复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊生长性能与免疫功能的影响

引用本文

刘世雄, 李冬芳, 郝凌魁, 于春微, 陈灰, 高民, 胡红莲, 刘大程. 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊生长性能与免疫功能的影响[J]. 动物营养学报, 2020, 32(7): 3263-3273.

LIU Shixiong, LI Dongfang, HAO Lingkui, YU Chunwei, CHEN Hui, GAO Min, HU Honglian, LIU Dacheng. Effects of Compound Bacteria Culture and Yeast β-Glucan on Growth Performance and Immune Function of Mutton Sheep[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2020, 32(7): 3263-3273.

复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊生长性能与免疫功能的影响

刘世雄¹ , 李冬芳¹ , 郝凌魁¹ , 于春微¹ , 陈灰¹ , 高民² , 胡红莲² , 刘大程¹

1. 内蒙古农业大学兽医学院, 呼和浩特 010018;
2. 内蒙古农牧业科学院动物营养与饲料研究所, 呼和浩特 010031

收稿日期: 2020-01-13

基金项目: 现代农业（奶牛）产业技术体系建设专项（CARS-36）；内蒙古自治区应用技术研究与开发资金计划（201602051）

作者简介: 刘世雄(1991-), 男, 内蒙古鄂尔多斯人, 硕士研究生, 兽医微生物学与免疫学专业。E-mail:1017435923@qq.com.

通信作者: 刘大程, 教授, 博士生导师, E-mail:nmgldc@163.com.

摘要: 本试验旨在研究复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊生长性能与免疫功能的影响。试验选取50日龄断奶健康公羔羊105只，随机分为3组，每组5个重复，每个重复7只羔羊。对照组饲喂全混合日粮（TMR），试验Ⅰ组在TMR中添加复合菌培养物（前期添加量为50 g/kg，中期与后期添加量为70 g/kg），试验Ⅱ组在TMR基础上额外添加酵母β-葡聚糖（75 mg/kg），试验期共137 d，其中预试期7 d，正试期130 d。在试验第1、30、60、90和130天空腹称肉羊体重，测定生长性能指标，并且在试验第1、30、60和90天采集血样，测定免疫指标。结果表明：1）与对照组相比，试验Ⅰ组和Ⅱ组平均体重分别提高了10.02%和5.05%（P < 0.05），屠宰率分别提高了1.29%和1.10%（P>0.05），料重比分别降低了10.33%（P < 0.05）和4.21%（P>0.05）。2）与对照组相比，试验Ⅰ组血清中酸性磷酸酶活性和溶菌酶含量显著提高（P < 0.05），试验Ⅰ组血清中免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、白细胞介素-lβ（IL-lβ）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）、干扰素-γ（INF-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、CD₃⁺含量及CD₄⁺/CD₈⁺显著提高（P < 0.05），试验Ⅱ组血清中IgG、IgM、IL-lβ含量显著提高（P < 0.05）。综上，复合菌培养物和酵母β-葡聚糖二者均可以显著提高肉羊平均体重；复合菌培养物显著提高肉羊的特异性免疫、非特异性免疫功能及降低料重比；酵母β-葡聚糖显著提高肉羊的特异性免疫功能。

关键词: 复合菌培养物酵母β-葡聚糖肉羊生长性能免疫功能

Effects of Compound Bacteria Culture and Yeast β-Glucan on Growth Performance and Immune Function of Mutton Sheep

LIU Shixiong¹ , LI Dongfang¹ , HAO Lingkui¹ , YU Chunwei¹ , CHEN Hui¹ , GAO Min² , HU Honglian² , LIU Dacheng¹

1. College of Veterinary, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China;
2. Research Institute of Animal Nutrition and Feed, Inner Mongolia Academy of Animal Sciences, Hohhot 010031, China

Corresponding author: LIU Dacheng, professor, E-mail: nmgldc@163.com.

Abstract: The purpose of this experiment was to study the effects of compound bacteria culture and yeast β-glucan on the growth performance and immune function of mutton sheep. In the experiment, 105 healthy weaned male lambs aged 50 days were randomly divided into 3 groups. The control group was fed a basal total mixed ration (TMR) diet, while the test group I was fed diets supplemented with a compound bacteria culture (50 g/kg in the early stage and 70 g/kg in the middle and late stages) and the test group Ⅱ was fed the TMR diet added with yeast β-glucan (75 mg/kg). The test lasted for 137 days including a 7-d preliminary period and a 130-d test period. The growth performance indicators were evaluated by lamb weights at days 1, 30, 60, 90, and 130, and the blood samples were collected at days 1, 30, 60, and 90 to determine the immune parameters. The results showed as follows:1) compared with the control group, the average body weights in test groups Ⅰ and Ⅱ increased by 10.02% and 5.05% (P < 0.05), respectively; the dressing percentages increased by 1.29%and 1.10% (P>0.05); the feed/gain decreased by 10.33% (P < 0.05) and 4.21% (P>0.05). 2) Compared with the control group, the serum acid phosphatase activity and lysozyme content of test group Ⅰ significantly increased (P < 0.05); the contents of immune globulin G, immune globulin M, CD₃⁺, interleukin-lβ, interleukin-2, interleukin-6, interferon-γ, tumor necrosis factor-α and CD₄⁺/CD₈⁺ in the serum of test group Ⅰ significantly enhanced (P < 0.05), and the contents of immune globulin G, immune globulin M, interleukin-lβ, of test group Ⅱ significantly significantly increased (P < 0.05). This results indicate that both the compound bacteria culture and yeast β-glucan can significantly increase the average body weight of lambs. Moreover, the compound bacteria culture not only markedly improve the specific and non-specific immunity but also reduce the feed/gain; yeast β-glucan dramatically increase the specific immunity of mutton sheep.

Key words: compound bacteria culture yeast β-glucan mutton sheep growth performance immune function

在肉羊养殖生产中羔羊腹泻和肉羊瘤胃酸中毒是生产中的常见病，发病率高，经济损失严重。人们尝试使用各种添加剂来缓解羔羊应激和提高动物机体的免疫力，常见的有植物提取物、微生态制剂、中草药制剂、低聚糖和生物饲料等，其中生物饲料添加剂显示出了积极的功效，诸多研究表明生物饲料添加剂不仅可以改善饲粮品质、提高饲粮的消化吸收率，还可以提高机体免疫力和缓解氧化应激。

已有的研究表明，酵母β-葡聚糖作为一种免疫刺激剂，具有增强动物机体免疫力、维持胃肠微生态平衡、增强机体抗氧化的功效^[1]，同时酵母β-葡聚糖可以刺激机体产生非特异性与特异性免疫反应^[2]，减少炎性细胞因子的产生，促进畜禽胃肠道发育，激活免疫细胞和补体系统，促进细胞因子生成^[3]，并有提高动物采食量的功效^[4]。复合菌培养物是课题组前期研究的一种微生物类发酵产品，该制剂由2株高活性酵母菌和1株枯草芽孢杆菌经发酵而成，其主效成分包括甘露聚糖、葡聚糖、氨基酸、多肽和有机酸等5种营养活性物质^[5]。这些活性物质能够为胃肠道微生物生长提供特殊营养底物，通过刺激瘤胃微生物的生长而达到调控瘤胃功能，其中酵母β-葡聚糖可以通过Toll样受体2(TLR2)信号通路活化巨噬细胞，增强巨噬细胞的吞噬能力，甘露聚糖能增强网状内皮系统的吞噬能力与淋巴细胞对病原微生物的吞噬作用，加强机体免疫与抗应激能力。

前期动物试验表明，复合菌培养物在抗应激和提高机体免疫力以及促进生长方面具有明显的功效^[6]。以往对动物机体免疫功能的研究多是侧重于对血清抗体的分析，事实上机体的免疫调节是一个系统工程，是需要通过特异性免疫与非特异性免疫协同发挥功效的。本试验通过研究复合菌培养物与酵母β-葡聚糖对肉羊生长性能的影响，同时系统研究二者对肉羊免疫功能的作用，旨在比较分析二者功效的差异，为复合菌培养物在肉羊生产实践中的应用提供理论支撑。

1 材料与方法 1.1 试验设计与饲养管理

试验在内蒙古巴彦淖尔市乌拉特前旗肉羊养殖园区进行。试验选取50日龄断奶健康公羔羊共105只，随机分为3组，每组5个重复，每个重复7只羔羊。试验期共137 d，其中预试期7 d，在预试期内对参试羔羊按常规程序进行消毒、防疫、打耳号、驱虫。正试期130 d，每天06:00、18:00分2次进行饲喂，自由饮水。

1.2 试验饲粮

根据各阶段肉羊对营养物质需求的不同，将试验分为前期(第1~30天)、中期(第31~90天)和后期(第91~130天)，对照组饲喂全混合日粮(TMR)，试验Ⅰ组在TMR(干物质基础)中添加复合菌培养物(前期添加量为50 g/kg，中期与后期添加量为70 g/kg)，试验Ⅱ组在TMR(干物质基础)基础上额外添加酵母β-葡聚糖(75 mg/kg)，TMR参照《肉羊饲养标准》(NY/T 816—2004)配制，各组饲粮能量和蛋白质水平相同，饲粮组成及营养水平见表 1。

表 1 饲粮组成及营养水平(干物质基础) Table 1 Composition and nutrient levels of diets (DM basis)

%
项目 Items	试验前期Pre-test period		试验中期Mid-test period		试验后期Late test period
项目 Items	试验Ⅰ组 Test group Ⅰ	试验Ⅱ组及对照组 Test group Ⅱ and control group	试验Ⅰ组 Test group Ⅰ	试验Ⅱ组及对照组 Test group Ⅱ and control group	试验Ⅰ组 Test group Ⅰ	试验Ⅱ组及对照组 Test group Ⅱ and control group
原料Ingredients
花生秧Peanut vine	22.00	22.00	13.50	14.00	10.00	10.00
玉米秸秆Corn stalk	4.00	5.00	4.00	4.50	5.00	5.50
葵花籽皮Sunflower seed skin	4.00	5.00	4.00	4.50	5.00	5.50
苜蓿草粉Alfalfa meal	10.00	11.00	13.00	13.50	12.00	12.00
玉米Corn	27.00	26.50	32.00	31.00	38.00	39.00
豆粕Soybean meal	10.00	11.00	8.00	9.00	8.00	8.00
胚芽粕Germ meal	5.50	6.00	4.00	6.50	3.00	7.00
棉籽粕Cotton meal	6.00	6.00	5.50	6.50	3.00	4.00
小麦麸Wheat bran	2.00	3.00
花生饼Peanut cake			4.00	5.00	3.00	3.00
食盐NaCl	0.50	0.50	0.50	0.50	0.50	0.50
小苏打NaHCO₃	0.50	0.50	0.50	0.80	1.00	1.00
石粉Limestone			0.50	0.70	0.50	0.50
磷酸氢钙CaHPO₄	0.50	0.50	0.50	0.50	0.50	0.50
氯化铵NH₄Cl					0.50	0.50
4%预混料4% premix¹⁾	3.00	3.00	3.00	3.00	3.00	3.00
复合菌培养物 Compound bacteria culture	5.00		7.00		7.00
合计Total	100.00	100.00	100.00	100.00	100.00	100.00
营养水平Nutrient levels²⁾
消化能DE/(MJ/kg)	10.48	10.45	10.83	10.78	11.12	11.08
干物质DM	89.55	89.72	89.44	89.70	89.30	89.50
粗蛋白质CP	14.81	14.91	15.27	16.13	13.41	13.38
中性洗涤纤维NDF	32.64	32.89	30.00	29.73	28.86	28.22
酸性洗涤纤维ADF	21.78	22.25	19.73	19.73	18.70	18.17
钙Ca	1.36	1.37	1.42	1.51	1.32	1.30
磷P	0.44	0.45	0.42	0.44	0.39	0.44
1)预混料为每千克饲粮提供The premix provided the following per kg of diets:Fe 60 mg，Cu 12 mg，Zn 60 mg，Mn 45 mg，烟酸nicotinic acid 60 mg，I 0.6 mg，Se 0.2 mg，VA 3 500 IU，VD 1 200 IU，VE 20 IU，Ca 2 g，P 1 g，Co 20 mg，NaCl 5 g。 2)消化能为计算值，其余营养水平为实测值。DE was a calculated value，while other nutrient levels were measured values.

表 1 饲粮组成及营养水平(干物质基础) Table 1 Composition and nutrient levels of diets (DM basis)

1.3 样品采集与指标测定 1.3.1 生长性能和屠宰性能指标测定

正试期内每天对剩料进行精准称量并计算出动物日采食量，在试验第30、60、90、130天计算平均日采食量。在试验第1、30、60、90、130天晨饲前空腹称重，计算平均日增重、料重比(平均日采食量/平均日增重)。在试验期最后1 d空腹称重，隔日进行屠宰。屠宰当日称取胴体重，计算料肉比(饲粮日消耗量/胴体重增加量)、屠宰率等。

1.3.2 血液样本采集

试验Ⅰ组、Ⅱ组与对照组各选5只羊，分别在试验第1、30、60、90天晨饲前用促凝管进行颈静脉采血10 mL。待静止30 min后，以3 000 r/min离心10 min，用一次性吸管吸取上层血清于5 mL无菌无酶冻存管中。置于-80 ℃保存，用于检测血清免疫指标。

1.3.3 血清免疫指标的测定

采用南京建成生物工程研究所生产的酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒测定T淋巴细胞亚群(CD₃⁺、CD₄⁺、CD₈⁺)、白细胞介素-lβ(IL-lβ)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、免疫球蛋白M(IgM)以及免疫球蛋白G(IgG)、溶菌酶(LZM)含量及酸性磷酸酶(ACP)活性。检测方法严格按照试剂盒说明书进行。

1.4 统计分析

采用Excel 2010对试验数据进行整理与计算，利用SAS 9.0统计软件中的ANOVA对数据进行方差分析，以Duncan氏法进行多重比较，结果以平均值±标准差的形式来表示，P＜0.05为差异显著。

2 结果与分析 2.1 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊生长性能的影响

由表 2可知，第1~30天、第31~60天、第61~90天，试验Ⅰ组、Ⅱ组与对照组平均日采食量无显著差异(P＞0.05)；第91~130天，试验Ⅰ组平均日采食量较对照组提高了4.46%(P＜0.05)，试验Ⅱ组较对照组提高了9.41%(P＜0.05)，试验Ⅱ组较试验Ⅰ组提高了100 g(P＜0.05)；在130 d的整个试验期内，3组间平均日采食量差异不显著(P＞0.05)。

表 2 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊生长性能的影响 Table 2 Effects of compound bacteria culture and yeast β-glucan on growth performance of mutton sheep

项目 Items	时间 Time	对照组 Control group	试验Ⅰ组 Test group Ⅰ	试验Ⅱ组 Test group Ⅱ	P值 P-value
平均日采食量 ADFI/(kg/d)	第1~30天Days 1 to 30	0.84±0.13	0.83±0.14	0.83±0.13	0.997
	第31~60天Days 31 to 60	1.44±0.18	1.45±0.19	1.44±0.18	0.996
	第61~90天Days 61 to 90	1.94±0.13	1.96±0.09	1.91±0.12	0.762
	第91~130天Days 91 to 130	2.02±0.06^c	2.11±0.07^a	2.21±0.07^b	0.003
	第1~130天Days 1 to 130	1.56±0.54	1.59±0.58	1.60±0.60	0.996
平均体重 BW/kg	第1天Day 1	12.74±1.06	12.70±0.98	12.72±1.23	0.999
	第30天Day 30	20.42±1.05	20.53±1.15	19.78±1.11	0.531
	第60天Day 60	31.09±1.08	32.06±1.31	30.96±1.33	0.349
	第90天Day 90	41.77±0.95^b	43.53±1.16^a	41.24±1.23^a	0.018
	第130天Day 130	51.52±1.23^c	56.68±1.79^a	54.12±1.61^b	< 0.001
平均日增重 ADG/(g/d)	第1~30天Days 1 to 30	255.93±10.02^a	260.73±8.40^a	235.33±12.33^b	0.005
	第31~60天Days 31 to 60	355.87±9.05^b	384.40±14.38^a	372.80±12.76^a	0.010
	第61~90天Days 61 to 90	356.00±13.75^b	382.27±14.45^a	342.53±15.98^b	0.004
	第91~130天Days 91 to 130	243.80±14.10^b	328.95±21.61^a	322.05±14.96^a	< 0.001
	第1~130天Days 1 to 130	298.35±2.29^c	338.31±7.28^a	318.48±4.70^b	< 0.001
料重比 F/G	第1~30天Days 1 to 30	3.26±0.40	3.18±0.45	3.52±0.40	0.433
	第31~60天Days 31 to 60	4.04±0.43	3.76±0.35	3.85±0.37	0.510
	第61~90天Days 61 to 90	5.45±0.19^a	5.13±0.09^b	5.57±0.17^a	0.003
	第91~130天Days 91 to 130	8.30±0.25^a	6.43±0.21^c	6.86±0.15^b	< 0.001
	第1~130天Days 1 to 130	5.23±0.38^a	4.69±0.26^b	5.01±0.31^ab	0.060
同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P＞0.05)，不同字母表示差异显著(P＜0.05)。下表同。 In the same row，values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P＞0.05)，while with different letter superscripts mean significant difference (P＜0.05). The same as below.

表 2 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊生长性能的影响 Table 2 Effects of compound bacteria culture and yeast β-glucan on growth performance of mutton sheep

第1、30和60天，试验Ⅰ组和Ⅱ组与对照组间平均体重无显著差异(P＞0.05)；第90天，试验Ⅰ组平均体重较对照组提高了4.21%(P＜0.05)，试验Ⅱ组与对照组间差异不显著(P＞0.05)；第130天，试验Ⅰ组和Ⅱ组平均体重较对照组提高了10.02%和5.05%(P＜0.05)；在130 d的整个试验期内，平均体重最高的是试验Ⅰ组，为56.68 kg，并且试验Ⅰ组和Ⅱ组显著高于对照组，分别较对照组提高了5.16和2.60 kg(P＜0.05)。

第1~30天，平均日增重最高的是试验Ⅰ组，与对照组差异不显著(P＞0.05)，较试验Ⅱ组提高了10.79%(P＜0.05)；第31~60天，试验Ⅰ组和Ⅱ组平均日增重分别较对照组提高了28.53和16.93 g(P＜0.05)；第61~90天，3组中平均日增重最高的为试验Ⅰ组，较试验Ⅱ组和对照组分别提高了11.60%和7.38%(P＜0.05)；第91~130天，试验Ⅰ组和Ⅱ组平均日增重较对照组分别提高了34.93%和32.10%(P＜0.05)；在130 d的整个试验期内，平均日增重最高的是试验Ⅰ组，而且试验Ⅰ组和Ⅱ组较对照组分别提高了39.96和20.13 g(P＜0.05)。

第1~30天、第31~60天，试验Ⅰ组和Ⅱ组与对照组间的料重比差异不显著(P＞0.05)；第61~90天，试验Ⅰ组料重比较对照组下降了5.87%(P＜0.05)，试验Ⅱ组与对照组间料重比无显著差异(P＞0.05)；第91~130天，3组间料重比均呈现显著差异(P＜0.05)，其中试验Ⅰ组的料重比为最低；在130 d的整个试验期内，只有试验Ⅰ组料重比较对照组显著降低(P＜0.05)，下降了11.51%。

2.2 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊屠宰性能的影响

由表 3可知，宰前活重最大的是试验Ⅰ组，分别较试验Ⅱ组与对照组提高了2.56和5.16 kg(P＜0.05)，试验Ⅱ组较对照组提高了2.60 kg(P＜0.05)；试验Ⅰ组与Ⅱ组的胴体重较对照组的分别提高了11.44%和6.19%(P＜0.05)；试验Ⅰ组和Ⅱ组与对照组间屠宰率无显著差异(P＞0.05)；试验Ⅰ组料肉比较对照组降低了12.85%(P＜0.05)，试验Ⅱ组与对照组间无显著差异(P＞0.05)。

表 3 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊屠宰性能的影响 Table 3 Effects of compound bacteria culture and yeast β-glucan on slaughter performance of mutton sheep

2.3 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊血清免疫功能的影响 2.3.1 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊血清非特异性免疫指标的影响

由表 4可知，第1、30和60天，3组间血清中溶菌酶含量、酸性磷酸酶活性无显著差异(P＞0.05)；第90天，试验Ⅰ组血清中溶菌酶含量、酸性磷酸酶活性显著高于对照组(P＜0.05)，而试验Ⅱ组与对照组间无显著差异(P＞0.05)，试验Ⅰ组血清中酸性磷酸酶活性显著高于试验Ⅱ组(P＜0.05)。

表 4 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊血清非特异性免疫指标的影响 Table 4 Effects of compound bacteria culture and yeast β-glucan on non-specific immune indexes in serum of mutton sheep

2.3.2 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊血清免疫指标的影响

由表 5可知，第1、30天，各组间血清中IgM、IgG含量无显著差异(P＞0.05)；第60天，试验Ⅰ组血清中IgM、IgG含量较对照组分别提高了33.60%、12.42%(P＜0.05)，试验Ⅱ组血清中IgM、IgG含量较对照组分别提高了18.40%(P＜0.05)、7.72%(P＞0.05)；第90天，试验Ⅰ组和Ⅱ组血清中IgM、IgG含量与对照组均有显著差异(P＜0.05)。

表 5 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊血清免疫指标的影响 Table 5 Effects of compound bacteria culture and yeast β-glucan on immune indexes in serum of mutton sheep

2.3.3 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊血清中细胞免疫相关因子的影响

由表 6可知，第1天，3组间血清中细胞免疫相关因子含量均无显著差异(P＞0.05)；第30天，试验Ⅰ组血清中TNF-α、IFN-γ、IL-2含量均显著高于对照组(P＜0.05)，血清IL-4含量显著低于对照组(P＜0.05)，而试验Ⅱ组血清中TNF-α含量显著高于对照组(P＜0.05)；第60天，各试验组指标较对照组均有所改善，与对照组相比，试验Ⅰ组血清中IFN-γ、TNF-α、IL-6含量显著提高(P＜0.05)，血清中IL-4含量显著降低(P＜0.05)，试验Ⅱ组血清中IL-10含量显著降低(P＜0.05)；第90天，试验Ⅰ组血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ、IL-2含量与对照组相比均显著提高(P＜0.05)，血清中IL-4、IL-10含量显著下降(P＜0.05)，试验Ⅱ组只有血清中IL-1β含量较对照组显著提高(P＜0.05)，血清中IL-10含量较对照组显著降低(P＜0.05)。

表 6 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊血清中细胞免疫相关因子的影响 Table 6 Effects of compound bacteria culture and yeast β-glucan on cells immune related factors in serum of mutton sheep

pg/mL
项目 Items	时间 Time	对照组 Control group	试验Ⅰ组 Test group Ⅰ	试验Ⅱ组 Test group Ⅱ	P值 P-value
肿瘤坏死因子-α TNF-α	第1天Day 1	46.55±4.62	53.85±6.64	52.32±7.10	0.189
	第30天Day 30	37.37±1.60^c	60.56±7.93^a	51.41±7.59^b	< 0.001
	第60天Day 60	52.52±2.81^b	66.03±4.56^a	55.79±3.90^b	< 0.001
	第90天Day 90	57.10±8.91^b	70.03±6.44^a	62.93±4.36^ab	0.049
白细胞介素-1β IL-1β	第1天Day 1	16.75±2.46	17.34±1.63	19.03±2.27	0.260
	第30天Day 30	19.30±0.78	21.08±1.57	19.93±1.66	0.149
	第60天Day 60	23.19±2.25	25.13±2.84	23.32±1.72	0.365
	第90天Day 90	22.52±2.52^b	26.67±0.63^a	25.88±2.91^a	0.030
白细胞介素-4 IL-4	第1天Day 1	9.24±1.19	10.91±0.66	9.77±1.68	0.140
	第30天Day 30	9.74±0.83^a	7.58±1.16^b	8.14±1.64^ab	0.047
	第60天Day 60	9.12±0.96^a	6.63±0.69^b	8.25±1.32^a	0.007
	第90天Day 90	7.93±0.87^a	6.70±0.79^b	7.72±0.54^ab	0.050
白细胞介素-6 IL-6	第1天Day 1	115.68±9.50	123.00±9.13	120.76±8.74	0.454
	第30天Day 30	132.92±9.78^a	121.26±11.22^a	101.52±8.54^b	0.001
	第60天Day 60	149.83±8.97^b	168.53±10.30^a	161.58±11.60^ab	0.042
	第90天Day 90	156.31±6.31^b	174.96±18.04^a	171.07±9.85^ab	0.080
白细胞介素-10 IL-10	第1天Day 1	14.36±2.89	12.57±1.94	13.31±2.87	0.567
	第30天Day 30	13.22±1.69	13.02±0.98	13.12±1.60	0.977
	第60天Day 60	12.20±0.96^b	10.63±1.51^ab	12.98±1.43^a	0.086
	第90天Day 90	10.78±0.81^a	8.33±1.03^b	8.79±0.64^b	0.001
干扰素-γ IFN-γ	第1天Day 1	26.23±6.17	31.36±4.52	31.01±4.39	0.245
	第30天Day 30	28.69±1.69^b	34.28±2.74^a	29.18±3.99^b	0.020
	第60天Day 60	32.43±2.16^b	45.26±5.16^a	34.24±3.42^b	< 0.001
	第90天Day 90	40.28±5.64^b	51.30±5.73^a	44.83±7.31^ab	0.050
白细胞介素-2 IL-2	第1天Day 1	209.85±25.73	216.87±12.45	213.75±9.54	0.818
	第30天Day 30	221.80±14.24^b	282.47±19.66^a	227.26±11.20^b	< 0.001
	第60天Day 60	246.88±28.68^b	305.31±8.70^a	268.30±13.16^b	0.001
	第90天Day 90	285.26±23.76^b	348.40±37.44^a	305.31±15.47^b	0.009

2.3.4 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊血清中T淋巴细胞亚群的影响

由表 7可知，第1天，只有试验Ⅱ组血清中CD₄⁺/CD₈⁺较对照组显著降低(P＜0.05)，3组间血清CD₃⁺、CD₄⁺、CD₈⁺含量均无显著差异(P＞0.05)；第30天，试验Ⅰ组血清中CD₈⁺含量较对照组下降了23.57%(P＜0.05)，第30、60天，3组间血清中CD₃⁺、CD₄⁺含量及CD₄⁺/CD₈⁺均无显著差异(P＞0.05)；第90天，试验Ⅰ组血清中CD₃⁺、CD₄⁺含量及CD₄⁺/CD₈⁺较对照组分别提高了18.13%、20.84%、17.24%(P＜0.05)。

表 7 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊血清中T淋巴细胞亚群含量的影响 Table 7 Effects of compound bacteria culture and yeast β-glucan on T lymphocyte subsets contents in serum of mutton sheep

3 讨论 3.1 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊生长性能的影响

本试验所选用的羔羊是从多个养殖场购买，50日龄、平均体重为12.72 kg。在羔羊育肥试验中，通常使用的动物为3月龄左右、平均体重20~25 kg，可见，本试验动物日龄小、体重偏低，消化、免疫系统尚未发育完全，消化吸收能力差，加上运输途中会对动物产生很大的应激，即使饲喂复合菌培养物等营养活性物质，动物也需要一定的时间进行适应和缓解^[7]，因此，在试验初期添加复合菌培养物与酵母β-葡聚糖后，试验动物在采食量与日增重两方面均未表现出显著的效果。随着试验时间的延长，2个试验组肉羊的平均日增重和平均日采食量等生长性能指标和屠宰率有了明显优势，料重比明显降低，其原因可能是复合菌培养物中含有的甘露聚糖和葡聚糖等营养活性物质进入肠道后抑制了有害菌的繁殖，促进了有益菌生长与小肠结构的发育^[8]，从而加强了肠道对营养物质的消化吸收；同时，复合菌培养物中含有大量的有机酸，降低了肠道内pH，激活消化酶，降解了饲粮中大分子物质，提高了营养物质的消化率^[9]；并且使饲粮具有了酸香味，改善了饲粮的适口性^[10]，刺激了肉羊的嗅觉，增加食欲。而添加酵母β-葡聚糖可能是通过提高消化吸收效率而间接促进了采食量的增加，进而提高了肉羊的日增重。

另外在动物试验中观察到，饲喂复合菌培养物的羊只瘤胃绒毛较长、结构致密，而对照组的羊只瘤胃绒毛较短、数量稀疏，甚至许多区域出现绒毛脱落的现象。在生产中，养殖者为了追求较高的经济效益，在肉羊育肥中、后期往往会提高精料的比例来提高增重效率，然而这样容易造成瘤胃酸中毒，从而出现瘤胃结构损伤、黏膜脱落等现象，而试验组由于饲喂复合菌培养物，其中含有益生菌和营养活性物质能够有效促进瘤胃上皮细胞的发育^[11]，从而使瘤胃绒毛变长、数量增多，有利于动物机体对酸性物质的吸收，另外，培养物中的代谢产物为瘤胃微生物的生长提供了丰富的营养底物，促进了乳酸利用菌的生长^[12]，从而加强了瘤胃对酸的吸收能力。

3.2 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊非特异性免疫功能的影响

溶菌酶与酸性磷酸酶是动物机体重要的非特异性免疫因子，在维持机体非特异性免疫平衡和动物抵御病害过程中起到了积极作用^[13]。研究显示，酸性磷酸酶是巨噬细胞溶酶体的标志酶，可以水解磷酸酯，直接参与体内磷酸基团的转移，并与DNA、蛋白质和脂类代谢有关。溶菌酶是单核细胞分泌的一种能溶解细菌细胞壁的水解酶，在吞噬细胞杀菌过程中起到重要作用。本试验结果显示，添加复合菌培养物后肉羊血清中溶菌酶含量与酸性磷酸酶活性显著高于对照组，一方面是由于复合菌培养物富含多种营养活性物质，促进了免疫器官与淋巴组织的发育，加快机体免疫机能成熟，活化巨噬细胞，刺激体内溶菌酶的产生^[14]，从而提高了机体的抗菌防御机能^[15]；另一方面培养物中的益生菌能有效刺激肠黏膜免疫，促进机体的免疫应答，激活巨噬细胞，增加酸性磷酸酶活性，进而提高机体的抗病能力^[16]。

3.3 复合菌培养物及酵母β-葡聚糖对肉羊特异性免疫功能的影响

血液是动物机体内环境稳定的重要因素，通过检测血液免疫指标，能够反映营养物质代谢、病理变化和免疫状态。有研究表明，饲粮中添加含酵母菌的微生态制剂能显著提高肉羊血清中IgG、IgM、IgA含量，进而增强机体的抗病能力^[17]。本试验结果表明，添加复合菌培养物与酵母β-葡聚糖后二者均可显著提高肉羊血清中IgM和IgG含量，说明复合菌培养物与酵母β-葡聚糖均可改善机体免疫功能。究其原因可能是复合菌培养物中的营养活性物质和益生菌进入动物机体后，能够促进胃肠道正常菌群的繁殖，调节肠道微生态平衡，并占据消化道上的定植位点，从而直接作用于宿主免疫系统，诱发肠黏膜免疫，促进免疫球蛋白分泌，从而提高了机体免疫功能^[18]；此外，培养物中的β-葡聚糖、甘露聚糖等活性多糖可以通过吸附毒素和病原微生物来提高动物机体的抗病力。有研究表明，含有乳酸菌与酵母菌混合微生态制剂以5%的剂量添加到绵羊饲粮中，可显著提高绵羊吞噬细胞的吞噬功能和血清抗体水平，增强机体的免疫力和抗病力^[19]，这一结果也支持了本研究的结论。

T淋巴细胞亚群检测是评价动物机体细胞免疫水平的重要方法，其稳定性是维持机体正常免疫调节的重要因素，其中CD₃⁺淋巴细胞表示外周血T细胞总数，反映机体细胞免疫的功能，而CD₄⁺/CD₈⁺作为评判机体细胞免疫功能强弱的一项重要指标，当CD₄⁺/CD₈⁺上升，表示细胞免疫功能增强；当CD₄⁺/CD₈⁺下降，表示细胞免疫功能降低。同时，在动物血清中细胞因子虽然含量较少，但在机体防御疾病过程中发挥着重要作用^[20]。如血清中IL-2能促进自然杀伤细胞的细胞毒性；IL-6能促进B淋巴细胞增殖分化产生抗体；IFN-γ具有抗病毒、增强巨噬细胞的吞噬的功能。本试验研究表明，添加复合菌培养物后肉羊血清中IL-2、IL-6、IFN-γ、CD₃⁺含量与CD₄⁺/CD₈⁺均显著提高；而酵母β-葡聚糖组中只有血清中IL-1β含量显著提高。究其原因可能有2方面：一是复合菌培养物中的甘露聚糖通过活化巨噬细胞触发了肠道上皮细胞或肠道相关淋巴组织的免疫活性，同时，活化的巨噬细胞能通过Toll样受体4(TLR4)介导产生IL-6、IFN-γ和TNF-α等细胞因子；二是培养物中的甘露聚糖、β-葡聚糖本身具有一定免疫原性，能与毒素、病毒的表面受体结合，作为外源抗原助剂，减缓抗原吸收，增加抗原效价，从而增强动物机体细胞免疫功能；此外，培养物中的多肽、有机酸等活性物质进入动物机体后发挥了免疫增强剂的作用，激活免疫器官，促进T淋巴细胞的增殖和B淋巴细胞的活性。

4 结论

① 与对照组相比，试验Ⅰ组和Ⅱ组的平均体重分别提高了10.02%和5.05%，料重比分别降低了10.33%和4.21%，表明复合菌培养物及酵母β-葡聚糖二者均可以显著提高肉羊生长性能。

② 与对照组相比，试验Ⅰ组肉羊血清中特异性免疫指标IgG、TNF-α、IL-1β、IL-6含量和CD₄⁺/CD₈⁺显著提高，非特异性免疫指标血清酸性磷酸酶活性和溶菌酶含量也显著提高；试验Ⅱ组中血清特异性免疫指标IgG、IL-1β和IgM含量显著提高，表明复合菌培养物显著提高了肉羊的特异性免疫和非特异性免疫功能，而酵母β-葡聚糖显著提高了肉羊的特异性免疫功能。

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