不同蚕蛹油与大豆油组合对吉富罗非鱼生长性能、体组成及脂质代谢的影响

引用本文

李伟龙, 白富瑾, 王双, 李战福, 陈拥军, 黄先智, 罗莉. 不同蚕蛹油与大豆油组合对吉富罗非鱼生长性能、体组成及脂质代谢的影响[J]. 动物营养学报, 2019, 31(3): 1220-1230.

LI Weilong, BAI Fujin, WANG Shuang, LI Zhanfu, CHEN Yongjun, HUANG Xianzhi, LUO Li. Effects of Different Combinations of Silkworm Pupa Oil and Soybean Oil on Growth Performance, Body Composition and Lipid Metabolism of Genetic Improvement of Farmed Tilapia (Oreochroms niloticus)[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2019, 31(3): 1220-1230.

不同蚕蛹油与大豆油组合对吉富罗非鱼生长性能、体组成及脂质代谢的影响

李伟龙¹, 白富瑾², 王双¹, 李战福¹, 陈拥军¹, 黄先智³, 罗莉¹

1. 西南大学动物科技学院, 淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室, 重庆 400715;
2. 宁夏水产技术推广站, 银川 750001;
3. 家蚕基因组生物学国家重点实验室, 重庆 400715

收稿日期: 2018-08-01

基金项目: 公益性行业科研专项（农业）（201303053）；国家现代蚕桑产业技术体系（CARS-22）；重庆市生态渔产业技术体系项目（2016-2021）

作者简介: 李伟龙(1995-), 男, 山东潍坊人, 硕士研究生, 研究方向为水产动物营养与饲料学。E-mail:lwl199501@163.com

通信作者: 罗莉, 副教授, 硕士生导师, E-mail:luoli1972@163.com.

摘要: 为研究蚕蛹油（SPO）与大豆油（SO）组合应用于吉富罗非鱼饲料中的可行性，本试验以SPO和SO为脂肪源，配制成5种等氮等脂试验饲料。5种试验饲料中油脂总添加水平均为5.00%，SPO与SO按照不同配比组合，SPO：SO分别为5：0、3：1、1：1、1：3、0：5。选取初始均重为（48.07±0.23）g的吉富罗非鱼300尾，随机分为5组，每组3个重复，每个重复放养20尾，进行56 d的养殖试验。结果显示：吉富罗非鱼终末均重（FBW）、增重率（WGR）、特定生长率（SGR）和蛋白质效率（PER）均在SPO：SO=3：1组出现最大值，并显著高于SPO：SO=5：0组（P < 0.05），但与SPO：SO=1：1组和SPO：SO=0：5组差异不显著（P>0.05）；同时，饲料系数（FCR）、摄食量（FI）、灰分沉积率、体长/体高（BL/BD）、全鱼粗灰分含量、肝脏和肌肉水分含量、血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量和肝脏乙酰辅酶A羧化酶（ACC）活性均以SPO：SO=3：1组最佳。干物质和蛋白质沉积率均在SPO：SO=1：1组出现最大值，且显著高于SPO：SO=5：0组（P < 0.05），但与SPO：SO=0：5组差异不显著（P>0.05）。肠脂系数（IPF）、血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量、肝脏肉碱酯酰转移酶-Ⅰ（CPT-Ⅰ）活性和血清碱性磷酸酶（AKP）活性也均在SPO：SO=1：1组出现最大值，并显著高于SPO：SO=5：0组和SPO：SO=0：5组（P < 0.05）。以WGR和PER为评价指标，通过二次回归方程分析得到吉富罗非鱼饲料的适宜n3/n6值为1.040 2~1.106 4。由此得出，以SPO和SO组合作为吉富罗非鱼饲料脂肪源时，在油脂总添加水平为5.00%的条件下，SPO与SO的适宜组合为SPO：SO=3：1~1：1，即以SPO占混合脂肪源的50%~75%为宜。

关键词: 吉富罗非鱼蚕蛹油大豆油脂肪源

Effects of Different Combinations of Silkworm Pupa Oil and Soybean Oil on Growth Performance, Body Composition and Lipid Metabolism of Genetic Improvement of Farmed Tilapia (Oreochroms niloticus)

LI Weilong¹, BAI Fujin², WANG Shuang¹, LI Zhanfu¹, CHEN Yongjun¹, HUANG Xianzhi³, LUO Li¹

1. College of Animal Science and Technology of Southwest University, Key Laboratory of Freshwater Reproduction and Development, Ministry of Education, Chongqing 400715, China;
2. Ningxia Aquatic Technology Extension Station, Yinchuan 750001, China;
3. State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Chongqing 400715, China

Corresponding author: LUO Li, associate professor, E-mail:luoli1972@163.com.

Abstract: To study the feasibility of combining silkworm pupa oil (SPO) with soybean oil (SO) in genetic improvement of farmed tilapia (GIFT, Oreochromis niloticus) diet, five isonitrogenous and isolipidic diets were formulated based on either silkworm pupa oil or soybean oil. The total addition level of oil in the five experimental diets was 5.00%. SPO and SO were combined according to different ratios, and the SPO:SO were 5:0, 3:1, 1:1, 1:3 and 0:5, respectively. A total of 300 GIFT with an initial body weight of (48.07±0.23) g were randomly divided into 5 groups with 3 replicates per group and 20 fish per replicate, and all fish were fed for 56 days. The results showed that the final body weight (FBW), weight gain rate (WGR), specific growth rate (SGR) and protein efficiency ratio (PER) all showed maximum in SPO:SO=3:1 group, and significantly higher than the SPO:SO=5:0 group (P < 0.05), but showed no significant differences with the SPO:SO=1:1 and SPO:SO=0:5 groups (P>0.05). The feed conversion ratio (FCR), feed intake (FI), deposition rate of ash, body length/body height (BL/BD), the content of ash in whole body, the content of moisture in liver and muscle, the content of serum low density lipoprotein cholesterol (LDL-C) and the activity of liver acetyl-CoA carboxylase (ACC) were the best in the SPO:SO=3:1 group. The deposition rates of dry matter and protein all showed maximum in SPO:SO=1:1 group, and significantly higher than that in SPO:SO=5:0 group (P < 0.05), but showed no significant differences compared with the SPO:SO=0:5 group (P>0.05). The intraperitoneal fat ratio (IPF), the content of serum high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C), the activities of liver carnitine acyl transferase-Ⅰ (CPT-Ⅰ) and serum alkaline phosphatase (AKP) also showed maximum in SPO:SO=1:1 group, and significantly higher than those in SPO:SO=5:0 and SPO:SO=0:5 groups (P < 0.05). To use the WGR and PER as evaluation indexes, the optimal n3/n6 ratio of diet for GIFT obtained by quadratic regression equation is 1.040 2 to 1.106 4. It is concluded that when the total additive level of oil is 5.00%, the combination of SPO and SO is used as the lipid source of diet for GIFT, the optimal combination is SPO:SO=3:1 to 1:1. That is to say, SPO accounts for 50% to 75% of mixed lipid source are suitable.

Key words: GIFT (Oreochroms niloticus) silkworm pupal oil soybean oil lipid source

脂肪是鱼体修补各种组织器官和新组织生长的必需原料，能为鱼体提供能量和必需脂肪酸，是影响鱼类正常生长发育的主要因素之一^[1]。鱼类人工配合饲料中的脂肪主要来源于大豆油(soybean oil, SO)、鱼油、菜籽油、猪油等脂肪源，不同脂肪源中脂肪酸的组成和比例各不相同，对鱼类生长发育、体组成以及脂质代谢的影响也有所差异^[2-3]。

蚕蛹油(silkworm pupa oil, SPO)是从蚕蛹中低温萃取出来的含多种脂肪酸甘油酯的混合物，不饱和脂肪酸含量高达75%，富含淡水鱼类生长发育所必需的α-亚麻酸(C18 : 3n-3)，同时具有降血糖、降血脂、清除机体自由基以及抗氧化的作用，是极具潜力的新型脂肪源^[4]。在白富瑾等^[5]对吉富罗非鱼(GIFT，Oreochroms niloticus)脂肪源的研究中发现，使用SPO作为吉富罗非鱼饲料的单一脂肪源，虽具有降血糖、降血脂，增加肌肉中α-亚麻酸和高不饱和脂肪酸(HUFA)含量及保护鱼体肝脏健康等优点，但其饲料转化率较低，吉富罗非鱼的生长速度缓慢，其主要原因是亚油酸(C18 : 2n-6)缺乏。已有研究发现，使用植物油作为鱼类饲料的单一脂肪源，会改变鱼体组织脂肪酸组成，表现为亚油酸含量的增加^[6-8]。目前，SO作为水产饲料脂肪源的应用已经较为普遍，且其亚油酸含量在50%以上^[9]。程小飞等^[10]对框鳞镜鲤(Cyprinus carpio var. specularis)的研究发现，在含蚕蛹的基础饲料中添加SO会使n-3、n-6系列脂肪酸比较均衡，能促进水产动物摄食并使其获得更好的生长性能。据此推测，SPO和SO按一定比例组合后作为水产动物饲料的脂肪源，既可满足其对亚油酸的需求，又对其生长起到加成作用。基于此，本试验以吉富罗非鱼为研究对象，以SPO和SO为脂肪源，探究不同SPO和SO组合对吉富罗非鱼生长性能、体组成及脂质代谢的影响，旨在明确2种油脂在吉富罗非鱼饲料中的适宜配比，为吉富罗非鱼饲料中SPO的应用提供科学依据。

1 材料与方法 1.1 试验饲料

根据吉富罗非鱼营养需求，以豆粕、菜籽粕、棉籽粕、面粉、预混料、SPO和SO等为原料配制5种等氮(粗蛋白质含量33.5%)等脂(粗脂肪含量5.6%)的试验饲料。5种试验饲料中油脂总添加水平均为5.00%，SPO与SO按照不同配比组合，SPO : SO分别为5 : 0、3 : 1、1 : 1、1 : 3、0 : 5。试验饲料组成及营养水平见表 1。饲料原料经粉碎过40目网筛，然后按照配方比例混合均匀，挤压制成粒径2 mm的硬颗粒饲料，自然风干，使用加厚双层塑料袋包装，-20 ℃冰箱保存备用。SPO、SO和试验饲料脂肪酸组成见表 2。

表 1 试验饲料组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis)

表 2 脂肪源和试验饲料脂肪酸组成(占总脂肪酸的百分比) Table 2 Fatty acid composition of fat sources and experimental diets (percentage of total fatty acids)

%
脂肪酸Fatty acids	脂肪源Lipid sources		饲料Diets
脂肪酸Fatty acids	蚕蛹油SPO	大豆油SO	SPO:SO=5:0	SPO:SO=3:1	SPO:SO=1:1	SPO:SO=1:3	SPO:SO=0:5
C14:0	0.52	0.08	0.49	0.39	0.29	0.19	0.09
C16:0	23.43	10.94	22.39	19.64	16.85	14.06	11.25
C18:0	4.47	3.78	4.30	4.15	4.00	3.84	3.68
C24:0	0.24		0.21	0.16	0.11	0.05
SFA	28.66	14.80	27.38	24.34	21.24	18.15	15.03
C16:1n-7	1.71	0.25	1.61	1.29	0.96	0.64	0.31
C18:1n-9	30.94	24.85	30.48	29.17	27.81	26.46	25.05
C24:1n-9	0.28	0.13	0.41	0.37	0.34	0.31	0.27
MUFA	32.93	25.23	32.50	30.84	29.12	27.40	25.63
C18:2n-6	6.33	51.66	10.11	20.24	30.36	40.48	50.51
C18:3n-3	30.35	6.92	27.82	22.64	17.41	12.18	6.93
C18:3n-6	0.37	0.42	0.41	0.42	0.43	0.44	0.45
C20:4n-6	0.66	0.15	0.59	0.48	0.36	0.25	0.13
C20:5n-3	0.77	0.55	1.18	1.13	1.08	1.03	0.98
C22:6n-3	0.31	0.06	0.28	0.22	0.17	0.11	0.05
PUFA	38.79	59.76	40.46	45.12	49.80	54.49	59.06
n3	31.43	7.53	29.36	24.14	18.65	13.32	7.97
n6	7.36	52.23	11.10	21.14	31.15	41.17	51.09
n3/n6	4.27	0.14	2.64	1.13	0.60	0.32	0.16
SFA：饱和脂肪酸saturated fatty acids；MUFA：单不饱和脂肪酸monounsaturated fatty acids；PUFA：多不饱和脂肪酸polyunsaturated fatty acids；HUFA：高不饱和脂肪酸highly unsaturated fatty acids；n3：n3多不饱和脂肪酸n3 polyunsaturated fatty acids；n6：n6多不饱和脂肪酸n6 polyunsaturated fatty acids。表 6同The same as Table 6。

表 2 脂肪源和试验饲料脂肪酸组成(占总脂肪酸的百分比) Table 2 Fatty acid composition of fat sources and experimental diets (percentage of total fatty acids)

1.2 试验鱼饲养与管理

试验所需吉富罗非鱼购买于重庆歇马鱼种场，经浓度为3%的食盐水消毒后，在室内淡水循环塑料水族箱中以基础饲料暂养驯化10 d，待体质恢复后开展正式试验。试验开始时，选择体格健壮、体重[(48.07±0.23) g]均匀的吉富罗非鱼300尾，随机分为5组，每组3个重复，每个重复放养20尾。以曝气自来水为水源。每天投喂3次(08:30、12:30、16:30)。饲养期间水温27~31 ℃，日投喂量为鱼体重的3%~5%，根据试验鱼体重增加情况，每隔7 d调整1次投喂量。每晚100%换水1次，养殖试验持续56 d。养殖水体中要求氨氮含量 < 0.10 mg/L，溶解氧含量>6.0 mg/L，亚硝酸盐含量 < 0.10 mg/L，pH 6.6~7.0。

1.3 样品采集、制备

养殖试验结束后饥饿24 h，从每组的每个重复中随机选取12尾鱼，用MS-222进行麻醉，测定每尾鱼的体重、体高和体长。其中，3尾鱼用于全鱼营养成分测定，3尾鱼用于血清制备，使用1 mL一次性无菌注射器在尾静脉处采血，取血后放于4 ℃冰箱静置3 h，然后在4 ℃离心机内以4 000 r/min离心10 min，提取上清后放入液氮罐中速冻，最后转入-80 ℃冰箱内保存，用于血清生化指标测定。另外6尾鱼于冰上解剖，取出完整内脏团，然后将肝脏与肠系膜脂肪分离并称重，同时，从鱼体两侧头盖骨后至尾鳍前取鱼体背部肌肉样品，-80 ℃冰箱保存待用。

1.4 指标测定 1.4.1 生长性能及形体指标

养殖试验结束后，饥饿24 h，准确称量鱼体重和饲料消耗量，然后计算其生长性能和形体指标：

式中：W₀为初始均重(g)；W_t为终末均重(g)；D为养殖天数(d)；W_f为尾均干物质摄食量(g)；W_p为饲料粗蛋白质含量(%)；D_f为总干物质摄食量(g)；M₀为初始鱼数量(g)；M_t为终末鱼数量(g)；W为鱼体重(g)；W_v为内脏重(g)；W_l为肝脏重(g)；BL为鱼体长(cm)；BD为鱼体高(cm)；W_m为肠系膜脂肪重(g)。

1.4.2 饲料、全鱼和组织常规营养成分测定

水分含量测定采用恒温(105 ℃)干燥法，粗灰分含量测定采用高温(550 ℃)灼烧法，粗蛋白质含量测定采用半微量凯氏定氮法，粗脂肪含量测定采用索氏抽提法。

1.4.3 营养素沉积率测定

干物质、脂肪、蛋白质或灰分沉积率计算公式如下：

式中：W₀为初始均重(g)；W_t为终末均重(g)；W_f为尾均干物质摄食量(g)；CN_i为终末鱼体干物质、粗脂肪、粗蛋白质或粗灰分含量(%)；CO_i为初始鱼体干物质、粗脂肪、粗蛋白质或粗灰分含量(%)；CF_i为饲料干物质、粗脂肪、粗蛋白质或粗灰分含量(%)。

1.4.4 肌肉脂肪酸组成测定

肌肉脂肪酸组成使用安捷伦7820a气相色谱仪，参考田晶晶等^[11]的方法进行测定。

1.4.5 血清和肝脏生化指标测定：

血清葡萄糖(GLU)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙二醛(MDA)含量以及总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷丙转氨酶(GPT)、碱性磷酸酶(AKP)活性均采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒，按说明书所述方法进行测定。肝脏肉碱脂酰转移酶-Ⅰ(CPT-Ⅰ)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性由上海将来实业股份有限公司测定。

1.5 数据处理与分析

采用SPSS 22.0对数据进行方差齐性检验和单因素方差分析(one-way ANOVA)，并采用Duncan氏法多重比较组间差异显著性，显著水平为P < 0.05。数据用平均值±标准差(mean±SD)形式表示。

2 结果 2.1 不同SPO与SO组合对吉富罗非鱼生长性能和营养素沉积率的影响

由表 3可知，吉富罗非鱼FBW、WGR、SGR、PER、FI和灰分沉积率均在SPO : SO=3 : 1组出现最大值，且FBW、WGR显著高于SPO : SO=5 : 0组和SPO : SO=1 : 3组(P < 0.05)，但与SPO : SO=1 : 1和SPO : SO=0 : 5组差异不显著(P>0.05)，其中WGR较SPO : SO=5 : 0组和SPO : SO=0 : 5组分别提高了60.20%和16.41%；此外，该组FI和灰分沉积率均显著高于其余组(P < 0.05)。FCR在SPO : SO=3 : 1组时出现最小值，显著低于SPO : SO=5 : 0组(P < 0.05)，但与其他组差异不显著(P>0.05)。干物质和蛋白质沉积率均在SPO : SO=1 : 1组出现最大值，其中干物质沉积率显著高于SPO : SO=5 : 0组和SPO : SO=3 : 1组(P < 0.05)，但与SPO : SO=1 : 3组和SPO : SO=0 : 5组差异不显著(P>0.05)，蛋白质沉积率显著高于除SPO : SO=0 : 5组外的其余3组(P < 0.05)。SPO : SO=5 : 0组的脂肪沉积率显著低于其余组(P < 0.05)，SPO : SO=3 : 1组的脂肪沉积率显著低于SPO : SO=1 : 1组、SPO : SO=1 : 3组和SPO : SO=0 : 5组(P < 0.05)。

表 3 不同SPO与SO组合对吉富罗非鱼生长性能和营养素沉积率的影响 Table 3 Effects of different combinations of silkworm oil and soybean oil on growth performance and nutrient retention rates of GIFT

项目Items	组别Groups
项目Items	SPO:SO=5:0	SPO:SO=3:1	SPO:SO=1:1	SPO:SO=1:3	SPO:SO=0:5
生长性能Growth performance
初始均重IBW/g	47.67±0.38	47.08±0.88	47.67±0.63	47.08±0.76	47.58±0.52
终末均重FBW/g	197.33±5.86^a	223.17±6.25^c	215.00±8.79^bc	208.92±4.69^b	217.83±1.81^bc
增重率WGR/%	314.06±15.35^a	374.26±22.07^c	350.94±12.67^bc	343.88±16.16^b	357.85±8.00^bc
特定生长率SGR/(%/d)	2.54±0.07^a	2.78±0.08^b	2.69±0.05^b	2.66±0.07^b	2.72±0.03^b
饲料系数FCR	1.06±0.02^b	0.99+0.03^a	0.99±0.04^a	1.01±0.03^ab	1.00±0.02^ab
蛋白质效率PER/%	13.10±0.30^a	14.05±0.62^b	13.99±0.48^b	13.76±0.40^ab	13.82±0.33^ab
摄食量FI/[g/(尾·d)]	2.83±0.05^a	3.11±0.03^c	2.95±0.01^b	2.91±0.01^ab	3.05±0.10^b
营养素沉积率Nutrient retention rates/%
干物质Dry matter	33.50±0.67^a	34.02±1.05^ab	37.24±1.56^c	35.68±0.93^bc	35.85±0.86^bc
脂肪Lipid	151.30±2.41^a	163.96±4.34^b	178.03±6.98^c	178.24±3.99^c	174.50±4.25^c
蛋白质Protein	45.21±0.95^a	48.30±1.55^b	52.31±2.23^c	49.16±1.34^b	50.71±1.21^bc
灰分Ash	43.20±1.05^a	49.17±1.72^b	45.04±1.06^a	43.60±1.36^a	43.00±1.02^a
同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P < 0.05)。下表同。 In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P < 0.05). The same as below.

2.2 不同SPO与SO组合对吉富罗非鱼形体指标的影响

由表 4可知，SPO : SO=3 : 1组BL/BD显著高于SPO : SO=5 : 0组和SPO : SO=0 : 5组(P0.05)，但与SPO : SO=1 : 1组和SPO : SO=1 : 3组差异不显著(P>0.05)。SPO : SO=1 : 1组和SPO : SO=3 : 1组的IPF差异不显著(P>0.05)，但二者显著高于其余组(P0.05)。VSI、HSI和CF各组间差异不显著(P>0.05)。

表 4 不同SPO与SO组合对吉富罗非鱼形体指标的影响 Table 4 Effects of different combinations of silkworm oil and soybean oil on physique indexes of GIFT

2.3 不同SPO与SO组合对吉富罗非鱼全鱼、肝脏和肌肉常规营养成分的影响

由表 5可知，SPO : SO=1 : 1组全鱼水分含量显著低于SPO : SO=5 : 0组和SPO : SO=3 : 1组(P < 0.05)，但与SPO : SO=1 : 3组和SPO : SO=0 : 5组差异不显著(P>0.05)。SPO : SO=5 : 0组和SPO : SO=3 : 1组全鱼粗脂肪显著低于其余组(P < 0.05)。全鱼粗蛋白质含量各组之间差异不显著(P>0.05)。SPO : SO=3 : 1组全鱼粗灰分含量显著高于其余组(P < 0.05)。SPO : SO=5 : 0组肌肉粗脂肪含量显著低于其余组(P < 0.05)。肌肉粗蛋白质和粗灰分含量各组之间无显著差异(P>0.05)。肌肉和肝脏水分含量均在SPO : SO=3 : 1组出现最小值。肝脏粗脂肪含量在SPO : SO=5 : 0组、SPO : SO=3 : 1组和SPO : SO=1 : 1组之间差异不显著(P>0.05)，但三者均显著低于SPO : SO=1 : 3组和SPO : SO=0 : 5组(P < 0.05)。

表 5 不同SPO与SO组合对吉富罗非鱼全鱼、肌肉和肝脏常规营养成分的影响 Table 5 Effects of different combinations of silkworm oil and soybean oil on normal nutritional components of whole fish muscle and liver of GIFT

%
项目Items	组别Groups
项目Items	SPO:SO=5:0	SPO:SO=3:1	SPO:SO=1:1	SPO:SO=1:3	SPO:SO=0:5
全鱼Whole body
水分Moisture	71.66±0.93^b	71.58±1.92^b	69.64±1.11^a	70.40±1.30^ab	70.24±0.74^ab
粗脂肪Crude lipid	26.86±1.29^a	27.84±0.72^a	29.66±0.53^b	30.16±0.62^b	29.63±0.65^b
粗蛋白质Crude protein	58.36±1.31	58.53±0.60	58.17±1.68	57.63±0.34	58.68±1.06
粗灰分Ash	13.25±0.25^b	13.87±0.29^c	12.95±0.05^ab	12.84±0.10^a	12.65±0.17^a
肌肉Muscle
水分Moisture	77.60±0.21^c	76.35±0.62^a	76.93±0.42^abc	77.08±0.17^bc	76.57±0.18^ab
粗脂肪Crude lipid	2.79±0.14^a	3.83±0.13^b	3.83±0.16^b	3.90±0.11^b	4.16±0.16^b
粗蛋白质Crude protein	89.54±0.31	88.29±0.19	88.81±0.14	88.96±0.13	89.84±0.16
粗灰分Ash	5.98±0.04	5.89±0.12	6.01±0.03	5.94±0.04	5.97±0.10
肝脏Liver
水分Moisture	70.37±0.47^c	67.42±1.19^a	69.21±0.43^bc	67.21±0.26^a	67.91±1.01^ab
粗脂肪Crude lipid	28.35±0.44^a	28.58±0.70^a	28.77±0.86^a	32.25±0.72^b	31.27±0.75^b
除水分外，其他指标均为干物质基础。 All indexes were based on dry matter except moisture.

2.4 不同SPO与SO组合对吉富罗非鱼肌肉脂肪酸组成的影响

由表 6可知，吉富罗非鱼肌肉脂肪酸组成中饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)、α-亚麻酸和高不饱和脂肪酸(HUFA)含量随SPO比例的下降而逐渐降低，SPO : SO=5 : 0组和SPO : SO=3 : 1显著高于其余组(P < 0.05)，SPO : SO=0 : 5组显著低于其余组(P < 0.05)。亚油酸、多不饱和脂肪酸(PUFA)含量随SPO比例的下降而逐渐上升，SPO : SO=1 : 3组和SPO : SO=0 : 5组显著高于其余组(P < 0.05)。此外，随着SPO比例的下降，n3/n6值逐渐下降，SPO : SO=5 : 0组和SPO : SO=3 : 1组显著高于其余组(P < 0.05)，SPO : SO=1 : 1组显著高于SPO : SO=1 : 3组和SPO : SO=0 : 5组(P < 0.05)。将各组肌肉脂肪酸组成(Y_i)与对应饲料脂肪酸组成(X_i)进行回归分析和相关性分析，发现罗非鱼肌肉脂肪酸组成与饲料脂肪酸组成存在极显著线性相关关系(P < 0.01)，详见表 7。

表 6 不同SPO与SO组合对吉富罗非鱼肌肉脂肪酸组成的影响 Table 6 Effects of different combinations of silkworm oil and soybean oil on muscle fatty acid composition of GIFT

%
脂肪酸Fatty acids	组别Groups
脂肪酸Fatty acids	SPO:SO=5:0	SPO:SO=3:1	SPO:SO=1:1	SPO:SO=1:3	SPO:SO=0:5
C14:0	1.55±0.03^c	1.50±0.03^b	1.37±0.12^b	1.35±0.05^ab	1.19±0.01^a
C16:0	19.15±0.26^a	19.14±0.89^a	16.86±0.83^a	16.76±0.86^a	15.59±0.32^a
C18:0	7.04±0.01^d	6.61±0.03^c	6.29±0.08^b	6.10±0.20^a	5.94±0.01^a
C24:0	4.57±0.05^e	4.42±0.02^d	3.59±0.04^c	3.30±0.02^b	3.16±0.03^a
SFA	32.31±0.33^c	31.67±0.99^c	28.11±0.88^b	27.51±1.10^b	25.88±0.90^a
C16:1n-7	3.38±0.04^b	3.32±0.06^b	3.22±0.56^ab	2.72±0.06^a	2.66±0.37^a
C18:1n-9	25.80±0.16^c	25.53±0.74^c	22.57±0.69^b	21.63±0.25^b	19.23±0.51^a
C24:1n-9	1.28±0.01^c	1.21±0.08^c	1.20±0.01^c	0.83±0.01^b	0.65±0.01^a
MUFA	30.46±1.36^c	30.06±1.74^c	26.99±1.56^b	25.18±1.02^b	22.54±1.23^a
C18:2n-6	13.76±0.19^a	14.87±0.19^b	17.13±0.64^c	21.25±0.33^d	21.85±1.01^d
C18:3n-3	7.50±0.01^d	7.02±0.05^c	6.60±0.09^b	6.56±0.20^b	5.96±0.01^a
C18:3n-6	2.71±0.09^a	3.16±0.09^b	3.29±0.08^b	3.62±0.06^c	5.79±0.05^d
C20:4n-6	7.50±0.19^d	7.45±0.20^cd	7.11±0.19^bc	6.89±0.20^b	6.34±0.15^a
C20:5n-3	3.18±0.07^d	3.08±0.06^cd	3.00±0.09^bc	2.90±0.05^ab	2.83±0.08^a
C22:6n-3	4.69±0.18^d	4.39±0.11^c	4.00±0.16^b	3.90±0.19^ab	3.65±0.12^a
PUFA	39.34±1.29^a	39.97±1.59^a	41.13±1.39^a	45.12±1.63^b	46.42±1.52^b
HUFA	15.37±0.23^d	14.92±0.24^c	14.11±0.20^b	13.69±0.26^b	12.82±0.28^a
n3	15.37±0.13^c	14.49±0.25^bc	13.60±0.39^ab	13.36±0.35^ab	12.44±0.33^a
n6	23.97±0.98^a	25.48±1.03^a	27.53±1.01^b	31.76±0.89^c	33.98±0.90^d
n3/n6	0.64±0.02^c	0.57±0.02^c	0.49±0.02^b	0.42±0.01^a	0.37±0.01^a

表 6 不同SPO与SO组合对吉富罗非鱼肌肉脂肪酸组成的影响 Table 6 Effects of different combinations of silkworm oil and soybean oil on muscle fatty acid composition of GIFT

表 7 肌肉脂肪酸组成与饲料脂肪酸组成的回归分析和相关性分析 Table 7 Regression and correlation analysis of fatty acid composition between muscle and diet

2.5 不同SPO与SO组合对吉富罗非鱼血清和肝脏脂质代谢的影响

由表 8可知，SPO : SO=5 : 0组血清TG含量显著低于其余组(P < 0.05)。血清TC含量各组之间差异不显著(P>0.05)。SPO : SO=1 : 1组血清HDL-C含量显著高于其余组(P < 0.05)。混合脂肪源组(SPO : SO=3 : 1组、SPO : SO=1 : 1组和SPO : SO=1 : 3组)肝脏CPT-Ⅰ和血清AKP活性均显著高于单一脂肪源组(SPO : SO=5 : 0组和SPO : SO=0 : 5组)(P < 0.05)。SPO : SO=3 : 1组血清LDL-C含量和肝脏ACC活性显著低于其余组(P < 0.05)。血清GLU含量以SPO : SO=5 : 0组最低，但与除SPO : SO=0 : 5组外的其余组差异不显著(P>0.05)。血清GPT活性以SPO : SO=3 : 1组最低，但与SPO : SO=5 : 0组和SPO : SO=1 : 1组差异不显著(P>0.05)。血清T-SOD活性以SPO : SO=0 : 5组最高，但与除SPO : SO=5 : 0组外的其余组差异不显著(P>0.05)。血清MDA含量表现为SPO : SO=5 : 0组显著低于其余组(P < 0.05)，SPO : SO=3 : 1组和SPO : SO=0 : 5组显著低于SPO : SO=1 : 1组和SPO : SO=1 : 3组(P < 0.05)。

表 8 不同SPO与SO组合对吉富罗非鱼血清和肝脏脂质代谢的影响 Table 8 Effects of different combinations of silkworm oil and soybean oil on lipid metabolism in serum and liver of GIFT

项目Items	组别Groups
项目Items	SPO:SO=5:0	SPO:SO=3:1	SPO:SO=1:1	SPO:SO=1:3	SPO:SO=0:5
血清
甘油三酯TG/(mmol/L)	0.72±0.01^a	0.80±0.02^b	0.85±0.01^c	0.91±0.02^d	0.96±0.05^e
总胆固醇TC/(mmol/L)	3.49±0.11	3.46±0.09	3.40±0.08	3.45±0.05	3.41±0.04
高密度脂蛋白胆固醇HDL-C/(mmol/L)	3.08±0.13^a	3.18±0.09^a	3.49±0.16^b	3.16±0.05^a	3.28±0.11^a
低密度脂蛋白胆固醇LDL-C/(mmol/L)	0.29±0.02^c	0.19±0.01^a	0.23±0.01^b	0.24±0.02^b	0.23±0.01^b
葡萄糖GLU/(mmol/L)	4.80±0.16^a	4.88±0.17^a	5.03±0.12^ab	5.10±0.15^ab	5.22±0.19^b
谷丙转氨酶GPT/(U/L)	5.89±0.23^a	5.78±0.24^a	6.15±0.20^a	8.55±0.26^b	10.17±0.28^c
总超氧化物歧化酶T-SOD/(U/mL)	45.19±2.21^a	46.62±2.70^ab	47.98±0.59^ab	48.91±1.17^ab	50.48±2.58^b
丙二醛MDA/(nmol/mL)	4.14±0.13^a	5.54±0.20^b	7.21±0.22^c	6.91±0.21^c	5.52±0.20^b
碱性磷酸酶AKP/(U/L)	4.74±0.64^a	6.12±0.25^b	6.11±0.29^b	6.12±0.48^b	4.99±0.41^a
肝脏Liver
肉碱酯酰转移酶-Ⅰ CPT-Ⅰ/(pg/mL)	245.66±9.08^a	269.41±4.32^b	271.03±6.20^b	265.25±4.19^b	251.64±9.33^a
乙酰辅酶A羧化酶ACC/(U/mL)	21.71±0.69^b	19.58±0.81^a	22.30±0.83^b	24.58±0.75^c	35.94±0.90^d

2.6 饲料中n3/n6值与部分指标的二次回归分析

以饲料中n3/n6值为自变量(X)，分别与吉富罗非鱼WGR(Y₁)、PER(Y₂)进行回归分析，结果表明它们之间呈二次回归关系，得到的回归方程为：Y₁=-21.763X²+48.161X+339.5(R²=0.815 5)；Y₂=-0.367 1X²+0.763 7X+13.645(R²=0.977 8)。根据回归方程，WGR和PER达到极值时，n3/n6值分别为1.106 4和1.040 2。

3 讨论 3.1 不同SPO与SO组合对吉富罗非鱼生长性能的影响

本试验旨在研究SPO与SO以不同配比组合后在吉富罗非鱼饲料中的可行性，为避免基础原料所含油脂对试验结果的干扰，故在配方设计时均选用低油脂原料。本试验结果表明，适宜配比的混合脂肪源组吉富罗非鱼的生长性能优于单一脂肪源组，且WGR、SGR、PER、FCR均在SPO : SO=3 : 1组达到最优，说明吉富罗非鱼饲料中脂肪源的混合使用不但使鱼体表现出比单一脂肪源更好的生长效果，且提高了鱼体对饲料的转化率和对蛋白质的利用效率，有利于节约饲料成本。这与王煜恒等^[12]对异育银鲫(Carassius auratus gibelio)和刘玮等^[13]对草鱼(Ctenopharyngodon idella)稚鱼的研究结果一致。随着混合脂肪源中SO比例的升高，饲料中的亚油酸含量逐渐上升，α-亚麻酸含量逐渐下降。根据饲料粗脂肪含量和饲料脂肪酸组成计算后发现，吉富罗非鱼饲料中油脂添加水平为5.00%时，SPO : SO=3 : 1组饲料即可满足吉富罗非鱼对亚油酸的需求(1.02%~2.66%)^[14]，同时，本试验结果进一步验证了α-亚麻酸对吉富罗非鱼生长的加成作用，这与Li等^[15]在罗非鱼上的研究结果一致。此外，白富瑾等^[5]的研究发现，饲料中高含量的α-亚麻酸对吉富罗非鱼生长发育无显著影响，说明饲料中α-亚麻酸含量在一定范围内对鱼体生长有加成作用，含量过高则可能导致饲料中n3/n6值失衡，影响吉富罗非鱼正常的脂质代谢^[16]。因此，吉富罗非鱼饲料中α-亚麻酸的最适含量还有待深入研究。

图 1 饲料中n3/n6值与吉富罗非鱼增重率的关系 Fig. 1 Relationship between dietary n3/n6 ratio and WGR of GIFT

图 2 饲料中n3/n6值与吉富罗非鱼蛋白质效率的关系 Fig. 2 Relationship between dietary n3/n6 ratio and PER of GIFT

3.2 不同SPO与SO组合对吉富罗非鱼体组成的影响

本试验发现，以SPO为单一脂肪源会降低全鱼、肌肉、肝脏粗脂肪含量，说明SPO具有降低鱼体脂肪沉积的作用，这与Ng等^[17]和Chen等^[18]的研究结果一致。此外，以SO为单一脂肪源时，肌肉、肝脏粗脂肪含量均较高，尤其是肌肉中，说明饲料中低含量的亚油酸可以降低脂肪沉积，而过高则会使鱼体出现脂肪蓄积等负面影响，且主要以在肌肉中沉积为主。肌肉粗脂肪含量变化比肝脏更加迅速，这与田娟等^[14]研究结果一致，表明在脂质代谢调节方面，肝脏比肌肉能力更强，对亚油酸的耐受能力和利用效率更高。

此外，本试验还发现，SPO与SO以适宜比例组合可显著提高全鱼粗灰分含量及干物质、蛋白质和灰分的沉积率，其中，全鱼粗灰分含量、灰分沉积率均在SPO : SO=3 : 1组出现最大值，干物质和蛋白质沉积率均在SPO : SO=1 : 1组出现最大值。上述结果表明SPO与SO以适宜比例组合有利于吉富罗非鱼对矿物质的积累，并会提高鱼体对饲料中营养素的沉积效率。根据上述结果得出SPO与SO的适宜组合为SPO : SO=3 : 1~1 : 1，即以SPO占混合脂肪源的50%~75%为宜。

3.3 不同SPO与SO组合对吉富罗非鱼肌肉脂肪酸组成的影响

鱼类从饲料中获取油脂，经同化作用将其变为自身脂肪沉积下来。饲料中添加不同脂肪源会影响动物对脂肪的消化、吸收和利用，且对鱼体脂肪酸组成也有一定影响。本试验中，随着饲料中SPO比例的下降和SO比例的上升，吉富罗非鱼肌肉中各脂肪酸含量和饲料中脂肪酸含量呈同步变化，两者呈极显著相关关系，相关系数为0.864~0.942，且混合脂肪源组相关性均高于单一脂肪源组，以SPO : SO=1 : 1组最高，表明吉富罗非鱼肌肉中脂肪酸组成很大程度上受饲料中脂肪酸组成的影响^[19-20]，且SPO和SO组合添加更有利于平衡饲料中脂肪酸组成。同时，随着饲料中SPO比例的下降和SO比例的上升，肌肉中C20 : 5n-3(EPA)和C22 : 6n-3(DHA)含量逐渐下降，且EPA含量低于DHA含量，表明吉富罗非鱼体内DHA比EPA的累积能力更强^[21]。因为DHA的△4双键需要过氧化物酶体的氧化去除，因此，DHA在线粒体中很少被氧化，从而在组织中得以保留，但其与饲料DHA的含量无关^[22]。

此外，现今人类膳食中n6 PUFA含量普遍过高，而n3 PUFA却严重缺乏，而高n3/n6值的鱼肉对人体更加健康^[23]。本试验中，随着SPO比例的下降，吉富罗非鱼肌肉中n3/n6值逐渐下降，SPO : SO=5 : 0组和SPO : SO=3 : 1组显著高于其他组，SPO : SO=1 : 1组显著高于SPO : SO=1 : 3组和SPO : SO=0 : 5组，因此，SPO和SO组合作为吉富罗非鱼脂肪源时，SPO占混合脂肪源的比例应以不低于50%为宜。

3.4 不同SPO与SO组合对吉富罗非鱼血清和肝脏脂质代谢的影响

鱼类血清和肝脏指标是反映机体健康状态的重要生理指标，易受饲料中脂肪含量的影响。脂肪在鱼体内以脂蛋白为载体，通过HDL-C和LDL-C等形式在肝脏和血液中运输。若饲料中脂肪含量过高或运输过程受阻，就会增加鱼体脂质代谢负担。同时，饲料中营养因子会损伤鱼体肝脏的正常生理功能^[24]，使肝细胞内脂质代谢的动态平衡失调，出现高脂血症，引发营养性脂肪肝。白富瑾等^[5]研究发现，SPO富含α-亚麻酸，作为鱼类饲料脂肪源可有效降低鱼体血糖、体脂和血脂，保护鱼体肝脏健康，但会使鱼类生长速度缓慢，与富含亚油酸的SO混合使用，更能满足鱼类的生长需求。

相关研究表明，不同亚油酸和α-亚麻酸比例能够影响鱼类的脂质代谢^[25]。本试验中，随着SPO比例的下降和SO比例的升高，吉富罗非鱼血清TG、GLU含量不断升高；血清HDL-C含量与肝脏CPT-Ⅰ活性均在SPO : SO=1 : 1组出现最大值；血清LDL-C含量、肝脏ACC活性和血清GPT活性均在SPO : SO=3 : 1组有最小值；混合脂肪源组血清MDA含量和AKP活性均高于单一脂肪源组。上述结果表明高含量的α-亚麻酸和亚油酸会给吉富罗非鱼脂质代谢带来压力，易引起鱼体脂质过氧化和血管动脉硬化，而适宜比例的α-亚麻酸和亚油酸水平会加速甘油三酯的分解并减缓其合成，有效降低鱼体对脂肪的沉积效率，从而降低鱼体脂肪含量；此外，还有利于维护吉富罗非鱼肝脏健康。

4 结论

① SPO和SO组合作为吉富罗非鱼脂肪源时，在油脂总添加水平为5.00%的条件下，SPO与SO的适宜组合为SPO : SO=3 : 1~1 : 1，即以SPO占混合脂肪源的50%~75%为宜。

② 同SPO相比，SPO与SO以适宜比例组合可提高吉富罗非鱼的生长性能和饲料转化率，促进鱼体对营养素的沉积。

③ 同SO相比，SPO与SO以适宜比例组合可降低吉富罗非鱼全鱼和肝脏粗脂肪含量，增加肌肉中α-亚麻酸和HUFA含量，并可维护鱼体肝脏健康。

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