2. 海阳市畜牧兽医站, 海阳 265100
2. Haiyang Animal Husbandry and Veterinary Station, Haiyang 265100, China
近年来因环境恶化，我国沿海地区每年滋生大量的浒苔，对海洋生物生存、海洋运输等造成严重影响，已成为一种污染生物，需花费大量人力物力进行打捞、清除。但浒苔营养丰富，我国沿海居民浒苔的食用和药用历史悠久[1]。近年来，国内外研究者对浒苔的提取物——浒苔多糖进行了大量的研究，发现浒苔多糖具有免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、降血脂等多种生物学活性。近年来我国饲料资源紧缺问题突出，急需开发新型饲料资源。浒苔因其独特的营养及多种生物活性的优势，日益受到养殖业的关注，有望作为新型饲料资源得以开发利用。
浒苔多糖的化学组分复杂，浒苔种类、采集季节、生长区域等不同，由其提取的浒苔多糖的组分及含量等差异较大，因此其活性表现形式不尽一致[2-3]。迄今对于浒苔多糖的研究多集中于提取方法及以小鼠为试验动物的生物活性研究，在家禽生产中作为饲料添加剂的应用报道很少。张文启[4]报道，饮水中添加1.0‰浒苔多糖可提高肉鸡平均日采食量、平均日增重和料重比，并显著提高免疫器官指数、血清血球凝集抑制(HI)抗体水平和黏膜抗体水平。据报道，小鼠口服100 mg/L的浒苔多糖有利于其肠道菌群平衡，可减轻便秘和肠道炎症[5]。对本试验所用浒苔多糖的前期研究显示，饲粮中添加不同水平浒苔多糖可显著提高肉鸡生长性能，因此，本试验进一步研究了浒苔多糖对肉鸡肠道消化酶活性、菌群数量和养分表观利用率的影响，旨在为揭示其促生长机理及在肉鸡生产中的推广应用提供参考依据。
1 材料与方法 1.1 试验材料试验动物：840只1日龄爱拔益加(AA)肉鸡，购自山东省肉种鸡孵化工程技术研究中心。浒苔多糖的成分及含量：浒苔多糖47.75%，粗蛋白质4.82%，水分2.9%，氯化钠10%，粗灰分34.53%。
1.2 试验设计将840只1日龄AA肉鸡随机分为7个组，每组6个重复，每个重复20只鸡。对照组(1组)饲喂玉米-豆粕型基础饲粮，试验组(2~7组)分别饲喂在基础饲粮中添加0.02%、0.05%、0.10%、0.20%、0.40%、0.80%浒苔多糖的试验饲粮。试验期为42 d。基础饲粮参照AA商品代肉鸡营养标准配制，基础饲粮组成及营养水平见表 1。所有试验鸡按鸡场常规程序饲养管理。
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表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis) |
于第42天，每组每个重复选取1只体况良好、体重接近平均体重的鸡(每组6只，其中3只公鸡、3只母鸡)，颈部放血宰杀，取空肠内容物，放入冻存管中，液氮迅速冷冻后转入-80 ℃的冰箱保存待测。主要检测空肠内容物中淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的活性，所需试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
1.3.2 肠道菌群测定样品处理：于第42天，取1.3.1中鸡的回肠前段10 cm肠管，两侧用棉线结扎。-20 ℃冰箱保存。取回肠内容物按照1 : 9的比例加入溶菌肉汤混匀，取100 μL加入专用培养基进行细菌培养。
肠道菌群检测：主要检测回肠内容物中的乳酸菌、大肠杆菌、双歧杆菌数量，检测方法参见文献[6]。结果以每克食糜的菌落形成单位对数值即lg(CFU/g)表示。
1.3.3 养分表观利用率分别于16、35日龄，自每组每个重复中取体况良好、体重接近平均体重的鸡2只，饲养于代谢笼内，采用全收粪法进行代谢试验[5]。试验前48 h为饥饿排空期，停止喂料只提供饮水，于18、37日龄每只鸡分别一次性饲喂50 g前期(1~21日龄)饲粮、120 g后期(22~42日龄)饲粮，之后连续收集排泄物48 h。期间每隔2~3 h收集1次，每次准确称重后，按每100 g鲜粪加10 mL 10%的盐酸溶液混匀固氮，粪样保存于-20 ℃冰柜中待测。
饲粮和粪样的粗蛋白质、粗脂肪、钙、总磷含量分别采用凯氏定氮法(GB/T 6432—1994)、残余法(GB/T 6433—2006)、高锰酸钾滴定法(GB/T 6436—2002)、分光光度法(GB/T 6437—2002)测定。
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试验数据采用SPSS 17.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，Duncan氏法进行组间差异显著性检验。结果以“平均值±标准差”表示。
2 结果 2.1 浒苔多糖对肉鸡空肠内容物消化酶活性的影响浒苔多糖对肉鸡空肠内容物消化酶活性的影响见表 2。淀粉酶活性方面，3~7组均高于1组，但各组之间差异不显著(P>0.05)。糜蛋白酶活性方面，2~7组不同程度的高于1组；其中5组最高，与4组、6组差异不显著(P>0.05)，但极显著高于1组、2组、3组、7组(P < 0.01)；4组、6组极显著高于1组(P < 0.01)，显著高于2组(P < 0.05)。胰蛋白酶活性方面，5组略高于4组、6组(P>0.05)，4组和5组极显著高于1组、2组、3组、7组(P < 0.01)；6组显著或极显著高于1组、2组、3组、7组(P < 0.05或P < 0.01)；1组、2组、3组、7组之间差异不显著(P>0.05)。脂肪酶活性方面，3~6组显著高于1组(P < 0.05)，与其他组间差异不显著(P>0.05)。
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表 2 浒苔多糖对肉鸡空肠内容物消化酶活性的影响 Table 2 Effects of Enteromorpha prolifera polysaccharide on jejunal contents digestive enzyme activity of broilers |
浒苔多糖对肉鸡回肠内容物菌群数量的影响见表 3。各组之间大肠杆菌、双歧杆菌数量差异不显著(P>0.05)。乳酸菌数量方面，6组极显著高于1组(P < 0.01)，其他各组之间差异不显著(P>0.05)。
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表 3 浒苔多糖对肉鸡回肠内容物菌群数量的影响 Table 3 Effects of Enteromorpha prolifera polysaccharide on ileum contents microbial number of broilers |
浒苔多糖对肉鸡养分表观利用率的影响见表 4。1~21日龄，粗蛋白质表观利用率方面，2~7组均不同程度的高于1组，其中6组显著高于1组(P < 0.05)，2~7组之间差异不显著(P>0.05)。粗脂肪表观利用率方面，2~7组与1组之间差异不显著(P>0.05)。钙表观利用率方面，1~6组显著高于7组(P < 0.05)，1~6组之间差异不显著(P>0.05)。各组之间总磷表观利用率差异不显著(P＞0.05)。
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表 4 浒苔多糖对肉鸡养分表观利用率的影响 Table 4 Effects of Enteromorpha prolifera polysaccharide on nutrient apparent utilization of broilers |
22~42日龄，粗蛋白质和钙表观利用率方面，2~7组均高于1组，但各组之间差异不显著(P>0.05)。总磷表观利用率方面，2~6组均高于1组，但各组之间差异不显著(P>0.05)。粗脂肪表观利用率方面，6组、7组显著高于1组、2组(P < 0.05)，其他组之间差异不显著(P>0.05)。
3 讨论 3.1 浒苔多糖对肉鸡空肠内容物消化酶活性的影响肠道消化酶的活性在机体物质代谢中起到关键作用。研究发现，在肉鸡饲粮中添加3%~4%浒苔粉可显著增强胰腺、十二指肠、空肠中胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰腺中淀粉酶活性[7]。王述柏等[8]在肉鸡饲粮中添加浒苔粉的试验结果与上述报道一致。据报道，海藻多糖能够影响酶和蛋白质的表达水平，从而改善体能代谢，促进养分的利用[9]。本试验结果表明，饲粮中添加不同水平的浒苔多糖可不同程度提高肉鸡空肠内容物消化酶活性，其中饲粮中添加0.20%浒苔多糖可显著提高空肠内容物糜蛋白酶、胰蛋白酶和脂肪酶活性。可见，饲粮中添加浒苔多糖可提高肉鸡肠道内容物消化酶活性，有利于对养分消化吸收。
3.2 浒苔多糖对肉鸡回肠内容物菌群数量的影响据报道，肠道微生物与免疫系统存在密切关系，肠道微生物菌群的稳定对动物机体的健康具有重要意义[10]。王虹玲等[11]研究发现，在肉鸡饲粮中添加2.5%的黄芪多糖，对改善肠道菌群结构具有明显的效果，可增加有益菌数量，抑制病原菌繁殖。但孙国强等[12]研究报道，饲粮中添加浒苔粉对牛粪中的主要微生物菌落数量无显著影响；王述柏等[13]试验发现，肉鸡饲粮中添加1%~4%的浒苔粉对其盲肠微生物菌群无显著影响。本试验结果显示，肉鸡饲粮中添加浒苔多糖对回肠内容物中的大肠杆菌和双歧杆菌数量无显著影响，但可提高乳酸菌数量，饲粮中添加0.40%浒苔多糖效果最好。
3.3 浒苔多糖对肉鸡养分表观利用率的影响有研究表明，生长育肥猪饲粮中添加6%浒苔粉可显著提高粗蛋白质表观消化率[14]。何雯娟等[15]研究表明，在3~7周龄肉鸡饲粮中添加200 mg/kg黄芩多糖，显著提高了粗蛋白质的代谢率；饲粮中添加100 mg/kg黄芩多糖显著提高了粗脂肪的代谢率，饲粮中添加400 mg/kg黄芩多糖显著提高了钙的代谢率。李海英等[16]研究表明，饲粮中添加0.5%苜蓿多糖，肉鸡粗脂肪的代谢率较对照组提高了2.99%。本试验结果显示，饲粮中添加适量浒苔多糖对肉鸡的养分表观利用率有一定促进作用。
4 结论饲粮中添加浒苔多糖可提高肠道糜蛋白酶、胰蛋白酶活性及乳酸菌数量、养分表观利用率。浒苔多糖在肉鸡饲粮中适宜添加水平为0.10%~0.40%。
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