梅花鹿(Cervus nippon)是我国特有的一种具有较高经济价值的鹿科动物，所产鹿茸是其经济价值的主要体现。《本草纲目》记载，鹿茸具有生精补髓、养血益阳、强健筋骨、治一切虚损虚痢的功效，是名贵的中药材。因此，从20世纪50年代我国便建立了以鹿茸为主的养鹿业。至今，全国梅花鹿存栏量约为120万头，90%以小规模养殖方式集中在我国东北地区^[1]。随着畜牧业的发展和结构的不断调整，我国传统的粗放养殖向精准化饲养的转变已成为必然。在实际饲养中，受养殖场地规模等限制，越冬期(10月份至次年3月份)梅花鹿多限饲控制体重，减少因膘情过肥、精力旺盛而冲击圈舍的情况。Muir等^[2]和Park等^[3]研究发现生茸期(5—8月份)梅花鹿的体重与产茸量呈正相关。因此，生茸前期(3—5月份)成为梅花鹿越冬期与生茸期间重要节点，此时期梅花鹿的体重增长将最终影响鹿茸产量。粗饲料占反刍动物饲粮的40%~60%，经瘤胃发酵降解后会产生挥发性脂肪酸(VFA)、二氧化碳(CO₂)、氨态氮(NH₃-N)等，供应动物的能量及营养需要^[4]。因纬度原因，东北地区冬春季节寒冷且漫长，青绿饲料严重缺乏，在生茸前期优质粗饲料的缺乏严重掣肘梅花鹿饲养规模的提高。

东北梅花鹿饲养中多以农副秸秆或青贮作为冬春季节的主要粗饲料。因干秸秆适口性差、消化率低，长期饲喂这样劣质的粗饲料会导致反刍动物瘤胃能量吸收及精饲料利用效率下降，从而降低生产性能^[5]；青贮对于制作原料有明确要求，适宜制作的时间较短且与农作物收获时间相悖，导致多数种养结合的中小养殖户无法兼顾。黄贮饲料对原料的要求较少，全年均可制作，仅需在制作过程中添加适宜的水和少量发酵促进剂，其营养水平和适口性较风干秸秆均显著提高^[6]。王星凌等^[7]、殷茂军等^[8]、曹俊伟等^[9]和赵红波等^[10]在育肥肉牛、肉羊和奶牛等动物上的研究证明玉米秸黄贮作为粗饲料在动物育肥或产乳性能上略逊于玉米秸青贮，但优于干秸秆。饲粮纤维水平改变对反刍动物瘤胃发酵类型有显著影响^[11]，瘤胃中生成的挥发性脂肪酸可被动物直接吸收利用，挥发性脂肪酸产生的能量占反刍动物摄入的可消化能的70%~80%^[12]。梅花鹿按照瘤胃消化特性介于嫩食(browsers)与粗食(grazers)之间^[13]，与粗食者(牛等)相比，其瘤胃乳头小，粗饲料消化能力低，耐粗饲效果差。因此，梅花鹿以玉米秸黄贮作为主要粗饲料能否获得与牛、羊等相似的生长性能需试验证明。本试验以生茸前期梅花鹿为试验对象，研究玉米秸青贮、玉米秸黄贮对梅花鹿生长性能、血清生化指标和瘤胃挥发性脂肪酸生成的影响，为玉米秸黄贮作为粗饲料在梅花鹿饲养上的应用提供更多的试验结果和理论依据。

1 材料与方法 1.1 试验设计

选取16只2锯龄、体况良好的成年梅花鹿公鹿，随机分为2组，每组2个重复，每个重复4只，2组之间体重差异不显著(P＞0.05)。2组梅花鹿饲喂相同的精饲料，所饲喂粗饲料分别为玉米秸青贮(Ⅰ组)和玉米秸黄贮(Ⅱ组)。试验用粗饲料采用裹包青贮的方式制作于吉林省吉林市左家镇中国农业科学院特产研究所茸鹿试验基地。试验中使用的玉米秸青贮是于2017年9月收获玉米后收割玉米秸后直接制作，玉米秸黄贮是2017年9月收获玉米后收割玉米秸，经2个月风干后，于2017年11月制作，2种粗饲料均室外贮存至次年。饲养试验在吉林省长春市中国农业科学院特产研究所进行，饲养期为45 d。试验动物饲喂方式及饲喂量参照李忠宽等^[14]，固定每只动物精饲料饲喂量1.5 kg/d，粗饲料饲喂量4 kg/d，每天早晚定时饲喂，先精后粗，自由饮水。精饲料组成及营养水平见表 1。2种粗饲料的营养水平见表 2。

1.2 样品采集

试验第45天，晨饲前麻醉动物，颈静脉采血10 mL，在4 ℃以3 500×g离心10 min，收集上清保存于-80 ℃，用于后续血清生化指标的测定，同时使用胃管抽取瘤胃液5 mL，在4 ℃下以10 000×g离心10 min，收集上清用于瘤胃液挥发性脂肪酸浓度的测定。

1.3 指标测定及方法 1.3.1 生长性能的测定

试验第1、45天晨饲前麻醉动物称重并记录，准确计算平均日增重(ADG)。在试验第20~25天记录其每天的采食量，计算其平均日采食量(ADFI)。根据饲养期内所耗饲粮量和同期增重计算料重比(F/G)。

1.3.2 血清生化指标的测定

血清甘油三酯(triglycerides, TG)、总胆固醇(total cholesterol, TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol, HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol, LDL-C)、葡萄糖(glucose, GLU)、尿素氮(UN)、总蛋白(total proteins, TP)、白蛋白(albumin, ALB)含量以及丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspertate aminotransferase, AST)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase, LDH)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性均使用Beckman AU 480全自动生化分析仪测定。上述指标测定所用试剂盒均购于中生北控生物科技有限公司。血清球蛋白(globulin, GLB)含量以TP与ALB含量的差值表示。

1.3.3 瘤胃液挥发性脂肪酸浓度的测定

瘤胃液挥发性脂肪酸浓度的测定参照Li等^[15]的方法，采用安捷伦6890气相色谱仪测定，主要测定瘤胃液中乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸和总挥发性脂肪酸的浓度，并计算乙丙比(乙酸/丙酸)。

1.4 数据统计与分析

试验数据使用Excel 2013整理后采用SPSS 22.0中的独立样本t检验进行均值的差异显著性检验，以P＜0.05为差异显著标准。

2 结果与分析 2.1 不同粗饲料对生茸前期梅花鹿生长性能的影响

由表 3可知，2组梅花鹿的末重、平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著差异(P＞0.05)。但从数值上看，Ⅱ组的料重比与Ⅰ组相比有升高趋势，而平均日增重则有降低趋势。这说明，生茸前期梅花鹿以玉米秸黄贮为粗饲料来源时，其生长性能虽较玉米秸青贮为粗饲料来源时稍有降低，但并无显著差异。

2.2 不同粗饲料对生茸前期梅花鹿血清生化指标的影响

由表 4可知，Ⅱ组血清GLU含量显著低于Ⅰ组(P＜0.05)，其余各项血清生化指标2组之间差异均不显著(P>0.05)。从数值上看，Ⅱ组的血清AST、ALT、LDH活性与Ⅰ组相比均呈现上升趋势，而ALP活性则表现出下降趋势。上述结果表明，与以玉米秸青贮为粗饲料来源相比，以玉米秸黄贮为粗饲料来源会降低生茸前期梅花鹿血清GLU含量，但对其他血清生化指标无显著影响。

2.3 不同粗饲料对生茸前期梅花鹿瘤胃挥发性脂肪酸生成和发酵类型的影响

由表 5可知，2组梅花鹿在瘤胃液中各项挥发性脂肪酸与总挥发性脂肪酸浓度以及乙丙比方面均无显著差异(P＞0.05)，但Ⅱ组的乙酸、总挥发性脂肪酸浓度和乙丙比较Ⅰ组有上升趋势。上述结果说明，与以玉米秸青贮为粗饲料来源相比，以玉米秸黄贮为粗饲料来源对生茸前期梅花鹿瘤胃挥发性脂肪酸的生成未产生显著影响，对其瘤胃发酵类型也未产生显著影响。

3 讨论 3.1 不同粗饲料对生茸前期梅花鹿生长性能的影响

本试验中玉米秸黄贮组各项生长性能指标与玉米秸青贮组无统计学差异，与王星凌等^[7]和殷茂军等^[8]的研究结果不同，其原因可能是他们在试验中采用了全株玉米青贮作为对照，全株玉米青贮的发酵品质尤其是粗蛋白质及可溶性碳水化合物含量优于玉米秸青贮，而本试验中对照组使用收获玉米后的秸秆制作青贮，因此玉米秸黄贮组与玉米秸青贮组的生长性能并无显著差异。曹俊伟等^[9]和赵红波等^[10]使用玉米秸青贮对比玉米秸黄贮在奶牛生长性能所得结果与本试验结果一致。本试验结果表明，梅花鹿在生茸前期阶段内，以玉米秸黄贮为粗饲料可以获得与以玉米秸青贮为粗饲料相似的生长性能。

但在本试验中，与玉米秸青贮组相比，玉米秸黄贮组的末重和平均日增重均有降低趋势，料重比呈现上升趋势，这说明如果饲喂期继续延长，玉米秸黄贮可能会影响梅花鹿的体重增长。因此，玉米秸黄贮作为粗饲料在梅花鹿上的应用还需进一步延长试验时间以获得更加详实的试验数据。

3.2 不同粗饲料对生茸前期梅花鹿血清生化指标的影响

本试验中玉米秸青贮组血清GLU含量显著高于玉米秸黄贮组。黄健等^[16]研究发现降低饲粮粗蛋白质水平会显著降低梅花鹿血清GLU含量。本试验中玉米秸青贮组粗饲料的粗蛋白质含量高于玉米秸黄贮组，饲粮粗蛋白质水平的提高可以减缓动物饥饿程度，血清GLU含量会随动物饥饿程度的增加而降低^[17]。血清LDH活性则呈现出与GLU含量相反的趋势，原因可能是LDH是机体能量代谢中参与糖酵解的一种重要酶^[18]，玉米秸黄贮组血清LDH活性较高，因此玉米秸黄贮组糖酵解程度高于玉米秸青贮组，导致了玉米秸黄贮组血清GLU含量的下降。

血清ALT和AST活性是反映肝脏功能的关键指标，当肝细胞因炎症、中毒等而受损时，ALT和AST会从肝脏细胞释放到血液中，引起血清ALT和AST活性升高^[19]。本试验中玉米秸黄贮组血清AST、ALT活性均较玉米秸青贮组有所上升，但差异并不显著。目前尚无玉米秸黄贮作为粗饲料对动物肝脏功能影响的相关研究，对比其他梅花鹿相关血清数据^{[16, 19-22]}，本试验中2组梅花鹿血清AST和ALT活性均低于其他研究，证明给生茸前期梅花鹿饲喂玉米秸黄贮虽然血清AST和ALT活性表现出上升的趋势，但对动物的肝脏健康并无负面影响。血液ALP是消化代谢的关键酶，其活性高低可用来反映动物机体的生长速度，提高血液中的ALP活性有利于提高畜禽的生长速度^[23]。张勇等^[24]研究表明血清ALT和AST活性与氨基酸平衡性呈负相关。在饲粮氨基酸失衡的条件下，会导致机体氨基酸合成与代谢增强，生长发育减慢，肝脏负担变重及肝细胞受损，进而引起血清ALT和AST活性升高，ALP活性降低。这与本试验表现出的趋势是相似的，说明玉米秸青贮粗蛋白质的氨基酸组成较玉米秸黄贮更加平衡。

3.3 不同粗饲料对生茸前期梅花鹿瘤胃挥发性脂肪酸生成和发酵类型的影响

本试验中，生茸前期梅花鹿瘤胃液总挥发性脂肪酸浓度远低于其他试验中所测结果^[25-27]，其可能的原因：一是该阶段瘤胃微生物组成或丰度变化导致总挥发性脂肪酸的生成降低^[28]，这需要进一步对该阶段梅花鹿瘤胃微生物组成进行研究确定。二是生茸前期瘤胃能量周转代谢速率加快导致。瘤胃挥发性脂肪酸的吸收是被动的，其吸收程度和速度依赖于瘤胃液与血液中挥发性脂肪酸的浓度差^[29]。生茸前期梅花鹿增重显著，机体对营养与能量的利用加快。瘤胃液pH同样影响挥发性脂肪酸的吸收速度，在pH恒定的情况下，纤维水平也将影响挥发性脂肪酸的吸收速度^[30]。三是瘤胃内容物外流速度加快导致。饲料的组成、加工方式都对瘤胃内容物的外流有显著影响^[31]。结构性碳水化合物含量较高的饲粮会延长瘤胃外排时间^[32]，生茸前期梅花鹿饲粮精粗比与其他时期不同^{[14, 16]}，精饲料比例较高，瘤胃排出速率高，减少了饲粮在瘤胃内的发酵时间，导致挥发性脂肪酸的生成降低^[33]。本试验中，玉米秸黄贮的中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量高于玉米秸青贮，延长了瘤胃排空速度，提高了挥发性脂肪酸的生成，这与李艺^[12]和孙龙生等^[34]的结果是一致的。有研究发现乙酸的生成与饲粮的纤维水平呈正相关^[35]，这与本试验的结果也是一致的。乙酸生成的增多导致乙丙比上升。Blaxter等^[36]研究发现，乙丙比与代谢能的利用呈负相关。熊本海等^[37]研究也发现，瘤胃挥发性脂肪酸中乙酸比例增加会降低代谢能转化为体沉积能的效率，同时丙酸比例与血清中GLU的含量呈正相关，这与本试验中血清GLU含量所得结果也是相符的。本试验中，玉米秸黄贮组乙丙比较玉米秸青贮组有上升趋势，从挥发性脂肪酸对动物吸收利用影响上看，玉米秸黄贮可能会降低动物对代谢能的利用，长期使用可能会降低动物的生长性能，但在生茸前期内，玉米秸黄贮可以短期完全或以一定比例替代玉米秸青贮。在未来的研究中，需要延长试验时间观察玉米秸黄贮对梅花鹿生长性能的影响，同时对梅花鹿瘤胃微生物组成及瘤胃挥发性脂肪酸互作进行研究，为生茸前期总挥发性脂肪酸生成的降低进行更深入的研究。此外，还需对玉米秸黄贮对越冬期梅花鹿生长性能等的影响展开研究，为玉米秸黄贮在梅花鹿上的推广应用积累更多的基础资料。

4 结论

分别以玉米秸青贮、玉米秸黄贮作为粗饲料来源时，生茸前期梅花鹿的生长性能、血清生化指标及瘤胃发酵类型均无显著差异。因此，在东北地区可以加大玉米秸黄贮的制作，既可以提高秸秆资源的利用，又可以减轻农忙季节养殖户压力，同时解决梅花鹿饲养粗饲料缺乏问题。