幼兔饲养是家兔生产中的重要环节，断奶后生产力低是影响兔业发展的瓶颈问题。幼兔断奶后，肠道机能尚未发育完全，胃酸分泌不足，特别是夏季，加之营养、环境应激，胃肠道损伤，营养物质消化率低，产生腹泻等症状，影响幼兔生产。传统养兔生产一般采用抗生素预防和治疗，有一定效果，但耐药性、抗生素残留等问题随之而来。有研究表明，酸化剂可以改善幼畜生长性能和健康状况。畜禽饲粮中添加适量的酸化剂可以弥补其生理性产酸不足，酸化剂能够调节动物肠道微生物平衡，增殖有益菌、抑制有害菌，提高动物抗应激和免疫力，降低肠道pH，增强消化酶活性，提高营养物质消化率，从而提高生长性能^[1-6]。酸化剂对幼畜健康有积极的影响，但由于试验动物品种、年龄、试验条件、添加量等不同，试验的结果变异很大，特别是仔幼兔方面，类型、添加量方面的研究相对较少。前期，我们研究了苹果酸对獭兔生长性能的影响及其适宜添加量^[7]，而本试验旨在夏季幼兔饲粮中添加有机酸化剂——延胡索酸，探讨其对夏季幼兔生长性能、空肠发育、血清抗氧化和免疫指标的影响，为酸化剂在幼兔生产中的应用提供理论依据。

1 材料与方法 1.1 试验材料

延胡索酸购于苏州优合科技有限公司，复合酸化剂(酸赐宝)购于广东绿生源饲料科技有限公司。

1.2 试验设计

选择90只体况良好、体重[(919.00±8.92) g]相近的56日龄獭幼兔作为试验动物，试验前统一免疫，随机分为3组，每组10个重复，每个重复3只。对照组饲喂基础饲粮，延胡索酸组在基础饲粮中添加0.05%延胡索酸，复合酸化剂组在基础饲粮中添加0.10%复合酸化剂。预试期7 d，正试期35 d。试验地点在江苏省农业科学院六合试验兔场。

1.3 试验饲粮

试验饲粮配制参照NRC(1977)家兔饲养标准^[8]和谷子林^[9]推荐的獭兔营养需要。消化能供给量为1.2倍的维持需要。延胡索酸和复合酸化剂先预混合后添加至饲粮中制成颗粒饲喂，添加量根据前期其他酸化剂试验结果确定。基础饲粮组成及营养水平见表 1。

1.4 饲养管理

试验前对兔舍兔笼进行彻底清扫、消毒。试验兔3只为1笼，每天饲喂2次，分别在08:30和15:30，试验幼兔饲喂配合饲料，颗粒料，长度为2~3 cm，自由饮水，每天清扫卫生，并做好各种记录。预试期内进行分组、打耳号。

1.5 样品采集与指标测定

试验开始和结束时对试验兔称重，记录初始体重和终末体重，计算平均日增重；记录试验兔的死亡数量并计算死亡率。

营养物质表观消化率测定采用全收粪法，在试验第21天，连续收粪5 d，记录采食量，粪量。饲粮及粪中干物质(DM)、粗蛋白质(CP)、粗纤维(CF)、钙(Ca)、磷(P)含量采用AOAC^[10]规定方法进行测定。

在试验期第35天采血，分离血清，-20 ℃保存用于血清抗氧化和免疫指标的测定，按照检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)规定的方法进行检测。

在试验结束时，幼兔称重，每组各随机抽取体重相近獭兔5只，空腹24 h后进行屠宰，取空肠中段组织，4%多聚甲醛固定，制成石蜡切片，苏木精-伊红(HE)染色。使用倒置显微镜(附带相机)，目镜为10倍、物镜为4倍条件下观察，每张切片随机观察10个视野。应用Q-capture Pro 6.0软件获得组织切片照片，Image-pro plus 6.0图像分析系统进行分析，测量肠壁厚度、绒毛高度、隐窝深度，计算绒毛高度/隐窝深度值。

1.6 数据分析

运用Excel 2007整理数据，采用SPSS 17.0进行单因素方差分析(one-way ANVOA)，Duncan氏法多重比较，P < 0.05为显著差异。

2 结果与分析 2.1 延胡索酸对夏季幼兔生长性能及营养物质表观消化率的影响

由表 2可知，与对照组相比，饲粮添加延胡索酸和复合酸化剂均提高了夏季幼兔终末体重和平均日增重(P>0.05)，降低了死亡率(P>0.05)。与对照组相比，延胡索酸组终末体重提高了6.05%，平均日增重提高了13.40%，但无显著差异(P>0.05)。由此可见，饲粮添加延胡索酸可提高夏季幼兔的生长性能。

由表 3可知，延胡索酸组、复合酸化剂组粗蛋白质表观消化率均显著高于对照组(P < 0.05)，而延胡索酸组、复合酸化剂组磷表观消化率均显著低于对照组(P < 0.05)。延胡索酸组、复合酸化剂组粗纤维表观消化率均高于对照组(P>0.05)。由此可见，饲粮中添加延胡索酸和复合酸化剂均有利于促进蛋白质的消化。

2.2 延胡索酸对夏季幼兔空肠发育的影响

由表 4可知，与对照组相比，饲粮添加延胡索酸能够提高空肠肠壁厚度、绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度(P>0.05)，分别提高了20.7%、9.83%和18.6%，同时也降低了空肠隐窝深度(P>0.05)。

2.3 延胡索酸对幼兔血清抗氧化和免疫指标的影响

由表 5可知，延胡索酸组血清总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性均高于对照组，且血清丙二醛(MDA)含量低于对照组，但均无显著差异(P>0.05)。

由表 6可知，与对照组相比，饲粮添加延胡索酸、复合酸化剂对血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、补体3(C3)、补体4(C4)含量及碱性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LZM)活性均无显著影响(P>0.05)，但血清LZM活性有提高的趋势。

3 讨论 3.1 延胡索酸对夏季幼兔生长性能及营养物质表观消化率的影响

延胡索酸又叫富马酸，广泛应用于食品生产加工工艺中，作为食品酸味剂，具有抑菌、防腐的功效；对于单胃动物，作为酸化剂和饲料保存剂，延胡索酸可以通过降低胃肠道pH、抑制饲料霉变而促进动物的健康，提高生长性能。王杰等^[11]研究发现，饲粮添加复合酸化剂可以显著提高断奶仔猪的平均日增重，降低腹泻率，蛋白质、干物质表观消化率也有所提高。Palamidi等^[12]研究发现，饲粮添加酸化剂可以提高肉鸡生长性能、营养物质表观消化率及能量沉积。Zhu等^[13]研究发现，生长兔饮用有机酸酸性水可以部分改善生长性能，补偿胃酸酸度，影响盲肠微生物群落结构，其中饮水最适宜pH为4.3。本试验中，饲粮添加延胡索酸能够提高夏季幼兔粗蛋白质、粗纤维的表观消化率，提高终末体重和平均日增重。李春华等^[14]研究报道，饲粮添加不同浓度延胡索酸能够不同程度提高奶牛粗蛋白质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维的表观消化率。饲粮中添加延胡索酸也可以显著提高断奶仔猪平均日增重，降低料重比和腹泻率^[15]。其他酸化剂研究中也得到相似的结果，潘孝青等^[7]研究发现，饲粮添加适宜的苹果酸可以提高獭兔的生长性能和营养物质表观消化率，与本次试验结果相一致。王凯英等^[16]研究发现，水貂饲粮中添加1.5%乳酸，能调节饲料和胃肠道pH，进而获得最佳生长性能。近年，柠檬酸研究报道也较多，Zhang等^[17]研究发现，饲粮添加0.8%~1.6%柠檬酸可以提高饲喂高植物蛋白质饲粮大黄鱼的生长性能，因为酸化剂可以提高矿物质生物学利用率，增强肠道抗氧化能力及肠道恢复能力。Liu等^[18]研究发现，饲粮添加柠檬酸对妊娠后期和哺乳期母猪生产性能和窝产性能无显著影响，但饲粮添加10和15 mg/kg柠檬酸可以增强母猪钙、磷、蛋白质的吸收，改善体液免疫功能，通过初乳和母乳使仔猪获益。因此，生产中，饲粮添加适宜的酸化剂可以改善幼畜的健康，提高生长性能。

3.2 延胡索酸对夏季幼兔空肠发育的影响

肠道形态发育是影响幼兔生长健康的重要因素，仔兔断奶后由吮吸母乳过渡到采食固体饲料的过程中，容易导致小肠绒毛萎缩和隐窝加深，影响幼兔肠道发育，从而影响生长及健康。晏家友等^[19]研究发现，仔猪饲粮添加缓释复合酸化剂极显著提高了空肠绒毛高度/隐窝深度值，改善了肠道发育，与林映才等^[20]研究早期断奶仔猪饲粮添加复合酸化剂得到的结果基本一致。李鹏等^[21]研究发现，断奶仔猪饲粮中添加2种复合酸化剂都可以显著增加小肠绒毛的高度，降低隐窝深度。肉鸡生产中，饲粮添加复合酸化剂可以提高肉鸡21日龄十二指肠绒毛高度，降低隐窝深度，同时提高21和42日龄空肠的绒毛高度^[22]。本次试验研究也得到相似的结果，饲粮添加延胡索酸能够提高空肠肠壁厚度、绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度值，降低了隐窝深度。由此可见，饲粮添加适宜的延胡索酸可以改善幼畜肠道发育及健康，改善肠道的消化吸收，从而提高生长性能。

3.3 延胡索酸对夏季幼兔血清抗氧化和免疫指标的影响

本试验研究发现，与对照组相比，饲粮添加延胡索酸能够提高血清T-AOC和SOD活性，降低血清MDA含量，但对血清IgG、IgA、IgM等指标含量无显著影响，仅血清LZM活性有提高的趋势，因此延胡索酸有可能提高幼兔的抗氧化性能，但对免疫效果不显著。李鹏等^[21]研究发现，饲粮添加复合酸化剂可以显著提高仔猪血清中IgA、IgG的含量，提高仔猪的免疫水平。郭骥^[23]研究发现，复合酸化剂能够提高仔猪平均日增重与母猪泌乳期采食量，提高母猪乳中抗氧化能力，对母猪乳常规成分、免疫功能无显著影响。张德成等^[24]报道，饲粮添加柠檬酸可提高哺乳仔猪细胞免疫功能。但张秀文等^[15]研究表明，饲粮添加1%延胡索酸对提高断奶仔猪的免疫性能效果不明显，但并无负面的反应，这与本次试验的研究结果相一致。李建平等^[25]研究报道，饲粮添加酸化剂对断奶仔猪的免疫功能没有显著影响，且柠檬酸显著提高了早期断奶仔猪的抗氧化能力，机体清除自由基的能力增强，有助于提高断奶仔猪的抗应激能力。周岭等^[26]研究报道，饲粮添加复合酸化剂能显著降低鸡蛋脏蛋率，降低输卵管中MDA的产生，缓解脂质过氧化反应，且能显著抑制输卵管沙门氏菌的生长。沈家鲲等^[27]研究发现，生长期蛋雏鸡饲粮中添加复合酸化剂，对改善雏鸡的免疫性能及血液中抗氧化指标具有一定的促进作用。由此可见，饲粮添加酸化剂能够改善机体的抗氧化能力，对免疫性能影响还需进一步研究。

4 结论

饲粮中添加延胡索酸可以提高夏季幼兔生长性能，降低死亡率，改善肠道发育，提高肠道消化吸收能力，提高粗蛋白质表观消化率，增强机体的抗氧化能力，促进机体健康。