动物营养学报    2019, Vol. 31 Issue (2): 638-651    PDF    
种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡生长性能、肉品质及相关基因表达的影响
周博1, 闫俊书2*, 吴乐2, 王樱洁1, 宦海琳2, 周维仁2, 李垚1     
1. 东北农业大学动物营养研究所, 哈尔滨 150030;
2. 江苏省农业科学院畜牧研究所, 动物品种改良与繁育重点实验室, 南京 210014
摘要: 本试验旨在研究种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸(IMP)对子代肉仔鸡生长性能、肉品质及相关基因表达的影响。选取遗传背景相同、体重相近、产蛋率达到5%的20周龄健康爱拔益加(AA)种鸡864羽,随机分为2组,每组6个重复,每个重复72羽。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加0.5%肌苷酸,试验期30 d。试验结束前1周,母鸡产蛋率到达高峰期,连续收集7 d种蛋,共3 700枚种蛋孵化,孵化结束后,依据母代分组情况,选取孵化所得1日龄健康子代肉仔鸡3 000羽,分成4组,分别记为Ⅱ(母代饲喂基础饲粮+0.5%肌苷酸,子代饲喂基础饲粮+0.5%肌苷酸)、IN(母代饲喂基础饲粮+0.5%肌苷酸,子代饲喂基础饲粮)、NI(母代饲喂基础饲粮,子代饲喂基础饲粮+0.5%肌苷酸)和NN组(母代饲喂基础饲粮,子代饲喂基础饲粮),每组6个重复,每个重复125羽。试验期42 d。结果表明:1)与NN组相比,Ⅱ、IN和NI组子代肉仔鸡的平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著差异(P>0.05)。2)与NN组相比,Ⅱ、IN和NI组子代肉仔鸡胸肌率和腿肌率均无显著差异(P>0.05);Ⅱ组腹脂率显著高于NI组(P < 0.05)。3)与NN组相比,Ⅱ、IN和NI组子代肉仔鸡胸肌、腿肌的红度(a*)和黄度(b*)值均无显著差异(P>0.05),Ⅱ组胸肌的亮度(L*)值显著降低(P < 0.05);IN和NI组胸肌和腿肌pH45 min显著提高(P < 0.05),IN和NI组胸肌pH24 h显著提高(P < 0.05),Ⅱ、IN和NI组腿肌pH24 h显著升高(P < 0.05)。4)与NN组相比,Ⅱ、IN和NI组21和42日龄胸肌和腿肌的谷氨酰胺磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶(GPAT)基因相对表达量没有显著差异(P>0.05),21日龄NI组胸肌和IN组腿肌的腺苷琥珀酸裂解酶(ADSL)基因相对表达量显著提高(P < 0.05),42日龄Ⅱ和IN组胸肌的ADSL基因相对表达量显著提高(P < 0.05)。以上结果提示,种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡生长性能、屠宰性能无显著影响;能够提高肌肉pH,降低胸肌L*值,提高胸肌ADSL基因表达量,在一定程度上能够提高子代肉仔鸡肉品质。
关键词: 肌苷酸     母代效应     生长性能     肉品质    
Effects of Adding Exogenous Inosinic Acid in Diets of Breeding Hens and Offspring Broilers on Growth Performance, Meat Quality and Related Gene Expression of Offspring Broilers
ZHOU Bo1, YAN Junshu2*, WU Le2, WANG Yingjie1, HUAN Hailin2, ZHOU Weiren2, LI Yao1     
1. Institute of Animal Nutrition, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China;
2. Laboratory of Animal Improvement and Reproduction, Institute of Animal Science, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China
Abstract: The objective of this study was to investigate the effects of adding exogenous inosinic acid (IMP) in diets of breeding hens and offspring broilers on growth performance, meat quality and related gene expression of offspring broilers. A total of 864 Arbor Acres (AA) breeding hens (20-week-old) with similar genetic background, weight and 5% egg production rate were randomly divided into 2 groups with 6 replicates in each group and 72 broilers in each replicate. Hens in the control group were fed a basic diet, and the others in the experimental group were fed the basic diet supplemented with 0.5% inosinic acid. The experiment lasted for 30 days. One week before the end of the experiment, the laying rate of hens reached the peak, a total of 3 700 eggs were continuously collected for 7 days and hatched. After hatching, a total of 3 000 one-day-old broilers were selected and divided into 4 groups according to the maternal group, named Ⅱ (mother feed basal diet+0.5% inosinic acid, offspring feed basal diet+0.5% inosinic acid), IN (mother feed basal diet+0.5% inosinic acid, offspring feed basal diet), NI (mother feed basal diet, offspring feed basal diet+0.5% inosinic acid) and NN group (mother feed basal diet, offspring feed basal diet), each group had 6 replicates and 125 birds in each replicate. The experiment lasted for 42 days. The results showedas follows:1) compared with the NN group, the average daily feed intake, average daily gain and feed to gain ratio in Ⅱ, IN and NI groups were no significant difference (P>0.05). 2) Compared with the NN group, the breast muscle rate and leg muscle rate in Ⅱ, IN and NI groups were no significant difference (P>0.05); the abdominal fat rate in Ⅱ group was significantly higher than that in NI group (P < 0.05). 3) Compared with the NN group, the values of redness (a*) and yellowness (b*) of breast muscle and leg muscle in Ⅱ, IN and NI groups were no significant difference (P>0.05), the breast muscle brightness (L*) value in Ⅱ group was significantly decreased (P < 0.05); the pH45 min and pH24 h of breast muscle and leg muscle in IN and NI groups were significantly increased (P < 0.05); the pH24 h of breast muscle in IN and NI groups was significantly increased (P < 0.05); the pH24 h of leg muscle in Ⅱ, IN and NI groups was significantly increased (P < 0.05). 4) Compared with the NN group, the relative expression level of glutamine phosphoribosylpyrophosphate amidotransferase (GPAT) gene of breast muscle and leg muscle in Ⅱ, IN and NI groups at 21 and 42 days of age was no significant difference (P>0.05), the relative expression level of adenylosuccinate lyase (ADSL) gene of breast muscle in NI group and that of leg muscle in IN group at 21 days of age was significantly increased (P < 0.05), the relative expression level of ADSL gene of breast muscle in Ⅱ and IN groups at 42 days of age was significantly increased (P < 0.05). These results suggest that adding exogenous inosinic acid in diets of breeding hens and offspring broilers have no significant effect on growth performance and slaughter performance of offspring broilers; and can increase muscle pH, decrease breast muscle L* value, improve the relative expression of ADSL gene, and improve meat quality of offspring broilers to a certain extent.
Key words: inosinic acid     maternal effect     growth performance     meat quality    

母代效应是指子代畜禽的某些外貌特征、生理性状和生长性能受其母本直接影响的一种生理现象,对于动物后天的生长与发育至关重要。对于家禽而言,种蛋内的营养成分一定程度上能够影响个体后天的发育[1]。有报道称,母代自身的营养状况可以影响蛋品质,进而调控后代的表型,这对后代个体形态、生长发育有深远的影响[2]。单安山等[3]研究发现,母代的营养状况能够影响子代的生长发育、代谢、内分泌以及肉品质。蛋中的营养物质含量受母代自身营养水平的调控,母代也会影响后代对营养物质的吸收及利用[4],从而影响后代的性状。生命初始阶段,家禽的生长和发育所需要的营养完全来源于蛋中[5]。因此,我们可以通过调控母代的营养水平,进而提升子代的生长性能。

肌苷酸(inosinic acid,IMP)又名次黄嘌呤核苷酸,是一种在核糖核苷酸中发现的单核苷酸。研究表明,饲粮添加核苷酸能够增强肠道对铁的吸收,对肝脏和肠黏膜有营养作用,还能够降低腹泻率[6]。所以核苷酸的需求在快速生长期、应激期和免疫受损动物中是增加的[7-8]。本课题组前期研究发现,外源肌苷酸作为饲料添加剂在肉鸡饲粮中添加可以对肉鸡的生长性能、肉品质、蛋白质代谢、脂肪代谢以及血清中的某些酶活性和激素含量有显著影响,且母代肌苷酸对子代肉仔鸡的生长、代谢有一定的调控作用[9-10],但对种蛋的蛋品质无显著影响[11]。母代及子代同时添加肌苷酸对子代肉仔鸡的影响还未见报道。因此,本试验旨在研究种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡生长性能、肉品质及相关基因表达的影响,为母代营养对子代的调控及肉品质的改善提供理论依据。

1 材料与方法 1.1 试验材料

本试验所用肌苷酸为5′-肌苷酸二钠,购自希杰(聊城)生物科技有限公司,纯度≥97%。

1.2 试验动物及试验设计

本试验以爱拔益加(AA)种鸡和肉仔鸡为研究对象,选择遗传背景相同、体重相近、产蛋率达到5%的20周龄健康AA种鸡864羽,随机分为2组,每组6个重复,每个重复72羽。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加0.5%肌苷酸。试验期30 d。试验结束前1周,母鸡产蛋率达到高峰期,连续收集7 d种蛋,共3 700枚种蛋孵化,孵化结束后,依据母代分组情况,选取孵化所得1日龄健康肉仔鸡30 00羽,分成4组(Ⅱ、IN、NI和NN组),每组6个重复,每个重复125羽。试验期42 d。试验设计见表 1,种鸡基础饲粮组成及营养水平见表 2,子代肉仔鸡基础饲粮组成及营养水平见表 3

表 1 试验设计 Table 1 Experimental design
表 2 种鸡基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 2 Composition and nutrient level of basal diet for breeding hens (air-dry basis)
表 3 子代肉仔鸡基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 3 Composition and nutrient level of basal diets for offspring broilers (air-dry basis)
1.3 测定指标和方法 1.3.1 子代肉仔鸡生长性能

于试验第42天,以重复为单位,对子代肉仔鸡空腹称重,并记录饲料消耗量,计算试验全期肉仔鸡平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)及料重比(F/G)。

1.3.2 子代肉仔鸡屠宰性能

于子代肉仔鸡21和42日龄时,每个重复随机抽取2只健康的肉仔鸡,将其放血致死后,剥皮取左侧完整胸肌、腿肌并称重;剖开腹腔,剥离全部腹脂称重;计算21和42日龄子代肉仔鸡胸肌率、腿肌率和腹脂率。

1.3.3 子代肉仔鸡肉色和pH

pH测定:鸡宰杀后45 min,在右侧胸肌、腿肌上部用嫩度仪取样器钻一小孔(打孔切忌将孔打在筋膛部位,否则造成酸度计不稳定而产生误差孔),将便携式数显pH计电极直接插入刺孔中,电极头部完全包埋在肉样中。读取pH精确度(0.01),每测完1个样品,用蒸馏水冲洗电极。

肉色测定:采用TC-P11G全自动色差计测定胸肌和腿肌的亮度(L*)、红度(a*)和黄度(b*)值。

1.3.4 肌肉中肌苷酸含量

主要试剂和标准品:甲醇(高效液相色谱级)、磷酸(分析纯)、三乙胺(分析纯)、肌苷酸标准品(Sigma公司),试验用水为Millipore纯水器高纯制备水。3.5%高氯酸(HClO4)溶液:量取50 mL市售HClO4(分析纯)加水定容至1 L。1 mol/L氢氧化钠(NaOH)溶液:称取NaOH固体40 g,先溶于少量水中,冷却后加水定容至1 L。1 mg/mL肌苷酸标准储备液:准确称取肌苷酸标准品10.31 mg,用流动相溶解并定容至10 mL;准确量取上述标准储备液用流动相依次稀释制备成1.00、2.00、4.00、8.00、16.00和32.00 μg/mL的混合标准系列溶液流动相:量取3.5 mL磷酸溶液,加入200 mL水和7.2 mL三乙胺,摇匀,补加水至1 L,再用三乙胺调pH=6.5后,取950 mL并加入50 mL甲醇,混匀,经0.22 μm滤膜过滤,置超声波水浴中脱气30 min。

测定样品制备:取1 g样品,用已预冷的3.5% HClO4溶液10 mL,浸泡混匀,以3 500 r/min离心10 min后吸取上清液,沉淀物用5 mL同浓度的HClO4溶液洗涤,离心,合并二次上清液为提取液,用1 mol/L NaOH调节pH=6.8,用水定容至25 mL,吸取1 mL,稀释至10 mL,用0. 22 μm滤膜过滤样品液。

色谱条件:安捷伦高效液相色谱仪,Symmetry C18分离柱(5 μm, 250 mm×4.6 mm)及预柱,流动相流速1 mL/min,检测波长254 nm,柱温25 ℃,进样量20 μL,外标法定量;在拟定的色谱条件下,以各级标准液浓度对应的峰面积计算回归方程。

1.3.5 鸡肉中谷氨酰胺磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶(GPAT)、腺苷琥珀酸裂解酶(ADSL)基因表达量

于21和42日龄时每个重复取1只健康鸡,宰后取胸肌、腿肌样,用液氮速冻,保存于-80 ℃低温冰箱中待用。

1.3.5.1 总RNA的提取

1) 研磨组织样:取100 mg组织样放置于-80 ℃保存的研钵中,倒入液氮,快速研磨,至组织样成粉末状,装入10 mL离心管中,向离心管中加入1 mL Trizol提取液。2)分相:室温温育5 min以完全解离核蛋白复合体,4 ℃、12 000 r/min离心10 min,上清移至新离心管,加200 μL氯仿用力摇动15 s,放置5 min,4 ℃、12 000 r/min离心15 min。3)RNA沉淀:移上清水相于新管,加等体积500 μL异丙醇混匀,室温放置15 min,4 ℃、12 000 r/min离心10 min。4)洗涤RNA沉淀:弃上清,加1mL 75%乙醇洗涤,4 ℃、7 500 r/min离心5 min。5)RNA重溶:弃乙醇,空气中干燥10 min,加适量焦碳酸二乙酯(DEPC)水溶解总RNA。

1.3.5.2 总RNA的检测

1) 纯度检测:取2 μL总RNA溶液用DEPC水稀释200倍后,用分光光度计测定260、280 nm的吸光度(OD)值,OD260/OD280应为1.8~2.0。2)完整性检测:取3 μL总RNA与2 μL 6×Loading Buffer混合,于1.2%甲醛变性胶上120 V电泳20 min,结束后利用凝胶成像分析系统检测RNA完整性。

1.3.5.3 反转录(RT)反应

总RNA RT反应体系为20 μL,PrimeScriptTM RT Reagent Kit试剂盒说明,反转录反应体系的组成见表 4,在冰浴上按量依次加入各组分于0.2 mL Eppendof管中,振荡后在低温离心机瞬时离心。于PCR仪进行RT反应,反应条件为:37 ℃,15 min(反转录反应);85 ℃ 5 s(反转录酶失活反应),对RT产物进行PCR或-40 ℃保存。

表 4 反转录反应体系的组成 Table 4 Composition of reverse-transcription reaction system
1.3.5.4 目的基因cDNA实时定量PCR体系与程序

引物的设计与合成:根据GenBank中鸡内标基因β-肌动蛋白(β-actin)、GPATADSL基因序列,采用Primer Premier 5.0和Oligo 6.0,引物的设计与合成见表 5,引物由上海生工合成。

表 5 引物的设计与合成 Table 5 Primer design and synthesis

实时荧光定量PCR体系:实时荧光定量PCR反应采用SYBR Real-Time PCR Kit试剂盒进行。采用20 μL反应体系,实时荧光定量PCR的反应体系组成见表 6

表 6 实时荧光定量PCR的反应体系组成 Table 6 Composition of real-time PCR system

实时荧光定量PCR反应程序:应用ABI PRISM 7500 Fast Real-Time PCR System进行两步法Real Time PCR扩增反应,实时荧光定量PCR反应的程序设置见表 7

表 7 实时荧光定量PCR反应的程序设置 Table 7 Program settings of real-time fluorescent quantitative PCR

利用反转录合成的cDNA在同一反应程序条件下同时进行目的基因(GPATADSL)和内标基因(β-actin)实时定量PCR。根据所设计合成目的基因、内标基因上下游引物给定的解链温度(Tm)值优化退火温度。通过优化反应条件,利用两步法运行程序对cDNA进行扩增。

1.3.5.5 目的基因相对表达量的计算

β-actin、GARTADSL基因荧光定量PCR结果使用Opticon Monitor分析软件进行处理,获得相应的Ct值,用2-△△Ct计算目的基因GPATADSL在组织中的相对表达量。

1.4 数据统计与分析

采用SPSS 20.0软件,用GLM模块进行2×2方差分析和Duncan氏法进行各组间多重比较,以P < 0.05为差异显著,0.05≤P < 0.10为趋势显著。

2 结果 2.1 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡生长性能的影响

表 8可知,与NN组相比,Ⅱ、IN和NI组子代肉仔鸡1~42日龄ADFI、ADG、F/G均无显著差异(P>0.05)。肌苷酸的母代效应与子代效应对ADFI、ADG和F/G均无显著交互效应(P>0.05)。

表 8 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡生长性能的影响 Table 8 Effects of adding exogenous IMP in diets of breeding hens and offspring broilers on growth performance of offspring broilers
2.2 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡屠宰性能的影响

表 9可知,与NN组相比,Ⅱ、IN和NI组子代肉仔鸡胸肌率和腿肌率均无显著差异(P>0.05)。肌苷酸的母代效应与子代效应对胸肌率和腿肌率均无显著交互效应(P>0.05),而对腹脂率存在显著交互效应(P < 0.05)。

表 9 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡屠宰性能的影响 Table 9 Effects of adding exogenous IMP in diets of breeding hens and offspring broilers on slaughter performance of offspring broilers
2.3 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡肉品质的影响 2.3.1 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡肉色的影响

表 10可知,与NN组相比,Ⅱ、IN和NI组肉仔鸡胸肌、腿肌的a*和b*值均无显著差异(P>0.05);Ⅱ组胸肌的L*值显著降低(P < 0.05),IN和NI组胸肌的L*值无显著差异(P>0.05)。肌苷酸的母代效应和子代效应对胸肌和腿肌的a*、b*及L*值均无显著交互效应(P>0.05),肌苷酸的子代效应对胸肌的L*值有显著影响(P < 0.05)。

表 10 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡肉色的影响 Table 10 Effects of adding exogenous IMP in diets of breeding hens and offspring broilers on meat color of offspring broilers
2.3.2 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡胸肌及腿肌pH的影响

表 11可知,与NN组相比,IN和NI组肉仔鸡胸肌和腿肌pH45 min显著提高(P < 0.05);IN和NI组胸肌pH24 h显著提高(P < 0.05),Ⅱ、IN和NI组腿肌pH24 h显著升高(P < 0.05)。肌苷酸的母代效应与子代效应对胸肌和腿肌pH45 min存在显著交互效应(P < 0.05),对胸肌和腿肌pH24 h则无显著交互效应(P>0.05);肌苷酸的母代效应对腿肌pH24 h有显著影响(P < 0.05)。

表 11 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡胸肌及腿肌pH的影响 Table 11 Effects of adding exogenous IMP in diets of breeding hens and offspring broilers on breast muscle and leg muscle pH of offspring broilers
2.3.3 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡胸肌和腿肌肌苷酸沉积的影响

表 12可知,与NN组相比,Ⅱ、IN和NI组21和42日龄肉仔鸡胸肌和腿肌肌苷酸含量均无显著差异(P>0.05)。肌苷酸的母代效应有提高21日龄胸肌的肌苷酸含量的趋势(P=0.091),对21日龄腿肌以及42日龄胸肌和腿肌的肌苷酸含量无显著影响(P>0.05)。肌苷酸的母代效应和子代效应对21和42日龄肉仔鸡胸肌和腿肌肌苷酸含量均无显著交互效应(P>0.05)。

表 12 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡胸肌和腿肌肌苷酸沉积的影响 Table 12 Effects of adding exogenous IMP in diets of breeding hens and offspring broilers on IMP deposition in breast muscle and leg muscle of offspring broilers
2.4 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡GPATADSL基因相对表达量的影响

表 13可知,与NN组相比,Ⅱ、IN和NI组21和42日龄子代肉仔鸡胸肌和腿肌的GPAT基因相对表达量没有显著差异(P>0.05)。肌苷酸的母代效应和子代效应对21和42日龄子代肉仔鸡胸肌和腿肌的GPAT基因相对表达量无显著交互效应(P>0.05)。

表 13 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡胸肌和腿肌GPAT基因相对表达量的影响 Table 13 Effects of adding exogenous IMP in diets of breeding hens and offspring broilers on relative expression level of GPAT gene of offspring broilers

表 14可知,与NN组相比,21日龄,NI组胸肌和IN组腿肌的ADSL基因相对表达量显著提高(P < 0.05);42日龄,Ⅱ和IN组胸肌的ADSL基因相对表达量显著提高(P < 0.05)。肌苷酸的母代效应和子代效应对21和42日龄子代肉仔鸡胸肌和腿肌的ADSL基因相对表达量无显著交互效应(P>0.05),肌苷酸的母代效应对21日龄腿肌和42日龄胸肌和腿肌的ADSL基因相对表达量有显著影响(P < 0.05)。

表 14 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡胸肌和腿肌ADSL基因相对表达量的影响 Table 14 Effects of adding exogenous IMP in diets of breeding hens and offspring broilers on relative expression level of ADSL gene of offspring broilers
3 讨论 3.1 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡生长性能的影响

动物体的生长、发育离不开核苷酸,适当的补充外源核苷酸对机体是有益的[12]。研究表明,饲粮中添加外源核苷酸能够提高动物的生长性能[13-15]。肌苷酸是一种单核苷酸,可通过肠道被吸收[4, 16],所以肌苷酸作为饲粮核苷酸的一种,与动物的免疫功能、肠道健康以及营养代谢密切相关。有研究表明,饲粮中添加外源肌苷酸可以刺激味觉,增加动物采食量[17-18]。但闫俊书等[9]在三黄鸡饲粮中添加肌苷酸发现,外源肌苷酸对肉鸡整个生长期的生长性能无显著影响。刘培峰等[11]在母鸡饲粮中添加不同水平肌苷酸,结果发现其对子代肉仔鸡的生长性能也无显著影响。本试验结果表明,种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加肌苷酸对子代肉仔鸡平均日采食量、平均日增重和料重比均无显著影响,与闫俊书等[9]和刘培峰等[11]的报道一致。Sauer等[17]和Weaver等[18]研究结果也显示,外源核苷酸对肉鸡的生长性能无显著影响。这可能因为基础饲粮的蛋白质水平不同而影响了核苷酸的功能,因此外源肌苷酸未产生诱食作用[19-20]。所以饲粮中0.5%的肌苷酸添加量未能增加鸡的采食量,也未产生母代效应。Ⅱ和NI组子代肉仔鸡的平均日增重和平均日采食量要高于其他2组,证实母代效应及子代效应均可影响子代肉仔鸡的生长性能。

3.2 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡屠宰性能的影响

胸肌率、腿肌率和腹脂率是反映肉鸡产肉性能极其重要的指标[21-22]。赵建闯[23]研究发现,饲粮中添加0.2%外源核苷酸(肌苷酸:鸟苷酸=1:1)对肉鸡的胸肌率、腿肌率和腹脂率无显著影响。但张金秋等[24]在AA肉鸡基础饲粮中添加0.05%、0.10%和0.20%的核苷酸发现,0.10%和0.20%组的胸肌重和腿肌重显著高于对照组(基础饲粮)。本试验中,饲粮添加0.5%外源肌苷酸对子代肉仔鸡屠宰性能无显著影响,表明母代效应对子代肉仔鸡屠宰性能的影响不显著,这与闫俊书[25]和李锋[26]研究结果类似。

3.3 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡肉品质的影响

肉色和肌肉pH是评判肉质优劣的重要指标,肉色是肌肉自身的生物化学、生理学及微生物学变化的外部显现[27],能较好地反映肉品质,是消费者关注肉品质的首要指标[28-29]。而肌肉pH能够反映屠宰后肌肉肌糖原的酵解速率,对肌肉色、肉嫩度、失水率等有直接影响[30]。目前,衡量肉色的一般方法是测定肌肉的L*、a*、b*值。a*值在红肌中是非常重要的指标。L*值在白肌中较重要,它与pH存在相关性[31]。研究表明,肉鸡的胸肌L*和b*值与pH呈负相关,a*值与pH呈正相关[32-33],与本试验研究结果一致。闫俊书等[10]研究发现,饲粮中添加外源肌苷酸对雪山草鸡肌肉颜色无影响。Zhang等[34]在肉鸡饲粮中添加不同水平的肌苷酸对肉色无显著影响。本试验结果表明,种鸡及子代肉仔鸡饲粮同时添加肌苷酸对胸肌a*、b*值,腿肌a*、b*、L*值无显著影响,与闫俊书等[10]和Zhang等[34]报道结果相似,而Ⅱ组的胸肌L*值显著降低,这可能与肌纤维类型的改变有关[35],也可能是由母代效应和子代饲粮中肌苷酸的调控共同造成。

肌肉pH也能较好的反映肉质的优劣,一定范围内pH的下降,对提高肌肉的嫩度有利,它能直接影响肉的口感、保藏性以及烹煮损失等[36]。pH过高对正常肌肉转向食用肉的过程不利,过低则往往会引起异常肉的发生。屠宰后肌肉pH的变化主要是肌糖原酵解代谢引起的,pH的下降速率和终点pH都取决于屠宰后肌肉糖原含量。宰后45 min的pH45 min代表肌肉的乳酸水平,pH45 min < 5.8易产生PSE肉,pH45 min>6.7或pH24 h>6.2易产生DFD肉[37]。有研究表明,鸡在宰后1 h内,腿肌和胸肌的pH迅速下降,到12 h时pH达到最低值,然后缓慢上升,并且腿肉pH的下降速率和上升速率一定程度地高于胸肌[38]。赵建闯[23]研究发现,饲粮中添加0.2%外源核苷酸(肌苷酸:鸟苷酸=1:1),肌肉的pH有显著降低。Zhang等[34]研究发现,基础饲粮中添加0.25%、0.50%、0.75%的外源肌苷酸对肉鸡肌肉pH无显著影响。而本试验中,NI组胸肌和腿肌的pH45 min和pH24 h均有提高,与上述研究结果不同,可能是由于不同品种鸡肉的糖酵解潜力不同造成的[39],IN组胸肌和腿肌的pH45 min和pH24 h显著提高,母代效应显著。Ⅱ组的腿肌pH24 h显著提高,其作用机制还有待研究。

肌苷酸是评判肉风味的重要指标,与谷氨酸之间有着强烈的正相关[40]。肌苷酸作为鲜味剂很受消费者青睐[41],大量研究表明,鸡肉质鲜味特性是由肌肉中肌苷酸的含量所决定,肌苷酸和糖蛋白在水中或脂肪中加热能产生明显的肉鲜味[42-43]。肌肉肌苷酸的含量受遗传因素、饲料组成、屠宰方法、保藏温度和时间控制[44-45]。动物肌肉组织中肌苷酸的含量很低[46],Wang等[47]报道,饲粮中添加单核苷酸可提高肌肉中肌苷酸的含量,还能改善肉的风味。所以肌苷酸可以作为饲粮核苷酸,能够促进动物脂肪代谢,改善肉质[10]。Zhang等[34]研究发现,饲粮中添加外源肌苷酸能显著提高胸肌和腿肌中的内源肌苷酸含量。陈国宏等[48]在对泰和乌骨鸡肌肉肌苷酸含量的分析时发现,胸肌和腿肌肌肉中肌苷酸含量随体重和时间增加而明显减少。闫俊书等[9]在三黄肉鸡饲粮中添加肌苷酸明显提高了腿肌和胸肌中内源肌苷酸含量。闫俊书等[10]在雪山草鸡饲粮中添加外源肌苷酸发现,0.30%肌苷酸添加组的肌苷酸沉积量较对照提高了57.43%。本试验中,母代添加肌苷酸有提高21日龄胸肌的肌苷酸含量的趋势;对21日龄腿肌以及42日龄胸肌和腿肌的肌苷酸含量无显著影响。可能是由于本试验中饲粮肌苷酸的添加量略高[18],导致肉鸡对饲粮肌苷酸的吸收和利用率降低。

3.4 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡GPATADSL基因相对表达量的影响

GPAT基因位于鸡的第6号染色体上,主要是编码谷氨酸胺磷酸核糖焦磷酸转酰胺酶(glutamine phosphoribosylpyrophosphate amidotransferase, GPATase),一般简称PRPP转酰胺酶[49]。张彦华等[50]报道称,GPAT基因是肌苷酸合成代谢的关键基因;余春林等[51]研究表明,GPAT基因相对表达量与肌苷酸含量呈极显著正相关。束婧婷[52]也研究发现,GPAT基因的相对表达量与肌肉肌苷酸含量具有显著相关性。本试验中,肌苷酸对GPAT的基因相对表达量无显著影响,母代效应不显著。束婧婷[52]试验结果中,各组间胸肌和腿肌的肌苷酸沉积量无显著差异,与本试验结果一致。

ADSL基因主要编码ADSL,是肌苷酸合成酶系中的另一个关键酶,是一种双功能酶。ADSL通过调节细胞腺嘌呤核苷酸(AMP)含量间接影响肌苷酸的生成[53]。张学余等[54]报道,鸡ADSL基因相对表达量在品种间存在显著差异。路宏朝等[55]研究发现,ADSL基因相对表达量随生长发育时间的增加而增加。本试验中,与NN组相比,21日龄NI组胸肌和IN组腿肌的ADSL基因相对表达量显著升高;42日龄Ⅱ和IN组胸肌ADSL基因相对表达量显著升高,而腿肌ADSL基因相对表达量则没有显著差异。结果表明,母鸡及肉仔鸡饲粮添加肌苷酸均对胸肌及腿肌ADSL基因相对表达量产生显著影响。可能的原因是发育早期ADSL基因表达主要是参与细胞代谢,外源性肌苷酸增强了细胞代谢从而显著增加了ADSL基因的表达,而随着后期各组细胞代谢逐步趋于同一水平导致ADSL基因的表达差异性消失[56]。而胸肌与腿肌变化规律的不同可能是ADSL基因的组织特异性导致[57]。肌苷酸的母代效应是导致21日龄腿肌和42日龄胸肌及腿肌ADSL基因相对表达量增加的主要原因。

4 结论

① 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸对子代肉仔鸡生长性能及屠宰性能无显著影响。

② 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸能够提高子代肉仔鸡肌肉pH,降低胸肌L*值,对肌肉中肌苷酸含量有提高的趋势,在一定程度上能够提高子代肉仔鸡肉品质。

③ 种鸡及子代肉仔鸡饲粮添加外源肌苷酸能够提高子代肉仔鸡ADSL基因相对表达量。

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