在养猪生产中，常在仔猪教槽料和前期保育料中同时添加多种抗生素来预防断奶应激引起的腹泻，促进仔猪生长。然而，长期使用甚至滥用抗生素会使细菌产生抗药性，降低动物机体免疫力，造成畜产品和环境中抗生素和锌的残留^[1]。因此，寻找高效、无残留的绿色饲料添加剂替代抗生素成为近年来的研究热点。现有研究表明，益生菌具有改善肠道微生态环境、促进营养物质的消化和代谢、增强机体免疫力、提高动物生长性能等功能^[2]，作为微生态饲料添加剂在畜禽养殖中已被广泛应用。常见的益生菌主要有枯草芽孢杆菌、乳酸菌、双歧杆菌、类链球菌和酵母菌等几大类，其中枯草芽孢杆菌能够形成芽孢，具有抗逆性强、耐高温高压、耐酸碱、便于生产和储存等特点，是目前应用最广泛的益生菌之一^[3-4]。研究表明，在母猪或仔猪饲粮中添加枯草芽孢杆菌可增加肠道有益菌数量，减少致病菌数量^[5]，降低仔猪腹泻率，提高窝产活仔数、仔猪初生重和断奶重^[6]，增加血清免疫球蛋白含量^[7-8]。Rashid等^[9]研究认为，枯草芽孢杆菌还能够增强机体的抗氧化性能。因此，本研究评价了饲粮添加枯草芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能和腹泻率的影响，通过测定血浆生化参数探讨其代谢调节机制，为其在养猪生产中的推广应用提供重要依据。

1 材料与方法 1.1 试验动物、分组与饲养管理

动物试验在中国科学院亚热带农业生态研究所永安动物试验基地开展。试验选用25日龄断奶的“长×大”二元杂交仔猪120头，均为去势公猪。根据体重随机分为3个组，每组5个重复，每个重复8头猪。空白对照组饲喂不添加抗生素的基础饲粮，抗生素组在基础饲粮中添加40 mg/kg的维吉尼亚霉素制剂(有效含量为20 mg/kg)，枯草芽孢杆菌组在基础饲粮中添加250 g/t的枯草芽孢杆菌制剂(活菌数量≥4.0×10⁹ CFU/g)。试验使用的枯草芽孢杆菌制剂由赢创德固赛(中国)投资有限公司提供，其添加剂量根据前人相关研究报道^[10]及生产厂家建议确定。断奶后前3天饲喂相同的商品乳猪保育料；试验从28日龄[仔猪平均体重(7.00±0.45) kg]开始，28~48日龄饲喂保育前期料、49~69日龄饲喂保育后期料，试验期42 d。饲喂、饮水和免疫等饲养管理按商业养殖场规范操作。基础饲粮组成及营养水平见表 1。

1.2 生长性能和腹泻率测定

分别于试验第1、7、21和42天，记录每栏仔猪的体重及日采食量，计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)；试验期间，每天记录每栏仔猪的腹泻情况，并计算腹泻率。

腹泻率(%)=(腹泻猪头数×腹泻天数)/(总试验猪头数×试验天数)×100。

1.3 血液样品采集与生化参数分析

分别于试验第7、21和42天，每栏选择1头接近平均体重的仔猪，前腔静脉采血8 mL，肝素抗凝，4 ℃离心10 min(3 000 r/min)分离血浆，-20 ℃保存。用全自动生化分析仪(罗氏Cobas^® c311)测定血浆中葡萄糖(GLU)、总蛋白(TP)含量及α-淀粉酶(α-AMY)、乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)活性。测定方法按照罗氏公司提供的试剂盒说明书进行。

1.4 数据处理与分析

以栏为单位，试验数据采用Excel 2016初步整理后，利用SPSS 18.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，用Duncan氏法进行多重比较，数据以“平均值±标准误”表示，P < 0.05表示差异显著。

2 结果与分析 2.1 枯草芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能的影响

由表 2可见，试验第7、21和42天，枯草芽孢杆菌组的体重均显著高于空白对照组(P < 0.05);试验第1~7天、第8~21天、第22~42天和第1~42天，枯草芽孢杆菌组的ADFI均为最高；试验第1~42天，枯草芽孢杆菌组的ADG最高，且显著高于空白对照组(P < 0.05)。

2.2 枯草芽孢杆菌对断奶仔猪腹泻率的影响

由表 3可见，与空白对照组相比，枯草芽孢杆菌组和抗生素组试验第1~7天腹泻率差异不显著(P>0.05)，试验第8~21天、第22~42天和第1~42天腹泻率均显著降低(P < 0.05)。与抗生素组相比，试验第22~42天枯草芽孢杆菌组腹泻率显著降低(P < 0.05)。

2.3 枯草芽孢杆菌对断奶仔猪血浆生化参数的影响

由表 4可见，与抗生素组相比，枯草芽孢杆菌组试验第42天的血浆LDH和AST活性均显著升高(P < 0.05)，试验第21天枯草芽孢杆菌组和空白对照组的血浆GLU含量显著降低(P < 0.05)；各时间点各组间的血浆α-AMY和ALT活性以及TP含量均无显著差异(P>0.05)。

3 讨论

在养猪生产中，通常在仔猪饲粮中添加大剂量的抗生素来减少断奶应激引起的仔猪腹泻。本研究结果表明，饲粮添加枯草芽孢杆菌可在一定程度上提高断奶仔猪的ADFI和ADG, 降低F/G，显著降低断奶仔猪的腹泻率，其效果与抗生素组相当。黄雪泉^[11]研究发现，枯草芽孢杆菌制剂能提高哺乳仔猪ADG，降低F/G；万根等^[12]研究表明，枯草芽孢杆菌可显著提高仔猪的生长性能，降低腹泻率。其作用机制可能是枯草芽孢杆菌抑制肠道有害菌的生长, 刺激有益微生物的生长^[13]，或保护肠上皮细胞屏障免受毒素的破坏^[14]，这与本研究结果一致。

血浆生化参数可反映动物体内营养物质代谢情况。血浆GLU含量受胰岛素和胰高血糖素等激素的调节，与动物采食量、机体营养状况和应激水平呈正相关^[15]。在本研究中，与抗生素组相比，试验第21天，饲粮添加枯草芽孢杆菌降低了血浆GLU含量，这可解释断奶仔猪采食量增加的原因，其主要原因可能是由于枯草芽孢杆菌减少了仔猪的断奶应激。血浆α-AMY活性是反映机体淀粉消化吸收状况的一个重要指标，提高血浆α-AMY活性可增强机体的消化吸收能力和抗病力^[16]。在本研究中，与抗生素组相比，饲粮添加枯草芽孢杆菌在一定程度上提高了血浆α-AMY活性，提示断奶仔猪的消化吸收能力和机体抗病力不断增强。在断奶过程中，仔猪的采食量降低、肠道或肌肉能量供给不足、细胞萎缩或凋亡，均可引起血浆中LDH活性的上升^[16]。在本研究中，饲粮添加枯草芽孢杆菌7 d后血浆LDH活性较低，提示断奶应激引起的细胞损伤得到缓解；试验21或42 d后血浆LDH活性升高，这是否与后期仔猪采食量增加、机体代谢加快导致细胞凋亡加速有关，尚需要进一步深入研究。

血浆TP含量可在一定程度上反映机体蛋白质的吸收和代谢状况。在本研究中，与抗生素组相比，饲粮添加枯草芽孢杆菌可在一定程度上提高血浆TP含量，提示动物机体对蛋白质的消化吸收能力和蛋白质合成能力增强，这有利于动物的生长发育^[17]。AST和ALT是反映肝脏和心脏功能的重要指标，也是动物体内重要的转氨酶，影响多种氨基酸的代谢^[18]。在本研究中，与抗生素组相比，饲粮添加枯草芽孢杆菌显著提高了试验第42天血浆AST活性，提示断奶仔猪对氨基酸或小肽的利用率增加，从而有利于仔猪的生长。

4 结论

与抗生素组相比，饲粮添加枯草芽孢杆菌可显著提高仔猪血浆AST活性，降低腹泻，可促进仔猪生长。