微量元素是维持动物健康和正常生理机能所必需的营养物质，在动物体内主要以酶的必需组成成分(辅酶、辅基等)或激活剂等形式参与体内的一系列生理、生化反应，从而影响物质代谢和生长发育[1-2]。为了防止微量元素不足，保证动物健康和正常生长发育，提高动物的生产性能，畜禽生产中通常在饲粮中添加一定量的微量元素。目前畜禽饲粮中的微量元素(铜、铁、锌和锰)都是以无机盐的形式(如硫酸盐、氧化物和氯化物)添加的。由于无机微量元素价格便宜，为保证足够的营养水平，在生产中出现了过量添加的现象。畜禽对无机微量元素的吸收率较低，没有被吸收的微量元素随粪便排出体外，从而给生态环境带来了较大的影响。研究表明，有机微量元素(氨基酸螯合物和蛋白质螯合物)具有稳定性好、吸收率高、生物学效价高等优点[3-6]。但有关有机微量元素在肉鸡中的应用研究大多是以单一有机微量元素替代相应无机微量元素，而有关复合有机微量元素替代无机微量元素在肉鸡尤其是地方优质肉鸡中的应用研究较少。崇仁麻鸡是江西省优良地方特色品种，被誉为全国十大名鸡之一，2015年获国家地理标志认证，具有抗逆性好、肉质鲜美等优点，但由于其生长速度较慢，严重地制约了崇仁麻鸡的发展。鉴此，本试验旨在以崇仁麻鸡为试验对象，研究不同水平复合有机微量元素替代无机微量元素对崇仁麻鸡生长性能和粪便中微量元素含量的影响，为确定其适宜添加量提供试验依据。
1 材料与方法 1.1 试验材料试验所用无机微量元素均为饲料级，有机微量元素由广州隆达饲料有限公司生产并提供，无机及有机微量元素种类及规格见表 1。
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表 1 无机及有机微量元素规格 Table 1 The specifications of inorganic and organic trace elements |
选择28日龄、初始体重相近的崇仁麻鸡256只(公母各占1/2)，随机分为4组，每组4个重复，每个重复16只鸡。Ⅰ组为对照组(标准水平无机组)，参照我国《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)，微量元素铁、铜、锰、锌的添加水平分别为80、8、80和60 mg/kg(以无机盐形式添加)；Ⅱ~Ⅳ组分别以50%、75%和100%有机微量元素替代无机微量元素。基础饲粮中铁、铜、锰、锌的含量分别为7.93、75.28、30.72和27.37 mg/kg。各组其他营养水平保持一致。基础饲粮组成及营养水平见表 2。
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表 2 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 2 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) |
试验鸡采用网上分栏平养，自然光照和人工光照相结合，自由采食和饮水，每天早、中、晚各投1次料，观察试验鸡群的健康状况、采食、饮水及粪便等。按常规程序进行消毒和免疫。预试期7 d，正试期28 d。
1.4 测定指标及方法 1.4.1 生长性能试验期间以重复为单位记录各组试验鸡的喂料量、剩料量、初始体重和终末体重，计算各组试验鸡的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。
1.4.2 血清生化指标试验结束时，分别从各组取体重相近的试验鸡6只(公母各3只)，翅静脉采血5 mL，分离血清，-20 ℃保存。血清碱性磷酸酶和5′-核苷酸酶活性采用Thermo Multiscan MK3酶标仪[热电(上海)仪器有限公司]测定，血清尿素氮含量采用PUS-2018型半自动生化分析仪(北京普朗新技术有限公司)测定，试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
1.4.3 粪便中微量元素含量试验结束时停料，空腹24 h后开始饲喂，饲喂开始时用铺好塑料薄膜的收粪盘收集粪便。饲喂72 h后清理料槽中剩余的饲料，继续空腹24 h，此间一直收集粪便。收集完毕，先清理干净粪便上的鸡毛、皮屑和饲料(扣除采食量)，然后将粪便充分混合，准确称取150 g于(65±1) ℃烘箱烘干，回潮24 h，称重，粉碎，制成风干粪样用于微量元素含量的检测。粪样中铁、铜、锰、锌含量采用TAS-986F原子吸收分光光度计(北京普析通用仪器有限公司)测定。
1.5 数据处理和分析采用SPSS 16.0统计软件中单因素方差分析(one-way ANOVA)程序进行方差分析，差异显著者进行Duncan氏法多重比较。P < 0.05为差异显著，所有结果均以“平均值±标准差”表示。
2 结果 2.1 不同水平复合有机微量元素对崇仁麻鸡生长性能的影响由表 3可知，各组崇仁麻鸡的平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著差异(P>0.05)。
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表 3 不同水平复合有机微量元素对崇仁麻鸡生长性能的影响 Table 3 Effects of complex organic trace elements at different levels on growth performance of Chongren chickens |
由表 4可知，与对照组相比，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组崇仁麻鸡的血清尿素氮含量分别显著降低了55.45%、32.67%和43.56(P < 0.05)；Ⅲ和Ⅳ组的血清碱性磷酸酶活性分别显著增加了74.78%和107.88%(P < 0.05)，血清5′-核苷酸酶活性分别显著增加了91.76%和166.47%(P < 0.05)。
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表 4 不同水平复合有机微量元素对崇仁麻鸡血清生化指标的影响 Table 4 Effects of complex organic trace elements at different levels on serum biochemical indexes of Chongren chickens |
由表 5可知，各组崇仁麻鸡粪便中的铜和铁含量无显著差异(P < 0.05)。与对照组相比，Ⅱ组粪便中的锌含量显著降低29.21%(P < 0.05)；锰含量显著降低25.62%(P < 0.05)。
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表 5 不同水平复合有机微量元素对崇仁麻鸡粪便中微量元素含量的影响 Table 5 Effects of complex organic trace elements at different levels on trace element contents of feces of Chongren chickens |
研究表明，饲粮中添加低剂量有机微量元素替代无机微量元素可维持肉鸡正常的生长需要[2]。胥彩玉等[1]报道，肉仔鸡基础饲粮中用50%甘氨酸螯合铁、蛋氨酸螯合铜、蛋氨酸螯合锌和蛋氨酸螯合锰替代无机微量元素可提高肉仔鸡的生长性能。陆娟娟等[7]研究发现，用不同比例的蛋氨酸螯合物(铜、铁、锌、锰)替代相应无机微量元素可一定程度提高肉鸡的生长性能。本试验结果也表明，饲粮中添加低水平有机微量元素替代无机微量元素对崇仁麻鸡的生长性能无显著影响，与前人研究结果相一致。
3.2 不同水平复合有机微量元素对崇仁麻鸡血清生化指标的影响碱性磷酸酶是动物生长和发育的重要酶，提高血液碱性磷酸酶活性有利于加快动物的生长速度[8-9]。血清尿素氮是反映机体蛋白质和氨基酸代谢的重要指标，血清尿素氮含量低表明机体蛋白质合成率高[10]。5′-核苷酸酶是一种特殊的磷酸水解酶，可作用于磷酸酯键，能分解核酸生成核苷和无机磷酸，为机体提供各种单核苷酸，参与能量代谢及RNA的分解代谢[11-13]。本试验结果表明，饲粮中添加复合有机微量元素替代无机微量元素可显著降低血清尿素氮含量，其中添加75%和100%复合有机微量元素替代无机微量元素可显著提高血清碱性磷酸酶和5′-核苷酸酶活性。这说明饲粮中添加复合有机微量元素能够促进动物机体蛋白质的合成利用，提高动物的生长性能，与肖俊武等[14]研究结果相一致。
3.3 不同水平复合有机微量元素对崇仁麻鸡粪便中微量元素含量的影响当饲粮中微量元素不足时，会影响动物的健康水平和生长性能；微量元素过量时，粪便中过多的微量元素又会增加环境负担。研究表明，降低饲粮中微量元素的添加水平可有效减少粪便中微量元素含量[15-16]。研究也表明，氨基酸螯合物具有较高的生物学效价[17-19]，饲粮中用微量元素氨基酸螯合物替代无机微量元素可以降低微量元素的添加剂量，减少粪便中微量元素的含量[20]。本试验结果表明，饲粮中添加50%复合有机微量元素替代无机微量元素可显著降低粪便中锌和锰的含量。这说明通过添加高效价的微量元素氨基酸螯合物，降低饲粮中微量元素的添加量，可有效减少粪便中微量元素含量，与前人研究结果基本一致。但本研究中添加100%复合有机微量元素替代无机微量元素，粪便中铁、锌、锰的含量均有所增加，这说明在饲粮中添加较高水平的复合有机微量元素不仅造成浪费，还会增加粪便中微量元素的含量。可能是由于动物体内某些微量元素过量时，其吸收机制与缺乏时不同，而导致相应元素的利用率降低，具体原因有待进一步研究。
4 结论① 饲粮中添加50%、75%和100%复合有机微量元素替代无机微量元素对崇仁麻鸡的生长性能无显著影响。
② 饲粮中添加50%、75%和100%复合有机微量元素替代无机微量元素可显著降低崇仁麻鸡的血清尿素氮含量，添加75%和100%复合有机微量元素替代无机微量元素可显著增加血清碱性磷酸酶和5′-核苷酸酶活性。
③ 在本试验条件下，饲粮中添加50%复合有机微量元素替代无机微量元素，可有效降低崇仁麻鸡粪便中微量元素含量。
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