2. 扬州大学农业科技发展研究院, 扬州 225009
2. Institutes of Agricultural Science and Technology Development, Yangzhou 225009, China
维生素A又称视黄醇，是一种脂溶性的醇类物质，有多种分子形式，是动物机体生命活动中一种必需的维生素。维生素A在动物生产中应用较多，具有广泛的生理作用，除了维持视觉功能外，对维持动物正常的生长发育、繁殖性能和免疫功能也具有重要作用。随着研究的深入，人们发现维生素A还具有脂质过氧化和清除自由基的作用。有关研究发现，维生素A的抗氧化作用与其含有多烯烃疏水链有关，多烯烃疏水链能清除氧自由基、氢自由基、结合和稳定过氧化氢结构，在体外试验中是一种有效的抗氧化和清除自由基物质，还可以提高机体免疫力[1-2]。动物体缺乏维生素A，易患夜盲症，影响消化道和呼吸道等上皮组织的功能，从而对动物的繁殖性能和消化机能等产生不利的影响，导致抵抗力的降低，而摄取过量的维生素A则会引起中毒。NRC(1994)建议种鹅维生素A营养需要量为4 000 IU/kg，但一般研究者认为这个需要量是动物体最低需要量，并不能达到最佳的抗氧化状态。目前，维生素A对蛋品质和抗氧化性能的研究主要集中在蛋鸡和蛋鸭上，在种鹅上的研究还是空白。因此，本试验旨在研究饲粮中添加维生素A对扬州鹅种蛋品质和抗氧化性能的影响，明确其对蛋品质和抗氧化性能较为理想的添加水平，为种鹅饲粮配制提供参考。
1 材料与方法 1.1 试验设计试验采用单因子完全随机分组设计。选取180日龄、体重相近的健康扬州鹅种鹅90只，随机分成5组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组)，每组15只母鹅、3只公鹅。Ⅰ组为对照组，饲喂基础饲粮；Ⅱ~Ⅴ组为试验组，分别在基础饲粮中添加4 000、8 000、12 000、16 000 IU/kg的维生素A。试验期为28周。试验全期，Ⅰ~Ⅴ组的产蛋率分别为30.75%、31.01%、34.69%、36.21%和36.54%。
1.2 试验饲粮试验采用玉米-豆粕型基础饲粮，预混料由扬州双扬生物科技有限公司生产，其中不添加维生素A。试验饲粮中添加的维生素A以维生素A醋酸酯(由帝斯曼维生素有限公司生产)形式添加，有效成分含量为5×105 IU/g。基础饲粮组成及营养水平见表 1。
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表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) |
试验种鹅自由饮水和采食，地面垫料平养，全期舍饲，每日12 h光照。
1.4 测定指标和方法 1.4.1 蛋品质指标于产蛋高峰期每组收集10枚种蛋用于测定蛋重、蛋白高度、哈氏单位、蛋壳厚度、蛋黄颜色、蛋形指数、蛋比重、蛋黄比例、蛋壳比例、蛋白比例等指标。
蛋重、蛋白高度、哈氏单位、蛋壳厚度：用多功能蛋品质分析仪(南京航大超控科技有限公司)测定。蛋黄颜色：用罗氏比色扇进行测定。蛋黄比例：从全蛋中取出蛋黄进行称重，蛋黄重与全蛋重的比值即为蛋黄比例。蛋壳比例：分离蛋壳，并清理干净，称出其重量，蛋壳重与全蛋重的比值即为蛋壳比例。蛋形指数：鹅蛋的纵径与横径的比值。蛋比重：用盐水漂浮法测定。
1.4.2 种蛋抗氧化指标于产蛋高峰期每组收集6枚种蛋用于测定蛋黄中的超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量及总抗氧化能力(T-AOC)，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
SOD活性、GSH含量、T-AOC测定：准确称取蛋黄重量，按质量体积比1 : 4的比例加入生理盐水，充分抽提3 min，3 500 r/min离心10 min，取上清测定[3]。MDA含量测定：准确称取蛋黄重量，按质量体积比1 : 9的比例加入无水乙醇，充分抽提3 min，3 500 r/min离心10 min，取上清测定[3]。
1.5 数据分析试验数据以“平均值±标准差”表示。数据采用SPSS 19.0统计软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，采用Duncan氏法进行多重比较。以P < 0.05为差异显著性判断标准，以P < 0.01为差异极显著性判断标准。
2 结果和分析 2.1 饲粮添加维生素A对鹅蛋品质的影响由表 2可知，各组之间蛋重和蛋白高度无显著差异(P > 0.05)。试验组哈氏单位均极显著高于对照组(P < 0.01)，试验组之间无显著差异(P > 0.05)。12 000 IU/kg添加组蛋壳厚度极显著高于对照组(P < 0.01)，且显著高于8 000和16 000 IU/kg添加组(P < 0.05)，4 000 IU/kg添加组显著高于对照组(P < 0.05)，4 000、8 000和16 000 IU/kg添加组之间无显著差异(P > 0.05)。4 000和12 000 IU/kg添加组蛋黄颜色极显著高于对照组(P < 0.01)，8 000 IU/kg添加组显著高于对照组(P < 0.05)，试验组之间无显著差异(P > 0.05)。各组之间蛋形指数无显著差异(P > 0.05)。试验组种蛋比重显著高于对照组(P < 0.05)，且12 000和16 000 IU/kg添加组极显著提高(P < 0.01)。
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表 2 饲粮添加维生素A对鹅蛋品质的影响 Table 2 Effects of dietary vitamin A on goose egg quality |
由表 3可知，4 000和8 000 IU/kg添加组蛋黄比例显著高于对照组(P < 0.05)，且8 000 IU/kg添加组极显著提高(P < 0.01)，12 000和16 000 IU/kg添加组和对照组相比无显著差异(P > 0.05)，但有提高的趋势(P=0.058，P=0.066)，试验组之间无显著差异(P > 0.05)。各组之间蛋壳比例和蛋白比例无显著差异(P > 0.05)。
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表 3 饲粮添加维生素A对鹅蛋主要组成部分的影响 Table 3 Effects of dietary vitamin A on main components of goose eggs |
由表 4可知，4 000、8 000和12 000 IU/kg添加组蛋黄SOD活性极显著高于对照组(P < 0.01)，8 000和12 000 IU/kg添加组显著高于16 000 IU/kg添加组(P < 0.05)，并且12 000和16 000 IU/kg添加组之间差异极显著(P < 0.01)，对照组和16 000 IU/kg添加组之间无显著差异(P > 0.05)。4 000和8 000 IU/kg添加组蛋黄MDA含量显著低于对照组(P < 0.05)，对照组、12 000和16 000 IU/kg添加组间无显著差异(P > 0.05)，但12 000 IU/kg添加组与对照组相比有降低的趋势(P=0.084)，各试验组之间差异不显著(P > 0.05)。12 000 IU/kg添加组蛋黄T-AOC显著高于对照组(P < 0.05)，其余各组间无显著差异(P > 0.05)，但4 000和8 000 IU/kg添加组与对照组相比有升高的趋势(P=0.087，P=0.051)。8 000和12 000 IU/kg添加组蛋黄GSH含量极显著高于对照组、4 000和16 000 IU/kg添加组(P < 0.01)。
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表 4 饲粮添加维生素A对鹅蛋蛋黄抗氧化指标的影响 Table 4 Effects of dietary vitamin A on yolk antioxidant indexes of goose eggs |
蛋品质是体现家禽生产性能好坏的重要指标，深受生产者和消费者的关注。蛋品质与饲料营养成分等密切相关，在种禽场实际生产中能直接影响后代雏禽的生长发育。蛋白高度、哈氏单位与禽蛋新鲜程度呈正比，张春善等[4]研究表明，蛋鸡饲粮中添加8 000 IU/kg的维生素A能显著提高哈氏单位。崔桂山等[5]研究表明，蛋鸡饲粮中添加不同水平的维生素A对鸡蛋的蛋白高度无显著影响。本试验结果研究发现，维生素A能显著提高鹅蛋哈氏单位，保证了种鹅蛋的新鲜度，对蛋白高度无显著影响，与前人研究结果一致。
蛋黄颜色是评价禽蛋品质的重要感官指标之一，蛋黄颜色等级越高，证明蛋品质越好，蛋黄颜色主要受健康状况和饲粮中色素含量的影响。沈洪民等[6]在绍兴鸭饲粮中添加不同水平的维生素A发现，12 000 IU/kg组蛋黄颜色显著高于9 000 IU/kg组。本试验研究结果发现，饲粮中添加4 000~12 000 IU/kg维生素A能显著提高鹅蛋蛋黄颜色等级，说明维生素A中所含的色素被吸收沉积在蛋黄里，而添加16 000 IU/kg维生素A时，蛋黄颜色没有显著提高，其具体原因还有待进一步研究。
蛋壳厚度是衡量蛋壳质量的重要指标，为了减少蛋在产出后收集及运输过程中造成的破损，要求蛋壳质量高，蛋壳厚度对产蛋量和孵化率都会有影响[7]。蛋形指数主要取决于输卵管峡部的构造和管壁生理状态，与鹅品种和年龄也有一定的关系。蛋比重与禽蛋的新鲜程度有关。张春善等[4]研究表明，蛋鸡饲粮中添加8 000 IU/kg的维生素A能显著提高蛋壳厚度。崔桂山等[5]研究表明，在8 000 IU/kg维生素A的蛋鸡饲粮基础上添加维生素A，能有效避免低水平的维生素A对上皮组织的影响，改善蛋壳质量。Jones等[8]研究表明，蛋壳厚度与沙门氏菌的渗透作用具有相关性，蛋壳过薄，更易受到细菌感染。邵元库等[9]研究表明，蛋鸡饲粮中添加维生素A对蛋形指数无显著影响。本试验结果发现，虽然对蛋形指数无显著影响，但能显著提高蛋壳厚度和蛋比重，说明种鹅饲粮中添加12 000 IU/kg维生素A能更好地维持生殖器官上皮组织的完整性，保证鹅蛋获得较好的蛋壳质量。
3.2 饲粮添加维生素A对种鹅蛋主要组成部分的影响蛋黄中营养丰富，蛋黄比例是衡量禽蛋营养含量的一项重要指标，蛋黄比例越大，表明禽蛋的营养水平越高，蛋品质越好[10-11]。本试验研究发现，种鹅饲粮中维生素A能显著影响蛋黄比例，饲粮中添加8 000 IU/kg维生素A效果最好，说明饲粮中添加适量的维生素A能增强种鹅吸收营养物质的能力，提高鹅蛋营养水平，而种蛋营养水平的提高同样也能获得较好的孵化效果。
3.3 饲粮添加维生素A对种鹅蛋抗氧化指标的影响大量研究已经证实维生素A具有抗氧化能力，由于维生素A化学性质活泼，极易发生氧化而阻止机体内脂质过氧化反应的发生，其中所含有的双烯共轭键能有效地清除单线态氧、羟自由基、脂质过氧化自由基等物质，从而提高机体抗氧化力[12-14]。
SOD是一种可以有效清除超氧化物阴离子自由基的抗氧化酶，能够催化超氧阴离子自由基发生歧化反应，减轻自由基链式反应对机体的损害。MDA是脂质过氧化链式终止小分子产物，其含量能反映自由基产生情况和机体内脂质过氧化的程度。MDA常与SOD的测定相互配合，SOD活性间接反映了机体清除自由基的能力，而MDA含量又间接反映了机体细胞受自由基攻击的严重程度。孙淑洁等[1]研究表明，在青农灰鹅饲粮中添加一定水平的维生素A可显著提高血清和肝脏中SOD活性，显著降低血清和肝脏中MDA的含量。洪平等[15]在黄羽肉鸡饲粮中添加3 000 IU/kg维生素A能显著提高试验鸡血清和肝脏的SOD活性，显著降低血清和肝脏中MDA的含量。本试验研究发现，种鹅饲粮中添加适量的维生素A能使蛋黄中SOD活性显著提高，MDA含量显著降低，以添加8 000~12 000 IU/kg维生素A为最佳，提高种蛋抗氧化性能。
T-AOC是衡量抗氧化系统功能状况的综合性指标，是体内抗氧化酶共同作用的结果，可反映机体对外界刺激的代偿能力及机体自由基代谢的状态。Sarada等[16]研究发现，维生素A能提高应激状态下大鼠机体T-AOC。王丹[17]在朗德鹅饲粮中添加不同水平的维生素A发现，添加8 000~15 000 IU/kg时试验组的肝脏T-AOC均显著高于对照组和添加30 000 IU/kg组。本试验研究发现，种鹅饲粮中添加12 000 IU/kg维生素A时效果最好。由此说明维生素A缺乏和过量不能发挥其最佳的抗氧化能力，缺乏时不利于体内各种抗氧化酶发挥其作用，过量时，也可能抑制机体内各种抗氧化酶的活性，使机体的抗氧化能力减弱。
GSH是重要的水溶性抗氧化物质之一，其含量增加是机体抗氧化性增强的标志，而机体内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)能够催化GSH变成氧化型，可使过氧化物及自由基还原成水或者羟基化合物，防止生物大分子发生氧化应激反应，保护生物大分子的结构和功能。本试验结果研究发现，种鹅饲粮中添加8 000~12 000 IU/kg的维生素A能显著提高种蛋蛋黄中GSH的含量，可以证明维生素A通过提高蛋黄中GSH含量，抑制自由基对种蛋脂肪和蛋白质大分子的攻击，减轻种蛋的氧化损伤。
4 结论种鹅饲粮中添加适量的维生素A能提高蛋品质，提高蛋黄抗氧化能力，降低脂质过氧化产物，提高种蛋的抗氧化性能。种鹅饲粮中维生素A适宜添加水平为8 000~12 000 IU/kg。
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