在畜禽生产中，抗生素作为促生长剂在全世界范围广泛使用，保证了畜禽业的快速发展，但随着人们对食品安全与健康的重视，抗生素的使用所带来的种种问题如细菌耐药性、抗生素残留等受到越来越多的关注。2006年欧盟禁止所有抗生素在动物生产中使用，这就更加促使我们去寻求安全有效的抗生素替代品，如草本精油、益生元、益生菌以及有机酸等^[1-2]。植物精油因其具有抑菌、抗氧化、调节免疫、促进生长、改善肠道内环境等方面的优点而成为研究热点^[3]。国外对植物精油生物活性的研究起步较早，已取得一定成果，并逐步深入到作用机理的细胞、分子层面^[4]，而国内相关研究较少，主要集中于植物精油对猪、肉鸡生产性能以及肠道功能的影响方面^[5-7]。本试验旨在研究在饲粮中添加不同水平的植物精油混合物(essential oil mixture，EOM)对海兰褐蛋鸡生产性能、蛋品质、卵泡发育及血清生殖激素指标的影响，以期为其在蛋鸡生产中的推广应用提供理论参考。

1 材料与方法 1.1 试验材料

植物精油混合物由上海美农生物科技股份有限公司提供，主要成分为肉桂醛(18%)、香芹酚(3%)、百里香酚(1%)，以二氧化硅为载体，由棕榈油包被而成。

1.2 试验设计

选取体重和产蛋率接近的25周龄健康海兰褐蛋鸡432只，随机分成4组，每组6个重复，每个重复18只鸡。预试期3周，正试期12周。对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮，试验组分别饲喂在基础饲粮中添加75、150和225 mg/kg植物精油混合物的试验饲粮。基础饲粮参考NRC(1994)^[8]家禽营养需要和我国《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)配制，其组成及营养水平见表 1。

1.3 饲养管理

试验在中国农业科学院家禽研究所试验基地进行。采用3层阶梯式笼养，每天定时饲喂2次(08：00、15：00)。自由采食、饮水，常规饲养。各组饲养管理条件保持完全相同，参考美国海兰公司推荐饲养方法饲养管理。

1.4 测定指标与方法 1.4.1 生产性能

试验期间每天以重复为单位准确记录产蛋数、蛋重和鸡只死亡数。每周进行结料并记录耗料量。计算产蛋率、采食量、产蛋量、蛋重和料蛋比。

1.4.2 蛋品质

在试验结束时，每个重复随机选取6只鸡蛋测定蛋品质，包括蛋形指数、蛋壳颜色、蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋白高度、蛋黄颜色、哈氏单位、蛋黄比例、蛋壳比例、蛋白比例。

哈氏单位=100×log(H-1.7W^0.37+7.57)。

式中：H为浓蛋白高度(mm)；W为蛋重(g)。

主要仪器设备包括：CM-2300d分光测色计(日本MINOLTA公司)、电子数显卡尺(广陆数字测控股份有限公司)、多功能蛋品质测定仪、蛋壳厚度测定仪、蛋壳强度测定仪(以色列ORKA公司)。

1.4.3 卵泡发育

在试验结束时，每个重复随机选取2只蛋鸡称重后进行翅静脉采血，记录后屠宰，肉眼观察记录等级卵泡、闭锁卵泡、小黄卵泡以及大白卵泡的数量，并测量输卵管长度。计算输卵管相对长度：

输卵管相对长度(cm/kg)=输卵管长度(cm)/蛋鸡活重(kg)。

1.4.4 血清生殖激素含量

试验结束时将采集的血液离心制作血清，测定血清中生殖激素含量，包括催乳素、孕酮、雄激素、促卵泡素、促黄体素以及雌二醇。血清生殖激素指标测定均采用放射免疫测定(RIA)法，试剂盒均购自北京北方生物技术研究所，具体方法参照说明书进行。

1.5 数据处理和统计分析

所有数据经Excel 2010软件初步处理后，用SPSS 20.0单因素方差分析，结果以“平均值±标准差”表示，采用单因素方差分析(one-way ANOVA)检验组间差异显著性，再进行LSD多重比较，以P < 0.05为差异显著判断标准。

2 结果 2.1 植物精油混合物对蛋鸡生产性能的影响

植物精油混合物对蛋鸡生产性能的影响见表 2。150 mg/kg植物精油混合物组蛋重显著高于对照组(P < 0.05)。各组间产蛋率、采食量、产蛋量和料蛋比无显著差异(P>0.05)。150 mg/kg植物精油混合物组的产蛋率、采食量最高，而225 mg/kg植物精油混合物组的料蛋比最低。

2.2 植物精油混合物对蛋鸡蛋品质的影响

植物精油混合物对蛋鸡蛋品质的影响见表 3。各组间蛋鸡蛋形指数、蛋壳颜色、蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋黄颜色、蛋黄比例、蛋白比例无显著差异(P>0.05)。75和150 mg/kg植物精油混合物组的哈氏单位显著高于225 mg/kg植物精油混合物组(P < 0.05)；150 mg/kg植物精油混合物组的蛋白高度最高，显著高于225 mg/kg植物精油混合物组(P < 0.05)；225 mg/kg植物精油混合物组的蛋壳比例显著高于其他各组(P < 0.05)。

2.3 植物精油混合物对蛋鸡卵泡发育的影响

植物精油混合物对蛋鸡卵泡发育的影响见表 4。各组间等级卵泡、闭锁卵泡、小黄卵泡以及大白卵泡的数量无显著差异(P>0.05)，且各组间输卵管相对长度也无显著差异(P>0.05)。

2.4 植物精油混合物对蛋鸡血清生殖激素指标的影响

植物精油混合物对蛋鸡血清生殖激素指标的影响见表 5。225 mg/kg植物精油混合物组的血清孕酮含量显著高于对照组(P < 0.05)。各组间催乳素、雄激素、促卵泡素、促黄体素以及雌二醇含量无显著差异(P>0.05)。

3 讨论 3.1 植物精油混合物对蛋鸡生产性能的影响

本试验结果显示，饲粮添加150 mg/kg植物精油混合物后蛋重显著增加，这与Bölükbasi等^[9]的研究结果一致，而Metin等^[3]和Bozkurt等^[10]研究结果均显示饲粮精油并没有显著增加蛋重。本试验中，饲粮添加植物精油混合物对蛋鸡产蛋率、采食量、产蛋量和料蛋比无显著影响。此外，而Bölükbasi等^[11]的研究结果显示，饲粮添加百里香精油后对蛋鸡的料蛋比无显著影响；Florou-Paneri等^[12]研究表明，饲粮添加牛至精油对采食量无显著影响。但Ma等^[13]和Metin等^[3]研究结果显示，饲粮添加精油能显著提高产蛋量和料蛋比。这可能与用于试验的精油成分复杂、含量不同有关，也有可能是本试验添加水平和饲养环境的原因未能发挥出精油对于蛋鸡生产性能的最佳作用^[14]。

3.2 植物精油混合物对蛋鸡蛋品质的影响

Bozkurt等^[10]研究了植物精油混合物对缓解蛋鸡高温应激的影响，结果显示饲粮中添加植物精油混合物能显著降低蛋鸡死亡率，显著增加蛋壳重量。这与本试验225 mg/kg植物精油混合物组蛋壳比例显著高于其他各组的结果一致。精油的添加可以提高蛋壳比例，这可能因为添加精油能够促进有益菌的增加，因而肠道对矿物质的吸收能力增强，尤其是镁离子(Mg²⁺)和钙离子(Ca²⁺)，因此蛋壳比例增加^[15]。饲粮添加植物精油混合物对蛋黄颜色和蛋黄比例的影响并不显著，这与Bozkurt等^[10]的结果一致，但有研究表明香芹酚能够通过介导肝脏的调节机制以促进卵黄前体物质从肝脏转移，进而导致蛋黄比例的增加^[16-17]。分析可能是由于用于研究的植物精油混合物的成分不一致，本试验所用植物精油混合物的主要成分是肉桂醛、百里香酚等，而其他研究^[16-17]所用精油中香芹酚的含量较大。蛋白高度和哈氏单位是确定蛋品质的重要指标，本试验结果显示，150 mg/kg植物精油混合物组的蛋白高度最高，显著高于225 mg/kg植物精油混合物组；75、150 mg/kg植物精油混合物组的哈氏单位显著高于225 mg/kg植物精油混合物组，说明饲粮添加植物精油混合物能改善蛋白品质，但添加水平不宜过高。这与Metin等^[3]的结果不一致，可能与用于研究的精油成分不一致有关。植物精油混合物能改善蛋白品质的原因可能是在蛋的形成过程中，植物精油混合物的作用影响输卵管腺体分泌的浓蛋白的含量以及成分，具体机制需要进行进一步的研究。

3.3 植物精油混合物对蛋鸡卵泡发育和血清生殖激素指标的影响

本试验结果显示，各组间等级卵泡、闭锁卵泡、小黄卵泡以及大白卵泡的数量无显著差异，而饲粮添加物精油混合物能够增加血清中孕酮的含量，而对其他血清生殖激素如催乳素、雄激素、促卵泡素、促黄体素以及雌二醇含量无显著影响，对输卵管相对长度也无显著影响。这说明植物精油混合物对卵泡发育以及输卵管长度的影响较小，而饲粮添加植物精油混合物后孕酮含量增加。有研究显示，孕酮可以抑制血钙含量的升高，促进钙转运至输卵管，能够增加蛋壳厚度，增强蛋壳强度^[18]，而这与本试验的结果相符合，本试验结果显示225 mg/kg植物精油混合物组的血清孕酮含量显著高于其他各组，且其蛋壳比例也显著高于其他各组，蛋壳强度和蛋壳厚度也达到了最高值。有关饲粮添加植物精油混合物对血清孕酮含量以及蛋壳间的分子作用机制仍需进行进一步的研究。

4 结论

饲粮添加150 mg/kg植物精油混合物可改善蛋鸡的蛋重及蛋白品质，且对卵泡发育的影响较小。