消化道酸度是由消化道内的酸性物质形成并维持的，适宜的酸度在维持消化系统正常功能上是必需的^[1]。断奶幼兔由于消化系统发育不完善，消化道酸度不稳定，食欲旺盛导致胃肠道负担重，内源酶分泌不足，同时受断奶应激的影响，易发生腹泻^[2]。消化道酸度是影响消化酶分泌与活性的主要因素之一，从而直接影响到饲料的消化吸收^[3]。前人研究发现，幼畜断奶后饲粮营养水平、饲粮组成和物理状态是影响其消化道酸度的重要因素^[4]。有报道证实，酸化剂可以调节胃肠道pH，保证消化酶在正常pH环境下发挥活性，同时抑制消化道有害微生物增殖^[5]。柠檬酸作为有机酸化剂中的第一大酸，溶解性好，添加效果优于其他有机酸^[6]。但有机酸解离度小，酸性较弱，要达到同样的酸化能力，添加量较大，成本高。而研究发现，磷酸在动物胃中可有效激活胃蛋白酶原，提高胃蛋白酶活性^[7]。因此使用柠檬酸与磷酸组成复合酸化剂应用到幼畜生产中，可以有效降低饲粮酸化成本。国内外利用复合酸化剂提高饲料利用率、促进幼畜健康生长已有较多的研究报道^[8-12]，饲粮中添加复合酸化剂可有效提高仔猪的生长性能及免疫功能；蓝狐饲粮中添加复合酸化剂可提高平均日增重(ADG)和饲料转化率；肉鸡饲粮中添加复合酸化剂也可以不同程度地提高肉鸡阶段增重，降低料重比(F/G)，增强免疫力。一些研究表明，复合酸化剂可以显著降低断奶幼兔腹泻、死亡率，但在饲料转化率、养分利用等方面结果并不一致，不同组成的复合酸化剂对断奶幼兔生长性能发挥、养分利用及免疫等方面的影响还有待于进一步的研究。因此，探讨复合酸化剂对断奶幼兔生长及养分利用的影响，筛选出适宜的添加剂量是十分必要的。而本试验旨在研究复合酸化剂对断奶幼兔生长性能、养分表观消化率、免疫器官及肉品质的影响，为肉兔生产中合理利用酸化剂提供数据参考。

1 材料与方法 1.1 试验材料

试验所用复合酸为柠檬酸与磷酸以4 : 6混合而成。柠檬酸为食品级一水柠檬酸，磷酸为食品级磷酸。试验兔为300只35日龄体重相近的断奶伊拉肉兔。

1.2 试验饲粮

基础饲粮参照文献[13]家兔饲养营养推荐值配制。不同水平(0.1%、0.2%和0.3%)复合酸先预混合后再添加到饲粮中，饲粮均制成颗粒。基础饲粮组成及营养水平见表 1。

1.3 试验设计与饲养管理

选择300只健康、体重[(1 071.55±117.96) g]相近的35日龄断奶伊拉肉兔，按性别随机分为5组，每组60只兔。试验设2个对照组，对照1组饲喂基础饲粮，对照2组在基础饲粮中添加恩拉霉素20 g/t+金霉素300 g/t；3个试验组分别在基础饲粮中添加0.1%(Ⅰ组)、0.2%(Ⅱ组)、0.3%(Ⅲ组)的复合酸。预试期5 d，试验期22 d，在试验期第16天进行消化试验。试验前对兔舍、笼具彻底清扫，消毒。试验前对试验兔统一免疫，兔舍自然采光、通风。采用单笼饲养，每日饲喂2次，分别在08：00、17:00进行，自由饮水，做好各项记录。

1.4 测定指标 1.4.1 生长性能

试验开始及结束时，于早晨对试验兔空腹称重，记录试验始重和试验末重，用于计算平均日增重；记录试验兔饲喂量，用于计算平均日采食量(ADFI)和料重比。监测、记录每只试验兔的腹泻、死亡情况，用于计算腹泻频率、死亡率。计算公式如下：

1.4.2 养分表观消化率

养分表观消化率测定采用全收粪法，在正式试验第16天进行，每组随机抽取8只试验兔，连续收粪4 d，记录采食量、粪量。将4 d全部粪样混合均匀后制风干样，保存待测。参照张丽英^[15]的方法测定饲粮及粪中各养分含量。养分表观消化率计算公式如下：

1.4.3 屠宰性能及肉品质

试验结束时，每组随机抽取8只体重相近的试验兔，空腹12 h后进行屠宰，称量宰前活重、胴体重及内脏器官重。试验兔屠宰后，除去血、毛皮、头、尾、前脚(腕关节以下)、后脚(跗关节以下)及全部脏器(含腹脂)的胴体重，即为全净膛重，保留心脏、肝脏、肾脏和腹脂等可食用内脏的胴体重，即为半净膛重^[16]，计算全净膛率、半净膛率。屠宰后剥离两侧背腰最长肌，鲜样24 h内送至北京金牛伟业科技开发有限公司测定肉品质各项指标。

pH：于宰后24 h采用PHSJ-3F型pH计从肉样的上、中、下3个部分各取1个点测量pH，将探头插入肌肉3 mm读数，最后求平均值。

肉色：采用CR-10型色差仪，从肉样的上、中、下3个部分各取1个点分别测量亮度(L^*)、红度(a^*)、黄度(b^*)值，取平均值。

蒸煮损失：将新鲜肉样称重记为m₁(g)后，放入封口袋密封，袋口向上放入80 ℃恒温水浴锅内蒸煮1 h后，取出肉样，吊挂于室内，冷却30 min后，将袋内液体排出，取出肉样称重记为m₂(g)，计算蒸煮损失。计算公式如下：

剪切力：将肉样装入封口袋密封放入80 ℃恒温水浴锅内水浴2 h后，取出肉样用流水冷却30 min，将肉样顺肌肉纤维方向截取长、宽、厚分别为1.5、1.0和0.5 cm的肉样，用TMS-Pro型质构仪测量剪切力。

肌肉化学成分测定：对肉样进行冻干，粉碎。参照张丽英^[15]的方法进行粗蛋白质、粗灰分、粗脂肪含量的测定。

1.4.4 免疫器官

对试验兔进行屠宰，迅速摘下脾脏、胸腺及圆小囊，将包围物去除后称重，并计算脾脏指数、胸腺指数及圆小囊指数，计算公式如下：

1.5 数据统计与分析

运用Excel 2007初步整理数据，采用SPSS 19.0进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，Duncan氏法进行多重比较。腹泻频率、死亡率采用卡方检验。除腹泻频率、死亡率外，试验结果均以平均值±标准差表示。P＜0.05为差异显著。

2 结果与分析 2.1 复合酸化剂对断奶幼兔生长性能的影响

由表 2可知，添加复合酸化剂对各组试验末重、平均日增重、平均日采食量及料重比均没有显著影响(P＞0.05)。但随着复合酸化剂添加水平的增加，平均日增重有增加的趋势(P=0.056 4)。与对照1组相比，添加复合酸化剂有降低腹泻频率的趋势(P=0.051 8)。添加复合酸化剂对死亡率影响不显著(P＞0.05)。

2.2 复合酸化剂对断奶幼兔养分表观消化率的影响

由表 3可知，Ⅱ组、Ⅲ组能量表观消化率、中性洗涤纤维(NDF)表观消化率均显著低于对照2组(P＜0.05)，各试验组能量表观消化率均与对照1组差异不显著(P＞0.05)。干物质表观消化率以对照2组最高，显著高于对照1组与Ⅱ组(P＜0.05)，与Ⅰ组、Ⅲ组差异不显著(P＞0.05)。添加复合酸化剂对粗蛋白质表观消化率影响不显著(P＞0.05)，但各试验组粗蛋白质表观消化率有高于对照1组、低于对照2组的趋势(P=0.083 3)。Ⅱ组、Ⅲ组酸性洗涤纤维(ADF)表观消化率极显著低于对照2组与Ⅰ组(P＜0.01)，与对照1组差异不显著(P＞0.05)。粗灰分表观消化率以对照1组最低，极显著低于对照2组及各试验组(P＜0.01)；各试验组粗灰分表观消化率与对照2组之间差异不显著(P＞0.05)。

2.3 复合酸化剂对断奶幼兔屠宰性能的影响

由表 4可知，与对照1组、对照2组相比，添加复合酸化剂对断奶幼兔屠宰性能没有显著影响(P＞0.05)。

2.4 复合酸化剂对断奶幼兔肉品质的影响

由表 5可知，与对照组相比，添加复合酸化剂对试验兔肉物理特性及肌肉常规成分均没有显著影响(P＞0.05)。

2.5 复合酸化剂对断奶幼兔免疫器官的影响

由表 6可知，Ⅰ组胸腺重与对照1组、对照2组差异不显著(P＞0.05)，Ⅱ组、Ⅲ组胸腺重显著低于对照2组(P＜0.05)，与对照1组差异不显著(P＞0.05)，各试验组胸腺重差异均不显著(P＞0.05)。胸腺指数以对照2组最高，显著高于对照1组、Ⅲ组(P＜0.05)；Ⅰ组、Ⅱ组胸腺指数与2个对照组差异均不显著(P＞0.05)。与对照组相比，添加复合酸化剂对脾脏重、圆小囊重、脾脏指数及圆小囊指数均没有显著影响(P＞0.05)。

3 讨论 3.1 复合酸化剂对断奶幼兔生长性能的影响

断奶幼兔消化系统发育不完善，需要一个逐步完善的过程，幼兔由于生长发育快，过量植物性饲粮的摄入破坏了这一消化生理，使胃酸和消化酶分泌不足，消化酶活性受到影响，从而引发腹泻，影响生长性能的发挥^[17]。酸化剂可以抑制细菌和霉菌的生长，提高养分利用率，调控肠道微生态平衡，提高幼畜生长性能^[18]。本试验中，添加复合酸化剂对试验兔平均日采食量、料重比没有显著影响，但随着复合酸化剂添加水平的增加，试验兔平均日增重有增加的趋势。乔栋等^[19]与Morrow等^[20]研究均发现，添加复合酸化剂可以提高断奶仔猪平均日增重，对料重比影响不显著。Debi等^[21]研究发现，柠檬酸可以显著提高新西兰白兔体重，对饲料转化率影响不显著。这些研究与本试验结果基本一致。但不同复合酸化剂对料重比的影响不尽一致，费洪标等^[22]研究发现一定量的复合酸化剂可以显著提高断奶獭兔平均日增重，降低料重比。朱克华^[17]试验得到酸化饮水可以显著提高断奶幼兔平均日增重，降低料重比。Valchev^[23]通过研究得出，有机酸化剂可以显著提高生长猪平均日增重及饲料报酬。产生这些差异的原因可能是因为本试验中采用磷酸与柠檬酸组成的复合酸化剂，无机酸的应用及其剂量对生长性能的影响有限。研究发现，仔猪饲粮中添加磷酸仅仅可以提高饲粮酸化程度，对仔猪生长性能没有显著影响。另外磷酸添加时间也有一定的影响，断奶后前2周使用以磷酸为基础的酸化剂对仔猪生长性能可产生有利作用，断奶后期添加磷酸仅对酸化饲粮有一定效果^[24]。李鹏等^[25]研究发现，磷酸型复合酸化剂可显著增加仔猪平均日采食量，提高平均日增重，降低料重比。大量研究表明，饲粮中添加不同类型的复合酸化剂可以促进幼畜健康生长，提高幼畜生长性能，与本试验结果一致。

3.2 复合酸化剂对断奶幼兔养分表观消化率的影响

消化道内酸性环境是饲粮成分在动物体内被充分利用，有益菌正常生长，病原微生物被抑制的必要条件。幼龄动物消化系统发育尚未完善，消化道内胃酸分泌不足，饲粮中添加酸化剂可以降低消化道内容物pH，增强消化酶活性，从而提高养分表观消化率^[26]。本试验中，与对照1组相比，添加复合酸化剂对粗蛋白质表观消化率没有显著影响，但随着复合酸化剂添加水平的增加，粗蛋白质表观消化率有增加的趋势。许多学者研究发现，饲粮中添加酸化剂可以提高粗蛋白质的消化率^{[12, 21, 26]}。这主要是因为酸化剂可以降低畜禽消化道内容物的pH，提高胃蛋白酶活性，同时酸化剂的添加降低了胃排空速度和食糜在肠道内的流动速度，使得养分充分吸收，从而提高粗蛋白质的消化率^[1]。本试验中，与对照1组相比，添加复合酸化剂极显著提高了粗灰分表观消化率。研究发现，柠檬酸对养分表观消化率的作用更多表现在对矿物质的影响上，常量元素和微量元素在碱性条件下形成不溶性盐而极难吸收。酸化剂在降低胃肠道pH的同时，可与饲粮中矿物元素形成有利于吸收的络合物，从而促进了矿物质的吸收^[27]。这与本试验结果相一致。本试验结果显示，与对照1组相比，添加复合酸化剂对能量、干物质、NDF及ADF表观表观消化率没有显著影响。Debi等^[21]研究发现，添加柠檬酸显著提高了家兔干物质表观消化率，Upadhaya等^[28]也发现添加酸化剂可以显著提高第3~6周试验猪能量表观消化率。这些试验结果与本试验结果不一致，这可能与不同的饲粮组成、酸化剂的种类有关，不同类型的酸化剂pH不同，对动物养分表观消化率的影响不同，因而其作用效果存在差异^[29]。

3.3 复合酸化剂对断奶幼兔屠宰性能及肉品质的影响

屠宰率是衡量肉兔产肉性能的一项主要指标，本试验中添加复合酸化剂对试验兔胴体重、半净膛率、全净膛率影响均不显著。研究发现，添加复合酸化剂对肉鸡屠宰率无显著影响^[30-32]。这些试验与本试验结果一致。但也有研究发现，饲粮中添加丁酸钠显著降低了彭县黄鸡的全净膛率^[33]。刁蓝宇等^[34]研究表明，适量的酸化剂与益生菌混合制剂可以显著提高三黄鸡屠宰率。由此可以推测，不同种类的酸化剂及其与其他添加剂的配伍是对动物屠宰性能产生不同影响的主要原因。肉品质是肉兔的主要性能指标，其物理特性决定了人们对兔肉的喜好程度，常规成分含量则关系着兔肉的营养价值^[35]。本试验中，添加复合酸化剂对兔肉物理特性及常规成分均没有显著影响。不同酸化剂对兔肉品质的研究不多，在其他动物肉品质的影响研究中结果也不尽一致。李万军等^[36]研究发现益生菌与有机酸复合制剂对大骨鸡肌肉常规成分、蒸煮损失及剪切力没有显著影响。李建平等^[37]试验得出，添加柠檬酸对生长肥育猪背最长肌pH及嫩度没有显著影响。钟炜^[38]试验得出添加复合酸化剂对肉鸡肉品质没有显著影响，这些结果与本试验一致。也有不同的研究结果，陶强强等^[39]试验得出添加复合酸化剂可以显著改善鸡肉品质。这些研究表明，酸化剂对屠宰性能及肉品质的影响与酸化剂的种类及与其他添加剂联合使用有关，不同酸化剂对动物屠宰性能及肉品质的影响机理有待于进一步研究。

3.4 复合酸化剂对断奶幼兔免疫器官的影响

动物机体免疫功能是机体健康状态的重要指标^[40]。家兔的胸腺、脾脏及圆小囊是机体免疫防御体系的重要组成部分，这些免疫器官的生长发育状况会明显影响家兔免疫能力。近年来大量研究表明，饲粮中添加一定量的酸化剂可以增强机体生物免疫力。本试验中，随着复合酸化剂添加水平的增加，试验兔胸腺重及胸腺指数逐渐降低，但未达到显著水平，同时试验兔腹泻频率有降低的趋势。蒋志等^[41]研究发现，饲粮中添加0.08%的包被精油复合酸化剂有增加断奶仔猪免疫力的趋势。罗曦等^[9]研究发现，饲粮中添加复合酸化剂对肉鸡免疫功能没有显著影响。王淑琴^[42]试验得出，添加高剂量的柠檬酸可以显著提高肉仔鸡免疫功能。Roofchaei等^[43]研究发现，添加木聚糖酶、β-葡聚糖酶及酸化剂的复合物降低了肉鸡脾脏重。这些试验结果并不一致，这主要是因为动物种类、酸化剂种类及不同配伍方式所造成的，一些研究认为部分酸类如柠檬酸、延胡索酸等可快速参与三羧酸循环反应，给机体供能，进而提高免疫功能^[36]。综合这些研究结果，多是针对不同酸化剂对动物体液免疫的影响研究，不同酸化剂对动物免疫器官的影响研究较少，还需要进一步深入研究其作用方式。

4 结论

饲粮中添加柠檬酸与磷酸复合酸化剂有提高断奶幼兔平均日增重、降低腹泻频率的趋势。与对照组相比，添加复合酸化剂可提高断奶幼兔对粗灰分表观消化率，而对肉兔屠宰性能、免疫器官及肌肉品质无显著影响。综合本试验指标，以添加0.3%的柠檬酸与磷酸的复合物效果较好。