发酵桑叶对湘西黄牛×利木赞杂交F1代育肥牛血清生化、抗氧化及免疫指标的影响

引用本文

罗阳, 李昊帮, 肖建中, 李剑波, 孙鏖, 李晟, 艾均文, 易康乐. 发酵桑叶对湘西黄牛×利木赞杂交F1代育肥牛血清生化、抗氧化及免疫指标的影响[J]. 动物营养学报, 2020, 32(10): 4914-4921.

LUO Yang, LI Haobang, XIAO Jianzhong, LI Jianbo, SUN Ao, LI Sheng, AI Junwen, YI Kangle. Effects of Fermented Mulberry Leaves on Serum Biochemical, Antioxidant and Immune Indexes of Xiangxi Yellow Cattle×Limousin Hybrid F1 Fattening Bulls[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2020, 32(10): 4914-4921.

发酵桑叶对湘西黄牛×利木赞杂交F1代育肥牛血清生化、抗氧化及免疫指标的影响

罗阳¹ , 李昊帮¹ ^*, 肖建中² , 李剑波¹ , 孙鏖¹ , 李晟¹ , 艾均文² , 易康乐¹

1. 湖南省畜牧兽医研究所, 长沙 410131;
2. 湖南省蚕桑科学研究所, 长沙 410127

收稿日期: 2020-04-26

基金项目: "十三五"国家重点研发计划（2018YFD050170）；湖南省科技重大专项（2017NK1020）；现代农业产业技术体系建设专项（No.CARS-18）

作者简介: 罗阳(1988-), 男, 湖南张家界人, 助理研究员, 硕士, 从事反刍动物营养与饲料科学研究。E-mail:xinhelu509@163.com.

通信作者: 艾均文, 研究员, E-mail:aijunwen718@sina.com;
易康乐, 研究员, E-mail:23404504@qq.com.

*作者贡献相同

摘要: 本试验旨在研究不同比例发酵桑叶对湘西黄牛×利木赞杂交F1代育肥牛（湘西杂交育肥黄牛）血清生化、抗氧化及免疫指标的影响。试验选取20头12~15月龄、平均体重为（244.25±12.32）kg的健康湘西杂交育肥黄牛，随机分为4组，每组5个重复，每个重复1头牛。各组饲粮中分别添加0（CG组，对照组）、10%（LG组）、20%（MG组）和30%发酵桑叶（HG组）。预试期10 d，正试期60 d。结果表明：1）HG组的干物质采食量显著高于CG、LG和MG组（P < 0.05），HG和LG组的平均日增重显著高于CG和MG组（P < 0.05）。2）MG组第60天血清葡萄糖（GLU）含量显著低于CG组（P < 0.05），MG组第30、60天血清总胆固醇（TCHO）含量显著低于CG和HG组（P < 0.05），CG组第30天血清极低密度脂蛋白（VLDL）含量显著高于HG组（P < 0.05），MG、HG组第60天血清低密度脂蛋白（LDL）含量显著低于LG组（P < 0.05），LG和HG组第60天血清高密度脂蛋白（HDL）含量显著低于CG组（P < 0.05）。3）HG组第30天血清丙二醛（MDA）含量显著低于CG组（P < 0.05），LG和HG组第60天血清过氧化氢酶（CAT）活性显著高于MG组（P < 0.05）。4）LG组第30天血清补体3（C3）含量显著低于CG组（P < 0.05）。由此可见，饲粮添加发酵桑叶能够促进湘西杂交育肥黄牛的生长，降低血清GLU、TCHO及MDA含量，从而调节动物的血糖、血脂及抗氧化功能。

关键词: 发酵桑叶湘西黄牛育肥血清生化指标抗氧化免疫

Effects of Fermented Mulberry Leaves on Serum Biochemical, Antioxidant and Immune Indexes of Xiangxi Yellow Cattle×Limousin Hybrid F1 Fattening Bulls

LUO Yang¹ , LI Haobang¹ ^*, XIAO Jianzhong² , LI Jianbo¹ , SUN Ao¹ , LI Sheng¹ , AI Junwen² , YI Kangle¹

1. Hunan Institute of Animal and Veterinary Science, Changsha 410131, China;
2. Sericulture Research Institute of Hunan Province, Changsha 410127, China

Corresponding author: AI Junwen, professor, E-mail: aijunwen718@sina.com;
YI Kangle, professor, E-mail: 23404504@qq.com.

* Contributed equally

Abstract: This experiment was conducted to study the effects of different proportions of fermented mulberry leaves on serum biochemical, antioxidant and immune indexes of Xiangxi yellow cattle×Limousin hybrid F1 fattening bulls (Xiangxi hybrid fattening yellow cattle). Twenty 12 to 15-month-old health Xiangxi hybrid fattening yellow cattle with similar body weight of (244.25±12.32) kg were randomly divided into 4 groups with 5 replicates in each group and 1 cattle in each replicate. Cattle in 4 groups were fed diets supplemented wtih 0 (CG group), 10% (LG group), 20% (MG group), and 30% (HG group) fermented mulberry leaves, respectively. The pre-experimental period lasted for 10 days, and the experimental period lasted for 60 days. The results showed as follows: 1) the dry matter feed intake of HG group was significantly higher than that of CG, LG and MG groups (P < 0.05), and the average daily gain of HG and LG groups was significantly higher than that of CG and MG groups (P < 0.05). 2) The serum glucose (GLU) content on day 60 of MG group was significantly lower than that of CG group (P < 0.05), and the serum total cholesterol (TCHO) content on days 30 and 60 of MG group was significantly lower than that of CG and HG group (P < 0.05), the serum very low density lipoprotein (VLDL) content on day 30 of CG group was significantly higher than that of HG group (P < 0.05), the serum low density lipoprotein (LDL) content on day 60 of MG and HG groups was significantly lower than that of LG group (P < 0.05), and the serum high density lipoprotein (HDL) content on day 60 of LG and HG groups was significantly lower than that of CG group (P < 0.05). 3) The serum malondialdehyde (MDA) content on day 30 of HG group was significantly lower than that of CG group (P < 0.05), and the serum catalase (CAT) activity on day 60 of LG and HG groups was significantly higher than that of MG group (P < 0.05). 4) The serum complement 3 (C3) content on day 30 of LG group was significantly lower than that of CG group (P < 0.05). In conclusion, dietary fermented mulberry leaves can improve the growth of Xiangxi hybrid fattening yellow cattle, decrease the contents of GLU, TCHO and MDA, thus regulate the functions of blood glucose, blood lipid and antioxidant of animals.

Key words: fermented mulberry leaves Xiangxi yellow cattle fattening serum biochemical indexes antioxidant immune

桑树(Morus alba L.)是多年生落叶木本植物，具有较强的抗逆性和生态适应性^[1]。桑叶的营养全面均衡，且富含维生素、矿物质及生物活性物质，在动物生产中已逐渐推广应用^[2-4]。桑叶微甜，对反刍动物有良好的适口性，其主要利用方式有鲜喂、风干制粉和青贮发酵。现代化养殖不仅要求生产成本低、产品品质高，还十分注重动物健康福利。研究发现，桑叶具有降血糖、降血脂、抗氧化以及提高免疫力的效果，被称为“药食同源”性植物^[5-7]。学者对桑叶的功能性研究多以小鼠、鸡以及罗非鱼等为试验对象^[8-10]，而其在反刍动物上的研究则多集中在生长性能、肉品质以及经济效益等方面^[11-12]。

近年来，消费者对肉、蛋、奶的需求量增加，畜牧业的发展也逐渐向集约化、规模化演变，饲草资源短缺已成为制约我国畜牧业发展的关键性因素，如何摆脱对进口饲草的依赖，开发出本土新型饲料成为我国畜牧工作者的重要任务。本团队前期研究发现，饲粮中添加10%的桑叶粉能够促进山羊瘤胃发酵^[13]；饲粮中添加发酵桑叶可以提高杂交育肥牛的平均日增重、屠宰性能和肌肉品质，促进氨基酸和脂肪酸在肌肉中沉积^[14-15]。本试验在发酵桑叶育肥试验的基础上，研究发酵桑叶对湘西黄牛×利木赞杂交F1代公牛(以下称湘西杂交育肥黄牛)血清生化、抗氧化及免疫指标的影响，探讨发酵桑叶调节血脂、血糖和免疫的变化规律，评估杂交育肥牛饲喂发酵桑叶后的健康状况，以期为全面推广桑叶在草食畜牧业中的应用提供更多的科学研究数据。

1 材料与方法 1.1 试验设计

本试验在湖南省怀化市新晃县某湘西黄牛育肥场进行，挑选20头12~15月龄、体重[(244.25±12.32) kg]相近的健康湘西杂交育肥黄牛，按照随机分组原则将试验牛分为4组，每组5个重复，每个重复1头牛。各组饲粮中分别添加0(CG组，对照组)、10%(LG组)、20%(MG组)和30%发酵桑叶(HG组)。试验期70 d，其中预试期10 d，正试期60 d，试验全期栓系饲养，每天07：00和18：00自由采食和饮水。预试期主要对试验牛只进行驱虫、打耳标和适应试验饲粮。在正试期第1(试验前期)、30(试验中期)和60天(试验后期)进行尾静脉采血，每隔15 d测1次采食量，试验结束后测定试验牛的体重，计算平均日增重。

1.2 桑叶处理

新鲜桑叶由湖南省某桑叶种植基地提供，经铡草机粉碎成2 cm左右的碎屑后，按照1：1×10⁵质量比添加青贮宝(主要成分为乳酸片球菌、植物乳杆菌及其代谢产物，活菌数大于1×10¹⁰ CFU/g，购自湖南某牧业有限公司)和2%的白砂糖，用圆捆青贮裹包机进行密封，置于阴凉处自然发酵30 d(环境温度25~30 ℃)，发酵完成的桑叶无霉变，呈黄绿色、散发酸香味，水分含量为71.34%，粗蛋白质(CP)含量为16.66%，粗脂肪(EE)含量为16.62%，中性洗涤纤维(NDF)含量为69.00%，酸性洗涤纤维(ADF)含量为23.96%。

1.3 试验饲粮

利用美国BRILL配方软件，参照NRC(2000)肉牛饲养标准设计全混合日粮配方，试验饲粮组成及营养水平见1表。

表 1 试验饲粮组成及营养水平(干物质基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis)

%
项目 Items	组别Groups
项目 Items	CG	LG	MG	HG
原料Ingredients
玉米Corn	36.45	38.88	39.00	40.12
豆粕Soybean meal	6.07	5.50	4.50	3.50
酒糟Vinasse	19.44	16.70	14.14	13.21
全株青贮玉米Whole corn silage	23.09	14.58	9.60	1.17
发酵桑叶Fermented mulberry leaves		10.00	20.00	30.00
稻草Straw	12.15	11.54	10.00	9.32
食盐NaCl	0.61	0.61	0.60	0.58
小苏打NaHCO₃	0.49	0.49	0.48	0.47
预混料Premix¹⁾	1.70	1.70	1.68	1.63
合计Total	100.00	100.00	100.00	100.00
营养水平Nutrient levels²⁾
综合净能NE_mf/(MJ/kg)	7.21	7.09	7.00	6.84
粗蛋白质CP	11.08	11.60	13.41	14.00
粗脂肪EE	9.58	11.26	8.87	11.20
中性洗涤纤维NDF	68.39	57.15	71.41	64.49
酸性洗涤纤维ADF	23.88	32.34	24.26	26.94
1)每千克预混料中含The premix provided the following per kg of diets: VA 6 875~7 000 IU，VD₃ 8 500~9 000 IU，VE 4 675 IU，Fe 15.5~17.5 g，Cu 30.0~32.2 g，Mn 6.25~10.00 g，Zn 9~10 g，I 150~200 mg，Co 31.25 mg，Se 31.25~35.00 mg。 2)综合净能为计算值，参考《肉牛饲养标准》(NY/T 815—2004)，其余为实测值。NE_mf was a calculated value according to Feeding Standard of Beef Cattle (NY/T 815—2004), while the others were measured values.

表 1 试验饲粮组成及营养水平(干物质基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis)

1.4 测定指标及方法 1.4.1 饲粮常规营养成分测定

采用四分法采集饲粮样本，干物质(DM)含量参照《饲料中水分的测定》(GB/T 6435—2014)的方法测定，计算每头牛每天的干物质采食量(DMI)；EE含量参照《饲料中粗脂肪的测定》(GB/T 6433—2006)的方法测定；CP含量参照《饲料中粗蛋白的测定》(GB/T 6432—2018)的方法测定，NDF和ADF含量参照Van Soest等^[16]的方法测定。

1.4.2 血清采集和指标测定

采集试验牛尾静脉血液于普通采血管中，静置30 min，在高速冷冻离心机(H2050R，湘仪)中1 100×g、4 ℃离心15 min，取血清。

血清生化指标：葡萄糖(GLU)、总胆固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)、极低密度脂蛋白(VLDL)、尿素氮(UREA)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)含量采用日立全自动生化仪(7600-210)测定。

血清抗氧化指标：丙二醛(MDA)含量及过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定，ELISA试剂盒购自长沙维世尔生物科技有限公司，并按照说明书进行测定。

血清免疫指标：免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、补体3(C3)、补体4(C4)含量采用ELISA试剂盒(长沙维世尔生物科技有限公司)测定。

1.5 数据统计与分析

原始数据用Excel 2007整理后，采用SPSS 20.0进行单因子方差分析(one-way ANOVA)，差异显著时采用Duncan氏法进行多重比较，结果用平均值±标准差表示，P < 0.05为差异显著。

2 结果 2.1 发酵桑叶对湘西杂交育肥黄牛生长性能的影响

由表 2可知，HG组的干物质采食量显著高于CG、LG和MG组(P < 0.05)，HG和LG组的平均日增重显著高于CG和MG组(P < 0.05)。

表 2 发酵桑叶对湘西杂交育肥黄牛干物质采食量和平均日增重的影响 Table 2 Effects of fermented mulberry leaves on DMI and ADG of Xiangxi hybrid fattening yellow cattle

2.2 发酵桑叶对湘西杂交育肥黄牛血清生化指标的影响

由表 3可知，MG组第60天血清GLU含量显著低于CG组(P < 0.05)，MG组第30、60天血清TCHO含量显著低于CG和HG组(P < 0.05)。各组血清TG、TP和UREA含量差异不显著(P>0.05)。CG组第30天血清VLDL含量显著高于HG组(P < 0.05)；CG、MG和HG组第1、60天血清VLDL含量均高于CG组，但差异不显著(P>0.05)。MG组第60天血清LDL含量显著低于LG组(P < 0.05)，但与CG和HG组无显著差异(P>0.05)。LG和HG组第60天血清HDL含量显著低于CG组(P < 0.05)。

表 3 发酵桑叶对湘西杂交育肥黄牛血清生化指标的影响 Table 3 Effects of fermented mulberry leaves on serum biochemical indexes of Xiangxi hybrid fattening yellow cattle

项目 Items	时间 Time	组别Groups
项目 Items	时间 Time	CG	LG	MG	HG
葡萄糖 GLU/(mmol/L)	第1天Day 1	3.67±0.23	3.81±0.50	3.86±0.33	4.10±0.29
	第30天Day 30	3.69±0.47	4.05±0.35	4.20±0.52	4.13±0.62
	第60天Day 60	3.66±0.80^a	3.56±1.18^a	2.89±0.44^b	3.58±0.81^a
总胆固醇 TCHO/(mmol/L)	第1天Day 1	2.82±0.33	2.50±0.43	2.54±0.32	2.72±0.50
	第30天Day 30	3.20±0.71^a	2.38±0.25^b	2.30±0.29^b	2.68±0.39^a
	第60天Day 60	2.95±0.01^b	2.98±0.09^bc	2.51±0.28^c	3.30±0.59^a
甘油三酯 TG/(mmol/L)	第1天Day 1	0.73±0.02	0.75±0.04	0.76±0.07	0.76±0.05
	第30天Day 30	0.83±0.05	0.78±0.04	0.77±0.04	0.78±0.03
	第60天Day 60	0.83±0.08	0.79±0.07	0.83±0.04	0.85±0.08
极低密度脂蛋白 VLDL/(mmol/L)	第1天Day 1	1.36±0.54	1.87±0.92	1.74±0.89	1.63±0.95
	第30天Day 30	2.90±0.80^a	2.45±0.91^ab	1.98±0.18^ab	1.95±0.31^b
	第60天Day 60	2.16±0.86	3.19±1.67	2.60±0.94	2.18±1.41
尿素 UREA/(mmol/L)	第1天Day 1	2.11±0.35	2.42±0.44	2.58±0.72	2.38±0.86
	第30天Day 30	2.22±0.37	2.45±0.28	2.91±0.80	3.06±0.54
	第60天Day 60	3.42±1.58	3.16±0.62	3.61±0.45	4.69±2.02
总蛋白 TP/(g/L)	第1天Day 1	64.47±5.23	64.27±5.95	68.23±8.83	60.27±7.32
	第30天Day 30	62.95±6.84	62.33±2.68	58.78±12.44	59.40±9.97
	第60天Day 60	65.46±2.37	63.24±0.92	65.62±6.48	57.61±16.34
低密度脂蛋白 LDL/(mmol/L)	第1天Day 1	3.57±0.95	3.54±0.69	3.31±0.72	3.68±1.02
	第30天Day 30	3.49±1.50	3.35±0.43	2.79±0.98	3.22±1.00
	第60天Day 60	4.08±0.50^ab	4.32±0.31^a	3.23±0.71^b	4.01±1.14^b
高密度脂蛋白 HDL/(mmol/L)	第1天Day 1	1.10±0.32	1.28±0.52	1.00±0.48	1.44±0.72
	第30天Day 30	1.58±0.62	1.02±0.69	1.34±0.76	0.98±0.49
	第60天Day 60	2.36±0.80^a	0.78±0.34^b	1.52±0.89^ab	1.43±0.98^b

表 3 发酵桑叶对湘西杂交育肥黄牛血清生化指标的影响 Table 3 Effects of fermented mulberry leaves on serum biochemical indexes of Xiangxi hybrid fattening yellow cattle

2.3 发酵桑叶对湘西杂交育肥黄牛血清抗氧化指标的影响

由表 4可知，饲粮添加发酵桑叶能降低湘西杂交育肥黄牛第30、60天血清MDA含量，HG组第30天血清MDA含量显著低于CG组(P < 0.05)。LG和HG组第60天血清CAT活性显著高于MG组(P < 0.05)。各组血清SOD活性和T-AOC差异不显著(P>0.05)。

表 4 发酵桑叶对湘西杂交育肥黄牛血清抗氧化指标的影响 Table 4 Effects of fermented mulberry leaves on serum antioxidant indexes of Xiangxi hybrid fattening yellow cattle

项目 Items	时间 Time	组别Groups
项目 Items	时间 Time	CG	LG	MG	HG
丙二醛 MDA/(mmol/L)	第1天Day 1	7.04±0.75	7.80±0.74	7.58±0.91	7.84±0.98
	第30天Day 30	8.42±0.73^a	7.71±1.50^ab	7.34±0.59^ab	6.80±0.64^bc
	第60天Day 60	8.32±1.57	7.18±0.43	7.23±1.54	6.79±0.49
过氧化氢酶 CAT/(U/mL)	第1天Day 1	2.74±0.47	3.02±0.43	2.69±1.36	2.73±0.70
	第30天Day 30	3.05±1.43	2.77±0.57	2.34±0.65	3.69±2.54
	第60天Day 60	2.48±0.16^ab	4.13±1.76^a	2.02±0.81^b	4.37±1.46^a
超氧化物歧化酶 SOD/(U/mL)	第1天Day 1	11.50±0.46	12.01±1.18	13.02±1.39	12.06±0.96
	第30天Day 30	11.92±0.90	12.34±1.87	12.25±0.89	13.19±1.43
	第60天Day 60	12.26±0.76	13.84±1.22	12.59±1.30	13.15±0.93
总抗氧化能力 T-AOC/(mmol/L)	第1天Day 1	0.19±0.02	0.19±0.02	0.15±0.07	0.20±0.03
	第30天Day 30	0.19±0.02	0.19±0.02	0.18±0.02	0.19±0.03
	第60天Day 60	0.19±0.02	0.17±0.03	0.18±0.01	0.17±0.01

表 4 发酵桑叶对湘西杂交育肥黄牛血清抗氧化指标的影响 Table 4 Effects of fermented mulberry leaves on serum antioxidant indexes of Xiangxi hybrid fattening yellow cattle

2.4 发酵桑叶对湘西杂交育肥黄牛血清免疫指标的影响

由表 5可知，各组血清IgA、IgG、IgM和C4含量差异不显著(P>0.05)。LG组第30天血清C3含量显著低于CG组(P < 0.05)。

表 5 发酵桑叶对湘西杂交育肥黄牛血清免疫指标的影响 Table 5 Effects of fermented mulberry leaves on serum immune indexes of Xiangxi hybrid fattening yellow cattle

项目 Items	时间 Time	组别Groups
项目 Items	时间 Time	CG	LG	MG	HG
免疫球蛋白M IgM/(mg/L)	第1天Day 1	0.75±0.11	0.92±0.15	0.88±0.08	0.88±0.14
	第30天Day 30	0.72±0.10	0.82±0.28	0.77±0.27	0.74±0.23
	第60天Day 60	0.87±0.20	0.63±0.21	0.75±0.13	0.76±0.09
免疫球蛋白G IgG/(mg/L)	第1天Day 1	50.41±6.94	49.23±4.72	50.10±5.93	49.17±4.72
	第30天Day 30	42.11±16.01	43.47±15.97	39.10±19.09	39.99±13.58
	第60天Day 60	40.97±1.67	47.80±7.67	36.84±6.40	47.62±8.58
免疫球蛋白A IgA/(mg/L)	第1天Day 1	0.68±0.17	0.57±0.08	0.70±0.14	0.65±0.16
	第30天Day 30	0.47±0.15	0.56±0.06	0.54±0.17	0.52±0.16
	第60天Day 60	0.49±0.09	0.50±0.24	0.47±0.12	0.56±0.12
补体3 C3/(g/L)	第1天Day 1	1.98±1.73	1.73±0.88	1.41±0.87	1.59±0.78
	第30天Day 30	2.46±1.07 ^a	1.29±0.18 ^b	1.92±0.47 ^ab	1.66±0.33 ^ab
	第60天Day 60	1.40±0.21	1.16±0.24	1.83±0.51	1.35±0.22
补体4 C4/(g/L)	第1天Day 1	1.30±0.35	0.99±0.16	1.26±0.62	1.12±0.47
	第30天Day 30	0.84±0.28	0.89±0.05	0.63±0.50	0.91±0.34
	第60天Day 60	0.67±0.21	0.72±0.38	0.56±0.19	0.68±0.28

表 5 发酵桑叶对湘西杂交育肥黄牛血清免疫指标的影响 Table 5 Effects of fermented mulberry leaves on serum immune indexes of Xiangxi hybrid fattening yellow cattle

3 讨论 3.1 发酵桑叶对湘西杂交育肥黄牛生长性能的影响

新鲜桑叶味甘，适口性好，发酵后的桑叶，在保留其养分的同时，还降低了有害物质的滋生，有利于家畜的健康生长^[12]。对于反刍动物而言，瘤胃是重要的消化器官，有研究发现，桑叶有利于瘤胃纤维分解菌的繁殖，增加了其在纤维上的附着，可以提高饲粮的采食量和消化率^[17]。本试验中，桑叶在青贮前添加了2%的白砂糖，发酵后的桑叶甜度高，故试验牛的采食量高，平均日增重也高于对照组。冯兴龙等^[18]研究发现，饲喂桑叶组的秦川肉牛平均日增重显著高于饲喂苜蓿组和饲喂麦草组，说明桑叶对反刍动物的生长性能有促进作用。

3.2 发酵桑叶对湘西杂交育肥黄牛血清生化指标的影响

血清生化指标对衡量动物机体健康和生理机能具有重要意义。正常情况下，GLU是机体能量供应的主要来源，反映了动物机体对糖类物质吸收利用的动态平衡。本试验中，CG组血清GLU含量在整个试验期保持稳定，试验组血清GLU含量有下降趋势，且以发酵桑叶添加量为20%时下降趋势最显著，虽然饲粮中能量水平不同，但试验牛的碳水化物摄入量高于CG组，这说明发酵桑叶具有降低动物血糖的功能，该功能可能与桑叶中的活性物质有关。Cai等^[19]认为桑叶黄酮可能是桑叶发挥降血糖作用的主要成分，此外，桑叶中的生物碱、萜类等活性物质也能起到不同程度的降血糖作用^[20-21]。王祖文等^[22]研究发现，桑叶对正常小鼠的血糖、血脂水平和抗氧化功能具有调节作用，且不会对健康造成不利影响，而这种调节作用是通过提高机体抗氧化能力并抑制脂质过氧化反应途径完成的。

血脂主要由类脂和TG组成，血清中血脂的含量反映了机体脂质代谢的状况。本试验研究发现，各组在试验期间血清TG含量相对稳定；但在试验中期，试验组血清TCHO含量均低于CG组，且LG和MG组差异显著，这说明发酵桑叶可能是通过降低血清中TCHO含量影响脂质代谢，从而发挥降血脂功能^[23]。此外，有文献报道，桑叶能减少内源性胆固醇的合成，增加血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量，并抑制低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)在血液中的堆积，达到防止高血脂症的发生^[24]。

TP是衡量动物机体蛋白质代谢的重要指标，具有维持血液渗透压、酸碱度以及运输代谢物等多项功能，有助于预判疾病的发生，在临床上具有重要意义。本试验中，各组的血清TP含量稳定，无显著差异，说明试验动物在试验期相对健康，发酵桑叶对动物机体无毒副作用，与吴配全等^[25]的研究结果一致。在试验期间，试验组血清VLDL和LDL含量均有所上升，这与动物体内胆固醇运转密切相关，也说明试验牛体内的脂质代谢活动增强，吴浩^[26]也得出与本研究一致的试验结果。

3.3 发酵桑叶对湘西杂交育肥黄牛血清抗氧化指标的影响

动物抗氧化能力的强弱对动物健康有重要的影响，SOD、MDA等是反映机体抗氧化能力强弱的重要指标。SOD活性反映机体清除自由基的能力，MDA含量反映体内脂质过氧化作用的指标，T-AOC反映机体抗氧化系统的总体水平。本试验中，HG组第30天血清MDA含量显著低于CG组，LG和MG组血清MDA含量虽然与CG组差异不显著，但在整个试验期呈现下降趋势，试验后期CG组血清MDA含量与其他各组无显著差异，但整体高于试验组；饲粮添加发酵桑叶后LG、MG和HG组血清CAT、SOD活性以及T-AOC与CG组无显著差异，说明发酵桑叶是通过降低血清MDA含量来提高机体的抗氧化能力，其原因可能与桑叶中含有的桑叶黄酮等活性物质有关^[27-30]。

3.4 发酵桑叶对湘西杂交育肥黄牛血清免疫指标的影响

血清IgA、IgG、IgM含量可以衡量机体的免疫功能，是体液免疫应答的主要物质。本试验中，饲粮添加发酵桑叶对湘西杂交黄牛血清IgA、IgG、IgM含量无显著影响，说明发酵桑叶对试验牛的免疫能力无显著的调节作用，Zhou等^[31]研究认为，这可能与试验牛只在试验期的健康状况有关。本试验全期试验牛健康状况良好，未有疾病发生。

4 结论

饲粮添加发酵桑叶能够促进湘西杂交育肥黄牛的生长，降低血清GLU、TCHO及MDA含量，从而调节动物的血糖、血脂及抗氧化功能。

参考文献

[1]	LIU X Q, ZHU J J, WEI C J, et al. Genome-wide identification and characterization of the DREB transcription factor gene family in mulberry[J]. Biologia Plantarum, 2015, 59(2): 253-265. DOI:10.1007/s10535-015-0498-x
[2]	ZOU Y X, LIAO S T, SHEN W Z, et al. Phenolics and antioxidant activity of mulberry leaves depend on cultivar and harvest month in Southern China[J]. International Journal of Molecular Sciences, 2012, 13(12): 16544-16553. DOI:10.3390/ijms131216544
[3]	KOJIMA Y, KIMURA T, NAKAGAWA K, et al. Effects of mulberry leaf extract rich in 1-deoxynojirimycin on blood lipid profiles in humans[J]. Journal of Clinical Biochemistry and Nutrition, 2010, 47(2): 155-161. DOI:10.3164/jcbn.10-53
[4]	JI T, LI J, SU S L, et al. Identification and determination of the polyhydroxylated alkaloids compounds with α-glucosidase inhibitor activity in mulberry leaves of different origins[J]. Molecules, 2016, 21(2): 206. DOI:10.3390/molecules21020206
[5]	LEE M R, KIM J E, YUN W B, et al. Lipolytic effect of novel extracts from mulberry (Morus alba) leaves fermented with Cordyceps militaris in the primary adipocytes derived from SD rats[J]. Laboratory Animal Research, 2017, 33(3): 270-279. DOI:10.5625/lar.2017.33.3.270
[6]	OH N S, LEE J Y, LEE J M, et al. Mulberry leaf extract fermented with Lactobacillus acidophilus A4 ameliorates 5-fluorouracil-induced intestinal mucositis in rats[J]. Letters in Applied Microbiology, 2017, 64(6): 459-468. DOI:10.1111/lam.12741
[7]	冯淦熠, 刘莹莹, 李颖慧, 等. 桑叶黄酮降糖、降脂作用与机制及其在动物生产中的应用[J]. 动物营养学报, 2020, 32(1): 48-53.
[8]	HONG H C, LI S L, ZHANG X Q, et al. Flavonoids with α-glucosidase inhibitory activities and their contents in the leaves of Morus atropurpurea[J]. Chinese Medicine, 2013, 8: 19. DOI:10.1186/1749-8546-8-19
[9]	黄静, 邝哲师, 刘吉平, 等. 饲料中添加不同品种桑叶及发酵桑叶对胡须鸡的饲养效果[J]. 蚕业科学, 2017, 43(6): 978-986.
[10]	杨阳.桑叶对罗非鱼生长、代谢及品质的影响[D].硕士学位论文.重庆: 西南大学, 2015.
[11]	LI Y, MENG Q X, ZHOU B, et al. Effect of ensiled mulberry leaves and sun-dried mulberry fruit pomace on the fecal bacterial community composition in finishing steers[J]. Bmc Microbiology, 2017, 17: 97. DOI:10.1186/s12866-017-1011-9
[12]	HUYEN N T, WANAPAT M, NAVANUKRAW C. Effect of Mulberry leaf pellet (MUP) supplementation on rumen fermentation and nutrient digestibility in beef cattle fed on rice straw-based diets[J]. Animal Feed Science and Technology, 2012, 175(1/2): 8-15.
[13]	李昊帮, 曾佩, 李晟, 等. 桑叶粉对湘东黑山羊瘤胃发酵参数的影响[J]. 家畜生态学报, 2016, 37(1): 19-25.
[14]	李昊帮, 罗阳, 肖建中, 等. 发酵桑叶对湘西黄牛×利木赞杂交F1代育肥牛屠宰性能、肉品质及肌肉中氨基酸、脂肪酸含量的影响[J]. 动物营养学报, 2020, 32(1): 244-252.
[15]	肖建中, 刘耕, 李一平, 等. 发酵桑叶对新晃黄牛生长性能、血液生化指标、屠宰性能和肉品质的影响[J]. 蚕业科学, 2019, 45(1): 116-121.
[16]	VAN SOEST P J, ROBERTSON J B, LEWIS B A. Methods for dietary fiber, neutral detergent fiber, and nonstarch polysaccharides in relation to animal nutrition[J]. Journal of Dairy Science, 1991, 74(10): 3583-3597. DOI:10.3168/jds.S0022-0302(91)78551-2
[17]	李莉, 苏玉贤. 日粮添加干桑叶对郏县红牛生长性能、屠宰性能和肉质性状影响的研究[J]. 饲料研究, 2020, 43(3): 12-16.
[18]	冯兴龙, 赵春平, 焦锋, 等. 不同粗饲料对秦川肉牛生长发育及血液生化指标的影响[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2016, 44(9): 10-16.
[19]	CAI S Y, SUN W, FAN Y X, et al. Effect of mulberry leaf (Folium mori) on insulin resistance via IRS-1/PI3K/Glut-4 signalling pathway in type 2 diabetes mellitus rats[J]. Pharmaceutical Biology, 2016, 54(11): 2685-2691. DOI:10.1080/13880209.2016.1178779
[20]	RICHE D M, RICHE K D, EAST H E, et al. Impact of mulberry leaf extract on type 2 diabetes (Mul-DM):a randomized, placebo-controlled pilot study[J]. Complementary Therapies in Medicine, 2017, 32: 105-108. DOI:10.1016/j.ctim.2017.04.006
[21]	HORNG C T, LIU Z H, HUANG Y T, et al. Extract from mulberry (Morus australis) leaf decelerate acetaminophen induced hepatic inflammation involving downregulation of myeloid differentiation factor 88 (MyD88) signals[J]. Journal of Food and Drug Analysis, 2017, 25(4): 862-871. DOI:10.1016/j.jfda.2016.07.011
[22]	王祖文, 秦樱瑞, 黄先智, 等. 桑叶-苦瓜混合粉对正常小鼠血糖血脂和抗氧化能力的影响[J]. 食品科学, 2019, 40(9): 166-172.
[23]	丁国玉, 宋维彦, 姚志刚. 饲料中添加发酵桑叶对草鱼生长性能、血清生化指标的影响[J]. 中国饲料, 2019(18): 105-108.
[24]	陈菁菁.桑叶总黄酮的分离纯化和降血脂作用评价[D].硕士学位论文.杭州: 浙江大学, 2006.
[25]	吴配全, 任丽萍, 周振明, 等. 饲喂发酵桑叶对生长育肥牛生长性能、血液生化指标及经济效益的影响[J]. 中国畜牧杂志, 2011, 47(23): 43-46.
[26]	吴浩.桑叶和DDGS在反刍动物饲养中的应用研究[D].博士学位论文.北京: 中国农业大学, 2015.
[27]	TONG L T, ZHONG K, LIU L Y, et al. Effects of dietary hull-less barley β-glucan on the cholesterol metabolism of hypercholesterolemic hamsters[J]. Food Chemistry, 2015, 169: 344-349. DOI:10.1016/j.foodchem.2014.07.157
[28]	陈玲玲, 刘炜, 陈建国, 等. 桑叶黄酮对糖尿病小鼠调节血糖的作用机制研究[J]. 中国临床药理学杂志, 2010, 26(11): 835-838.
[29]	杨忠敏, 沈以红, 王祖文, 等.桑叶生物碱对D-半乳糖诱导氧化损伤模型小鼠肾脏的改善作用[J/OL].食品科学, 2019: 1-7.(2019-12-12).https://kns.cnki.net/KCMS/detail/11.2206.ts.20191212.1403.080.html.
[30]	KIM S Y, GAO J J, LEE W C, et al. Antioxidative flavonoids from the leaves of Morus alba[J]. Archives of Pharmacal Research, 1999, 22: 81-85. DOI:10.1007/BF02976442
[31]	ZHOU Z M, ZHOU B, REN L P, et al. Effect of ensiled mulberry leaves and sun-dried mulberry fruit pomace on finishing steer growth performance, blood biochemical parameters, and carcass characteristics[J]. PLoS One, 2014, 9(1): e85406. DOI:10.1371/journal.pone.0085406