等[11]指出,沙棘提取物会调控血清瘦素(leptin)含量和脂肪瘦素mRNA的表达,从而影响脂肪的合成,并进一步影响动物的生长性能。目前关于沙棘对反刍动物的脂肪合成的影响研究很少,其作用机制有待进一步挖掘。
由于消费者对肉类质量要求的提升,如何提高肉类中不饱和脂肪酸的含量成为一个研究热点[7]。在本试验中,由于沙棘果渣的添加,10%、20%和30%水平组的饱和脂肪酸比例出现了显著的降低,不饱和脂肪酸包括单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸的比例显著升高。肌肉中不饱和脂肪酸比例越高,越有利于消费者身体健康[42]。另外不饱和脂肪酸结果中10%、20%和30%水平组的单不饱和脂肪酸含量显著降低,而多不饱和脂肪酸的含量显著升高。单不饱和脂肪酸对人体血压、血脂、胆固醇等有显著调节作用[43],多不饱和脂肪酸对于心血管疾病、肥胖、视力生长发育等有重要的影响[44-45]。10%、20%和30%水平组的油酸等饱和脂肪酸比例出现了显著降低,而亚油酸、棕榈油酸、花生四烯酸等不饱和脂肪酸的比例有显著的升高。胆固醇在参与人体内的正常代谢之前,必须与亚油酸相结合[46]。如果亚油酸不足,一部分饱和脂肪酸就与和胆固醇发生结合,在血管壁上沉积,构成代谢障碍,进而形成动脉粥样硬化,并引发心脑血管疾病[47]。花生四烯酸是重要神经组织构成物质,是人体的必需脂肪酸,具有广泛的生理作用[48]。在降血脂、抑制血小板凝集、抗炎、抗癌、抗脂质氧化、促进脑组织发育等方面有非常积极的作用[49]。因此,从健康角度比较,亚油酸、花生四烯酸等不饱和脂肪酸含量越高,肉产品品质就越高。综合各项脂肪酸比例,20%水平组最佳。
4 结论① 饲粮中添加10%~20%沙棘果渣可以提高育肥羔羊生长性能,促进网胃、大肠、小肠等重要器官的发育,并提高血清的抗氧化性。
② 饲粮中添加沙棘果渣会影响育肥羔羊的肌内脂肪酸组分构成,提高不饱和脂肪酸的比例,降低饱和脂肪酸比例。
③ 饲粮中沙棘果渣添加水平超过30%会影响育肥羔羊的生长性能,并可能造成一定程度的肝肾损伤。
④ 本研究条件下,沙棘果渣的适宜添加水平为10%~20%。
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