我国北方牧区养羊模式逐渐由传统的放牧饲养转变为集约化饲养，但在集约化饲养模式下，动物饲粮组成和生活环境的变化一定程度上增加了机体遭受氧化应激的风险，动物抵抗疾病的能力下降，生长性能、繁殖性能和产品品质下降^[1-2]。葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidins，GSPs)是葡萄多酚类化合物的重要组成部分，在葡萄枝叶、果皮、果肉以及葡萄籽中都有存在。现有研究发现，葡萄籽原花青素是一种高效的抗氧化剂和自由基清除剂，可以通过清除自由基和抑制氧化酶活性等途径增强动物机体抗氧化力，调节机体免疫反应，进而改善动物健康状况，促进动物生长^[3]。因此，葡萄籽原花青素在动物健康、高效生产中具有潜在的应用价值。汪水平等^[4]研究发现，饲粮中添加200、400 mg/kg葡萄籽原花青素可以显著提高肉兔屠宰率，改善肉品质；周华等^[5]研究发现，饲粮中添加50、100、150 mg/kg葡萄籽原花青素可以提高青脚麻肉雏鸡生长性能，提高胸肌、腿肌率，降低肌肉滴水损失。饲粮中添加10%的酿酒葡萄皮渣可以显著提高肉羊的生长性能和肌肉抗氧化能力^[6]。目前，有关葡萄籽原花青素作为非营养性饲料添加剂对反刍动物生长性能、肉品质影响方面的研究较少。因此，本研究以杜泊×小尾寒羊杂一代公羔为研究对象，旨在研究葡萄籽原花青素对舍饲羔羊生长性能、屠宰性能、肉品质及血清抗氧化指标的影响，以期为开发羔羊绿色纯天然功能性饲料添加剂提供理论指导，为育肥羊健康、高效生产提供新思路。

1 材料与方法 1.1 试验材料及试验设计

葡萄籽原花青素为粉状制剂，其主要成分为原花青素(96.400%)、儿茶素(0.533%)、表儿茶素(0.239%)、儿茶素没食子酸酯(0.225%)和表儿茶素没食子酸酯(0.171%)。

本试验于2019年6月在山西农业大学国家肉羊体系饲料资源岗位试验基地开展，于2019年8月份结束。试验选取48只4月龄、体重[(22.75±1.20) kg]相近的杜泊×小尾寒羊杂交公羔，采用单因子完全随机试验设计，分为4组，每组12只羊，单栏饲养。试验全期60 d，其中预试期15 d，正试期45 d。各组饲喂基础饲粮的同时分别补饲0(对照组)、10(10GSPs组)、20(20GSPs组)、40 mg/kg BW(40GSPs组)的葡萄籽原花青素，添加剂量参考牟春堂等^[7]的体外发酵试验结果。试验饲粮参照NRC(2007)羔羊营养需要中体重20 kg、日增重300 g/d的营养需要量设计，基础饲粮组成及营养水平见表 1。

1.2 饲养管理

试验开始前对羊舍进行全面的清洗、消毒，对试验羊进行羊痘、口蹄疫和小反刍兽疫疫苗免疫。试验进行期间定期消毒打扫，确保试验场所干净。预试期对试验羊进行分组、编号和驱虫，逐渐过渡到试验饲粮。正试期，试验羊每日饲喂2次，自由采食、饮水，每日记录采食量。

1.3 样品采集及指标测定 1.3.1 生长性能测定

于正试期第1天08:00对所有羊进行空腹称重，作为初始体重，之后每隔15 d进行1次称重，记录数据。正试期结束当天08:00空腹称重，作为终末体重。饲喂期间记录每只羊的日采食量、剩料量，于正试期结束后计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)。

1.3.2 屠宰性能

正试期结束当天19:00，每组随机选择6只试验羊，禁食、禁水12 h，次日07:00进行屠宰，宰前称重，采用颈部放血方法将羊致死，记录头、蹄、皮、内脏重量。胴体进行骨肉分离，称量全骨和净肉重，记录数据。眼肌面积通过SCAN-Star K仪器测定。

1.3.3 肉品质

屠宰后立即取试验羊左侧背最长肌，用于测定肉色、pH、熟肉率、剪切力、系水力及肌肉常规营养成分。

肉色：使用Konica Minolta CM-5分光测色计分别测定宰后1、24 h的亮度(L^*)、红度(a^*)、黄度(b^*)值。取好肉样后，背最长肌切面中段朝下放入比色皿进行测定，测量3次，结果取平均值。

pH：使用TESTO-205酸碱度/温度pH测定仪进行测定，具体步骤：将pH计的探头插入背最长肌中段横切面，读数每秒更新2次，待数值稳定后记录数据。pH_{1 h}为背最长肌取后1 h测得的pH，pH_{24 h}为背最长肌在4 ℃冰箱放置24 h后测得的pH。

熟肉率：将背最长肌上取3块50 g左右的长方体状肉段，去除白肉和筋膜，使用曲别针固定防水标签。把样品铺在干净的蒸屉上，把蒸屉放在沸水锅上盖盖蒸30 min。待加热停止后将肉取出，冷却至室温，用吸水纸将肉样轻轻擦干，称重，计算熟肉率。

剪切力：从背最长肌上切下2.54 cm厚的肌肉，在177 ℃的烤箱中烘烤。当中心温度达到70 ℃后，取出样品，冷却至室温，在1 ℃下冷却24 h。使用TMS-PRO质构仪测量每块样品的6个圆柱形核心(直径=1.27 cm)的剪切力。

系水力：使用TMS-PRO质构仪进行测定，选择35 kg肉块压力试验的数据库，运行程序，设置位移零点。用分析天平称量1 g左右的肉样品记录质量(m₁)，放在测试平台上，在样品上方放置16层滤纸，样品下方放置18层滤纸，回程的距离一般设置为40 mm即可。测定结束后取出肉样品，称重并记录质量(m₂)。每个样品测定3次。

常规营养成分：将-20 ℃保存的肌肉样品进行称量，放入冷冻干燥机72 h，称量干燥后的重量，计算其水分含量。按照《饲料分析及饲料质量检测技术》^[8]方法测定背最长肌的粗脂肪、粗蛋白质、粗灰分含量。粗脂肪含量采用乙醚浸提法测定，粗蛋白质含量通过凯氏定氮仪测定，粗灰分含量通过茂福炉燃烧法测定。

1.3.4 血清抗氧化指标

正试期结束当天晨饲前颈静脉采血10 mL，立即于3 000×g离心10 min收集上层血清，-20 ℃保存待测。采用试剂盒方法测定血清总抗氧化能力(T-AOC)及过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.4 数据统计分析

利用Excel 2013软件进行数据初步整理，应用SPSS 23.0统计软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)。结果以平均值±标准差表示，P≤0.05为差异显著，0.05 < P < 0.10为有趋势。

2 结果 2.1 饲粮中添加葡萄籽原花青素对羔羊生长性能的影响

由表 2可以看出，各组之间试验羊的初始体重差异不显著(P＞0.05)。10GSPs、20GSPs和40GSPs组的终末体重均高于对照组，分别提高了5.48%、4.67%和2.57%，其中10GSPs和20GSPs组的终末体重与对照组差异显著(P≤0.05)。10GSPs和20GSPs组的平均日增重和平均日采食量均显著高于对照组和40GSPs组(P≤0.05)，平均日增重较对照组分别提高了12.01%和12.67%，平均日采食量较对照组分别提高了6.66%和5.77%。40GSPs组的平均日增重和平均日采食量与对照组差异不显著(P＞0.05)。各组之间料重比差异不显著(P＞0.05)。

2.2 饲粮中添加葡萄籽原花青素对羔羊屠宰性能和器官指数的影响

由表 3可以看出，10GSPs、20GSPs和40GSPs组的宰前活重均高于对照组，分别提高了8.03%、7.63%和2.93%；其中，10GSPs和20GSPs组的宰前活重显著高于对照组(P≤0.05)，40GSPs组与对照组差异不显著(P＞0.05)。10GSPs、20GSPs和40GSPs组的胴体重和净肉重均显著高于对照组(P≤0.05)；其中，10GSPs、20GSPs和40GSPs组的胴体重较对照组分别提高了9.04%、7.20%和8.69%，净肉重较对照组分别提高了6.56%、7.15%和6.63%。GSPs40组的眼肌面积显著高于对照组(P≤0.05)，较对照组提高了17.83%；10GSPs、20GSPs组的眼肌面积与对照组差异不显著(P＞0.05)。各组之间屠宰率、净肉率、骨重和骨肉比均无显著差异(P＞0.05)。

由表 4可以看出，各组之间各器官指数均无显著差异(P＞0.05)，但20GSPs和40GSPs组的脾脏指数较对照组和10GSPs组有升高的趋势(P=0.083)。

2.3 饲粮中添加葡萄籽原花青素对羔羊肉品质和背最长肌常规营养成分的影响

由表 5可以看出，各组之间背最长肌的pH_{1 h}和pH_{24 h}没有显著差异(P＞0.05)。宰后1 h时，20GSPs组的a^*值较对照组和10GSPs组分别提高了13.26%和10.90%，差异显著(P≤0.05)，10GSPs和40GSPs组的a^*值与对照组差异不显著(P＞0.05)，各组之间的L^*和b^*值均无显著差异(P＞0.05)。宰后24 h时，L^*、a^*和b^*值较宰后1 h时均有升高，但各组之间均无显著差异(P＞0.05)。20GSPs和40GSPs组的背最长肌剪切力显著低于对照组和10GSPs组(P≤0.05)。各组之间背最长肌系水力和熟肉率无显著差异(P＞0.05)。

由表 6可以看出，各组之间背最长肌的水分、粗灰分、粗脂肪和粗蛋白质含量均无显著差异(P＞0.05)。

2.4 饲粮中添加葡萄籽原花青素对羔羊血清抗氧化指标的影响

由表 7可以看出，各组之间血清T-AOC和CAT活性没有显著差异(P>0.05)。与对照组相比，20GSPs和40GSPs组的血清SOD和GSH-Px活性显著提高(P≤0.05)；其中，20GSPs和40GSPs组的血清SOD活性较对照组分别提高了19.66%和20.40%，血清GSH-Px活性较对照组分别提高了19.66%和21.71%。各组之间血清MDA含量没有显著差异(P>0.05)。

3 讨论 3.1 饲粮中添加葡萄籽原花青素对羔羊生长性能的影响

酚类物质作为天然植物提取物添加剂的一种，在提高动物生长性能、免疫功能、抗氧化能力等方面发挥着重要作用，但高浓度的植物多酚可能会抑制动物采食量，扰乱消化生理，抑制动物的消化和生长。晁娅梅等^[9]研究发现，与对照组相比，饲粮中添加茶多酚能显著提高育肥猪净增重和平均日增重。王凯等^[10]在饲粮中分别添加苜蓿和红车轴草黄酮提取物，结果表明苜蓿和红车轴草黄酮提取物能显著提高肉羊的平均日增重，降低料重比。金亚倩等^[11]试验结果表明，饲粮中添加10%葡萄渣添加组较对照组平均日增重提高了38%，可能是葡萄皮渣中的主要活性物质——葡萄籽原花青素发挥了主要作用，这与本试验得到的结果一致。张鹏等^[12]研究发现，利用葡萄籽粉替代一定比例的玉米能提高成年母羊的总增重和平均日增重。此外，何英霞等^[13]以欧洲鳗鲡为研究对象，试验组饲料中添加600 mg/kg的葡萄籽原花青素，发现欧洲鳗鲡增重率和特定生长率显著提高。本试验中，与对照组相比，10GSPs和20GSPs组平均日增重和平均日采食量均显著提高，一方面原因可能是葡萄籽原花青素作为天然的抗氧化物质能清除体内自由基，降低羔羊饲养过程中受到的应激反应，提高生长性能。另一方面可能是因为单宁类物质可以降低饲粮蛋白质在瘤胃中的降解比例，增加小肠中可吸收蛋白质的比例^[14]，从而提高了代谢蛋白质的供应量和氮的利用率。研究表明，高浓度的植物多酚会抑制瘤胃微生物尤其是纤维分解菌的生长，降低饲料消化率^[15-16]。此外，缪冰旋^[17]通过葡萄酒对不同细菌的抗性研究发现，葡萄酒酚类物质对四联球菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌表现出较强抗性。付丽等^[18]从番荔枝提取到酚类物质，通过抗菌研究发现其对金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌和白色念珠菌等革兰氏阳性菌有抑菌作用。因此，本试验中40GSPs组的平均日增重较10GSPs和20GSPs组低的原因可能是葡萄籽原花青素影响了羔羊瘤胃微生物区系、降低了饲料消化率所致，葡萄籽原花青素对羔羊瘤胃发酵及微生物区系的影响还需进一步研究。

3.2 饲粮中添加葡萄籽原花青素对羔羊屠宰性能的影响

屠宰性能是反映肉用生产的重要指标。屠宰率、净肉率和眼肌面积可直接反映动物的产肉性能。侯福银等^[19]研究了原花青素对肉鸡肠道及屠宰性能、脂质代谢和肉品质的影响，结果表明不同剂量的原花青素提高了肉鸡的屠宰率、半净膛率、全净膛率和腿肌率，同时提高了胸肌中粗蛋白质的含量。本试验研究结果表示，适宜剂量的葡萄籽原花青素能显著改善育肥羔羊的胴体重和净肉重，但饲粮中添加葡萄籽原花青素对屠宰率和净肉率没有显著影响。可能是因为试验羊机体各部位仍处在发育阶段，导致营养并未完全转化为肌肉和脂肪沉积在体内，一部分营养弥补组织脏器的发育。眼肌面积的大小与家畜产肉性能有强相关关系^[20]。本试验中，GSPs10和GSPs20组的眼肌面积与对照组比有增高的趋势，GSPs40组的眼肌面积显著增高。这说明饲喂不同剂量的葡萄籽原花青素有提高家畜产肉性能的作用。有关原花青素类物质对动物肌肉生长影响方面的文献尚未见报道，因此，葡萄籽原花青素是通过调控营养素的代谢提高产肉性能还是通过其他内在机理促进肌纤维发育，还有待于进一步深入研究。

器官指数一定程度上反映了动物机体的生长发育情况和机体机能情况，对生产实际有重要意义^[21]。正常情况下，动物器官发育与机体生长发育相协调^[22]。田华勤^[23]研究发现，饲粮中添加不同水平的葡萄籽原花青素提取物，对羔羊心脏重、肾脏重和肺脏重均未产生显著影响，与本试验结果一致。本试验结果表明，饲粮中添加葡萄籽原花青素对羔羊各器官指数均无显著影响，表明这些器官的发育与羔羊生长过程相协调，可能是本能生长协调的一种表现。此外，本试验中20GSPs和40GSPs组脾脏指数有提高的趋势，说明葡萄籽原花青素可能一定程度上促进免疫器官发育，提高机体免疫能力。未来应就添加葡萄籽原花青素对羔羊免疫机能的影响及机制方面做进一步研究。

3.3 饲粮中添加葡萄籽原花青素对羔羊肉品质和常规营养成分的影响

评价肉营养价值和品质的理化成分指标有水分、粗灰分、粗蛋白质和粗脂肪。肌肉组织的化学成分与动物的生长阶段有关，随着动物年龄的增加，肌肉中水分含量有所下降，粗脂肪含量逐渐增加，粗蛋白质含量相对稳定^[24]。水分与肉的多汁性密切相关^[25]，粗灰分代表肉中所含矿物质和维生素的含量，粗蛋白质和粗脂肪是肉中的营养物质代表性指标，适量的脂肪能提升肌肉的口感、嫩度和风味^[26]。本试验中，各组之间背最长肌水分、粗灰分、粗脂肪和粗蛋白质含量均无显著差异，说明葡萄籽原花青素在调控肌肉营养成分方面没有显著效果。

评定肉的营养价值和品质的主要依据除了营养成分指标外，还包括肉色、pH、系水力、嫩度等物理性指标^[27]。pH是评价肉品质的一项重要指标，是影响肌肉组织的系水力和嫩度的直接因素^[28]。肉品pH可以反映屠宰后肌糖原酵解速度和强度。pH越高，肌纤维贮存的糖原发生无氧酵解的速度越慢，水分渗出损失越少，蛋白质结构越稳定，肉品的保鲜性能越好^[4]。肉在成熟过程中，肌肉利用糖原产生能量维持一些耗能反应，同时会生产出大量乳酸导致pH下降。本试验中，肌肉pH结果在正常范围内，对照组与试验组无显著差异，说明饲粮中添加葡萄籽原花青素对肌肉pH没有显著影响，这与前人在猪饲粮中添加葡萄籽提取物后肉pH的影响结果^[29]一致。

肉色是肌肉外观评定的重要指标，其本身不影响肉的营养价值，但好的肉色能增加消费者的购买欲望。肌肉颜色的变化是由于肌红蛋白的变化引起的，肌红蛋白和氧气结合产生的氧合肌红蛋白使肌肉呈现鲜红色，如果转化成高铁肌红蛋白，肌肉就会呈现褐色^[30]。a^*值主要取决于肉中的肌红蛋白、色素和血红蛋白含量及化学形态。肌红蛋白含量与a^*值呈正相关，与L^*、b^*值呈负相关，即a^*值越高，表示肉色越好，L^*、b^*值越高，表示肉色相对较差^[31]。研究发现，猪饲粮中添加葡萄籽提取物能有效改善肉色^[29]。本试验中，20GSPs组宰后1 h肌肉a^*值显著高于对照组和10GSPs组，40GSPs组宰后1 h肌肉a^*值较对照组和10GSPs组有增加的趋势。这说明饲喂一定剂量的葡萄籽原花青素能改善育肥羔羊的感官品质，原因可能是葡萄籽原花青素提高了羔羊肌肉中肌红蛋白含量，从而使肉色更红更亮，增加消费者购买欲望。

系水力、剪切力、熟肉率等指标与肉质性状高度相关。系水力是指肉受外力作用时保持水分的能力，与肌肉的颜色、风味、嫩度和营养价值密切相关。熟肉率是衡量肌肉烹调时蛋白质变性丧失水分的指标。系水力和熟肉率越高，失水率越低，保水性越好，肉品质越好^[32]。剪切力是衡量肌肉嫩度的重要指标，剪切力越小，肌肉嫩度越好，剪切力越大，肌肉越老，其大小可能与肌肉中肌内脂肪和胶原含量有一定的关系^[33]。此外，有研究表明氧化性肌纤维比例的增加会降低肌肉剪切力，而植物多酚(白藜芦醇)可以抑制成肌细胞中过表达叉头转录因子发挥作用，从而促进肌肉氧化性肌纤维的表达，抑制酵解性纤维的表达，提高肌肉嫩度，降低剪切力^[34]。一些多酚类物质对畜禽肉品质影响方面的研究表明，饲粮中添加染料木黄酮能提高肉鸡胸肌的系水力和肌肉的抗氧化能力^[35]；饲粮中添加一定量的茶多酚能降低肉鸡胸肉及腿肉的剪切力和失水率^[36]。随着饲粮中葡萄籽原花青素添加剂量的提高，育肥猪背最长肌的剪切力也呈下降趋势^[37]。Zhao等^[6]在育肥羊饲粮中添加5%和10%酿酒葡萄皮渣可以显著降低背最长肌剪切力，同时降低胶原含量。本试验中，20GSPs和40GSPs组剪切力显著低于对照组和10GSPs组，说明饲喂适宜剂量的葡萄籽原花青素可以提高肉的嫩度，原因可能是多酚提高氧化性肌纤维类型比例或降低肌肉中胶原含量，具体机制还需进一步研究。

3.4 饲粮中添加葡萄籽原花青素对羔羊血清抗氧化指标的影响

有关原花青素具有清除氧自由基、提高机体抗氧化水平的报道甚多^[38-40]。尽管多酚并不是机体必需的营养素，但动物和人饮食中的多酚物质可以有效预防一些慢性或代谢性疾病，主要是通过调节机体抗氧化能力实现的。另有研究发现，植物多酚可以通过与细胞炎症信号分子结合，激活抗氧化信号通路，使机体抗氧化水平提高，缓解各种刺激造成的机体紊乱，从而达到缓解炎症和氧化损伤的效果^[41]。Zhao等^[6]研究表明，饲粮中添加10%或15%酿酒葡萄皮渣可以显著提高机体抗氧化能力，提高羔羊生长性能。本研究中，饲粮中添加葡萄籽原花青素可提高抗氧化物酶活性，说明饲粮中添加葡萄籽原花青素可以一定程度上改善育肥羊的抗氧化能力。羔羊机体抗氧化能力提升的原因可能在于葡萄籽原花青素激活了机体抗氧化酶体系，促使抗氧化酶活性增强所致。

4 结论

饲粮中添加适量葡萄籽原花青素，羔羊的平均日采食量、平均日增重提高，胴体重、净肉重及眼肌面积增大，背最长肌剪切力下降，血清抗氧化酶活性提高。因此，葡萄籽原花青素可以作为一种天然绿色添加剂在育肥羊生产中开发利用，且在本试验条件下，葡萄籽原花青素的适宜添加剂量为20 mg/kg BW。