2. 青岛农业大学动物科技学院, 青岛 266109
2. College of Animal Science and Technology, Qingdao Agricultural University, Qingdao 266109, China
饲粮营养水平对养猪生产发挥着重要作用,饲粮中的能量和蛋白质除了用于维持和生长外,还直接决定动物脂肪和蛋白质的沉积速度。饲喂不同营养水平的饲粮对猪的生长速度、料重比(F/G)和饲养效益具有较大的影响。酵母硒作为一种新型的添加剂也越来越受到人们的关注。吕耀忠等[1]研究显示,高营养水平饲粮在平均日增重(ADG)和F/G方面优于中、低营养水平饲粮。1973年,Rotruck等[2]研究发现,硒是谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的必需组成元素;同年,世界卫生组织(WHO)宣布硒是人和动物生命活动中的必需微量元素。研究表明,随着硒浓度的变化,谷胱甘肽过氧化物酶-l(GPx1)活性也发生变化,且GPx1活性的变化总是滞后硒浓度的变化,当硒元素缺乏时,GPxl活性降低,不能充分催化过氧化物,引起脂质自由基和过氧化物的积累,以致对细胞膜产生过氧化损伤[3]。硒不仅作为抗氧化酶系的组分,而且可以通过直接清除血液自由基而发挥抗自由基损伤作用[4]。王惠康等[5]研究表明,硒代蛋氨酸可以提高商品猪增重。饲粮营养水平影响养猪生产,是养猪生产中一个重要前提,对提高猪生产力有着重要作用。酵母硒是一种新型的硒元素补充剂,相对于传统的无机硒源具有更好的生物利用率。本试验旨在研究营养水平和酵母硒对烟台黑猪生长性能、养分表观消化率及血清抗氧化指标的影响,为烟台黑猪的饲养提供理论参考。
1 材料与方法 1.1 试验设计试验在威海市烟台黑猪保种场进行,选择48头体况良好、体重(70.30±1.30) kg的烟台黑猪,公母各1/2。试验采用2×2因子试验设计,随机分为4个组,每组4个重复,每个重复(圈)3头猪。Ⅰ组饲喂低营养水平饲粮(消化能水平11.19 MJ/kg、粗蛋白质水平12.28%),Ⅱ组饲喂低营养水平饲粮+0.5 mg/kg酵母硒,Ⅲ组饲喂高营养水平饲粮(消化能水平13.11 MJ/kg、粗蛋白质水平14.73%),Ⅳ组饲喂高营养水平饲粮+0.5 mg/kg酵母硒。预试期为7 d,正试期为105 d。
1.2 试验饲粮试验饲粮为玉米-杂粕型,根据我国《猪饲养标准》(NY/T 65—2004)配制。在保持能量蛋白质比和其他各养分含量基本不变的前提下,低营养水平饲粮比高营养水平饲粮能量水平降低15%。试验所用酵母硒购自珠海万福康生物科技有限公司,硒元素含量为2 000 mg/kg。试验饲粮组成及营养水平见表 1。
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表 1 试验饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) |
试验猪饲喂粉料,自由采食和饮水。试验开始前按照猪场常规程序进行消毒、驱虫和免疫。栏舍每天清扫1次,保持圈舍卫生,每天观察猪群健康状况。
1.4 测定指标 1.4.1 生长性能分别于试验开始和结束时早晨空腹称个体体重,以计算ADG;以重复(圈)为单位记录每天的耗料量,以计算平均日采食量(ADFI)、F/G、平均日粗蛋白质摄入量和平均日能量摄入量。
1.4.2 养分表观消化率采用内源指示剂法测定各饲粮中养分的表观消化率,采用盐酸不溶灰分(AIA)作为内源指示剂,盐酸浓度为3 mol/L。
于试验结束前10 d开始,连续3 d每天不定期收集部分新鲜粪样,将每天每一重复的鲜粪混匀,按每100 g样品加5 mL 10%硫酸固氮。60~65 ℃条件下烘干制备风干样,置室温条件下回潮24 h,称重、记录、粉碎,分装于样品袋中备用。饲粮和粪中的干物质(DM)、粗蛋白质(CP)、钙(Ca)和磷(P)含量分别参照中华人民共和国国家标准GB/T 6432—1994、GB/T 6433—1994、GB/T 6436—2002、GB/T 6437—2002测定。
某养分的表观消化率(%)=100-(饲粮中指示剂的含量/粪中指示剂的含量)×(粪中某养分的含量/饲粮中某养分的含量)×100。
1.4.3 血清抗氧化指标血清抗氧化指标[GSH-Px活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(T-AOC)]采用南京建成生物工程研究所生产的检测试剂盒,将全血样品于室温放置1~2 h(不加抗凝剂),待血液凝固后,室温3 000~4 000 r/min离心10 min,收集上清于1.5 mL离心管中,2~8 ℃冷藏保存,用于当天检测。采用752紫外可见分光光度计、离心机、恒温水浴锅等仪器进行测定。
1.5 数据统计数据先用Excel 2010预处理,采用SPSS 17.0统计软件中一般线性模型(GLM)分别对营养水平、酵母硒及二者互作效应进行方差分析,并用Duncan氏法进行多重比较。P < 0.05表示差异显著,P < 0.01表示差异极显著,0.05≤P < 0.10表示有趋势。
2 结果 2.1 营养水平和酵母硒对烟台黑猪生长性能的影响营养水平和酵母硒对烟台黑猪生长性能的影响见表 2。ADG方面,酵母硒有提高烟台黑猪ADG的趋势(P=0.07),Ⅲ、Ⅳ组ADG极显著高于Ⅰ、Ⅱ组(P < 0.01);其中Ⅳ组ADG最高,分别比Ⅰ、Ⅱ组提高了17.20%(P < 0.01)、15.20%(P < 0.01),比Ⅲ组提高了5.24%(P < 0.05);Ⅲ组ADG分别比Ⅰ、Ⅱ组提高了11.20%(P < 0.01)、9.47%(P < 0.01);但酵母硒与营养水平之间没有互作效应(P>0.05)。F/G方面,Ⅳ组烟台黑猪F/G最低,分别比Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组降低了4.60%(P < 0.01)、5.74%(P < 0.01)、1.99%(P>0.05);Ⅲ组分别比Ⅰ、Ⅱ组降低了2.66%(P < 0.05)、3.83%(P < 0.05)。ADFI方面,酵母硒对烟台黑猪ADFI影响不显著(P>0.05);Ⅳ组ADFI分别比Ⅰ、Ⅱ组提高了12.03%(P < 0.01)、9.01%(P < 0.01),比Ⅲ组提高了3.84%(P>0.05);酵母硒与营养水平之间没有互作效应(P>0.05)。烟台黑猪平均日粗蛋白质摄入量和平均日能量摄入量与ADFI变化规律相似,酵母硒与营养水平之间没有互作效应(P>0.05)。
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表 2 营养水平和酵母硒对烟台黑猪生长性能的影响 Table 2 Effects of nutrition level and yeast selenium on growth performance of Yantai black pigs |
营养水平和酵母硒对烟台黑猪养分表观消化率的影响见表 3。干物质表观消化率方面,营养水平和酵母硒对烟台黑猪干物质表观消化率影响均不显著(P>0.05),酵母硒与营养水平之间没有互作效应(P>0.05)。粗蛋白质表观消化率方面,酵母硒对烟台黑猪粗蛋白质表观消化率影响不显著(P>0.05),营养水平对其粗蛋白质表观消化率影响极显著(P < 0.01);其中Ⅳ组粗蛋白质表观消化率最高,分别比Ⅰ、Ⅱ组提高了2.73%(P < 0.01)、3.17%(P < 0.01),比Ⅲ组提高了0.82%(P>0.05);但酵母硒与营养水平之间没有互作效应(P>0.05)。钙、磷表观消化率方面,营养水平和酵母硒对烟台黑猪钙、磷表观消化率影响均不显著(P>0.05),其中酵母硒有提高钙、磷表观消化率的趋势(P=0.09、P=0.07),且酵母硒与营养水平之间没有互作效应(P>0.05)。
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表 3 营养水平和酵母硒对烟台黑猪养分表观消化率的影响 Table 3 Effects of nutrient level and yeast selenium on nutrient apparent digestibility of Yantai black pigs |
营养水平和酵母硒对烟台黑猪血清抗氧化指标的影响见表 4。血清SOD活性方面,酵母硒对烟台黑猪血清SOD活性影响极显著(P < 0.01),营养水平对其血清SOD活性影响不显著(P>0.05);其中Ⅳ组血清SOD活性比Ⅰ、Ⅲ组分别提高了13.13%(P < 0.01)、10.50%(P < 0.01),比Ⅱ组提高了2.37%(P>0.05);但酵母硒与营养水平之间没有互作效应(P>0.05)。血清GSH-Px方面,酵母硒对烟台黑猪血清GSH-Px活性影响极显著(P < 0.01),营养水平有提高其血清GSH-Px活性的趋势(P=0.06);其中Ⅳ组血清GSH-Px活性比Ⅰ、Ⅲ组分别提高了23.27%(P < 0.01)、18.69%(P < 0.01),比Ⅱ组提高了3.83%(P>0.05);酵母硒与营养水平之间没有互作效应(P>0.05)。血清MDA含量方面,酵母硒对烟台黑猪血清MDA含量影响极显著(P < 0.01),营养水平有降低其血清MDA含量的趋势(P=0.06);其中Ⅰ组血清MDA含量最高,分别比Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组高了18.22%(P < 0.01)、3.83%(P>0.05)、25.68%(P < 0.01);但酵母硒与营养水平之间没有互作效应(P>0.05)。在血清T-AOC方面,酵母硒对烟台黑猪血清T-AOC影响极显著(P < 0.01),营养水平对其血清T-AOC影响显著(P < 0.05);其中Ⅳ组血清T-AOC比Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别提高了26.33%(P < 0.01)、5.09%(P>0.05)、16.14%(P < 0.01);但酵母硒与营养水平之间没有互作效应(P>0.05)。
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表 4 营养水平和酵母硒对烟台黑猪血清抗氧化指标的影响 Table 4 Effects of nutrient level and yeast selenium on serum antioxidant indexes of Yantai black pigs |
饲粮营养水平是猪营养中的重要因素,适宜的营养水平有利于提高猪只生长速度和饲料转化率,充分发挥动物的种质特性。Chiba等[6]研究表明,采取自由采食方式饲喂的生长猪,其饲粮营养水平会影响猪只采食量。营养水平低的饲粮中粗纤维含量较高,适口性较差,导致动物采食量降低,同等质量的饲粮低营养水平能量水平低,动物摄入的能量低导致生长性能下降[7]。研究发现,天津白猪20~60 kg阶段,从不同能量、蛋白质组合饲粮处理结果看,高能高蛋白质组和高能低蛋白质组饲料转化效率最高,显著优于低能低蛋白质组;高能量水平饲粮饲料转化率极显著高于低能量水平饲粮;同时高蛋白质水平组ADG显著高于低蛋白质水平组[8]。综上,高营养水平饲粮一般有较好的适口性,可提高动物的ADFI、ADG和饲料转化率,进而使生长性能得到提高。这与本试验得出的高营养水平能够显著提高烟台黑猪生长性能,提高ADG、ADFI,降低F/G的结果类似,且赵宏志等[9]也曾得出了类似的研究结果。硒元素方面,林长光[10]研究表明,0.5 mg/kg硒水平的纳米硒组育肥猪ADG显著高于亚硒酸钠各硒水平组,极显著高于对照组;且F/G极显著低于对照组;0.5 mg/kg硒水平的酵母硒和纳米晒显著提高初生仔猪、断奶仔猪和生长育肥猪的ADG,降低F/G。在本试验中,添加酵母硒能够提高烟台黑猪ADG,有提高ADFI的趋势但不显著,并且营养水平与酵母硒之间没有互作效应。但也有研究表明,不同硒源对生长肥育猪的生长性能无显著影响,但有提高ADFI和ADG及降低F/G的趋势[11]。酵母硒对生长猪生长性能的影响的不同结论可能是由于试验动物品种差异、个体差异以及试验周期的长短造成的。
3.2 营养水平和酵母硒对烟台黑猪养分表观消化率的影响研究发现,不同营养水平对生长育肥猪养分表观消化率影响显著,其中高营养水平组养分表观消化率最高,显著高于中、低营养水平组,粗蛋白质表观消化率显著高于中营养水平组,高营养水平组钙、磷表观消化率显著高于中、低养水平组[12-13]。何若钢等[14]研究表明,饲粮能量水平对干物质、粗蛋白质、磷和粗脂肪表观消化率影响极显著,对粗纤维和钙表观消化率影响显著;不同粗蛋白质水平对粗蛋白质表观消化率有显著影响,对粗脂肪表观消化率有极显著影响。本试验中高营养水平能够极显著提高粗蛋白质表观消化率,提高饲粮利用率,而饲粮营养水平对干物质、钙、磷表观消化率影响不显著,可能是与动物的品种、试验周期差异等因素引起的。硒元素对动物养分表观消化率也有一定影响,能够提高干物质和氮的表观消化率[15]。张丽娟等[16]研究表明,奶牛饲粮中添加0.45 mg/kg水平的酵母硒可以极显著提高奶牛有机物、酸性洗涤纤维、中性洗涤纤维及钙、磷的表观消化率,显著提高粗蛋白质的表观消化率,同时与其他组相比养分表观消化率也较高。在本试验中,饲粮营养水平对干物质、钙、磷表观消化率影响不显著,但高营养水平能够极显著提高粗蛋白质的表观消化率,提高饲粮利用率。酵母硒总体主效应不显著,添加酵母硒能够提高钙、磷的表观消化率,但差异不显著,且营养水平与酵母硒之间没有互作效应。这与张丽娟[17]用酵母硒替代亚硒酸钠对奶牛的粗脂肪、有机物消化率略有提高但差异不显著的结果类似。
3.3 营养水平和酵母硒对烟台黑猪血清抗氧化指标的影响在动物血液中,SOD、GSH-Px、MDA、T-AOC是反映动物机体抗氧化能力的重要指标[18]。硒元素是GSH-Px的重要组成成分,GSH-Px通过催化还原态的谷胱甘肽(GSH)来参与过氧化反应,其作用是清除机体细胞代谢过程中的氧化物质和羟自由基,同时促进过氧化氢分解,减少不饱和脂肪酸对细胞膜的过氧化作用。当动物机体缺硒时,GSH-Px合成减少,动物抗氧化能力降低[19-20]。SOD是生物体内重要的抗氧化酶,广泛分布于动植物体内,是生物体内清除自由基的重要物质。MDA是脂质体内氧化反应的终产物,MDA的产生能加剧膜的损伤,因此在动植物衰老生理和抗性生理研究中血清MDA含量是一个常用指标。Mahan等[21]研究表明,在仔猪饲粮中添加富硒酵母比添加亚硒酸钠能够更显著地提高GSH-Px的活性。贾建英[22]、高建忠等[23]研究表明,饲粮中添加酵母硒能够提高猪血清GSH-Px的活性,同时也能够显著降低血清MDA的含量。本试验结果表明,饲粮中添加0.5 mg/kg酵母硒对烟台黑猪各抗氧化指标影响极显著,能够显著提高血清SOD、GSH-Px活性及T-AOC,能够极显著降低血清MDA的含量,与贾建英[22]的研究结果类似。本试验中营养水平对血清SOD、GSH-Px活性及T-AOC影响不显著,但有提高血清GSH-Px活性和降低血清MDA含量的趋势,陈军[24]也得出了类似的结论。但本试验中营养水平能够显著提高烟台黑猪血清T-AOC,对提高机体抗氧化能力有帮助。
4 结论① 营养水平对烟台黑猪生长性能、粗蛋白质表观消化率影响显著,对烟台黑猪血清抗氧化指标有一定影响。
② 酵母硒有提高烟台黑猪平均日采食量的趋势,酵母硒能够极显著提高烟台黑猪血清抗氧化指标。
③ 营养水平与酵母硒对烟台黑猪生长性能、养分表观消化率及血清抗氧化指标没有互作效应。
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