作为动物机体含量最高的矿物质元素，钙(Ca)可激活体内酶活性，参与细胞信号传导，维持细胞正常形态[1]，更是骨骼生长和更新所必需的矿物质元素之一。Ca存在于骨骼中，维持骨骼的硬度和抗压力[2-3]。Ca缺乏时家禽产生Ca代谢紊乱，造成采食量下降，基础代谢率提高，生长受阻；进而导致骨骼发育异常，典型症状为佝偻病和软骨病[1]。而饲粮Ca水平过高可扰乱其他微量元素的吸收和代谢[4]，造成肾脏病变等[5-6]。磷(P)参与维持细胞膜平衡，作为辅酶的结构部分参与物质代谢，通过调节体液酸碱平衡来参与维持机体内环境稳定[7-8]，同时P也是骨骼的结构物质[2]。饲料缺P时，会使畜禽食欲降低甚至废绝，造成饲料转化率低下，持续缺P会导致幼龄畜禽患佝偻病，成年畜禽患软骨病[4]。而P过量会影响肠道中Ca的吸收，导致机体Ca缺乏，易出现骨折、跛行[9-10]。综上所述，饲粮Ca和P均对肉鸡的生长发育与骨骼健康具有重要作用。同时Ca与P之间还存在相互作用[11]，肉鸡机体中约有98%的Ca和80%的P共同以羟基磷灰石的形式沉积于骨骼中[2]，当Ca或P水平过高时，会以磷酸钙的形式排出体外，导致另一方缺乏，进而对骨骼健康造成不利影响。植物性饲料中的植酸磷含量较高，需经过植酸酶水解为无机磷才能被吸收利用[12]，生产上通常以饲粮中非植酸磷(non-phytate phosphorus，NPP)水平反映畜禽对P的需要量[7]。因此，研究适宜的饲粮Ca、NPP水平对肉鸡生产具有重要指导意义。
目前缺乏对我国地方性土鸡或者特殊品种鸡的研究。黄羽肉鸡是我国的特色肉鸡产业，发展迅速，现年出栏量与白羽肉鸡基本持平，但对黄羽肉鸡营养需要量的研究起步较晚，缺乏深入研究；且黄羽肉鸡品种繁多，生长速度差异较大，关于其Ca、NPP需要量的研究差异较大[13]。《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)[14]给出的黄羽肉鸡需要量仅针对快大型黄羽肉鸡。因此，本试验旨在通过探究饲粮Ca、NPP水平对29~56日龄慢速黄羽肉鸡生长性能、胫骨性状的影响及其交互作用，以确定适宜的饲粮Ca、NPP水平，为黄羽肉鸡营养标准的制定和实际生产提供科学依据。
1 材料与方法 1.1 试验动物及试验饲粮试验采用3(Ca水平)×3(NPP水平)因子试验设计。按照体重一致原则选用720只29日龄慢速黄羽肉鸡母鸡作为试验鸡(试验鸡在1~28日龄阶段饲粮Ca水平为0.90%、NPP水平为0.45%)，分别饲喂Ca水平为0.75%、0.85%、0.95%，NPP水平为0.35%、0.40%、0.45%的试验饲粮，共9个处理(处理Ⅰ~Ⅸ)，每个处理4个重复，每个重复20只鸡。试验期28 d。
基础饲粮营养水平参考《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)[14]与本单位建立的黄羽肉鸡饲养标准，参照《中国饲料成分及营养价值表》(第28版)[15]设计饲粮配方。试验饲粮组成及营养水平见表 1。
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表 1 试验饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) |
本试验在广东省农业科学院动物科学研究所动物营养研究室试验场进行。试验鸡自由采食和饮水，地面平养，试验期间每天进行16 h恒定光照，并进行自然通风。记录每日08:00、14:00、20:00鸡舍温度与湿度。其他饲养步骤按常规饲养操作规程，并按常规免疫程序进行免疫。
1.3 指标测定 1.3.1 生长性能饲养期间以重复为单位，记录每日采食量。每日观察鸡只健康状况，记录死亡数，并对死亡鸡及其所在栏剩料量称重。在试验结束前1天20：00断料供水，于次日清晨以重复为单位称试验鸡空腹重、结料，用于计算末重、平均日增重、平均日采食量和料重比。
1.3.2 胫骨性状饲养结束时，试验鸡称重后，每重复选取2只接近平均体重的试验鸡，进行屠宰取样。剥离双侧胫骨，用纸巾拭干右侧胫骨水分，称鲜重，并使用游标卡尺测量胫骨长度与中截面直径。使用Lunar Prodigy型骨密度仪(GE Medical Systems, Madison, WI)测定右侧胫骨密度。采用剪切仪(INSTRON-441型，Instron公司，美国)测定左侧胫骨折断力。
1.4 数据处理与统计分析每重复作为1个试验统计单位，采用SPSS 17.0软件对试验数据进行双因素方差分析，包括Ca、NPP水平的主效应以及两者间的互作效应，当交互作用显著时(P < 0.05)，对因子组合进行单因素方差分析，当处理效应差异显著时进行Duncan氏法多重比较。表中数据采用平均值和均值标准误(SEM)表示。
2 结果 2.1 饲粮钙、非植酸磷水平对慢速黄羽肉鸡生长性能的影响由表 2可知，对于29~56日龄慢速黄羽肉鸡，饲粮Ca、NPP水平对其生长性能没有显著影响(P>0.05)。饲粮Ca水平有影响料重比的趋势(P=0.080)，饲粮Ca水平从0.75%增至0.95%，料重比随之增加。另外，饲粮Ca、NPP水平对料重比有显著交互作用(P < 0.05)，当饲粮Ca水平为0.75%、NPP水平为0.35%和Ca水平为0.85%、NPP水平为0.45%时，获得最小料重比，且显著低于饲粮Ca水平为0.85%、NPP水平为0.35%和Ca水平为0.95%、NPP水平为0.35%时(P < 0.05)。
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表 2 饲粮钙、非植酸磷水平对29~56日龄慢速黄羽肉鸡生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary Ca and NPP level on growth performance of slow-growing yellow-feathered broilers aged from 29 to 56 days |
由表 3可知，饲粮Ca水平显著影响胫骨长度(P < 0.05)，主效应分析表明，饲粮Ca水平为0.75%和0.85%时的胫骨长度显著高于饲粮Ca水平为0.95%时(P < 0.05)；饲粮Ca水平有影响胫骨密度的趋势(P=0.076)，主效应分析表明，饲粮Ca水平为0.85%时的胫骨密度显著低于饲粮Ca水平为0.75%时(P < 0.05)。饲粮NPP水平显著影响胫骨直径、折断力和密度(P < 0.05)，主效应分析表明，饲粮NPP水平为0.35%时的胫骨直径、折断力和密度均高于饲粮NPP水平为0.40%和0.45%时(P < 0.05)。另外，饲粮Ca、NPP水平对胫骨直径、折断力和密度有显著交互作用(P < 0.05)。饲粮Ca水平为0.95%、NPP水平为0.35%和Ca水平为0.75%、NPP水平为0.35%时，可获得较优的胫骨直径、折断力和密度。
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表 3 饲粮钙、非植酸磷水平对56日龄慢速黄羽肉鸡胫骨性状的影响 Table 3 Effects of dietary Ca and NPP level on tibial characteristics of slow-growing yellow-feathered broilers at 56 days of age |
关于饲粮Ca、NPP水平对肉鸡生长性能影响的研究结果并不一致。潘文等[16]研究发现，饲粮Ca水平显著影响1~28日龄麒麟鸡平均日增重和平均日采食量；Ca缺乏降低了爱拔益加(AA)肉鸡的平均日增重[2]。饲粮P水平显著影响育雏期坝上长尾鸡的平均日采食量和料重比[17]、22~42日龄AA肉鸡的平均日采食量[18]以及太行鸡雏鸡的平均日增重[19]；饲粮NPP水平显著影响1~21日龄麒麟鸡的平均日增重[7]。也有一些研究表明，饲粮Ca、P水平对肉鸡生长性能无显著作用。如饲粮Ca水平对1~28日龄贵妃鸡[1]、育雏期坝上长尾鸡[20]的生长性能无显著影响，不同饲粮Ca、P水平或钙磷比对快速型黄羽肉鸡、矮脚黄羽肉鸡的平均日增重、平均日采食量、料重比等均无显著影响[13, 21-22]。本试验结果与以往饲粮Ca、P水平在黄羽肉鸡上的报道一致，在本试验条件下，饲粮Ca、NPP水平对29~56日龄慢速黄羽肉鸡的生长性能并未有显著影响。但饲粮Ca水平有影响料重比的趋势，饲粮Ca水平为0.75%时料重比最低。产生以上结果差异的原因可能为肉鸡品种不同，另外，各研究中肉鸡所处的日龄阶段也不同，例如有研究报道，生长前期肉仔鸡的生长性能对P缺乏最为敏感[23]。
本试验表明，饲粮Ca、NPP水平对料重比有显著交互作用，当肉鸡饲粮Ca水平为0.75%、NPP水平为0.35%(Ca/NPP=2.14)或者Ca水平为0.85%、NPP水平为0.45%(Ca/NPP=1.89)时，获得最小料重比，且显著低于饲粮Ca水平为0.85%、NPP水平为0.35%(Ca/NPP=2.43)以及Ca水平为0.95%、NPP水平为0.35%(Ca/NPP=2.71)时。这表明相比与高Ca、高P，适宜的钙磷比具有改善生长性能的作用。邵玉新等[23]研究发现，饲粮Ca、P同时缺乏时，肉仔鸡的生长性能高于Ca或者P单独缺乏组；王传龙等[2]研究发现，饲粮Ca、P同时缺乏组肉仔鸡的平均日增重和平均日采食量显著高于P缺乏组，这说明钙磷比可能比Ca、P的绝对含量更重要。郝艳霜等[17]也指出，饲粮Ca、P水平对育成期坝上长尾鸡青年鸡平均日增重和料重比具有显著交互作用。
3.2 饲粮钙、非植酸磷水平对慢速黄羽肉鸡胫骨性状指标的影响及互作效应胫骨是肉鸡全身生长最快的骨骼[24]，通常采用胫骨性状指标来评价肉鸡骨骼健康状况。本试验中，饲粮Ca水平显著影响胫骨长度，且有影响胫骨密度的趋势；饲粮NPP水平显著影响胫骨直径、折断力和密度。以往的研究结果证明了饲粮Ca、P水平对肉鸡骨骼性状的有效作用，研究表明，饲粮Ca水平显著影响麒麟鸡胫骨强度[25]、趾骨重量[16]以及贵妃鸡的胫骨重量和胫骨折断力[1]；饲粮NPP水平显著影响麒麟鸡的胫骨重量与胫骨强度[7]、黄羽肉鸡的胫骨重量[26]，江勇[18]的研究也表明胫骨抗压强度与胫骨密度是评价肉仔鸡NPP需要量的敏感指标。另外，本试验中，饲粮Ca、NPP水平对慢速黄羽肉鸡的胫骨直径、折断力和密度有显著交互作用。王润莲等[27]报道，饲粮Ca、NPP水平对贵妃鸡的胫骨特性有显著的互作效应。研究表明，P缺乏组AA肉鸡胫骨长度[2]、强度和密度[6]均显著低于Ca缺乏组及Ca和P同时缺乏组；邵玉新等[23]也发现肉仔鸡胫骨组织结构对P缺乏最为敏感，其次为Ca缺乏，最后为Ca、P同时缺乏。同时，Ca、P之间对胫骨直径、折断力和密度的互作效应提示我们设置饲粮Ca、P水平时应注意二者的比例而不仅仅是含量。
通过胫骨性状指标对慢速黄羽肉鸡适宜的饲粮Ca、P水平进行分析，发现饲粮Ca水平为0.75%和0.85%时的黄羽肉鸡胫骨长度显著高于Ca水平为0.95%时，饲粮Ca水平为0.75%时的胫骨密度显著高于Ca水平为0.85%时；饲粮NPP水平为0.35%时的胫骨直径、折断力和密度均高于饲粮NPP水平为0.40%和0.45%时。刘松柏等[21]提出，饲粮Ca水平为0.75%、NPP水平为0.31%时即可满足31~60日龄中速型黄羽肉鸡骨骼发育需要。以上关于黄羽肉鸡的适宜Ca、P水平均低于《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)[14]中的育成鸡Ca水平0.90%、NPP水平0.40%的推荐量，这是因为《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)[14]中关于黄羽肉鸡Ca、P需要量的推荐水平针对快大型黄羽肉鸡，而慢速黄羽肉鸡Ca、P水平有较大的下调空间。生产中Ca、P水平过高时，不仅造成原料资源浪费，还会影响肠道Ca、P吸收，减少骨骼灰分沉积，进而对骨骼健康造成影响[2, 4, 27]，甚至影响生长性能[21]，因而针对地方黄羽肉鸡品种的Ca、P需要量研究对生产具有重要意义。
4 结论在本试验条件下，饲粮中Ca、NPP水平影响29~56日龄慢速黄羽肉鸡的胫骨指标并具有交互作用，饲粮Ca、NPP水平有影响生长性能的趋势。综合胫骨指标与生长性能，推荐饲粮Ca、NPP水平分别为0.75%、0.35%，此时Ca/NPP为2.14。
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