动物营养学报    2018, Vol. 30 Issue (11): 4514-4525    PDF    
引用本文
何昊伦, 董晓慧, 谭北平, 杨奇慧, 迟淑艳, 刘泓宇, 章双, 杨原志, 张海涛. 多鳞对饲料中n-3高不饱和脂肪酸需要量的研究[J]. 动物营养学报, 2018, 30(11): 4514-4525.  
HE Haolun, DONG Xiaohui, TAN Beiping, YANG Qihui, CHI Shuyan, LIU Hongyu, ZHANG Shuang, YANG Yuanzhi, ZHANG Haitao. Requirement of Dietary n-3 Highly Unsaturated Fatty Acids of Sillago sihama[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2018, 30(11): 4514-4525.  
多鳞对饲料中n-3高不饱和脂肪酸需要量的研究
何昊伦1,2, 董晓慧1,2, 谭北平1,2, 杨奇慧1,2, 迟淑艳1,2, 刘泓宇1,2, 章双1,2, 杨原志1,2, 张海涛2     
1. 广东海洋大学水产学院, 水产动物营养与饲料实验室, 湛江 524088;
2. 农业部华南水产与畜禽饲料重点实验室, 湛江 524000
收稿日期: 2018-04-23
基金项目: 渔港建设和渔业产业发展专项（A201608C06）；湛江市财政资金科技专项竞争性分配项目（2016A3022）；广东省省级科技计划项目（2015A020209170）；现代农业产业技术体系专项资金资助（CARS-47）
作者简介: 何昊伦(1993-), 男, 广东深圳人, 硕士研究生, 研究方向为水产动物营养与饲料。E-mail:649410292@qq.com
通信作者: 董晓慧, 教授, 博士生导师, E-mail:dongxiaohui2003@163.com.
摘要: 本试验旨在研究多鳞对饲料中n-3高不饱和脂肪酸（HUFA）的需要量。挑选均重为（6.0±0.6）g的多鳞幼鱼540尾，随机分为6组，每组3个重复，每个重复30尾鱼。各组分别投喂n-3HUFA水平为0.53%、0.80%、1.22%、1.62%、2.12%和2.56%的等氮等脂饲料8周。结果表明：1）2.12%组的增重率和特定生长率最高，显著高于0.53%组（P < 0.05）；2.12%组的饲料系数最低，显著低于0.53%组（P < 0.05）；2.12%组的肝体比最低，显著低于0.53%组和0.80%组（P < 0.05）；2.12%组的肥满度最高，显著高于除1.62%组外的其他各组（P < 0.05）。2）各组之间的全鱼水分、粗蛋白质、粗灰分含量无显著差异（P > 0.05）；1.62%组的全鱼粗脂肪含量最高，显著高于除1.62%组外的其他各组（P < 0.05）。3）2.56%组的血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量显著高于除2.12%组外的其他各试验组（P < 0.05），0.80%组的血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量显著高于其他各组（P < 0.05），1.22%组的血清谷丙转氨酶（ALT）活性显著低于其他各组（P < 0.05），0.80%组的血清谷草转氨酶（AST）活性显著低于其他各组（P < 0.05）；0.53%组的血清总胆固醇（T-CHOL）、甘油三酯（TG）含量显著低于其他各组（P < 0.05），0.80%组的血清CHOL、TG含量显著高于其他各组（P < 0.05）。4）各组之间的血清超氧化物歧化酶（SOD）和酸性磷酸酶（ACP）活性无显著差异（P > 0.05），2.12%组和2.56%组的血清碱性磷酸酶（AKP）活性显著低于除1.62%组外的其他各组（P < 0.05），1.62%组的血清过氧化氢酶（CAT）活性显著低于除1.22%组和2.12%组外的其他各组（P < 0.05）。5）随着饲料n-3HUFA水平的提高，肝脏C18:3n-3、C20:5n-3、C22:6n-3含量显著升高（P < 0.05），肝脏C18:2n-6含量显著降低（P < 0.05）。6）随着饲料n-3HUFA水平的提高，肌肉C18:2n-6、C20:4n-6含量呈降低趋势，2.12%组和2.56组显著低于其他各组（P < 0.05）；肌肉C20:5n-3、C22:6n-3含量呈升高趋势，2.56%组显著高于其他各组（P < 0.05）。由此可见，以增重率为依据，折线模型拟合得出多鳞幼鱼对饲料中n-3HUFA的需要量为2.21%。
关键词: 多鳞     n-3高不饱和脂肪酸     生长性能     血清生化指标     组织脂肪酸含量    
Requirement of Dietary n-3 Highly Unsaturated Fatty Acids of Sillago sihama
HE Haolun1,2, DONG Xiaohui1,2, TAN Beiping1,2, YANG Qihui1,2, CHI Shuyan1,2, LIU Hongyu1,2, ZHANG Shuang1,2, YANG Yuanzhi1,2, ZHANG Haitao2     
1. Laboratory of Aquatic Animal Nutrition and Feed, College of Fisheries, Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China;
2. Key Laboratory of Aquatic, Livestock and Poultry Feed Science and Technology in South China, Ministry of Agriculture, Zhanjiang 524000, China
Corresponding author: DONG Xiaohui, professor, E-mail:dongxiaohui2003@163.com.
Abstract: This experiment was conducted to study the requirement of dietary n-3 highly unsaturated fatty acids (n-3HUFA) of Sillago sihama. A total of 540 juvenile Sillago sihama an with average body weight of (6.0±0.6) g were randomly divided into 6 groups with 3 replicates per group and 30 fish per replicate. Fish in the six groups were fed the isonitrogenic and isolipidic diets for 8 weeks, and the dietary n-3HUFA levels were 0.53%, 0.80%, 1.22%, 1.62%, 2.12% and 2.56%, respectively. The results showed as follows:1) the weight gain rate and specific growth rate of 2.12% group were the highest and significantly higher than those of 0.53% group (P < 0.05); the feed conversion rate of 2.12% group was the lowest and significantly lower than that of 0.53% group (P < 0.05); the hepatosomatic index of 2.12% group was the lowest and significantly lower than that of 0.53% and 0.80% groups (P < 0.05); the condition factor of 2.12% group was the highest and significantly higher than that of other groups except 1.62% group (P < 0.05). 2) There were no significant differences on the contents of moisture, crude protein and crude ash of whole body among all groups (P > 0.05); the whole body ether extract content of 1.62% group was the highest and significantly higher than that of other groups except 1.62% group (P < 0.05). 3) The serum high density lipoprotein cholesterol (HDL-C) content of 2.56% group was significantly higher than that of other groups except 2.12% group (P < 0.05), the serum low density lipoprotein cholesterol (LDL-C) content of 0.80% group was significantly higher than that of other groups (P < 0.05), the serum alanine aminotransferase (ALT) activity of 1.22% group was significantly lower than that of other groups (P < 0.05), the serum aspartate aminotransferase (AST) activity of 0.80% group was significantly lower than that of other groups (P < 0.05); the contents of total cholesterol (T-CHOL) and triglyceride (TG) in serum of 0.53% group were significantly lower than those of other groups (P < 0.05), and the contents of T-CHOL and TG in serum of 0.80% group were significantly higher than those of other groups (P < 0.05). 4) There were no significant differences on the activities of superoxide dismutase (SOD) and acid phosphatase (ACP) in serum among all groups (P > 0.05), the serum alkaline phosphatase (AKP) activity of 2.12% and 2.56% groups was significantly lower than that of other groups except 1.62% group (P < 0.05), the serum catalase (CAT) activity of 1.62% group was significantly lower than that of other groups except 1.22% and 1.12% groups (P < 0.05). 5) With dietary n-3HUFA level increased, the contents of C18:3n-3, C20:5n-3 and C22:6n-3 in liver were significantly increased (P < 0.05), and the liver C18:2n-6 content was significantly decreased (P < 0.05). 6) With dietary n-3HUFA level increased, the contents of C18:2n-6 and C20:4n-6 in muscle were showed a decreasing trend, and those of 2.12% and 2.56% groups were significantly lower than those of other groups (P < 0.05); the contents of C20:5n-3 and C22:6n-3 in muscle were showed a increasing trend, and those of 2.56% group were significantly higher than those of other groups (P < 0.05). In conclusion, based on the weight gain rate, the requirement of n-3HUFA level in diets for juvenile Sillago sihama determined by broken-line model is 2.21%.
Key words: Sillago sihama     n-3 highly unsaturated fatty acid     growth performance     serum biological parameters     tissue fatty acid contents    

多鳞(Sillago sihama)属于鲈形目(Perciformes)、鲈亚目(Percoidei)、科(Sillaginidae)、属(Sillago)，俗称沙钻、船丁鱼、麦穗，广东又名沙锥鱼。多鳞主要分布于印度洋和西太平洋的热带海域，在我国渤海、南海等沿海均有分布，粤西地区产量较高。多鳞为小型肉食性鱼类，味道鲜美，是具有较高经济价值和营养价值的食用鱼类，深受消费者的喜爱，曾在我国近海捕捞作业中占有相当重要的位置。但由于近年来的过度捕捞，野生个体数目减少，群体低龄化，自然资源已面临枯竭[1]。

高不饱和脂肪酸(highly unsaturated fatty acids，HUFAs)是指碳原子数目≥20且双键数目≥3的一类不饱和脂肪酸。根据甲基端第1个双键所连碳原子的位置，可将高不饱和脂肪酸分为n-3、n-6等系列，其中n-3HUFA主要包括二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)。n-3HUFA的生理功能主要包括：1)抑制促炎症因子产生，抑制炎症反应，减轻疾病症状；2)视网膜的重要结构成分，对视力发育有促进作用；3)作为细胞膜的重要组成成分，可影响甚至决定细胞膜的功能，同时可影响细胞膜的流动性，对细胞之间的信号传递起到重大的作用等[2-4]。在海水鱼中，EPA、DHA是类花生酸等高活性旁分泌激素类的前体[5]，参与生理功能的调控。已有的报道证明，多数淡水鱼具有合成EPA和DHA的能力，饲料中只需补充其合成原料亚麻酸即可满足其对n-3HUFA的需要[6]。对于缺乏脂肪酸延长和去饱和能力的海水鱼而言，n-3HUFA则是其必需脂肪酸[6]。饲料中添加n-3HUFA能提高海水鱼的生长性能，有利于脂类代谢平衡，加强机体免疫功能[7-10]。

多鳞自2012年繁育技术得以突破后[11]，其养殖面积在粤西地区快速增加，但作为一种新兴的养殖鱼类，该鱼的营养与饲料学研究尚未见报道，严重制约了多鳞的规模化养殖。因此，本试验旨在研究饲料n-3HUFA水平对多鳞生长性能、形态学指标、体成分、血清生化指标、相关酶活性及组织脂肪酸含量的影响，通过对相关指标的评价，确定多鳞幼鱼对饲料中n-3HUFA的适宜需要量，为多鳞高效配合饲料的研发提供基础数据。

1 材料与方法 1.1 试验设计与饲料配制

以鱼粉、小麦谷朊粉等为蛋白质源，鱼油和玉米油为脂肪源，调整饲料中玉米油和鱼油的含量，配制n-3HUFA水平分别为0.53%、0.80%、1.22%、1.62%、2.12%和2.56%的6组等氮等能饲料，试验饲料组成及营养水平见表 1，试验饲料脂肪酸组成见表 2。饲料原料粉碎后过60目筛，根据饲料配方称取各原料。饲料制作过程中，微量成分采用逐级扩大法混合均匀，再添加不同含量的鱼油和玉米油并搅拌均匀，然后添加30%~40%的水制成团状，用双螺杆挤条机制成粒径为1.5 mm的饲料，在阴凉干燥环境中风干后封口带密封，-20 ℃保存。

表 1 试验饲料组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis)
表 2 试验饲料脂肪酸组成(占总脂肪酸的百分比) Table 2 Fatty acid composition in experiment diets (percentage of total fatty acids)
1.2 试验动物与饲养管理

养殖试验在湛江市东海岛广东海洋大学海洋生物研究基地进行。试验所用的多鳞鱼苗购自湛江市龙海天育苗实验基地，为当年越冬苗。

试验前多鳞于4.5 m×4.9 m×1.8 m的室外水泥池中暂养至试验规格。正式试验开始时，多鳞禁食24 h后分组。根据试验设计，挑选体格健壮、大小均一、均重为(6.0±0.6) g的540尾鱼，随机分为6组，每组3个重复，每重复1个0.5 m3玻璃钢桶，每桶放30尾鱼。每天投喂2次(08:00和17:00)，以肉眼观察达到饱食为止。有死亡时，记数并称重，然后解剖分析原因。定期监测水质。养殖试验于6月开始，养殖系统为聚乙烯玻璃钢桶，循环海水养殖，试验期间，水温23~26 ℃，不间断充氧，溶氧浓度5~6 mg/L，水体盐度26~28，养殖期8周。

1.3 样本采集及分析 1.3.1 样品采集

养殖试验结束禁食24 h后取样。每桶鱼用丁香酚麻醉后称重，计数，计算生长指标。每桶随机选5尾鱼量取体长、称体重、肝脏重，计算形态学指标。再取5尾鱼，吸干体表水分，编号于-20 ℃冰箱中保存，备测常规成分。另取10尾鱼心脏采血，血液置于1.5 mL离心管中于-20 ℃冰箱过夜后4 000 r/min离心10 min，取上清液置于-80 ℃备用，待测血清生化指标。剖取肝脏及肌肉，液氮冷存，然后转移至-80 ℃冰箱，备测肝脏酶活性及肝脏和肌肉脂肪酸含量。

1.3.2 常规成分分析

全鱼和饲料常规成分采用国际标准方法[12]进行分析。样品在105 ℃下烘干测定水分含量，凯氏定氮仪(KjeltecTM 8400，瑞典)测定样品中粗蛋白质含量，索氏抽提法(抽提剂为石油醚)测定样品中粗脂肪含量，550 ℃马弗炉灼烧法测定样品中粗灰分含量。

1.3.3 脂肪酸含量分析测定

根据GB/T 21514—2008进行脂肪酸含量的测定，原理为用氢氧化钠-甲醇溶液皂化，皂化物与三氟化硼-甲醇溶液反应生成脂肪酸甲酯。用毛细管气相色谱分离，色谱峰用已知组成的标准品进行鉴定，以内标法定量。

1.3.4 血清生化指标测定

使用全自动生化分析仪(日立7600-110型)测定血清中甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(T-CHOL)含量及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性，所需试剂盒均购自南京威特曼生物科技有限公司。

1.3.5 组织酶活性测定

肝脏中的过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)活性均使用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒测定，测定步骤按试剂盒说明书进行。

1.4 生长指标和形态学指标计算公式
1.5 数据统计

试验数据用平均值±标准差表示，采用SPSS 20.0对试验数据进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，若有显著性差异则进行Duncan氏法多重比较，P < 0.05表示差异显著。

2 结果 2.1 饲料n-3HUFA水平对多鳞生长性能和形态学指标的影响

由表 3可见，WGR随着饲料n-3HUFA水平增加呈现先上升后下降趋势，2.12%组最高，显著高于0.53%组和0.80%组(P < 0.05)，与其他各组差异不显著(P > 0.05)。SGR随着饲料n-3HUFA水平增加呈现先上升后下降的趋势，2.12%组最高，显著高于0.53%组和2.56%组(P < 0.05)，与其他各组差异不显著(P > 0.05)。FCR随着n-3HUFA水平的增加呈现先下降后上升的趋势，2.12%组最低，显著低于0.53%组(P < 0.05)，与其他各组差异不显著(P > 0.05)。各组之间SR没有显著差异(P > 0.05)。随着饲料n-3HUFA水平的增加，HSI呈现出先下降后稳定的趋势，在2.12%组达到最低值，显著低于0.53%组和0.80%组(P < 0.05)，与其他各组无显著差异(P > 0.05)；而CF则呈现出先上升后下降的趋势，在2.12%组达到最大值，显著高于除1.62%组外的其他各组(P < 0.05)。

表 3 饲料n-3HUFA水平对多鳞生长性能和形态学指标的影响 Table 3 Effects of dietary n-3HUFA level on growth performance and morphological indicators of Sillago sihama

由图 1可见，以WGR为依据，折线模型得出多鳞对饲料中n-3HUFA的适宜需要量为2.21%。

图 1 饲料n-3HUFA水平与多鳞WGR的折线模型 Figure 1 Broken-line model of dietary n-3HUFA level and WGR of Sillago sihama
2.2 饲料n-3HUFA水平对多鳞体成分的影响

由表 4可见，各组之间全鱼水分、粗蛋白质、粗灰分含量无显著差异(P > 0.05)。随着饲料n-3HUFA水平的增加，全鱼粗脂肪含量呈现先上升后下降的趋势，1.62%组和2.12%组之间全鱼粗脂肪含量无显著差异(P > 0.05)，但显著高于其他各组(P < 0.05)，其他各组之间无显著差异(P > 0.05)。

表 4 饲料n-3HUFA水平对多鳞体成分的影响 Table 4 Effects of dietary n-3HUFA level on body composition of Sillago sihama
2.3 饲料n-3HUFA水平对多鳞血清生化指标的影响

由表 5可见，饲料HUFA水平在0.53%~1.62%之间时，血清HDL-C含量显著上升(P < 0.05)，2.56%组血清HDL-C含量显著高于除2.12%组外的其他各组(P < 0.05)。血清LDL-C含量则是先上升后逐渐下降，在0.80%组达到最大值并显著高于其他各组(P < 0.05)。血清ALT、AST活性呈现出先下降后上升再下降的趋势，血清ALT活性在1.22%组达到最低值并显著低于其他各组(P < 0.05)，血清AST活性则在0.80%组达到最低值并显著低于其他各组(P < 0.05)。随着饲料n-3HUFA水平的增加，血清T-CHOL含量呈先上升后下降并稳定的趋势，血清TG含量呈先上升后下降的趋势；0.53%组的血清T-CHOL、TG含量显著低于其他各组(P < 0.05)，0.80%组的血清T-CHOL、TG含量显著高于其他各组(P < 0.05)。

表 5 饲料n-3HUFA水平对多鳞血清生化指标的影响 Table 5 Effects of dietary n-3HUFA level on serum biological parameters of Sillago sihama
2.4 饲料n-3HUFA水平对多鳞肝脏酶活性的影响

由表 6可见，各组之间的血清SOD和ACP活性没有显著差异(P > 0.05)。2.12%组和2.56%组之间的血清AKP活性无显著差异(P > 0.05)，但显著低于除1.62%组外的其他各组(P < 0.05)。1.62%组的血清CAT活性最低，与1.22%组和2.12%组无显著差异(P > 0.05)，但显著低于其他各组(P < 0.05)。

表 6 饲料n-3HUFA水平对多鳞肝脏酶活性的影响 Table 6 Effects of dietary n-3HUFA level on liver enzyme activities of Sillago sihama
2.5 饲料n-3HUFA水平对多鳞肝脏、肌肉脂肪酸组成的影响

由表 7可见，多鳞肝脏中的主要脂肪酸为C16：0和C18：1n-9，含量均超过了20%。随着饲料n-3HUFA水平的提高，肝脏C18：3n-3、C20：5n-3、C22：6n-3含量显著升高(P < 0.05)，肝脏C18：2n-6含量显著降低(P < 0.05)，肝脏C18：1n-9含量呈降低趋势；肝脏C18：0含量呈先升高后稳定的趋势，在2.12%组达到最高值。

表 7 饲料n-3HUFA水平对多鳞肝脏脂肪酸组成的影响(占总脂肪酸的百分比) Table 7 Effects of dietary n-3HUFA level on liver fatty acid composition of Sillago sihama (percentage of total fatty acids)

由表 8可见，随着饲料n-3HUFA水平的提高，肌肉C18：2n-6、C20：4n-6含量呈降低趋势，2.12%组和2.56组显著低于其他各组(P < 0.05)；肌肉C20：5n-3、C22：6n-3含量呈升高趋势，2.56%组显著高于其他各组(P < 0.05)；肌肉C16：0含量呈先升高后稳定趋势，在1.22%组达到最高。肌肉C16：1n-9含量在1.62%组达到最高。

表 8 饲料n-3HUFA水平对多鳞肌肉脂肪酸组成的影响(%总脂肪酸) Table 8 Effects of dietary n-3HUFA level on muscle fatty acid composition of Sillago sihama
3 讨论 3.1 饲料n-3HUFA水平对多鳞生长性能和形态学指标的影响

已有研究表明，适宜水平的n-3HUFA可促进海水鱼生长，提高饲料利用率[13]。各动物之间适宜n-3HUFA水平差异较大。饲料n-3HUFA水平为0.85%时，黑鲷(Sparus macrocephalus)幼鱼有最高的WGR[14]。常杰等[15]报道，饲料n-3HUFA水平为0.75%时能显著提高细鳞鲑(Brachymystax lenok)的WGR、SGR。Kim等[16]建议牙鲆(Paralichthys olivaceus)饲料n-3HUFA水平应在0.8%~1.0%。饲料n-3HUFA水平为0.98%时可显著提高大黄鱼(Larmichthys crocea)的生长性能[17]。饲料n-3HUFA水平为1%时可使金头鲷(Sparus aurata)幼鱼有最佳的生长性能和饲料效率[18]。饲料n-3HUFA水平分别为2.53%和3.93%时，斜带石斑鱼(Epinephluscoioides)幼鱼和中鱼有最高SGR[19]。本试验结果表明，饲料n-3HUFA水平显著影响多鳞的WGR、SGR和FCR，且随着饲料n-3HUFA水平的增加呈现出先上升后稳定的趋势，折线模型拟合得出，饲料n-3HUFA水平为2.21%时，多鳞有最大的WGR。

黄斑蓝子鱼(Siganus canaliculatus)[20]、俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedti)幼鱼[21]的研究中发现，不同的饲料n-3HUFA水平对黄斑篮子鱼WGR、SGR和FCR均无显著影响，且随着饲料n-3HUFA水平的增加，HSI呈现出先上升后下降的趋势。试验结果的不同可能与试验鱼的食性差异有关，植性食物亚油酸含量较亚麻酸丰富，从而使得植食性鱼类形成对饲料中亚油酸的需求，黄斑蓝子鱼作为植食性鱼类，n-3HUFA的变化对其生长性能等的影响较小或无影响。试验鱼种也影响试验结果，部分鱼类如大西洋鲑(Salmo salar)[22]可以将18：2n-6合成EPA、DHA，且合成能力受环境等因素影响。在本次试验中，随着饲料n-3HUFA水平的增加，多鳞HSI呈现出先下降后上升的趋势，这与在金头鲷[18]、斜带石斑鱼幼鱼[23]中的研究结果相同，然而在黄斑篮子鱼[20]的研究中得出相反的趋势。在养殖过程中，饲料中的营养素的缺失或过量都可造成养殖对象的形态变化[18]。斜带石斑鱼的研究结果表明，n-3HUFA可阻止肝脏星状细胞产生，降低HSI[19]。本次试验结果与之类似，这表明饲料中的n-3HUFA可促进脂类分解，减少机体尤其是肝脏中的脂肪沉积[24-25]。CF是衡量鱼类形体的一个重要指标，多鳞的CF随着饲料n-3HUFA水平的增加而呈现出先上升后下降的趋势，表明饲料中一定的n-3HUFA水平有利于多鳞的形态发育。试验结果与在斜带石斑鱼幼鱼[19]研究结果相同。而在斜带石斑鱼[23]、军曹鱼(Rachycentron canadum L.)[26]、草鱼(Ctenopharyngodon idella)稚鱼[27]的研究中，饲料n-3HUFA水平对试验对象CF没有显著影响。

3.2 饲料n-3HUFA水平对多鳞体成分的影响

本试验中，饲料n-3HUFA水平对多鳞水分、粗蛋白质和粗灰分含量没有显著影响，这与在军曹鱼[28]、细鳞鲑[15]的研究结果相似。随着饲料n-3HUFA水平的增加，多鳞体脂肪呈现出先上升后下降的趋势，这与在军曹鱼[26]、牙鲆[29]、草鱼稚鱼[27]等研究中的结果相似，原因可能是饲料中n-3HUFA在满足自身代谢所需后，多出的n-3HUFA在体内沉积。当满足体脂沉积后，可诱导线粒体中的解偶联蛋白(UCP)，加强线粒体中的β-氧化，降低体脂的沉积量[2, 30]。在斜带石斑鱼[19]、黑鲷[31]、凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)中虾[32]中则得到了相反的结果，即饲料n-3HUFA水平的增加使得体脂含量呈现先下降后上升的趋势。在大菱鲆[33]、黄斑蓝子鱼[20]、真鲷(Pagrus major)[34]的研究中，饲料n-3HUFA水平对鱼体的粗脂肪含量没有显著影响。这说明饲料n-3HUFA水平对鱼体成分的影响因鱼种而不同。

3.3 饲料n-3HUFA水平对多鳞血清生化指标的影响

血清生化指标可作为衡量机体健康状况的指标，通过对血液的检测可了解机体的营养、代谢与疾病等情况。刘玉军等[35]研究发现，DHA可有效降低高脂血患者血清T-CHOL和TG含量。EPA和DHA可显著降低蛋鸡血清T-CHOL含量[36]。EPA和DHA可抑制机体T-CHOL和TG合成，降低其在人类血清中的含量[37]。EPA和DHA可改善血液循环，降低能诱发动脉硬化和血栓的低密度脂蛋白的含量[38]。本试验中，多鳞血清HDL-C含量逐渐上升，血清T-CHOL含量先上升后下降，结果与俄罗斯鲟幼鱼[21]的结果相似。血清ALT、AST活性呈现出先下降后上升的趋势，可能是饲料n-3HUFA水平增加后加重了肝脏脂肪代谢的负担，导致细胞通透性降低，使得ALT、AST进入血液[26]；HDL-C有保护心血管、促进胆固醇逆向转运等功能[39]，LDL-C则是向组织转运肝脏合成的内源性胆固醇的主要形式[40]。随着饲料n-3HUFA水平增加，多鳞血清中的LDL-C含量短暂上升后则是持续的下降，这与凡纳滨对虾[32]研究中的结果相似，表明了n-3HUFA有利于体内的脂肪代谢。

3.4 饲料n-3HUFA水平对多鳞肝脏酶活性的影响

在机体内，SOD、CAT与过氧化物酶POD组成体内活性氧防御系统，能有效地清除体内超氧自由基、过氧化氢及其他过氧化物[41]。CAT在机体内参与活性氧代谢过程，可催化细胞内过氧化氢的分解，维持自由基代谢平衡，防止过氧化对机体造成损伤[42]。AKP作为一种非特异性磷酸单酯酶，可催化所有磷酸单酯的水解并生成磷酸根离子和自由羟基[43]，当存在于肝脏中时可参与肝细胞的排泄功能[44]。在本试验中，饲料n-3HUFA水平不影响肝脏SOD和ACP活性。但饲料n-3HUFA水平由0.80%增加到1.62%时，多鳞肝脏中CAT活性逐渐降低，饲料n-3HUFA水平由1.62%增加到2.56%时，肝脏CAT活性逐渐上升，结果与斜带石斑鱼[19]研究结果相似。这说明低于1.62%的饲料n-3HUFA水平对多鳞体内活性氧代谢、超氧自由基的平衡产生有利的作用，当饲料n-3HUFA水平高于1.62%后，肝脏CAT活性上升以清除肝脏中高水平n-3HUFA过氧化产生的自由基。而在褐菖鮋(Sebastiscus marmoratus)[45]的研究中则显示饲料n-3HUFA水平不影响肝脏CAT活性。

3.5 饲料n-3HUFA水平对多鳞肝脏、肌肉脂肪酸含量的影响

饲料n-3HUFA水平可显著影响试验对象组织中脂肪酸含量[46-50]，组织脂肪酸的组成能一定程度上反映饲料脂肪酸组成[51]。本试验中，随着饲料n-3HUFA水平的增加，多鳞肝脏中n-3HUFA含量呈现上升趋势，表现出与饲料n-3HUFA一致的规律，这与凡纳滨对虾[32]、黑鲷幼鱼[52]、真鲷[34]等的研究结果类似。在海水鱼组织中，可根据C18：1n-9的含量来判断出必需脂肪酸的缺乏[19]。在本试验中可看出，随着饲料n-3HUFA水平的提高，肝脏中的C18：1n-9含量明显降低，由此可知饲料中添加n-3HUFA可逐步满足多鳞对必需脂肪酸的需要。对比多鳞肝脏和肌肉之间脂肪酸的变化，可看出饲料n-3HUFA水平对肝脏脂肪酸组成的影响比肌肉脂肪酸组成更明显，与牙鲆[8]的研究结果相似。研究指出，动物组织根据n-9、n-6、n-3的优先顺序，通过脂肪酸β氧化为机体提供ATP[53]。本试验中，多鳞肝脏C18：1n-9含量显著降低，表明多鳞可利用单不饱和脂肪酸进行能量代谢而消耗，在斜带石斑鱼[19]和真鲷[54]研究中也有类似报道。多鳞肌肉EPA、DHA含量均较饲料中高，表明动物可在体内选择性保留EPA和DHA，在凡纳滨对虾[55]、斑节对虾[56]研究中也有类似报道。在研究中通常会根据n-3/n-6来评定脂肪酸营养，n-3/n-6越高代表营养价值越高[57]。脂质可影响肌肉的风味口感，HUFA受热可降解生成独特香味的醛酮等物质[58]，证明饲料n-3HUFA水平可提升多鳞鱼肉品质。

4 结论

本试验条件下，各测定指标表明饲料中添加1.62%~2.12%的n-3HUFA能促进多鳞生长性能和维持机体内环境的稳定。以WGR为依据，折线模型得出多鳞幼鱼对饲料中n-3HUFA的需要量为2.21%。

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