2. 生物饲料开发国家工程研究中心, 北京 100081
2. National Engineering Research Center for Biological Feed Development, Beijing 100081, China
研究京红蛋鸡产蛋高峰期饲粮中锌的适宜添加剂量对于提高京红蛋鸡产蛋性能和生态环保养殖具有重要意义。锌是禽类生长和生命活动所必需的微量元素之一[1],与300多种酶和蛋白质的结构或激活有关,如参与乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、铜锌超氧化歧化酶、碳酸酐酶和DNA聚合酶等的合成与激活[2];锌参与激素如胰岛素的合成及作用,并与核酸、脂类、蛋白质、维生素和其他矿物微量元素间有密切关系[3];锌作为碳酸酐酶影响碳酸盐的供应,影响蛋壳的形成[4]。因此锌对家禽的生长发育、生产性能、繁殖和免疫功能等均有显著影响[5]。研究报道饲粮中锌的含量小于10 mg/kg,导致产蛋率和孵化率降低[6];饲粮中28 mg/kg锌可以满足母鸡产蛋、孵化和雏鸡生长需要[7],NRC(1994)推荐饲粮中35.5 mg/kg锌能够满足褐壳蛋鸡产蛋需要。研究显示,添加48 mg/kg锌不影响产蛋率[8]。综合前人研究结果,以传统方法评定蛋鸡对锌的需要量为30~50 mg/kg[9]。近年来,随着微量元素营养研究的深入,采用更为敏感的胫骨锌等指标评估锌需要量高于传统方法评定的需要量,其值为72 mg/kg[10]。同时,为了避免亚临床症状的产生,生产中存在超量添加的问题。添加过量不仅引起蛋鸡代谢紊乱,而且会造成资源浪费,同时给环境带来污染。在产蛋高峰期饲粮中添加适量锌,对于维持产蛋鸡的产蛋性能和免疫机能至关重要。评价锌需要量的敏感指标之一是金属硫蛋白(metallothionein, MT),MT是富含半胱氨酸的金属结合蛋白,与体内必需金属元素的储运、代谢和调节有关,使机体达到最佳生理状态[11]。锌能诱导多种组织MT合成,MT对饲粮锌变化敏感[12]。本试验研究实用饲粮条件下饲粮锌水平对蛋鸡产蛋性能和组织中MT含量的影响,评价其在蛋鸡饲粮中的适宜添加量,为养殖生产合理添加锌提供科学指导。
1 材料与方法 1.1 试验材料一水硫酸锌(饲料级),含锌量35.5%。
1.2 试验设计选用540只20周龄后备蛋鸡随机分为6个组,每组6个重复,每个重复15只鸡(分5笼饲养,每笼3只鸡)。基础饲粮采用玉米-豆粕型饲粮,锌含量为25 mg/kg,配方参考京红蛋鸡公司推荐的饲养标准,其组成及营养水平见表 1。在基础饲粮中添加不同水平的硫酸锌组成6个试验饲粮(表 2),包括T1(基础饲粮)、T2[基础饲粮+25 mg/kg硫酸锌(以锌计,下同)]、T3(基础饲粮+50 mg/kg硫酸锌)、T4(基础饲粮+75 mg/kg硫酸锌)、T5(基础饲粮+100 mg/kg硫酸锌)和T6(基础饲粮+125 mg/kg硫酸锌)。
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表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) |
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表 2 饲粮处理 Table 2 Dietary treatments |
试验于2017年1月至2017年8月,在中国农业科学院饲料研究所通州试验基地进行,采用立体双面三层全层叠鸡笼笼养,16 h光照,乳头式饮水器供水,自由采食试验饲粮(粉料)。期间接种1次禽流感疫苗。鸡舍卫生管理按常规进行。试验预试期2周,饲喂基础饲粮,进行健康观察,对各组进行产蛋性能分析,挑选和调整试验鸡,统计分析组间差异不显著(P>0.05)后,开始正式试验。正式试验期饲喂试验饲粮,正试期24周。
1.4 测定指标及方法 1.4.1 产蛋性能每天12:00和21:00捡蛋2次,记录每天产蛋数和蛋重,汇总各重复产蛋数及称量蛋重,计算平均蛋重和产蛋率。每4周末称量剩余料重,计算平均日耗料量与耗蛋比。记录试验期间各组的死亡和淘汰情况,计算全期死淘率。
1.4.2 组织中MT含量于45周龄末每重复随机选取蛋鸡3只,取胸肌和心脏肌肉,测定胸肌和心肌中MT的含量。将组织用1: 10的磷酸缓冲液(PBS)研磨,待测。采用酶联免疫法测定MT含量,试剂盒购自南京建成生物工程研究所,检测仪器采用Multiskan MK3酶标仪。
1.5 试验数据统计分析采用SPSS 17.0软件的单因素方差分析(one-way ANOVA),因子显著性采用F检验。对主效应显著的指标进行LSD多重比较。采用曲线估计(curve estimate)模块对锌添加水平与锌水平有关的敏感指标进行线性和二次模型回归分析,显著性水平设为P < 0.05。
2 结果 2.1 不同添加水平硫酸锌对京红蛋鸡产蛋高峰期产蛋性能和死淘率的影响 2.1.1 不同添加水平硫酸锌对京红蛋鸡产蛋高峰期平均日耗料量的影响由表 3可知,与对照组相比,添加不同水平硫酸锌对不同饲喂阶段平均日耗料量均无显著影响(P>0.05)。
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表 3 不同添加水平硫酸锌对京红蛋鸡产蛋高峰期平均日耗料量的影响 Table 3 Effects of different supplemental levels of zinc sulfate on average daily feed consumption of Jinghong laying hens during peak egg production period |
由表 3可知,蛋鸡22~41周龄各个饲喂阶段平均日耗料量与硫酸锌添加水平间无显著的线性或者二次曲线回归关系(P>0.05);试验全期(22~45周龄)蛋鸡平均日耗料量与硫酸锌添加水平间有显著的线性或者二次曲线回归关系(P < 0.05),其回归方程为:Y=0.001X2-0.150X+121.031(R2=0.187),Y=-0.045X+119.275(R2=0.127)。由图 1可知,二次曲线回归预测当硫酸锌添加水平为75 mg/kg时,整个试验期蛋鸡平均日耗料量达到最小值。
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图 1 硫酸锌添加水平与22~45周龄京红蛋鸡平均日耗料量的回归关系 Figure 1 Regression between zinc sulfate supplemental level and average daily feed consumption of Jinghong laying hens from 22 to 45 weeks of age |
由表 4可知,添加不同水平的硫酸锌对各个饲喂阶段的京红蛋鸡产蛋高峰期产蛋率无显著影响(P>0.05)。各个饲喂阶段京红蛋鸡产蛋高峰期产蛋率和硫酸锌的添加水平间无显著线性和二次回归关系(P>0.05)。
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表 4 不同添加水平硫酸锌对京红蛋鸡产蛋高峰期产蛋率的影响 Table 4 Effects of different supplemental levels of zinc sulfate on laying rate of Jinghong laying hens during peak egg production period |
由表 5可知,添加不同水平的硫酸锌对各个饲喂阶段京红蛋鸡产蛋高峰期平均蛋重无显著影响(P>0.05)。22~25周龄和22~29周龄蛋鸡平均蛋重与硫酸锌添加水平间均有显著二次曲线回归关系(P < 0.05),其回归方程分别为:Y=-0.000 265X2+0.032X+60.012(R2=0.173)和Y=-0.000 246X2+0.040X+59.805(R2=0.181)。由图 2和图 3可知,二次曲线回归预测当硫酸锌添加水平分别为60.38和81.30 mg/kg时,22~25周龄和22~29周龄蛋鸡平均蛋重分别达到最大值。其他各个饲喂阶段的蛋鸡平均蛋重与硫酸锌添加水平间无显著的线性或者二次曲线回归关系(P>0.05)。
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表 5 不同添加水平硫酸锌对京红蛋鸡产蛋高峰期平均蛋重的影响 Table 5 Effects of different supplemental levels of zinc sulfate on average egg weight of Jinghong laying hens during peak egg production period |
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图 2 硫酸锌添加水平与22~25周龄京红蛋鸡平均蛋重的回归关系 Figure 2 Regression between zinc sulfate supplemental level and average egg weight of Jinghong laying hens from 22 to 25 weeks of age |
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图 3 硫酸锌添加水平与22~29周龄京红蛋鸡平均蛋重的回归关系 Figure 3 Regression between zinc sulfate supplemental level and average egg weight of Jinghong laying hens from 22 to 29 weeks of age |
由表 6可知,添加不同水平硫酸锌显著提高了京红蛋鸡产蛋高峰期22~29周龄料蛋比(P < 0.05),试验组间料蛋比无显著差异(P>0.05);但是添加不同水平的硫酸锌对其他几个饲喂阶段的料蛋比无显著影响(P>0.05)。22~29周龄蛋鸡料蛋比与硫酸锌添加剂水平间有显著的二次曲线回归关系(P < 0.05),其回归方程为:Y=0.000 0237X2-0.005X+2.287(R2=0.237)。由图 4可知,二次曲线回归预测当硫酸锌添加水平为105 mg/kg时,22~29周龄蛋鸡料蛋比达到最小值。
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表 6 不同添加水平硫酸锌对京红蛋鸡产蛋高峰期料蛋比的影响 Table 6 Effects of different supplemental levels of zinc sulfate on the ratio of feed to egg of Jinghong laying hens during peak egg production period |
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图 4 硫酸锌添加水平与22~29周龄京红蛋鸡料蛋比的回归关系 Figure 4 Regression between zinc sulfate supplemental level and the ratio of feed to egg of Jinghong laying hens from 22 to 29 weeks of age |
由表 7可知,添加不同水平的硫酸锌对京红蛋鸡产蛋高峰期全期死淘率无显著影响(P>0.05)。京红蛋鸡产蛋高峰期全期死淘率和硫酸锌的添加水平间无显著线性和二次回归关系(P>0.05)。
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表 7 不同添加水平硫酸锌对京红蛋鸡产蛋高峰期全期死淘率的影响 Table 7 Effects of different supplemental levels of zinc sulfate on mortality of Jinghong laying hens during the whole peak egg production period |
由表 8可知,添加不同水平硫酸锌对京红蛋鸡45周龄末心脏中MT含量无显著影响(P>0.05)。添加125 mg/kg硫酸锌组胸肌中MT含量显著高于对照组和添加25 mg/kg硫酸锌组(P < 0.05);但是其他添加水平组间胸肌中MT含量无显著差异(P>0.05)。
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表 8 不同添加水平硫酸锌对45周龄京红蛋鸡不同器官中MT含量的影响 Table 8 Effects of different supplemental levels of zinc sulfate on MT content in different tissues of Jinghong laying hens at 45 weeks of age |
硫酸锌的添加水平和45周龄京红蛋鸡胸肌中MT含量有极显著的线性和二次回归关系(P < 0.01),其回归方程分别为:Y=0.000 008X2+0.001X+0.629(R2=0.300),Y=-0.002X+0.612(R2=0.293)。由图 5可知,线性回归预测当随着饲粮中硫酸锌水平的提高(25~125 mg/kg),胸肌中MT含量逐渐增加。
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图 5 硫酸锌添加水平与京红蛋鸡胸肌中MT含量的回归关系 Figure 5 Regression between zinc sulfate supplemental level and MT content in breast muscle of Jinghong laying hens |
基于产蛋性能和孵化率指标,NRC对褐壳蛋鸡饲粮中锌的推荐量为35.5 mg/kg。本试验结果显示,在基础饲粮中添加25~125 mg/kg的硫酸锌显著降低了22~29周龄京红蛋鸡的料蛋比,但对其他几个饲喂阶段的平均日耗料量、料蛋比、平均蛋重和产蛋率均无显著影响。Tabatabaie等[13]给蛋鸡饲喂25和50 mg/kg硫酸锌未显著影响采食量、蛋重、产蛋性能和饲料转化率。张亚男等[14]在52周龄海兰灰蛋鸡饲粮中添加35、70和115 mg/kg的锌,未显著影响产蛋率、平均日采食量、平均蛋重和料蛋比等产蛋性能指标。Stahl等[7]在单冠白来航鸡基础饲粮中(含锌28或34 mg/kg)添加10、20和40 mg/kg碳酸锌并未显著改善产蛋量、采食量和饲料转化率,并且认为饲粮中28 mg/kg锌足以满足蛋鸡产蛋、繁殖、孵化和后代的生长需要。成廷水等[15]研究在海兰褐蛋鸡基础饲粮(含锌约31 mg/kg)中添加60 mg/kg硫酸锌未显著影响产蛋率、平均蛋重和采食量等产蛋性能。本试验结果与前人研究结果一致,基础饲粮中25 mg/kg的锌能满足京红蛋鸡22~45周龄产蛋高峰期产蛋的需要。但是,张军霞等[16-17]在基础饲粮中添加60和180 mg/kg锌对21~36周龄蛋鸡产蛋量、耗料量和料蛋比无显著影响,蛋重显著降低,破蛋率略有下降。曲湘勇等[18-19]在东乡黑羽绿壳蛋鸡基础饲粮中添加120 mg/kg的羟基蛋氨酸锌和80、120和160 mg/kg碱式氯化锌,显著提高了产蛋率,显著降低了料蛋比。在绿壳蛋鸡上添加锌对产蛋性能有改善效果可能跟锌源或者绿壳蛋鸡的锌需要量高有关,具体机理有待进一步研究。
回归分析结果显示,各个饲喂阶段的死淘率和产蛋率与硫酸锌的添加水平间均无显著的线性和二次曲线回归关系。从各个饲喂阶段的产蛋性能来看,22~25周龄和22~29周龄平均蛋重、22~29周龄料蛋比分别与硫酸锌的添加水平之间有显著二次回归关系,但是R2值不高。从整个试验期来看,平均日耗料量和硫酸锌添加水平之间有显著的二次回归关系,二次曲线回归预测当硫酸锌添加水平为75 mg/kg时,整个试验期平均日耗料量最低。
3.2 不同添加水平硫酸锌对京红蛋鸡产蛋高峰期末组织中MT含量的影响MT是富含半胱氨酸的金属结合蛋白,可与许多金属元素配位结合[20],锌可以作为其配基参与细胞内微量元素的代谢及重金属解毒,具有抗辐射、消除自由基、抗应激等作用[21]。MT对于维持细胞锌的稳态平衡有重要作用,直接参与锌的储存、运输和生物利用[22]。报道显示,添加适量水平的锌能显著提高组织中MT的含量[23]。添加锌显著增加肉仔鸡胰腺[24]、肾脏[25-26]、小肠[27]和肝脏[28-29]MT含量或MT基因的表达。但是关于添加锌对蛋鸡组织中MT含量和MT基因的表达影响研究报道较少。张军霞等[16]给28周龄商品代伊莎褐母鸡添加60 mg/kg硫酸锌,肝脏中MT基因表达量显著高于对照组和180 mg/kg硫酸锌组。钱凌霄等[30]报道显示,与添加40 mg/kg纳米氧化锌相比,添加80 mg/kg纳米氧化锌显著提高了肉鸡骨骼肌和心肌中MT含量,但添加120 mg/kg纳米氧化锌并未显著改善肉鸡骨骼肌和心肌中MT含量。本试验结果显示,添加硫酸锌显著提高了骨骼肌(胸肌)中MT含量,并未显著改善心肌中MT含量。回归预测分析显示,随着硫酸锌的添加水平的提高,胸肌MT的含量呈增加趋势。
4 结论① 添加硫酸锌除显著降低22~29周龄京红蛋鸡的料蛋比外,对整个产蛋高峰期的产蛋性能和死淘率无显著影响。
② 添加硫酸锌显著提高了胸肌中MT含量,并随添加水平升高而增加,但对心肌中MT含量无显著影响。
③ 二次曲线回归预测,京红蛋鸡饲粮中硫酸锌添加水平为75 mg/kg时,整个产蛋高峰期平均日耗料量最低。
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