2. 山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室, 济南 250100;
3. 山东省动物卫生技术中心, 济南 250022
2. Key Laboratory of Disease Control and Animal Breeding of Shandong Province, Jinan 250100, China;
3. Shandong Animal Health Technology Center, Jinan 250022, China
欧盟已禁止抗生素作为促生长剂用于动物饲料，我国也于2018年立法，实行兽用抗生素减量化，2020年实现动物饲料中药物饲料添加剂零添加。这就需要优化饲粮配方，提高营养素消化利用率，同时通过营养调控和增强肠道微生物活性改善肠道功能[1-2]。仔猪断奶应是一个平缓的、循序渐进的过程，但是随着生猪养殖集约化、规模化程度提高，仔猪断奶引起的应激使其肠屏障功能受损，肠绒毛萎缩，导致采食量降低[3]，肠道消化吸收功能降低[4-6]，对传染性疾病的易感几率增加[4]。
三丁酸甘油酯含有3个丁酸分子，是一种稳定的、快速吸收的丁酸前体物，在肠道中通过脂肪酶的作用释放大量丁酸[7]，为肠细胞发育提供能量，促进肠上皮细胞增殖，调节肠细胞功能，如基因表达、细胞分化、肠道组织发育、免疫调节、氧化应激减轻及腹泻控制等，从而促进养分消化吸收，缓解仔猪断奶应激[1, 8-10]。而且饲粮中添加三丁酸甘油酯可通过增强线粒体功能和诱导线粒体自噬缓解肠道氧化应激和炎症[11-12]。研究表明，具有抗菌活性的丁酸盐及其衍生物对动物生产普遍表现出积极作用，包括促进肠道发育、控制肠道病原体、减少炎症、改善生长性能、胴体性状和调节肠道微生物菌群，被认为是饲料中抗生素的潜在替代品[10]。21~70日龄仔猪饲粮中添加800~10 000 mg/kg三丁酸甘油酯(有效添加量675~9 700 mg/kg)均可显著提高其生长性能，改善肠道形态发育，促进营养素吸收。国内研究中三丁酸甘油酯的有效添加量为675~1 800 mg/kg[13-17]，而国外研究中三丁酸甘油酯的添加量为2 910~9 700 mg/kg[1-2]。可见，仔猪饲粮中三丁酸甘油酯的添加量差别很大，而且国内研究的添加量远远低于国外。我们前期研究发现断奶仔猪饲粮中添加2 000 mg/kg三丁酸甘油酯和1 500 mg/kg核苷酸可显著促进仔猪生长，提高机体免疫力，降低断奶应激对肠道的损伤，提高消化酶活性，提高仔猪的消化吸收功能[17]。为此，本试验旨在研究饲粮中添加不同水平三丁酸甘油酯对断奶仔猪生长性能、血清生化指标、肠组织形态和养分消化率的影响，为其在断奶仔猪上的应用提供理论支撑。
1 材料与方法 1.1 试验猪的选择与饲养试验在山东省良种猪繁育工程技术中心进行。选择出生日期相近、体重为7.66 kg左右的健康“杜×长×大”断奶仔猪(21日龄)200头，随机分为5组，每组5个重复，每个重复8头。对照组饲喂添加40 mg/kg杆菌肽锌的基础饲粮，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组在基础饲粮中分别添加1 000、1 500、2 000和2 500 mg/kg三丁酸甘油酯。试验期为42 d，试验期间猪自由采食、饮水，按照猪场常规管理规程和正常免疫程序进行。基础饲粮由山东邦基饲料有限公司提供，基础饲粮组成及营养水平见表 1。
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表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) |
三丁酸甘油酯由济南海华生物科技有限公司提供，纯度为60%，其余部分均为载体。
1.3 检测指标及方法 1.3.1 生长性能指标试验第1天(21日龄)、第14天(35日龄)和第42天(63日龄)晨饲前逐头称重。在试验期间，每天09:00—10:00、17:00—18:00观察仔猪排粪情况，记录腹泻个体。以个体为单位记录猪只死亡和淘汰情况，发现死淘猪及时结料并称重。根据每日记录的给料量、剩余料和损耗料，以重复为单位计算平均日采食量和料重比，同时计算个体平均日增重。
1.3.2 血清生化指标试验结束时晨饲前试验猪空腹称重，逐头前腔静脉采血10 mL，放入非抗凝离心管中静置15 min，3 000 r/min离心10 min分离血清，置-80 ℃冰箱保存备用。
使用日立全自动生化分析仪(7100)测定血清中尿素氮、葡萄糖、总蛋白、球蛋白、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量和二胺氧化酶活性。试剂盒购自四川迈克生物科技股份有限公司，操作步骤按照试剂盒说明书进行。
1.3.3 肠组织形态试验结束时，试验猪晨饲前空腹称重后，每组随机选择5头进行屠宰，取空肠、回肠制作石蜡切片，苏木精-伊红(HE)染色后，于10×20倍显微镜下拍照，应用Image-Pro Plus 6.0软件测量肠绒毛高度和隐窝深度，计算绒毛高度/隐窝深度(V/C)。
1.3.4 饲粮养分消化率试验结束前3 d，每重复每天07:00—08:00间按5点法(舍内4角和中间)收集粪样100 g，每10 g加10 mL 10%的盐酸进行固氮。样品置于-20 ℃冰箱保存，用于营养成分分析。采用四分法采集饲粮样品250 g，4 ℃保存待测。饲粮和粪样中粗蛋白质(CP)含量测定采用凯氏定氮法，粗脂肪(EE)含量测定采用索氏抽提法，钙(Ca)含量测定采用乙二胺四乙酸络合滴定法，磷(P)含量测定采用钒钼黄比色法。采用盐酸不溶灰分(AIA)内源指示剂法计算饲粮中粗蛋白质、粗脂肪、钙和磷的表观消化率。
1.4 数据统计分析数据用SPSS 19.0软件的one-way ANOVA程序进行分析，差异显著时采用LSD法进行多重比较。P < 0.05为差异显著，P < 0.01为差异极显著，结果均以“平均值±标准误”表示。
2 结果与分析 2.1 饲粮添加不同水平三丁酸甘油酯对断奶仔猪生长性能的影响试验过程中未有仔猪淘汰和死亡。由表 2可知，各组试验猪初始(21日龄)平均体重相近，无显著差异(P>0.05)。饲粮中添加三丁酸甘油酯饲养14 d后，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪35日龄平均体重在数值上均高于对照组，分别提高1.08%(P>0.05)、3.92%(P>0.05)、8.38%(P < 0.05)、6.54%(P>0.05)，其中试验Ⅲ组仔猪平均体重显著高于对照组(P < 0.05)。与对照组相比，饲粮中添加三丁酸甘油酯14 d可提高21~35日龄仔猪的平均日增重，降低料重比。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪21~35日龄平均日增重分别提高3.38%(P>0.05)、10.13%(P>0.05)、21.01%(P < 0.01)、15.20%(P>0.05)，其中试验Ⅲ组仔猪平均日增重极显著提高(P < 0.01)。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪21~35日龄料重比分别比对照组降低3.80%(P>0.05)、17.72%(P < 0.05)、24.68%(P < 0.05)、20.25%(P < 0.05)，其中试验Ⅲ组仔猪料重比降低幅度最大，试验Ⅳ、Ⅱ组次之；试验Ⅲ组仔猪21~35日龄料重比在数值上均低于试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组，分别降低21.71%、8.46%、5.56%(P>0.05)。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪21~35日龄平均日采食量与对照组相比无显著差异(P>0.05)。
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表 2 饲粮添加不同水平三丁酸甘油酯对断奶仔猪生长性能的影响 Table 2 Effects of different supplemental levels of tributyrin on growth performance of weaned piglets (n=40) |
饲粮中添加三丁酸甘油酯饲养28 d后，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪63日龄平均体重在数值上均高于对照组，分别提高3.22%(P>0.05)、7.05%(P>0.05)、11.70%(P < 0.01)、9.08%(P < 0.05)，试验Ⅲ组仔猪平均体重提高幅度最大，其次为试验Ⅳ、Ⅱ组，试验Ⅰ组提高幅度最小。与对照组相比，饲粮中添加三丁酸甘油酯可提高36~63日龄仔猪的平均日增重，降低平均日采食量和料重比。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪36~63日龄平均日增重分别比对照组提高5.53%(P>0.05)、10.40%(P>0.05)、15.26%(P < 0.01)、11.80%(P < 0.05)，其中试验Ⅲ组仔猪平均日增重极显著提高(P < 0.01)。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪36~63日龄料重比分别比对照组降低14.65%(P>0.05)、20.20%(P < 0.05)、21.72%(P < 0.05)、20.71%(P < 0.05)，其中试验Ⅲ、Ⅳ组仔猪料重比降低幅度较大，试验Ⅱ组次之，试验Ⅰ组降低幅度最小。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪36~63日龄平均日采食量与对照组相比无显著差异(P>0.05)，而且各试验组间亦无显著差异(P>0.05)。
与对照组相比，整个试验期间(即21~63日龄)，饲粮中添加三丁酸甘油酯可提高21~63日龄仔猪的平均日增重，降低平均日采食量和料重比。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪21~63日龄平均日增重分别比对照组提高4.87%(P>0.05)、10.31%(P>0.05)、17.02%(P < 0.01)、12.84%(P < 0.05)，其中试验Ⅲ组仔猪平均日增重极显著提高(P < 0.01)。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪21~63日龄料重比分别比对照组降低11.83%(P>0.05)、19.89%(P < 0.05)、22.58%(P < 0.05)、20.97%(P < 0.05)，其中试验Ⅲ、Ⅳ组仔猪料重比降幅较大，试验Ⅱ组次之，试验Ⅰ组降幅最小。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪21~63日龄平均日采食量与对照组相比无显著差异(P>0.05)，而且各试验组间亦无显著差异(P>0.05)。由此可见，饲粮中添加三丁酸甘油酯可提高仔猪平均日增重，降低料重比，而且与添加水平相关。
2.2 饲粮添加不同水平三丁酸甘油酯对断奶仔猪血清生化指标的影响由表 3可知，与对照组相比，试验组仔猪血清中IgA、IgG和IgM含量在数值上有不同程度增加，其中试验Ⅲ、Ⅳ组仔猪血清中IgM含量显著高于对照组(P < 0.05)，分别提高17.14%和20.00%，试验Ⅲ、Ⅳ组仔猪血清中IgM含量显著高于试验Ⅰ组(P < 0.05)，且在数值上略高于试验Ⅱ组，但差异不显著(P>0.05)。与对照组相比，试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪血清中尿素氮含量分别提高10.54%、8.92%、9.19%(P>0.05)，试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪血清中尿素氮含量也高于试验Ⅰ组(P>0.05)。试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪血清中葡萄糖含量显著高于对照组(P < 0.05)，分别提高19.48%、17.44%、23.26%。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪血清中总蛋白含量显著高于对照组(P < 0.05)，分别提高7.23%、6.93%、6.12%、5.40%，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组间无显著差异(P>0.05)。
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表 3 饲粮添加不同水平三丁酸甘油酯对断奶仔猪血清生化指标的影响 Table 3 Effects of different supplemental levels of tributyrin on serum biochemical indices of weaned piglets (n=35) |
试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪血清中球蛋白含量显著低于对照组(P < 0.05)，分别降低9.52%、9.19%、10.64%，其他各组间无显著差异(P>0.05)。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪血清中二胺氧化酶活性极显著低于对照组(P < 0.01)，分别降低18.29%、29.27%、26.22%、32.32%，其中试验Ⅱ、Ⅳ组显著低于试验Ⅰ组(P < 0.05)，其他各组间无显著差异(P>0.05)。由此可见，饲粮中添加甘油三酯提高了仔猪血清中IgA、IgG、IgM、葡萄糖和总蛋白含量，降低了血清中球蛋白含量和二胺氧化酶活性，而且随添加水平的提高有显著的变化。
2.3 饲粮添加不同水平三丁酸甘油酯对断奶仔猪肠组织形态的影响由表 4可知，仔猪空肠绒毛高度略高于回肠，V/C的变化趋势与绒毛高度一致。与对照组相比，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪空肠、回肠绒毛高度增加，隐窝深度降低，V/C不同程度提高。其中，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪空肠绒毛高度分别增加3.03%(P>0.05)、16.52%(P < 0.05)、15.25%(P < 0.05)、14.89%(P < 0.05)，且试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组增加幅度相近，组间无显著差异(P>0.05)。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪空肠隐窝深度分别降低6.51%(P>0.05)、11.00%(P>0.05)、15.54%(P < 0.05)、16.90%(P < 0.05)，且试验Ⅲ、Ⅳ组降低幅度相近，无显著差异(P>0.05)。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪空肠V/C分别提高10.40%(P>0.05)、30.80%(P < 0.05)、36.40%(P < 0.05)、38.40%(P < 0.05)，其中试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组增加幅度均超过30%，组间无显著差异(P>0.05)。与对照组相比，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪回肠绒毛高度分别增加4.53%(P>0.05)、10.27%(P < 0.05)、13.23%(P < 0.05)、14.47%(P < 0.05)，试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组增加幅度相近，均超过10%，组间无显著差异(P>0.05)。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪回肠隐窝深度分别降低3.17%(P>0.05)、8.69%(P>0.05)、12.18%(P < 0.05)、8.69%(P>0.05)。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪回肠V/C分别提高8.12%(P>0.05)、20.94%(P < 0.05)、29.06%(P < 0.05)、25.64%(P < 0.05)，试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组提高幅度均超过20%，组间无显著差异(P>0.05)。
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表 4 饲粮添加不同水平三丁酸甘油酯对仔猪肠组织形态的影响 Table 4 Effects of different supplemental levels of tributyrin on intestinal morphology of weaned piglets (n=5) |
由此可见，饲粮中添加三丁酸甘油酯可提高空肠、回肠绒毛高度和V/C，降低隐窝深度，而且对肠组织形态的改善效果与添加水平有关，饲粮中添加1 500、2 000、2 500 mg/kg三丁酸甘油酯对仔猪肠道形态发育的影响优于添加1 000 mg/kg。
2.4 饲粮添加不同水平三丁酸甘油酯对断奶仔猪养分消化率的影响由表 5可知，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪饲粮中粗蛋白质、粗脂肪、钙、磷的表观消化率均不同程度高于对照组，其中试验Ⅲ、Ⅳ组提高幅度较大。与对照组相比，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪饲粮中粗蛋白质的表观消化率显著提高(P < 0.05)，分别提高6.26%、7.17%、9.85%、7.59%，试验组间差异均不显著(P>0.05)。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪饲粮中粗脂肪的表观消化率显著高于对照组(P < 0.05)，分别提高11.30%、13.36%、17.63%、15.95%，试验组间差异均不显著(P>0.05)。试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪饲粮中钙的表观消化率显著高于对照组(P < 0.05)，分别提高12.42%、14.03%、13.78%，试验组间差异均不显著(P>0.05)。试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组仔猪饲粮中磷的表观消化率显著高于对照组(P < 0.05)，分别提高15.95%、19.12%、20.17%，试验组间差异均不显著(P>0.05)。
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表 5 饲粮添加不同水平三丁酸甘油酯对断奶仔猪养分消化率的影响 Table 5 Effects of different supplemental levels of tributyrin on nutrient digestibility of weaned piglets (n=15) |
由此可见，饲粮中添加三丁酸甘油酯可提高断奶仔猪饲粮中粗蛋白质、粗脂肪、钙和磷的表观消化率，而且随着三丁酸甘油酯添加水平的提高呈现升高的趋势，具有一定的剂量效应。总体来看饲粮中添加1 500、2 500、2 500 mg/kg三丁酸甘油酯可显著促进断奶仔猪对饲粮中粗蛋白质、粗脂肪、钙和磷的消化吸收。
3 讨论饲料中抗生素促生长添加剂的禁止使用使得对其替代品的研究势在必行。目前可作为抗生素替代品的添加剂主要有益生菌、低聚糖、微生态制剂、短链脂肪酸以及植物提取物等具有提高动物机体健康水平和生产性能的生物营养性物质[18-20]。特定的营养物质可由机体特定组织消化吸收，靶向滋养特定组织[2]。肠组织可吸收多种生物营养性物质，比如短链脂肪酸、谷氨酰胺、腐胺和戊二酸，这些物质通过提高动物机体的整体营养水平以及对营养物质的消化吸收能力，从而提升动物机体的健康水平和生产性能[2]。我们前期研究表明，饲粮中添加0.20%三丁酸甘油酯和0.15%核苷酸可显著提高仔猪生长性能，促进肠道发育，增加消化吸收面积，增强免疫力[17]。本试验主要研究在不含抗生素生长促进剂的饲粮中添加三丁酸甘油酯对断奶仔猪生长性能、血清生化指标、肠组织形态和养分消化率的影响，同时筛选三丁酸甘油酯的适宜添加水平。
3.1 饲粮添加不同水平三丁酸甘油酯对断奶仔猪生长性能的影响研究表明，饲粮中添加0.1%三丁酸甘油酯对仔猪生长性能指标影响不显著，但腹泻率、死亡率显著降低[2, 16]。饲粮中添加0.15%~0.20%三丁酸甘油酯可使仔猪生长性能显著提高，腹泻率显著降低，同时饲粮中粗脂肪、粗蛋白质和能量的表观消化率显著提高4.09%~12.38%[14-15, 17]，这与本研究的结果一致。本研究发现，饲粮中添加三丁酸甘油酯可不同程度提高仔猪的平均日增重，降低料重比，而且对生长性能的提高程度与添加水平呈正相关。饲粮中添加2 000和2 500 mg/kg三丁酸甘油酯显著提高仔猪的平均日增重，显著降低料重比，试验结束时仔猪平均体重也显著增加，分别增加11.70%和9.08%。但是饲粮中添加1 000和1 500 mg/kg三丁酸甘油酯虽然提高了仔猪的平均日增重，降低了料重比，但与对照组相比无显著差异。这可能是由于对照组饲粮中添加了40 mg/kg杆菌肽锌，而试验组饲粮中未添加。由此可见，饲粮中添加1 000、1 500 mg/kg三丁酸甘油酯对仔猪生长性能的改善略优于添加抗生素药物添加剂，而饲粮中添加2 000、2 500 mg/kg三丁酸甘油酯不仅可替代抗生素等药物添加剂，而且显著提高了仔猪的生长性能。综合考虑仔猪饲喂成本，那么仔猪饲粮中添加2 000 mg/kg三丁酸甘油酯最适宜，不仅可完全替代抗生素药物添加剂，而且可显著提高生长性能。由于生长性能是反映动物营养状态最直接的指标[21]，表明饲粮中添加2 000 mg/kg三丁酸甘油酯时仔猪对营养物质的消化吸收可能也最佳。
3.2 饲粮添加不同水平三丁酸甘油酯对断奶仔猪血清生化指标的影响饲粮中添加三丁酸甘油酯可降低促炎细胞因子的表达，改善结肠紧密连接的形成，提升健康水平[10]。研究表明，饲粮中添加0.1%三丁酸甘油酯可使仔猪血清中IgA、IgG和IgM含量增加，但不影响血清中总蛋白和球蛋白含量[16]。饲粮中添加0.10%~0.15%三丁酸甘油酯可使仔猪血清中总蛋白和球蛋白含量均有不同程度提高，而且与三丁酸甘油酯添加水平呈正相关[15]。
本研究结果表明，饲粮中添加三丁酸甘油酯提高了仔猪血清中IgA、IgG、IgM、尿素氮、葡萄糖和总蛋白的含量，降低了血清中球蛋白含量和二胺氧化酶活性，但是影响幅度与三丁酸甘油酯的添加水平呈非线性相关。其中，饲粮中添加2 000、2 500 mg/kg三丁酸甘油酯使仔猪血清中IgM含量显著提高，血清中葡萄糖含量显著增加，这与杨玲[15]、张勇等[16]和朱荣生等[17]的研究结果一致。饲粮中添加1 500、2 000和2 500 mg/kg三丁酸甘油酯可使仔猪血清中尿素氮含量增加，这与Zhang等[22]的研究结果一致，他们发现饲粮中添加0.5%~1.0%啤酒酵母水解液可显著提高生长育肥猪血清尿素氮含量，而且饲粮中氮的消化率显著增加。而张勇等[16]和朱荣生等[17]的研究表明，仔猪饲粮中添加三丁酸甘油酯或是同时添加牛至油与三丁酸甘油酯、核苷酸与三丁酸甘油酯时虽然不同程度提升了仔猪生长性能，但是不影响血清尿素氮含量，这与本研究结果不一致。尿素氮是蛋白质终极代谢产物，也是衡量动物机体氮利用率的指标。本研究中饲粮添加1 500、2 000和2 500 mg/kg三丁酸甘油酯提高了仔猪血清中尿素氮含量，这表明仔猪对饲粮中粗蛋白质的消化能力增加，但是饲粮中氮的利用率下降了。这可能是由于本研究饲粮中粗蛋白质的含量稍高(饲粮中粗蛋白质含量为20.6%)，而张勇等[16]和朱荣生等[17]的研究中仔猪饲粮的粗蛋白质含量分别为17.0%和18.0%。饲粮中添加1 500、2 000、2 500 mg/kg三丁酸甘油酯显著降低仔猪血清中球蛋白含量和二胺氧化酶活性，这与朱荣生等[17]的研究结果一致。血清总蛋白是动物体内蛋白质的一种重要来源，反映了饲粮中的蛋白质水平及动物对蛋白质的吸收代谢程度[17]，IgA、IgG、IgM在血清中的含量可反映机体免疫力的强弱[23]，总蛋白含量高说明蛋白质合成代谢速度快。血清中球蛋白的含量反映机体的抗应激能力，二胺氧化酶活性可反映肠道机械屏障的完整性和损伤程度[24]。三丁酸甘油酯低水平添加(1 000、1 500 mg/kg)对仔猪蛋白质合成、免疫力和抗应激、缓解肠道损伤的影响不显著，这可能是由于对照组饲粮中添加了40 mg/kg杆菌肽锌，而试验组饲粮中未添加。由此可见，饲粮中添加三丁酸甘油酯可促进仔猪体蛋白质合成，增加抗应激能力，降低肠组织损伤，提高机体免疫力。这可能是因为三丁酸甘油酯可为肠组织发育供能，促进肠细胞增殖、分化，改善肠组织的完整性，提高营养素的消化吸收。而且饲粮中添加三丁酸甘油酯可降低促炎细胞因子的表达，改善结肠紧密连接的形成，有利于肠道健康[10]，显著提升仔猪的非特异性免疫力。
3.3 饲粮添加不同水平三丁酸甘油酯对断奶仔猪肠组织形态的影响本研究结果表明，饲粮中添加三丁酸甘油酯提高了仔猪空肠、回肠的绒毛高度和V/C，降低了隐窝深度，而且空肠的绒毛高度高于回肠。饲粮中添加1 500、2 000、2 500 mg/kg三丁酸甘油酯显著增加了空肠和回肠的绒毛高度和V/C值。这与Piva等[1]的研究结果一致，饲粮中添加0.3%三丁酸甘油酯和乳糖醇可提高空肠的绒毛高度，降低隐窝深度。这主要是由于三丁酸甘油酯到达肠道后，分解为可为肠道供能的丁酸，而丁酸可促进肠上皮细胞增殖[25-27]，降低促炎细胞因子表达，改善结肠紧密连接的形成，从而优化肠组织形态，增加肠绒毛高度和完整，减小隐窝深度，增加肠组织消化吸收面积，进而提高养分消化吸收能力[28]。Hou等[29]发现，饲粮中添加三丁酸酯甘油(1 000 mg/kg)可显著降低溃疡性结肠炎猪肠组织损伤，可能是通过抑制细胞凋亡、促进紧密连接形成、激活表皮生长因子受体信号通路来实现的。饲粮中低水平添加三丁酸甘油酯(1 000 mg/kg)对仔猪肠组织形态影响不显著，这可能是由于对照组饲粮中添加了40 mg/kg杆菌肽锌，而试验组饲粮中未添加。这就表明，饲粮中添加三丁酸甘油酯可促进肠上皮细胞增殖，降低炎症因子表达，改善肠组织机械屏障，从而增加养分消化吸收能力。
3.4 饲粮添加不同水平三丁酸甘油酯对断奶仔猪养分消化率的影响饲粮养分消化率依赖于动物肠道健康状况，而三丁酸甘油酯进入肠道后可为肠上皮细胞供能，促进肠道发育，维持肠形态完整和肠道菌群平衡[2, 10-11, 29]，从而增加肠道的消化吸收能力，提高饲粮养分消化率。本研究结果表明，饲粮中添加1 500、2 000、2 500 mg/kg三丁酸甘油酯显著提高仔猪饲粮中粗蛋白质、粗脂肪、钙和磷的表观消化率。这与侯改凤等[14]的研究结果一致，他们发现饲粮中添加0.2%的三丁酸甘油酯可显著提高粗蛋白质、粗脂肪和能量的表观消化率，分别提高6.56%、12.38%和4.09%。但是张勇等[16]发现饲粮中添加1 000 mg/kg三丁酸甘油酯时不影响仔猪粗蛋白质、粗脂肪、钙和磷的表观消化率。这可能与饲粮中三丁酸甘油酯的添加量及其纯度有关，侯改凤等[14]在仔猪饲粮中添加的三丁酸甘油酯纯度大于90%，而张勇等[16]在仔猪饲粮中添加的三丁酸甘油酯的纯度仅为50%。本研究饲粮中三丁酸甘油酯的纯度为60%以上。饲粮中低水平添加三丁酸甘油酯(1 000 mg/kg)对仔猪养分消化率影响不显著，这可能是由于对照组饲粮中添加了40 mg/kg杆菌肽锌，而试验组饲粮中未添加。由此可见，饲粮中添加1 500、2 000、2 500 mg/kg三丁酸甘油酯显著提高仔猪养分消化率，但是不同添加水平间差异不显著。
4 结论① 仔猪饲粮中添加1 000~1 500 mg/kg三丁酸甘油酯可替代抗生素药物添加剂，同时维持仔猪的生长性能、肠组织形态和免疫功能。
② 仔猪饲粮中添加2 000~2 500 mg/kg三丁酸甘油酯不仅可替代抗生素药物添加剂，而且显著提升仔猪的生长性能、养分消化率和健康水平，显著改善肠组织形态。
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