动物营养学报    2021, Vol. 33 Issue (5): 2864-2874    PDF    
引用本文
耿彬, 陈开健, 刘祥, 魏泽宏, 易新文, 胡毅, 唐涛. 饲料中添加不同水平玉米干酒糟及其可溶物对斑点叉尾鮰生长、体色、肉色、血清生化指标及肠道菌群结构的影响[J]. 动物营养学报, 2021, 33(5): 2864-2874.  
GENG Bin, CHEN Kaijian, LIU Xiang, WEI Zehong, YI Xinwen, HU Yi, TANG Tao. Effects of Different Supplemental Levels of Corn Distillers' Dried Grains with Soluble in Diets on Growth, Body Color, Flesh Color, Serum Biochemical Indexes and Intestinal Microbiota Structure of Channel Catfish (Ictalurus punctatus)[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2021, 33(5): 2864-2874.  
饲料中添加不同水平玉米干酒糟及其可溶物对斑点叉尾鮰生长、体色、肉色、血清生化指标及肠道菌群结构的影响
耿彬1 , 陈开健1 *, 刘祥1 , 魏泽宏2 , 易新文3 , 胡毅1 , 唐涛2     
1. 湖南农业大学动物科学技术学院, 湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心, 长沙 410128;
2. 湖南师范大学生命科学学院, 省部共建淡水鱼类发育生物学国家重点实验室, 长沙 410081;
3. 深圳市澳华集团股份有限公司, 深圳 518067
收稿日期: 2020-10-22
基金项目: 省部共建淡水鱼类发育生物学国家重点实验室开放课题基金(2019KF003)
作者简介: 耿彬(1997-), 男, 江苏无锡人, 硕士研究生, 研究方向为水产动物营养与饲料。E-mail: 969329724@qq.com.
通信作者: 易新文, 中级工程师, E-mail: yixw2011@163.com;
胡毅, 教授, 博士生导师, E-mail: huyi740322@163.com.
* 同等贡献作者
摘要: 以初始体重(50.0±0.2)g的斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)作为试验对象，以不添加玉米干酒糟及其可溶物(DDGS)的饲料作为对照组饲料，在对照组饲料的基础上分别添加3%、6%和12%的玉米DDGS替代部分豆粕作为试验组饲料，研究饲料中添加不同水平玉米DDGS对斑点叉尾鮰生长、体色、肉色、血清生化指标及肠道菌群结构的影响。对照组设置8个重复，每个试验组均设置5个重复，每个重复50尾鱼，养殖试验在水库网箱(1.5 m×1.5 m×2.0 m)中进行，共持续60 d。结果显示：饲料中添加不同水平玉米DDGS替代部分豆粕对斑点叉尾鮰的存活率、增重率、特定生长率、饲料系数、摄食率、肝体比和肥满度均无显著影响(P>0.05)。与对照组相比，饲料中添加6%和12%玉米DDGS均会显著降低斑点叉尾鮰侧面皮肤亮度(L*)值(P < 0.05)，但对腹部皮肤及背部肌肉L*值无显著影响(P>0.05)；3个试验组的腹部和侧面皮肤及背部肌肉黄度(b*)值均显著高于对照组(P < 0.05)。各组血清免疫球蛋白M(IgM)、补体4(C4)及总胆汁酸(TBA)含量无显著差异(P>0.05)。饲料中添加不同水平玉米DDGS不会改变斑点叉尾鮰肠道中的绝对优势菌，且能够提高有益菌相对丰度，降低有害菌相对丰度。由此得出，在本试验条件下，饲料中添加12%的DDGS替代部分豆粕不会对斑点叉尾鮰的存活、生长、饲料利用、免疫力及肠道菌群结构造成不利影响，但会使其体色和肉色变黄。
关键词: 玉米DDGS    斑点叉尾鮰    生长    体色    肉色    血清生化指标    肠道菌群结构    
Effects of Different Supplemental Levels of Corn Distillers' Dried Grains with Soluble in Diets on Growth, Body Color, Flesh Color, Serum Biochemical Indexes and Intestinal Microbiota Structure of Channel Catfish (Ictalurus punctatus)
GENG Bin1 , CHEN Kaijian1 *, LIU Xiang1 , WEI Zehong2 , YI Xinwen3 , HU Yi1 , TANG Tao2     
1. Hunan Engineering Research Center for Utilization of Characteristics of Resources, College of Animal Science and Technology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China;
2. State Key Laboratory of Developmental Biology of Freshwater Fish, College of Life Sciences, Hunan Normal University, Changsha 410081, China;
3. Shenzhen Alpha Group Co., Ltd., Shenzhen 518067, China
Corresponding author: YI Xinwen, intermediate engineer, E-mail: yixw2011@163.com;
HU Yi, professor, E-mail: huyi740322@163.com.
* Contributed equally
Abstract: A 56-day feeding experiment was conducted to evaluate the effects of different supplemental levels of corn distillers' dried grains with soluble (DDGS) in diets on the growth, body color, flesh color, serum biochemical indexes and intestinal microbiota structure of channel catfish (Ictalurus punctatus). In this experiment, channel catfish with the body weight of (50.0±0.2) g were used as experimental animals, the diet without corn DDGS was used as the diet of control group, and then supplemented with 3%(group D1), 6%(group D2) and 12% (group D3) of corn DDGS to replace part of soybean meal based on the control group's diet, respectively, which were as the diets of experimental groups. The control group was set up with 8 replicates, and each experimental group was set up with 5 replicates. There were 50 fish in per replicate, and they were cultured in a reservoir cage (1.5 m×1.5 m×2.0 m). The results showed that supplemented with different levels of corn DDGS to replace part of soybean meal had no significant difference in survival rate, weight gain rate, specific growth rate, feed conversion rate, feeding rate, hepatopancreas-somatic index, condition factor of channel catfish (P>0.05). Compared with the control group, diet supplemented with 6% and 12% corn DDGS could significantly decrease the lightness (L*) value of lateral skin (P < 0.05), but had no significant difference in the L* value of abdominal skin and back muscle (P>0.05); the yellow (b*) value of the abdominal and lateral skin and back muscle was significantly higher in the groups D1, D2 and D3 than that in the control group (P < 0.05). The immunoglobulin M, complement 4 and total bile acid contents in serum were not significantly different among all groups (P>0.05). Diet supplemented with different levels of corn DDGS did not change the absolute dominant bacteria in intestinal microbiota of channel catfish, moreover, it could increase the relative abundance of beneficial bacteria and decrease the relative abundance of harmful bacteria. In conclusion, these results showed that the addition of 12% corn DDGS to replace part of soybean meal has no adverse effects on the survival, growth, feed utilization, immunity and intestinal microbiota structure of channel catfish, however, it can cause the body color and flesh color to turn yellow.
Key words: corn DDGS    channel catfish (Ictalurus punctatus)    growth    body color    flesh color    serum biochemical indexes    intestinal microbiota structure    

豆粕因蛋白质含量高且氨基酸组成较为均衡而成为水产饲料中重要的蛋白质源，但随着国内水产行业的迅速发展，豆粕需求量逐年增长，而我国大豆主要依靠进口，加之近年来中美贸易关系紧张，导致大豆价格持续走高，因此寻找成本低廉且对养殖动物无负面影响的替代蛋白质源显得尤为重要。玉米干酒糟及其可溶物(DDGS)是玉米产出燃料乙醇后，再通过低温干燥处理形成的含有可溶固形物的干酒糟。玉米DDGS中蛋白质、纤维素、维生素和脂肪含量较高，且价格低廉，来源广泛[1-2]。玉米DDGS在畜禽生产中已有广泛的研究和应用，有研究表明饲粮中添加适量玉米DDGS对动物的生长无不利影响，但在肉鸡饲粮中添加水平过高可能会导致鸡胸肉产量下降[3]。有研究显示，玉米DDGS中含有玉米黄质及叶黄素，动物摄入后会对肌肉、皮肤或其副产物颜色产生影响[4-5]，例如，在蛋鸡饲粮中添加玉米DDGS会对蛋黄的颜色产生显著影响。

关于玉米DDGS对水产动物影响的研究多集中在生长和免疫方面，饲料中适量添加玉米DDGS对水产动物的生长性能无负面影响且能在一定程度上提高机体免疫力[6-7]，但对体色、肉色和肠道菌群结构的研究未见报道。

斑点叉尾(Ictalurus punctatus)肉质鲜美，是我国重要的淡水经济养殖品种，其经济价值与其体色和肉色有关，而饲料中的一些色素会使其体色和肉色发生变化，导致其经济价值降低[8]。本试验通过在饲料中添加不同水平的玉米DDGS，研究其对斑点叉尾生长、体色、肉色、血清生化指标及肠道菌群结构的影响，确定饲料中玉米DDGS替代部分豆粕的可行性，以达到降低饲料成本但不影响养殖效益的目的。

1 材料与方法 1.1 试验饲料

以鱼粉、豆粕为主要蛋白质源，并分别添加0(对照组)、3%(D1组)、6%(D2组)和12%(D3组)的玉米DDGS(主要成分为蛋白质、脂肪、粗纤维及有效磷)，配制4种试验饲料，其组成及营养水平见表 1。饲料制备前先将饲料原料粉碎，过60目筛，按配比从小到大逐级定量均匀混合，再将其投入V型搅拌机充分混合25 min；随后将豆油与混好的饲料干粉充分混匀，再喷入适量的水混合均匀，将混合均匀的饲料用单螺杆挤压式饲料膨化机(安德里茨EX1250，中国，调制温度100 ℃，出模温度120 ℃左右)制成粒径为3.0 mm的膨化饲料，阴凉处风干后储存备用。

表 1 试验饲料组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) 
1.2 试验设计与养殖管理

养殖试验在湖南省娄底市车田江水库试验基地中进行，试验鱼统一购于种苗公司，并在网箱(9 m×9 m×2 m)中暂养1个月，暂养期间投喂对照组饲料，分组前饥饿24 h。挑选规格一致、体格健康、初始体重(50.0±0.2)g的斑点叉尾1 150尾，随机分配至23个网箱(网箱材料为聚乙烯，规格为1.5 m×1.5 m×2.0 m，使用前用3%的食盐水浸泡5~10 min)，每个网箱随机分配50尾。将23个网箱共分为4个组，即1个对照组和3个试验组(D1组、D2组、D3组)，对照组分配8个网箱(重复)，每个试验组均分配5个网箱(重复)。每日分别在06:00、12:00、18:00进行投喂，投喂量以鱼体重的3%~5%为准，每周根据实际情况调整投喂量。每天早中晚测量并记录水温。养殖期间每周测定水体溶氧浓度以及pH。养殖期间水体温度为(26.0±1.2) ℃，pH为7.4~7.8，溶解氧浓度＞5 mg/L，氨氮浓度＜0.01 mg/L。

1.3 样品采集与指标测定 1.3.1 生长性能

试验开始前和结束后记录每个网箱斑点叉尾总重、总尾数，用于计算存活率(SR)、增重率(WGR)、摄食率(FR)、特定生长率(SGR)和饲料系数(FCR)。每个网箱随机取4尾鱼，测量体重、体长、内脏重、肝脏重及腹脂重，用于计算肝体比、脏体比、肥满度和腹脂率。

1.3.2 体色和肉色

养殖试验结束后，从每个网箱中随机取6尾鱼，参考梁高杨等[9]的方法，用色差仪(NR110)测定腹部与侧线附近皮肤的亮度(L*)、红度(a*)、黄度(b*)值以及背部肌肉的L*、a*、b*值。具体测样点如图 1所示。

图 1 体色测样点(图片来自百度网站) Fig. 1 Body color test points (picture from Baidu website)
1.3.3 血清生化指标

养殖试验结束后，从每个网箱中随机取5尾鱼，使用经0.2%的肝素钠润洗后的注射器自尾静脉取血，储存于4 ℃冰箱，2 h后使用离心机3 000 r/min离心10 min，吸取血清并保存于-80 ℃冰箱中待测。血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, AKP)活性以及低密度脂蛋白(low-density lipoprotein, LDL)、总胆固醇(total cholesterol, TC)、甘油三酯(triglyceride, TG)、总胆汁酸(total bile acid, TBA)含量采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒进行测定，免疫球蛋白M(immunoglobulin M，IgM)、补体3(complement 3，C3)和补体4(complement 4，C4)含量采用浙江伊利康生物技术有限公司生产的试剂盒进行测定。

1.3.4 肠道菌群结构

养殖试验结束后，从每个网箱中随机取3尾鱼，用于肠道菌群结构检测样品采集。将解剖盘与器材用75%酒精消毒后，在酒精灯旁取出鱼体肠道后放入无菌离心管，于-80 ℃冰箱保存，用于后续肠道菌群结构分析。使用天根总DNA提取试剂盒进行斑点叉尾肠道菌群DNA提取。选取对照组、D2组、D3组DNA送北京诺和致源生物科技有限公司进行肠道菌群测序，后续利用诺和致源售后平台工具(https://magic.novogene.com)进行数据分析统计。

1.4 统计分析

试验数据通过SPSS 25.0软件采用单因素方差分析(one-way ANOVA)程序进行方差分析，并采用Duncan氏法进行组间多重比较。显著水平为P＜0.05，结果用平均值±标准误表示。

2 结果 2.1 饲料中添加不同水平玉米DDGS对斑点叉尾生长性能的影响

由表 2可知，饲料中添加不同水平玉米DDGS替代部分豆粕对斑点叉尾的增重率、特定生长率、存活率、饲料系数、摄食率、肝体比及肥满度无显著影响(P>0.05)。D2组的脏体比最高，显著高于D3组(P＜0.05)，与其他组差异不显著(P>0.05)。D1组的腹脂率最高，显著高于D2组(P＜0.05)，与其他组差异不显著(P>0.05)。

表 2 饲料中添加不同水平玉米DDGS对斑点叉尾生长性能的影响 Table 2 Effects of different supplemental levels of corn DDGS in diets on growth performance of channel catfish (Ictalurus punctatus)
2.2 饲料中添加不同水平玉米DDGS对斑点叉尾皮肤及肌肉色度值的影响

由表 3可知，饲料中添加不同水平玉米DDGS替代部分豆粕对斑点叉尾腹部皮肤L*值无显著影响(P>0.05)，但显著升高了a*和b*值(P＜0.05)。饲料中添加6%和12%的玉米DDGS使侧面皮肤L*值显著下降(P＜0.05)，a*和b*值显著升高(P＜0.05)。各组间背部肌肉L*值无显著差异(P>0.05)，各试验组a*和b*值均显著高于对照组(P＜0.05)，且D2组和D3组b*值还显著高于D1组(P＜0.05)。由图 2可以看出，随着饲料中玉米DDGS添加水平的升高，斑点叉尾肉色有肉眼可见的变黄趋势。

表 3 饲料中添加不同水平玉米DDGS对斑点叉尾皮肤及肌肉色度值的影响 Table 3 Effects of different supplemental levels of corn DDGS in diets on chromatic values of skin and muscle of channel catfish (Ictalurus punctatus)
图 2 斑点叉尾肌肉 Fig. 2 Muscle of channel catfish (Ictalurus punctatus)
2.3 饲料中添加不同水平玉米DDGS对斑点叉尾血清生化指标的影响

由表 4可知，饲料中添加不同水平玉米DDGS替代部分豆粕对斑点叉尾血清IgM、C4及TBA含量无显著影响(P>0.05)。与对照组相比，D1组血清AKP活性和TC含量显著升高(P＜0.05)，D2组显著降低(P＜0.05)，D3组则无显著变化(P＜0.05)；D2组和D3组血清LDL、TG和C3含量显著降低(P＜0.05)，D1组则无显著变化(P>0.05)。

表 4 饲料中添加不同水平DDGS对斑点叉尾血清生化指标的影响 Table 4 Effects of different supplemental levels of corn DDGS in diets on serum biochemical indexes of channel catfish (Ictalurus punctatus)
2.4 饲料中添加不同水平玉米DDGS对斑点叉尾肠道菌群结构的影响

根据生长性能、血清生化指标和体色、肉色差异，对对照组、D2组和D3组肠道菌群进行测序。由图 3可知，对照组操作分类单元(OTU)数目为406个，D2组OTU数目为424个，D3组OTU数目为305个，3组共有的OTU数目为164个，对照组与D2组共有OTU数目为150个，对照组与D3组共有OTU数目为31个，D2组与D3组共有OTU数目为43个，对照组特有OTU数目为61个，D2组、D3组特有OTU数目均为67个。

图 3 OTU韦恩图 Fig. 3 OTU Venn chart
2.4.1 门水平结构分析

通过对斑点叉尾肠道菌群中门水平物种相对丰度进行统计分析(图 4)，发现其肠道优势菌群为梭杆菌门(Fusobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)、蓝细菌门(Cyanobacteria)、疣微菌门(Verrucomicrobia)、绿弯菌门(Chloroflexi)和螺旋体门(Spirochaetes)，核心菌群为梭菌门、厚壁菌门、变形菌门和拟杆菌门。由表 5可知，D2组梭杆菌门、拟杆菌门的相对丰度均显著高于对照组、D3组(P＜0.05)，放线菌门的相对丰度显著高于D3组(P＜0.05)，厚壁菌门的相对丰度则显著低于对照组、D3组(P＜0.05)；变形菌门的相对丰度各组间无显著差异(P>0.05)。

Fusobacteria：梭杆菌门；Firmicutes：厚壁菌门；Proteobacteria：变形菌门；Bacteroidetes：拟杆菌门；Actinobacteria：放线菌门；Cyanobacteria：蓝细菌门；Verrucomicrobia：疣微菌门；Chloroflexi：绿弯菌门；unidentified_Bacteria：未鉴定细菌；Spirochaetes：螺旋体门；Others：其他。 图 4 门水平物种相对丰度 Fig. 4 Relative abundance of species on phylum level
表 5 门水平排名前5的物种相对丰度 Table 5 Relative abundance of top 5 species on phylum level
2.4.2 属水平结构分析

由图 5可知，斑点叉尾肠道菌群中相对丰度较高的10个属依次为鲸杆菌属(Cetobacterium)、乳球菌属(Lactococcus)、邻单胞菌属(Plesiomonas)、屠场杆状菌属(Macellibacteroides)、假纤细芽胞杆菌属(Pseudogracilibacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)、咸海鲜球菌属(Jeotgalicoccus)、梭菌目未鉴定属(unidentified_Clostridiales)和Romboutsia。由表 6可知，D2组鲸杆菌属的相对丰度显著高于对照组、D3组(P＜0.05)，乳球菌属的相对丰度则显著低于对照组、D3组(P＜0.05)；各组邻单胞菌属的相对丰度无显著差异(P>0.05)。

Cetobacterium：鲸杆菌属；Lactococcus：乳球菌属；Plesiomonas：邻单胞菌属；Macellibacteroides：屠场杆状菌属；Pseudogracilibacillus：假纤细芽胞杆菌属；Pseudomonas：假单胞菌属；Citrobacter：柠檬酸杆菌属；Jeotgalicoccus：咸海鲜球菌属；unidentified_Clostridiales：梭菌目未鉴定属；Romboutsia：罗姆布茨菌属；Others：其他。 图 5 属水平物种相对丰度 Fig. 5 Relative abundance of species on genus level
表 6 属水平排名前3的物种相对丰度 Table 6 Relative abundance of top 3 species on genus level
3 讨论 3.1 饲料中添加不同水平玉米DDGS对斑点叉尾生长性能的影响

研究表明，细鳞鲳(Piaractus mesopotamicus)幼鱼饲料中添加玉米DDGS可提高饲料效率，对增重率和形体指标无显著影响[10]。本研究结果表明，饲料中添加不同水平玉米DDGS替代部分豆粕对斑点叉尾的生长性能无显著影响，与在草鱼(Ctenopharyngodon idellus)[11]、鲤鱼(Cyprinus carpio)[11]、虹鳟(Oncorhynchus mykiss)[6]和金头鲷(Sparus aurata)[7]幼鱼上的研究结果相似。何晓庆等[12]用玉米DDGS替代奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus×O. mossambicus)饲料中的豆粕后发现各组脏体比、肝体比均无显著差异。在本试验中，饲料中添加不同水平玉米DDGS替代部分豆粕对斑点叉尾的肝体比无显著影响，但脏体比在添加水平为6%时最高，与在奥尼罗非鱼[12]上所得结果不一致，其原因可能是饲料中植物性蛋白质源或脂肪源在一定水平时会导致脂肪在鱼体内沉积[13-14]，当玉米DDGS添加水平达到6%时，可能影响了斑点叉尾对脂质的吸收利用，促进脂肪在脏器中沉积，导致脏体比升高。

3.2 饲料中添加不同水平玉米DDGS对斑点叉尾体色和肉色的影响

鱼类的皮肤和肌肉颜色的变化取决于摄取的类胡萝卜素，鱼类和其他动物一样，自生不能合成类胡萝卜素[15]。玉米DDGS中含有的玉米黄质和叶黄素会影响斑点叉尾皮肤和肌肉的b*值，b*值越大说明颜色越黄。本试验结果显示，饲料中玉米DDGS添加水平的变化未对斑点叉尾腹部皮肤和背部肌肉L*值产生显著影响，但添加6%和12%玉米DDGS时，各部位皮肤a*值显著升高，皮肤及肌肉b*值与a*值呈相似的变化趋势，其可能的原因是玉米DDGS含有较高比例的类胡萝卜素，且玉米DDGS中叶黄素和玉米黄质的含量是黄色玉米的3倍，而类胡萝卜素中的叶黄素及玉米黄质能够导致鱼类体色和肉色变黄[16]，这与Li等[17]的研究结果相似。

3.3 饲料中添加不同水平玉米DDGS对斑点叉尾血清生化指标的影响

血清中LDL、TC、TG和TBA含量是评价动物肝胆健康及脂质吸收代谢的重要指标，LDL作为胆固醇的载体，其含量与血清中TC含量呈正相关。本试验结果显示，随着饲料中玉米DDGS添加水平的升高，血清中LDL、TC、TG含量均不同程度下降，血清TBA含量各组间无显著差异，与黄文庆等[18]的研究结果相似。在亚麻籽饲料中添加玉米DDGS会显著降低肉鸡血清TG和TC含量[19]，说明饲料中添加玉米DDGS能改善脂质吸收代谢且不会对肝脏功能造成负面影响。Shelby等[20]使用玉米DDGS部分替代饲料中豆粕后对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus L.)血清免疫指标并无显著影响，本研究中血清IgM和C4含量的结果与其一致。AKP作为生物体内重要的磷酸酶，能够反映机体肝脏功能是否有损伤[21]。在正常情况下血清中AKP的活性保持在相对较低且稳定的状态下，只有当肝脏受到损伤时其活性才会升高[22]。本研究中，饲料中玉米DDGS添加水平为6%时血清AKP活性显著低于对照组，添加水平为12%时与对照组差异不显著，因此推测斑点叉尾摄入含6%或12%玉米DDGS的饲料后未对肝脏功能造成损伤。

3.4 饲料中添加不同水平玉米DDGS对斑点叉尾肠道菌群结构的影响

硬骨鱼类与水生环境直接接触，因此水环境中复杂而动态的微生物群落可能对其健康产生影响[23]。肠道黏膜表面是肠道菌群与宿主相互作用的主要部位，正常微生物群落在肠道黏膜表面的定植对肠道的消化吸收和机体免疫调节功能具有积极作用，而微生物群落失衡对鱼体则会产生不利影响[24]。与水环境相比，消化道是一个营养更丰富的生态系统，因此更有利于大多数细菌的生长，但并不是所有进入鱼类消化道的食物中的细菌都会寄生在肠道内[25]。存在于消化道中的微生物以寄主的食物为食，寄主的食物被它们和寄主自身产生的酶消化，而寄主产生的食糜决定了消化道中微生物的丰度和质量组成[26]，因此饲料的组成成分会对其肠道菌群结构产生一定影响。本试验研究结果显示，斑点叉尾饲料中玉米DDGS添加水平不同不会改变肠道中的绝对优势菌群，其门水平上的梭杆菌门和属水平上的鲸杆菌属为其肠道中绝对优势菌群。有研究表明鱼类初级肠道菌群的建立取决于卵黄囊阶段摄入的细菌种类，在首次进食后保持不变，并在进食后数周至数月内形成稳定菌群[27]，这有可能是本研究中不同组斑点叉尾肠道中绝对优势菌群保持不变的原因。通过分析OTU韦恩图发现，饲喂添加不同水平玉米DDGS饲料的斑点叉尾共有OTU的数目为164个，说明不同分组共有一个稳定的核心菌群，这与何娇娇等[28]在研究发酵豆粕对大黄鱼(Larimichthys crocea)幼鱼肠道菌群结构影响时得出的结果相似。

在本试验中，当饲料中玉米DDGS添加水平达到6%时，斑点叉尾肠道内门水平的梭杆菌门、拟杆菌门和属水平的鲸杆菌属的相对丰度较其他2组有所上升。Qi等[29]研究发现，低浓度氨会增加鲫鱼(Carassius auratus auratus)免疫相关基因和抗氧化酶相关基因的表达，同时肠道中鲸杆菌属的数量也会增加，鲸杆菌属可能属于能够提高鱼类免疫力的潜在有益菌。在对牛蛙的肠道微生物研究中发现，鲸杆菌属能更好地提高氨基酸转运和代谢率[30]，膳食氨基酸是鱼类生长和维持所必需的，特别是处在生长期的幼鱼，某些氨基酸及其代谢物是关键代谢途径的重要调节剂，对鱼类生长、采食、养分利用、免疫力、行为、幼虫变态、繁殖以及对环境压力和病原生物的抗性具有重要意义[31-32]。本研究结果还显示，在饲料中添加玉米DDGS会提高斑点叉尾肠道中鲸杆菌属的相对丰度，进而改善其肠道菌群结构。此外，玉米DDGS中富含动物蛋白质源中缺少的纤维素，相关研究表明拟杆菌门能有效利用纤维素生成短链脂肪酸，为机体供能，从而提高对饲料中养分的吸收利用[33]。因此，斑点叉尾肠道中鲸杆菌属相对丰度的增加有可能维持了其饲料系数、增重率和特定生长率不受玉米DDGS添加水平的影响。国内外研究发现乳球菌属是一种会导致淡水鱼及海水鱼干扰超急性和出血性败血病的病原菌[34-35]，在本研究中，当使用添加了6%玉米DDGS的饲料饲喂斑点叉尾时，其肠道中的乳球菌属的相对丰度显著低于其他2组，说明向饲料中添加DDGS或许能通过增加有益菌的数量来控制并减少有害菌的数量。

4 结论

综上所述，饲料中添加12%的玉米DDGS替代部分豆粕不会对斑点叉尾的存活、生长、饲料利用、免疫力、肠道菌群结构产生不利影响，但会使其体色和肉色变黄。

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