2. 中国科学院亚热带农业生态研究所, 动物营养生理与代谢过程湖南省重点实验室, 长沙 410125;
3. 山东祥维斯生物科技股份有限公司, 潍坊 261000
2. Hunan Provincial Key Laboratory of Animal Nutrition Physiology and Metabolism Process, Institute of Subtropical Agriculture, Chinese Academy of Sciences, Changsha 410125, China;
3. Shandong Xiangweisi Biotechnology Co., Ltd., Weifang 261000, China
提高母猪繁殖性能是增加养猪业经济效益的有效手段之一[1]。母猪的繁殖性能主要受遗传、营养、管理和环境等诸多因素的影响,其中营养因素尤为重要[2]。采用“母子一体化”营养干预策略,改善胚胎发育窗口期的关键营养素供给,对仔猪胚胎期发育和出生后生长具有深远影响。甜菜碱即三甲基甘氨酸,是长期以来被广泛使用的饲料添加剂。已有的研究表明,在母猪或仔猪饲粮中添加甜菜碱可提高母猪窝产仔数、窝产活仔数、初生窝重[3]和仔猪日增重[4],缩短母猪断奶-发情间隔[5],缓解应激[6],增加血清生长激素(GH)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)含量[7],促进动物生长[8],改善肉质[9]。
目前,国内外关于甜菜碱作为猪和肉鸡等“母子一体化”营养调控的研究报道较多,但是其对我国优良地方猪种的应用研究较少。巴马香猪是我国特有的品质优良的小型猪种之一,具有繁殖力强、抗病能力强和性早熟等特点。但是,目前巴马香猪的饲养管理粗放、繁殖性能较低、生长速度缓慢等[10],限制了巴马香猪的产业化生产。因此,选择恰当的营养调控剂,采用“母子一体化”营养干预策略,对提高巴马香猪繁殖性能和健康水平具有重要意义。本试验旨在研究甜菜碱对巴马香猪繁殖性能的影响,并通过测定初乳成分、血浆代谢物和繁殖激素含量的变化探讨其作用机制,为使用甜菜碱对我国优良地方猪种的“母子一体化”营养干预提供科学依据。
1 材料与方法 1.1 试验设计与饲养管理动物饲养试验于2018年8月至2019年2月在中国科学院亚热带农业生态研究所石门巴马香猪实验基地开展。选取3~7胎次刚配种的巴马香猪40头,随机分为2组,每组20头,单栏饲养,分娩前1周转至产房。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加3.5 kg/t甜菜碱盐酸盐(纯度95%,由山东祥维斯生物科技股份有限公司提供)。母猪配种后开始饲喂妊娠母猪饲粮,妊娠第105天至断奶饲喂泌乳母猪饲粮。
基础饲粮营养水平参照我国《猪饲养标准》(NY/T 65—2004)、预混料参考NRC(2012)母猪营养需求配制,基础饲粮组成及营养水平见表 1。试验期为母猪配种后第3天至分娩后第21天。试验期内,妊娠第1~15天、第16~30天、第31~75天、第76~90天和第91~110天的母猪饲喂量分别为0.8、1.0、1.2、1.5和2.0 kg/(d·头);分娩前1周饲喂量为1.0 kg/(d·头);产后第1~3天自由采食,产后第4~21天饲喂量为2.4 kg/(d·头)。试验期间,对照组母猪返情4头,正常分娩16头;试验组母猪返情4头,流产1头,正常分娩15头。其他饲养管理均按商业养猪场规范进行操作。
分娩当天,记录每窝的产仔数和产活仔数以及仔猪的初生窝重,计算每窝仔猪初生个体均重;哺乳期间,记录每窝仔猪死亡情况,计算死亡率;断奶当天,记录每窝仔猪数和窝重,并计算断奶个体均重和平均日增重。
1.3 母猪初乳成分测定每组随机选取12头母猪,于分娩当天采集初乳,-20 ℃保存。取解冻后的母猪初乳5 mL置于50 mL离心管中,加20 mL生理盐水混合均匀,利用乳品分析仪(FOSS electric,Hilleroed,丹麦)测定初乳中乳脂肪、乳蛋白、乳糖、尿素氮(UN)和去脂干物质的含量。
1.4 母猪血浆代谢物和繁殖激素含量测定分别于母猪妊娠第45、75和105天以及产后第7和21天,每组随机选取10头母猪,前腔静脉采血,肝素抗凝,3 000 r/min离心10 min,分离血浆,-20 ℃保存,用于血浆代谢物和繁殖激素含量测定。根据试剂盒(购于北京利德曼生化股份有限公司)说明,用罗氏Cobas c311全自动生化分析仪测定血浆中总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)和UN的含量以及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)的活性。每组随机选取8头母猪的血浆,利用酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒(购自江苏雨桐生物科技有限公司)测定血浆中催乳素(PRL)、孕酮(PROG)、催卵泡素(FSH)和雌二醇(E2)等繁殖激素的含量。
1.5 数据统计与分析试验数据用Excel 2010初步整理后,采用SPSS 22.0软件进行独立样本t检验,数据以“平均值±标准误”表示,P < 0.05表示差异显著,0.05≤P < 0.10表示有变化趋势。
2 结果 2.1 甜菜碱对母猪繁殖性能的影响由表 2可知,与对照组相比,甜菜碱组仔猪的死亡率降低了0.12%(P < 0.05),断奶仔猪数增加了1.2头(P=0.087)。
由表 3可知,与对照组相比,甜菜碱组初乳中乳蛋白和UN含量分别增加了10.22%和6.63%(P < 0.05)。
由表 4可知,与对照组相比,甜菜碱组妊娠第75天血浆TP含量下降了5.53%(P < 0.05),ALP活性升高了43.9%(P < 0.05);甜菜碱组妊娠第105天血浆TP含量和AST活性分别下降了6.49%和35.32%(P < 0.05),ALP活性升高了34.84%(P=0.073);甜菜碱组产后第7天血浆AST和ALP活性分别升高了56.12%和40.54%(P < 0.05)。
由表 5可知,与对照组相比,甜菜碱组妊娠第45天血浆PRL、PROG、FSH和E2含量分别下降了2.00%、18.73%、31.31%和29.04%(P < 0.05);甜菜碱组妊娠第75天血浆PRL和PROG含量分别下降了42.42%和19.73%(P < 0.05),妊娠第75天血浆E2含量和妊娠第105天血浆FSH含量分别下降了19.41%(P=0.061)和29.04%(P=0.062)。
甜菜碱是一种高活性的甲基供体,可参与机体蛋白质和脂肪代谢,促进动物生长发育[11];作为渗透调节剂可维持肠道健康和提高机体免疫功能,同时对动物具有诱食和抗应激等作用[12]。因此,探讨甜菜碱在“母子一体化”调控中的作用具有重要意义。本试验中,饲粮添加3.5 kg/t甜菜碱盐酸盐可显著降低仔猪死亡率,提高断奶仔猪数,提示甜菜碱可在一定程度上提高母猪繁殖性能。有研究表明,饲粮添加1 kg/t的甜菜碱显著提高了断奶仔猪数和断奶窝重[7];在热应激妊娠母猪饲粮中添加1 000、2 000 mg/kg甜菜碱有提高窝产仔数和窝产活仔数的趋势[5]。这与本研究结果基本一致,上述作用可能与甜菜碱的诱食、维持渗透压及抗应激等生物学功能有关[13]。
初乳中含有大量的营养物质和生物活性成分,其中的乳糖、乳脂和乳蛋白等营养物质容易被新生动物消化吸收,丰富的免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白A(IgA)等免疫蛋白可使新生仔猪获得被动免疫,为其生长发育和健康提供保障[14]。因此,母猪的泌乳性能和乳品质直接影响着仔猪的生长性能和健康。本研究测定了母猪初乳的营养成分,发现饲粮添加甜菜碱可显著增加初乳中乳蛋白含量,这有利于哺乳仔猪的生长发育。王敏[15]研究发现,母猪饲粮中添加甜菜碱不影响初乳中乳蛋白含量,上述差异可能与甜菜碱的添加剂量有关。UN是机体蛋白质代谢的主要终产物,可反映机体摄入蛋白质和能量的平衡情况[16]。本研究中,甜菜碱组初乳中UN含量升高,提示机体对蛋白质的利用程度下降,这可能与母猪的品种、胎次和饲养管理等因素有关[17],但具体机制尚有待进一步研究。总之,饲粮添加甜菜碱可改善母猪的泌乳性能和乳品质,这可能是甜菜碱可提高断奶仔猪数和降低死亡率的原因之一。
血浆代谢物含量可反映动物机体的消化吸收、新陈代谢和组织器官的健康水平等。血浆TP含量可反映机体对蛋白质的吸收和代谢状况[18]。本研究发现,母猪妊娠第75和105天血浆TP含量下降,说明机体蛋白质合成代谢效率降低,这与Matthews等[19]的报道不同,可能是因为母猪妊娠中后期胎儿生长发育加快,增加了对营养物质的需要量,从而增加了母猪对蛋白质的消化吸收,使血浆TP含量降低。ALP是广泛存在于机体组织器官中并参与糖脂代谢和蛋白质吸收、运输及合成等相关的一种单脂磷酸水解酶,能够维护机体肠道屏障,血浆ALP活性提高能够促进营养物质的消化吸收和生长性能[20]。本研究发现,甜菜碱组母猪妊娠第75和105天以及产后第7天血浆ALP活性均升高,这有利于机体健康和子代生长发育。AST与动物机体肝功能密切相关,其活性可反映氨基酸代谢强度大小[21]和肝功能是否正常[22]。本研究中,母猪妊娠第105天和产后第7天血浆AST活性均降低,表明甜菜碱对母猪的肝脏功能具有一定的保护作用。
母猪的繁殖过程受下丘脑-垂体-性腺轴的调节,繁殖激素在繁殖周期内表现出规律性变化。PRL可促进乳腺的生长发育和乳的合成,维持泌乳。妊娠期间由于胎盘和卵巢大量分泌雌激素和孕激素,抑制垂体释放PRL,有利于机体维持妊娠[23]。FSH可促进卵泡发育,与促黄体素协同作用促进机体分泌雌激素。本研究中,饲粮添加甜菜碱可降低妊娠前期和中期母猪血浆PRL含量,这有利于母猪维持妊娠;妊娠后期母猪血浆PRL含量升高,可促进母猪泌乳。但在本研究中,妊娠前期和中期血浆E2和PROG含量均下降,可能是由于饲粮添加甜菜碱时间过长,具体原因有待进一步研究。
4 结论饲粮添加甜菜碱可改善初乳成分和血浆代谢物含量,降低血浆繁殖激素含量,进而增加断奶仔猪数。
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