1~63日龄快速型黄羽肉鸡硫胺素需要量研究

引用本文

阮栋, 周桂莲, 陈芳, 林厦菁, 苟钟勇, 范秋丽, 郑春田, 蒋守群. 1~63日龄快速型黄羽肉鸡硫胺素需要量研究[J]. 动物营养学报, 2021, 33(12): 6757-6770.

RUAN Dong, ZHOU Guilian, CHEN Fang, LIN Xiajing, GOU Zhongyong, FAN Qiuli, ZHENG Chuntian, JIANG Shouqun. Thiamine Requirement for Fast-Growing Yellow-Feathered Chickens from 1 to 63 Days of Age[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2021, 33(12): 6757-6770.

1~63日龄快速型黄羽肉鸡硫胺素需要量研究

阮栋 , 周桂莲 , 陈芳 , 林厦菁 , 苟钟勇 , 范秋丽 , 郑春田 , 蒋守群

广东省农业科学院动物科学研究所, 畜禽育种国家重点实验室, 农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室, 广东省畜禽育种与营养重点实验室, 广州 510640

收稿日期: 2021-04-26

基金项目: 广东省自然科学基金项目（2019A1515010912）；广东省重点领域研发计划项目（2020B0202090004）；财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系（CARS-41）；广东省农业科学院科技计划项目（202106TD，R2019PY-QF008）

作者简介: 阮栋(1983-), 男, 湖北咸宁人, 副研究员, 博士, 从事家禽营养与饲料研究。E-mail: donruan@126.com.

通信作者: 蒋守群, 研究员, 硕士生导师, E-mail: jiangshouqun@gdaas.cn.

摘要: 本试验旨在研究饲粮添加不同水平硫胺素对1~63日龄快速型黄羽肉鸡生长性能、抗氧化能力、肉品质和风味的影响，以确定不同生长阶段黄羽肉鸡硫胺素需要量。试验采用单因素随机分组试验设计，分别选取1、22、43日龄快速型岭南黄羽肉鸡进行3个试验，每个试验的饲养周期为21 d。试验1选取1日龄黄羽肉鸡公雏1 920羽，随机分为8组，每组6个重复，每个重复40羽鸡；试验2选取22日龄公鸡1 440羽，随机分为8组，每组6个重复，每个重复30羽鸡；试验3选取43日龄公鸡1 440羽，分组同试验2。1~21日龄、22~42日龄和43~63日龄各组饲粮硫胺素添加水平分别为0（对照）、0.6、1.2、1.8、2.4、3.0、3.6和4.2 mg/kg。试验期间试验鸡地面平养，自由采食颗粒饲料和自由饮水。结果表明：1）随着饲粮硫胺素水平的升高，1~21日龄试鸡平均日采食量呈线性增加（P < 0.05），平均日增重呈线性和二次曲线增加（P < 0.05），料重比呈线性和二次曲线降低（P < 0.05），且平均日增重（r=0.779，P < 0.05）和料重比（r=-0.688，P < 0.05）均呈显著的剂量效应关系；饲粮硫胺素水平对22~42日龄和43~63日龄试鸡平均日采食量、平均日增重和料重比均无显著影响（P>0.05）。2）21日龄和42日龄试鸡血浆还原型谷胱甘肽含量和还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽值随饲粮硫胺素水平的升高呈线性增加（P < 0.05），且呈显著的正相关（P < 0.05）。与对照组相比，当饲粮硫胺素添加水平为3.6 mg/kg时，21日龄试鸡血浆总抗氧化力显著提高（P < 0.05），血浆丙二醛含量显著降低（P < 0.05）。3）饲粮硫胺素水平对21日龄、42日龄和63日龄试鸡大脑丙酮酸脱氢酶和α-酮戊二酸脱氢酶活性均未产生显著影响（P>0.05）。4）随着饲粮硫胺素水平的升高，63日龄试鸡胸肌剪切力呈线性降低（P < 0.05），鸡肉风味评分呈线性提高（P < 0.05）。综上所述，饲粮添加硫胺素可改善黄羽肉鸡生长性能、抗氧化能力和肉品质；分别以平均日增重和料重比为效应指标，通过二次曲线回归方程估测得到，1~21日龄、22~42日龄和43~63日龄快速型黄羽肉鸡饲粮硫胺素适宜水平分别为3.2、2.4、1.8 mg/kg和3.0、2.0、1.6 mg/kg。

关键词: 硫胺素黄羽肉鸡需要量抗氧化能力肉品质

Thiamine Requirement for Fast-Growing Yellow-Feathered Chickens from 1 to 63 Days of Age

RUAN Dong , ZHOU Guilian , CHEN Fang , LIN Xiajing , GOU Zhongyong , FAN Qiuli , ZHENG Chuntian , JIANG Shouqun

Guangdong Provincial Key Laboratory of Animal Breeding and Nutrition, Key Laboratory of Animal Nutrition and Feed Science in South China, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, State Key Laboratory of Livestock and Poultry Breeding, Institute of Animal Science, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510640, China

Corresponding author: JIANG Shouqun, professor, E-mail: jiangshouqun@gdaas.cn.

Abstract: This experiment was conducted to investigate the effects of different dietary levels of thiamine on growth performance, antioxidant capacity, meat quality and flavor of fast-growing yellow-feathered chickens from 1 to 63 days of age, in order to determine the thiamine requirement for yellow-feathered chickens at different growth stages. A single factor test design was adopted in the experiment, and the fast-growing Lingnan yellow-feathered chickens at 1, 22 and 43 days of age were selected for feeding trial with three stages of 21 days each. In experiment 1, a total of 1 920 male chicks at 1 day of age were selected and randomly divided into 8 groups with 6 replicates in each group and 40 chickens in each replicate. In experiment 2, a total of 1 440 male chickens at 22 days of age were selected and randomly divided into 8 groups with 6 replicates in each group and 30 chickens in each replicate. In experiment 3, a total of 1 440 male chickens at 43 days of age were selected and grouped with the same of experiment 2. The dietary thiamine levels of each group from 1 to 21, 22 to 42 and 43 to 63 days of age were 0 (control), 0.6, 1.2, 1.8, 2.4, 3.0, 3.6 and 4.2 mg/kg, respectively. During the experiment, chickens were raised flat on the ground and fed pellet feed and drank water freely. The results showed as follows: 1) with the increase of dietary thiamine level, the average daily feed intake of chickens from 1 to 21 days of age was linearly increased (P < 0.05), the average daily gain was linearly and quadratic increased (P < 0.05), the feed to gain ratio was linearly and quadratic decreased (P < 0.05), and the average daily gain (r=0.779, P < 0.05) and the feed to gain (r=-0.688, P < 0.05) showed significant dose-response relationship. Dietary thiamine level had no significant effects on the average daily feed intake, average daily gain and feed to gain ratio of chickens from 22 to 42 and 43 to 63 days of age (P>0.05). 2) The plasma reduced glutathione content and reduced glutathione to oxidative glutathione ratio of chickens at 21 and 42 days of age were linearly increased with the increase of dietary thiamine level (P < 0.05), and there was a significant positive correlation (P < 0.05). Compared with the control group, when the dietary thiamine supplemental level was 3.6 mg/kg, the plasma total antioxidant activity of chickens at 21 days of age was significantly increased (P < 0.05), and the plasma malondialdehyde content was significantly decreased (P < 0.05). 3) Dietary thiamine level had no significant effects on the activities of pyruvate dehydrogenase and α-ketoglutarate dehydrogenase in brain of chickens at 21, 42 and 63 days of age (P>0.05). 4) With the dietary thiamine level increasing, the shear force in breast muscle of chickens at 63 days of age was linearly decreased (P < 0.05), and the chicken flavor score was linearly increased (P < 0.05). In summary, dietary thiamine can improve the growth performance, antioxidant capacity and meat quality of yellow-feathered chickens. Based on the average daily gain and feed to gain ratio, the optimal thiamine levels estimated by quadratic regression equation for fast-growing yellow-feathered chickens from 1 to 21 days of age, 22 to 42 days of age and 43 to 63 days of age are 3.2, 2.4, 1.8 mg/kg and 3.0, 2.0, 1.6 mg/kg, respectively.

Key words: thiamine yellow-feathered chickens requirement antioxidant capacity meat quality

硫胺素(thiamine)又称维生素B₁，是维持动物正常生理功能的一类微量有机物质。硫胺素在动物体内主要以辅酶焦磷酸硫胺素(thiamine pyrophosphate，TPP)的生物活性形式存在，参与丙酮酸、α-酮戊二酸氧化脱羧反应，产生的乙酰辅酶A和琥珀酰辅酶A涉及碳水化合物、蛋白质和脂质代谢^[1-2]。在肉仔鸡中，硫胺素缺乏将导致鸡食欲不振、生长受阻，碳水化合物、蛋白质和脂质代谢障碍及明显的神经症状，最终导致死亡^[3]。硫胺素由嘧啶环和噻唑环构成，也是一种重要的水溶性风味前体物质，可改善鸡肉风味^[4]。目前，国内外关于肉鸡硫胺素需要量的研究报告较少，NRC(1994)给出的1~56日龄肉仔鸡饲粮中的硫胺素需要量为1.8 mg/kg，已不再适用于现代品系肉用仔鸡的生长需要。黄苇等^[5]研究报道，1~21日龄和22~49日龄的肉仔鸡硫胺素需要量分别为4.0和1.6 mg/kg。Olkowski等^[6]研究发现，肉仔鸡硫胺素的需求存在器官特异性，心脏似乎比肝脏或大脑具有更高的需要量。此外，不同品种、家系、日龄间肉鸡肌肉组织中硫胺素含量存在明显差异，机体硫胺素含量随日龄增加而逐渐下降，腿肌中硫胺素含量明显高于胸肌^[7-8]。近年来研究表明，硫胺素缺乏会导致大脑组织氧化应激，内质网应激和自噬^[9]。在幼年期剑鱼和草鱼中，硫胺素缺乏会抑制机体免疫系统，导致蛋白质和脂质氧化损伤^[10-11]。适宜含量的硫胺素能降低过氧化氢(H₂O₂)诱导的人脐静脉内皮细胞DNA氧化损伤^[12]。黄羽肉鸡是以我国地方品种鸡为血缘培育的肉鸡，按照生长速度分为快速型、中速型和慢速型3种类型。目前关于硫胺素在黄羽肉鸡上的需要量研究报道很少，且我国鸡饲养标准中提出的黄羽肉鸡硫胺素需要量也未按生长速度区分^[13]。有关硫胺素对黄羽肉鸡抗氧化功能的影响研究也少见报道。因此，本试验拟以快速型岭南黄羽肉鸡为试验动物，研究饲粮硫胺素水平对肉鸡不同生长阶段生长性能、抗氧化能力、肉品质及风味的影响，从而确定1~21日龄、22~42日龄以及43~63日龄快速型黄羽肉鸡硫胺素需要量，为黄羽肉鸡营养研究和标准化养殖提供科学依据。

1 材料与方法 1.1 试验动物与分组

本试验采用8个硫胺素水平的单因素随机分组设计，选用快速型岭南黄羽肉鸡公鸡作为试验鸡。试验1选用1 920只1日龄健康、发育良好的快速型岭南黄羽肉鸡公雏，依据体重一致原则将试验鸡分为8个组，每组6个重复，每个重复40只。试验2选用1 440只22日龄肉鸡，分为8个组，每组6个重复，每个重复30只。试验3选用1 440只43日龄肉鸡，分组同试验2。

1.2 试验饲粮

试验采用玉米淀粉-玉米-膨化豆粕型半纯合基础饲粮，营养水平参考《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)^[13]和《中国饲料成分及营养价值表》(2018年第29版)^[14]配制，基础饲粮组成及营养水平见表 1。试验通过硫胺素替代预混料中的玉米芯粉，实现不同硫胺素水平设置。1~21日龄、22~42日龄和43~63日龄各组饲粮硫胺素添加水平为0(对照)、0.6、1.2、1.8、2.4、3.0、3.6和4.2 mg/kg。除硫胺素外，其他营养水平均保持一致。

表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis)

%
项目 Items	1~21日龄 1 to 21 days of age	22~42日龄 22 to 42 days of age	43~63日龄 43 to 63 days of age
原料 Ingredients
玉米淀粉 Corn starch	34.31	39.20	44.26
玉米 Corn	20.43	20.43	20.43
膨化豆粕 Extruded soybean meal	33.10	26.90	20.52
酪蛋白 Casein	3.00	3.00	3.00
玉米蛋白粉 Corn gluten meal	4.00	5.00	6.00
大豆油 Soybean oil	1.10	1.70	2.30
L-赖氨酸盐酸盐 L-Lys·HCl (98.5%)	0.00	0.00	0.00
DL-蛋氨酸 DL-Met (99%)	0.08	0.05	0.03
石粉 Limestone	1.20	1.13	1.06
磷酸氢钙 CaHPO₄	1.48	1.29	1.10
食盐 NaCl	0.30	0.30	0.30
预混料 Premix¹⁾	1.00	1.00	1.00
合计 Total	100.00	100.00	100.00
营养水平 Nutrient levels²⁾
代谢能 ME/(MJ/kg)	12.12	12.54	12.96
粗蛋白质 CP	21.00	19.00	17.00
钙 Ca	1.00	0.90	0.80
有效磷 AP	0.45	0.40	0.35
赖氨酸 Lys	1.13	0.99	0.80
蛋氨酸 Met	0.45	0.40	0.35
蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys	0.78	0.68	0.63
苏氨酸 Thr	0.90	0.80	0.70
色氨酸 Trp	0.27	0.24	0.20
硫胺素 Thiamine/(mg/kg)	1.21	1.13	1.04
1)预混料为1~21日龄每千克饲粮提供The premix provided the following per kg of the diet during 1 to 21 days of age：VA 1 500 IU，VD 3 200 IU，VE 10 mg，VK₃ 0.5 mg，VB₂ 1.8 mg，VB₆ 3.5 mg，VB₁₂ 0.01 mg，烟酸niacin 15 mg，泛酸钙calcium pantothenate 10 mg，生物素biotin 0.15 mg，叶酸folic acid 0.55 mg，氯化胆碱choline chloride 1 000 mg，Fe 80 mg，Cu 8 mg，Mn 80 mg，Zn 40 mg，I 0.35 mg，Se 0.3 mg；预混料为22~42日龄每千克饲粮提供The premix provided the following per kg of the diet during 22 to 42 days of age：VA 1 500 IU，VD 3 200 IU，VE 10 mg，VK₃ 0.5 mg，VB₂ 1.8 mg，VB₆ 3.5 mg，VB₁₂ 0.01 mg，烟酸niacin 15 mg，泛酸钙calcium pantothenate 10 mg，生物素biotin 0.15 mg，叶酸folic acid 0.55 mg，氯化胆碱choline chloride 750 mg，Fe 80 mg，Cu 8 mg，Mn 80 mg，Zn 40 mg，I 0.35 mg，Se 0.15 mg；预混料为43~63日龄每千克饲粮提供The premix provided the following per kg of the diet during 43 to 63 days of age：VA 1 500 IU，VD 3 200 IU，VE 10 mg，VK₃ 0.5 mg，VB₂ 1.8 mg，VB₆ 3.5 mg，VB₁₂ 0.01 mg，烟酸niacin 15 mg，泛酸钙calcium pantothenate 10 mg，生物素biotin 0.15 mg，叶酸folic acid 0.55 mg，氯化胆碱choline chloride 750 mg，Fe 80 mg，Cu 8 mg，Mn 80 mg，Zn 40 mg，I 0.35 mg，Se 0.15 mg。 2)硫胺素为实测值，其他为计算值。Thiamine was a measured value, while the others were calculated values.

表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis)

1.3 饲养管理

饲养试验分3个阶段：小鸡阶段为1~21日龄，中鸡阶段为22~42日龄，大鸡阶段为43~63日龄。试验于广东省农业科学院动物科学研究所试验场肉鸡舍进行，采用地面平养，地面铺放干燥木屑，每组每个重复试验鸡饲养于一栏，栏间用不锈钢框架和铁丝网分隔。试验鸡自由采食、饮水，各组饲养管理和环境条件一致，按照常规操作程序和免疫流程进行饲养和免疫。每天08:00、14:00和20:00测定鸡舍温度和相对湿度。

1.4 测定指标与方法 1.4.1 生长性能

每个饲养阶段试验结束前1天18:00断料供水，次日08:00以重复为单位称重，统计耗料量，计算平均日采食量、平均日增重和料重比。每天观察鸡只健康状况，一旦出现死鸡及时称所在栏剩料量，以消除死鸡对试验结果的影响，并统计死亡率。

1.4.2 抗氧化能力

试验分别于21日龄、42日龄和63日龄，从每组每个重复选接近平均体重试鸡2只，称重后翅静脉采集全血5 mL于加有抗凝剂(肝素钠)的采血管，3 000 r/min离心10 min后取血浆，分装至500 μL的EP管中，-80 ℃冻存。血浆还原型谷胱甘肽(reduced glutathione，GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione，GSSG)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性、总抗氧化能力(total antioxidant capacity，T-AOC)和丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量均采用南京建成生物工程研究所研发的试剂盒测定，以上所有指标均在多功能酶标仪(SYNERGY H1，BioTek，美国)上读数，具体按照试剂盒说明书进行。

1.4.3 丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase，PDH)和α-酮戊二酸脱氢酶(α-ketoglutarate dehydrogenase，KGDH)活性

试验于21日龄、42日龄和63日龄，每组每个重复选2只鸡，颈部放血致死，剖摘整个大脑组织，取脑中线部分组织样约5 g于冻存管中，立即放入液氮中，然后转至-80 ℃冻存。试鸡大脑组织中PDH活性参照Kohda等^[15]的方法测定，大脑组织中KGDH活性参照Olkowski等^[16]的方法测定。以上指标均使用多功能酶标仪(SYNERGY H1，BioTek，美国)测定，并采用二喹啉甲酸(BCA)法测定大脑组织蛋白含量。

1.4.4 肉品质

在第3阶段试验结束时(63日龄)，每组每个重复随机选取接近平均体重试鸡2只，颈部放血屠宰后45 min，剖离2侧无皮无骨的完整胸肌，去除胸肌表面的脂肪组织，测定胸肌pH、肉色、剪切力和滴水损失。以上具体方法和详细操作步骤参照林厦菁等^[17]的方法。

1.4.5 风味品尝评分

将63日龄的每只重复的试验鸡胸肌切成块状放入1个小碗内，用锡箔纸包实并做好数字编号，隐去样品编号后，蒸煮20 min取出试验鸡胸肌样品。邀请畜牧专家共12位担任评委，对鸡肉风味品尝指标：颜色与外形、气味、口感风味、咀嚼嫩度和多汁性进行评分。各样品品尝间隔采用纯净水漱口。评分采用5分制，每个评委均独立给分。最后计算每个样品各个项目平均值。

1.5 数据统计分析

试验数据采用SAS 9.3(SAS Institute Inc，美国)软件中GLM程序进行方差分析，统计显著性水平为P < 0.05，0.05≤P < 0.10为有显著趋势，在差异显著的基础上采用Duncan氏法进行多重比较以及线性(Linear)和二次曲线(Quadratic)趋势分析，各表试验数据均以平均值和均值标准误(SEM)表示。并采用Pearson相关性分析，计算相关系数。对评价需要量的敏感指标应用REG程序进行二次曲线^[18][y=Ax²+Bx+C，式中y代表对应指标测定值，x代表饲粮硫胺素水平，A和B分别为回归方程二次项和一次项的系数，C为方程的常数项，x₀=-B/(2×A)的95%为饲粮硫胺素适宜水平]回归分析。

2 结果 2.1 饲粮硫胺素水平对1~63日龄快速型黄羽肉鸡生长性能的影响

由表 2可知，1~21日龄，试鸡平均日采食量随饲粮硫胺素水平的升高呈线性增加(P < 0.05)；试鸡21日龄活体重和平均日增重随饲粮硫胺素水平的升高呈线性和二次曲线增加(P < 0.05)，料重比呈线性和二次曲线降低(P < 0.05)。随着饲粮硫胺素水平的提高，试鸡平均日增重(r=0.779，P < 0.05)和料重比(r=-0.688，P < 0.05)均呈显著的剂量效应关系；其中，当饲粮硫胺素添加水平为3.0 mg/kg时，试鸡平均日增重最高，较对照组提高了10.94%(P < 0.05)，且料重比最低，较对照组降低了5.65%(P < 0.05)。

表 2 饲粮硫胺素水平对1~63日龄快速型黄羽肉鸡生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary thiamine levels on growth performance of fast-growing type yellow-feathered chickens during 1 to 63 days of age

项目 Items	饲粮硫胺素添加水平 Dietary thiamine supplemental levels/(mg/kg)								SEM	P值 P-value
项目 Items	0	0.6	1.2	1.8	2.4	3.0	3.6	4.2	SEM	硫胺素 Thiamine	线性 Linear	二次 Quadratic
1~21日龄 1 to 21 days of age
初重 Initial BW/g	42.31	42.30	42.31	42.35	42.31	42.30	42.30	42.32	0.019	0.493	0.929	0.658
末重 Final BW/g	401.40^b	397.27^b	423.98^ab	419.88^ab	429.00^a	440.41^a	436.25^a	431.88^a	7.403	0.006	< 0.001	0.043
平均日采食量 ADFI/g	30.27^b	30.27^b	31.10^ab	31.19^ab	31.03^ab	31.64^ab	31.48^ab	31.92^a	0.327	0.044	< 0.001	0.601
平均日增重 ADG/g	17.09^b	16.91^b	18.18^ab	17.98^ab	18.41^a	18.96^a	18.76^a	18.55^a	0.352	0.006	< 0.001	0.042
料重比 F/G	1.77^a	1.79^a	1.71^ab	1.74^ab	1.69^b	1.67^b	1.68^b	1.72^ab	0.021	0.002	< 0.001	0.012
22~42日龄 22 to 42 days of age
初重 Initial BW/g	400.55	399.72	400.0	400.32	400.57	399.72	400.22	399.92	0.855	0.531	0.882	0.658
末重 Final BW/g	1 119.3	1 128.2	1 128.6	1 127.9	1 148.0	1 141.1	1 141.9	1 127.2	13.89	0.910	0.530	0.504
平均日采食量 ADFI/g	84.33	84.44	85.10	84.64	85.54	85.24	86.43	85.11	0.762	0.352	0.151	0.156
平均日增重 ADG/g	34.26	34.69	34.71	35.26	35.64	35.54	35.30	34.64	0.661	0.147	0.532	0.037
料重比 F/G	2.46	2.45	2.44	2.40	2.40	2.42	2.45	2.46	0.038	0.545	0.904	0.045
43~63日龄 43 to 63 days of age
初重 Initial BW/g	1 082.3	1 084.1	1 082.3	1 083.5	1 084.5	1 083.0	1 082.3	1 083.6	2.13	0.452	0.756	0.613
末重 Final BW/g	1 832.7	1 858.4	1 881.8	1 868.5	1 855.1	1 854.3	1 835.5	1 836.1	17.51	0.563	0.242	0.101
平均日采食量 ADFI/g	106.86	108.61	110.81	108.61	108.30	108.75	109.40	108.44	2.662	0.380	0.695	0.077
平均日增重 ADG/g	35.73	36.96	37.90	37.28	36.71	36.75	35.87	35.90	1.125	0.183	0.508	0.032
料重比 F/G	2.99	2.97	2.93	2.94	2.95	2.96	3.05	3.02	0.057	0.110	0.802	0.021
同行数据肩标不同字母表示差异显著(P < 0.05)，相同字母或无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。 In the same row, values with different letter superscripts mean significant difference (P < 0.05), while with the same letter or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

22~42日龄和43~63日龄，饲粮硫胺素水平对试鸡平均日采食量无显著影响(P>0.05)。而随着饲粮硫胺素水平的提高，22~42日龄，试鸡平均日增重(r=0.655，P < 0.05)和料重比(r=-0.523，P < 0.05)均呈显著的剂量效应关系；43~63日龄，试鸡平均日增重(r=0.578，P < 0.05)和料重比(r=-0.456，P < 0.05)也均呈显著的剂量效应关系。

2.2 饲粮硫胺素水平对21、42和63日龄快速型黄羽肉鸡血浆抗氧化指标的影响

由表 3可知，21日龄，试鸡血浆GSH含量和GSH/GSSG值随饲粮硫胺素水平的升高呈线性增加(P < 0.05)，且呈显著的剂量效应关系(r=0.455，P < 0.05；r=0.678，P < 0.05)，其中以4.2 mg/kg硫胺素添加水平组GSH/GSSG值最高；而血浆GSSG含量随饲粮硫胺素水平的升高呈线性降低(P < 0.05)，且呈显著的剂量效应关系(r=-0.699，P < 0.05)；血浆T-AOC随饲粮硫胺素水平的升高呈线性升高(P < 0.05)，且呈显著的剂量效应关系(r=0.496，P < 0.05)；血浆MDA含量随饲粮硫胺素水平的升高呈线性和二次曲线降低(P < 0.05)，且呈显著的剂量效应关系(r=-0.826，P < 0.05)；饲粮硫胺素水平对试鸡血浆GSH-Px活性无显著影响(P>0.05)。

表 3 饲粮硫胺素水平对21、42和63日龄快速型黄羽肉鸡血浆抗氧化指标的影响 Table 3 Effects of dietary thiamine levels on plasma antioxidant indices of fast-growing yellow-feathered chickens at 21, 42 and 63 days of age

项目 Items	饲粮硫胺素添加水平 Dietary thiamine supplemental levels/(mg/kg)								SEM	P值 P-value
项目 Items	0	0.6	1.2	1.8	2.4	3.0	3.6	4.2	SEM	硫胺素 Thiamine	线性 Linear	二次 Quadratic
21日龄 21 days of age
还原型谷胱甘肽 GSH/(mg/L)	4.26^b	4.50^b	4.91^b	5.78^ab	5.68^ab	5.24^ab	6.67^a	5.78^ab	0.367	< 0.001	< 0.001	0.204
氧化型谷胱甘肽 GSSG/(μmol/L)	19.67^ab	21.87^a	14.20^cd	16.70^bc	13.88^cd	14.08^cd	13.07^cd	11.36^d	1.094	< 0.001	< 0.001	0.179
还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽 GSH/GSSG	0.23^cd	0.21^d	0.31^bcd	0.34^bcd	0.41^abc	0.37^bcd	0.52^ab	0.62^a	0.055	< 0.001	< 0.001	0.274
超氧化物歧化酶 GSH-Px/(U/L)	1 461.4	1 387.5	1 360.7	1 276.9	1 363.1	1 266.5	1 252.1	1 407.2	104.14	0.848	0.427	0.283
总抗氧化能力 T-AOC/(U/mL)	7.42^b	6.57^b	6.68^b	7.86^ab	8.10^ab	8.35^ab	9.21^a	9.31^a	0.502	0.003	< 0.001	0.215
丙二醛 MDA/(μmol/L)	0.86^a	0.89^a	0.86^a	0.81^a	0.82^a	0.54^b	0.49^b	0.47^b	0.035	< 0.001	< 0.001	< 0.001
42日龄 42 days of age
还原型谷胱甘肽 GSH/(mg/L)	5.13^b	6.02^ab	6.87^a	6.91^a	6.32^a	7.00^a	6.70^a	6.83^a	0.401	0.023	0.002	0.112
氧化型谷胱甘肽 GSSG/(μmol/L)	5.17^a	5.05^a	4.31^ab	4.45^ab	3.90^a	3.66^bc	3.89^abc	3.03^c	0.301	< 0.001	< 0.001	0.227
还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽 GSH/GSSG	0.99^d	1.20^cd	1.66^bc	1.64^bc	1.62^bc	1.94^ab	1.79^ab	2.26^a	0.149	< 0.001	< 0.001	0.799
超氧化物歧化酶 GSH-Px/(U/L)	868.3	923.2	922.8	992.1	856.3	904.2	930.2	1 012.9	49.56	0.700	0.298	0.605
总抗氧化能力 T-AOC/(U/mL)	6.42	6.67	7.38	7.45	7.41	8.63	7.88	7.58	0.517	0.062	0.007	0.114
丙二醛 MDA/(μmol/L)	2.56	2.37	2.32	2.55	2.61	2.65	2.72	2.71	0.210	0.810	0.234	0.749
63日龄 63 days of age
还原型谷胱甘肽 GSH/(mg/L)	3.86	3.37	4.03	3.53	3.55	3.83	3.22	3.15	0.389	0.926	0.717	0.961
氧化型谷胱甘肽 GSSG/(μmol/L)	4.78	4.62	4.61	4.45	4.73	4.40	3.79	3.89	3.570	0.862	0.028	0.445
还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽 GSH/GSSG	0.81	0.73	0.87	0.79	0.75	0.87	0.85	0.81	0.106	0.355	0.536	0.488
超氧化物歧化酶 GSH-Px/(U/L)	1 044.2	1 195.4	1 168.8	1 129.1	1 304.4	1 234.3	1 195.1	1 303.5	82.15	0.264	0.039	0.960
总抗氧化能力 T-AOC/(U/mL)	6.71	6.48	5.62	7.26	7.06	5.99	7.34	7.22	0.529	0.071	0.185	0.416
丙二醛 MDA/(μmol/L)	3.88^a	3.97^a	3.90^a	2.69^b	2.97^b	3.17^b	2.52^b	2.51^b	0.350	< 0.001	< 0.001	0.502

42日龄，试鸡血浆GSH含量和GSH/GSSG值随饲粮硫胺素水平的升高呈线性增加(P < 0.05)，且呈显著的剂量效应关系(r=0.418，P < 0.05；r=0.655，P < 0.05)，其中仍以4.2 mg/kg硫胺素添加水平组GSH/GSSG值最高；而血浆GSSG含量随饲粮硫胺素水平的升高呈线性降低(P < 0.05)，且呈显著的剂量效应关系(r=-0.619，P < 0.05)；血浆T-AOC随饲粮硫胺素水平的升高呈线性升高(P < 0.05)，且呈显著的剂量效应关系(r=0.329，P < 0.05)；饲粮硫胺素水平对试鸡血浆GSH-Px活性和MDA含量无显著影响(P>0.05)。

63日龄，饲粮硫胺素水平对试鸡血浆GSH和GSSG含量、GSH/GSSG值、GSH-Px活性和T-AOC均无显著影响(P>0.05)；随着饲粮硫胺素水平的升高，试鸡血浆MDA含量呈线性降低(P < 0.05)。

2.3 饲粮硫胺素水平对21、42和63日龄快速型黄羽肉鸡大脑PDH和KGDH活性的影响

由表 4可知，饲粮硫胺素水平对21、42和63日龄快速型黄羽肉鸡大脑PDH和KGDH活性均无显著影响(P>0.05)。

表 4 饲粮硫胺素水平对21、42和63日龄快速型黄羽肉鸡大脑PDH和KGDH活性的影响 Table 4 Effects of dietary thiamine levels on activities of PDH and KGDH in brain of fast-growing yellow-feathered chickens at 21, 42 and 63 days of age

nmol/(mg prot·min)
项目 Items	饲粮硫胺素添加水平 Dietary thiamine supplemental levels/(mg/kg)								SEM	P值 P-value
项目 Items	0	0.6	1.2	1.8	2.4	3.0	3.6	4.2	SEM	硫胺素 Thiamine	线性 Linear	二次 Quadratic
21日龄 21 days of age
丙酮酸脱氢酶 PDH	5.98	6.03	6.09	5.87	6.14	6.79	6.23	6.80	0.352	0.432	0.058	0.218
α-酮戊二酸脱氢酶 KGDH	12.69	12.51	13.32	12.89	13.90	13.18	13.95	13.87	0.793	0.385	0.459	0.522
42日龄 42 days of age
丙酮酸脱氢酶 PDH	16.93	15.59	14.77	15.78	16.26	16.85	17.06	16.08	0.835	0.355	0.153	0.159
α-酮戊二酸脱氢酶 KGDH	35.43	36.26	34.33	37.89	38.36	36.75	40.15	37.22	1.022	0.399	0.162	0.346
63日龄 63 days of age
丙酮酸脱氢酶 PDH	26.85	27.03	26.50	28.55	27.88	27.21	28.19	28.89	1.047	0.655	0.332	0.304
α-酮戊二酸脱氢酶 KGDH	47.38	48.35	45.78	48.15	49.10	50.25	46.36	48.88	1.335	0.494	0.355	0.246

2.4 饲粮硫胺素水平对63日龄快速型黄羽肉鸡肉品质的影响

由表 5可知，63日龄，试鸡胸肌剪切力随饲粮硫胺素水平的升高呈线性降低(P < 0.05)，且呈显著的剂量效应关系(r=-0.267，P < 0.05)。与对照组相比，4.2 mg/kg硫胺素添加水平组试鸡胸肌剪切力显著降低了25.12%(P < 0.05)。此外，随着饲粮硫胺素水平的升高，试鸡胸肌24 h滴水损失有降低趋势(P=0.052)，而饲粮硫胺素水平对试鸡胸肌45 min pH和肉色均无显著影响(P>0.05)。

表 5 饲粮硫胺素水平对63日龄快速型黄羽肉鸡肉品质的影响 Table 5 Effects of dietary thiamine levels on meat quality of fast-growing yellow-feathered chickens at 63 days of age

项目 Items	饲粮硫胺素添加水平 Dietary thiamine supplemental levels/(mg/kg)								SEM	P值 P-value
项目 Items	0	0.6	1.2	1.8	2.4	3.0	3.6	4.2	SEM	硫胺素 Thiamine	线性 Linear	二次 Quadratic
亮度 L^*	53.27	53.10	53.78	53.86	52.24	53.27	53.48	54.24	0.808	0.139	0.598	0.476
红度 a^*	11.01	11.08	11.25	11.31	10.66	11.41	11.54	11.63	0.356	0.380	0.435	0.688
黄度 b^*	11.70	12.01	11.76	10.51	11.11	11.65	10.86	11.40	0.816	0.981	0.477	0.559
pH_{45 min}	6.17	6.18	6.10	6.18	6.18	6.26	6.13	6.06	0.049	0.107	0.390	0.150
剪切力 Shear force/N	38.65^a	36.70^a	39.92^a	33.42^ab	36.31^ab	30.20^b	33.02^ab	28.94^b	2.517	0.038	< 0.001	0.076
24 h滴水损失 Drip loss at 24 h/%	4.12	4.09	3.83	3.64	3.40	3.27	3.47	3.30	0.191	0.052	< 0.001	0.535

表 5 饲粮硫胺素水平对63日龄快速型黄羽肉鸡肉品质的影响 Table 5 Effects of dietary thiamine levels on meat quality of fast-growing yellow-feathered chickens at 63 days of age

2.5 饲粮硫胺素水平对63日龄快速型黄羽肉鸡胸肌风味品尝评分的影响

由表 6可知，63日龄，试鸡胸肌口感风味评分随饲粮硫胺素水平的升高呈线性升高(P < 0.05)，且呈显著的剂量效应关系(r=0.503，P < 0.05)；随着饲粮硫胺素水平的升高，试鸡胸肌咀嚼嫩度评分有升高趋势(P=0.070)，而饲粮硫胺素水平对胸肌颜色与外形、气味和多汁性均无显著影响(P>0.05)。

表 6 饲粮硫胺素水平对63日龄快速型黄羽肉鸡胸肌风味品尝评分的影响 Table 6 Effects of dietary thiamine levels on breast muscle flavor tasting score of fast-growing yellow-feathered chickens at 63 days of age

2.6 二次曲线回归模型估测1~63日龄黄羽肉鸡硫胺素需要量

由表 7可知，通过二次曲线回归方程方差分析和拟合度相关系数检验，确定平均日增重和料重比的回归方程有较高的统计学意义，二次曲线的拟合度较好，R²值在0.665~0.851。以平均日增重为效应指标，1~21日龄、22~42日龄和43~63日龄快速型黄羽肉鸡饲粮硫胺素适宜水平分别为3.2、2.4和1.8 mg/kg；以料重比为效应指标，1~21日龄、22~42日龄和43~63日龄快速型黄羽肉鸡饲粮硫胺素适宜水平分别为3.0、2.0和1.6 mg/kg。

表 7 二次曲线回归模型估测1~63日龄黄羽肉鸡硫胺素需要量 Table 7 Estimation of thiamine requirement for yellow-feathered chickens from 1 to 63 days of age by quadric regression model

3 讨论 3.1 饲粮硫胺素水平对1~63日龄快速型黄羽肉鸡生长性能的影响

硫胺素是B族维生素成员，主要以辅酶形式参与机体碳水化合物、蛋白质和脂质代谢，对机体正常生理功能的维持具有重要作用^[2]。家禽缺乏硫胺素会导致其采食量下降、心脏功能不足、精神沉郁、神经麻痹、角弓反张和痉挛等症状^[3]。因此，对家禽硫胺素需要量进行科学评价是健康高效饲养的关键。黄苇等^[5]研究发现，饲粮添加1.0~4.0 mg/kg硫胺素可提高15~21日龄和22~49日龄肉仔鸡体增重，但对采食量则无显著影响。Xu等^[19]报道，饲粮添加1.5 mg/kg硫胺素可显著增加武昌鱼生长系数和代谢体重增长率。有研究报道，饲粮含有1.0 mg/kg或更高水平的硫胺素并未使肉鸡生长性能发生明显变化^{[6, 20-21]}。本试验结果显示，饲粮硫胺素水平可显著影响1~21日龄黄羽肉鸡平均日采食量、平均日增重和料重比，呈剂量效应关系，但对22~42日龄和43~63日龄黄羽肉鸡平均日采食量、平均日增重和料重比则无显著影响。相关研究结果不一致可能由于饲粮的组成、肉鸡品种及饲养环境等因素不同引起。

3.2 饲粮硫胺素水平对1~63日龄快速型黄羽肉鸡抗氧化能力的影响

硫胺素在调节能量代谢，特别是在协调线粒体和胞质生化过程中发挥重要作用。线粒体是产生ATP的主要细胞器。线粒体生物合成和功能受损会导致氧化应激。硫胺素作为线粒体营养素，是调节线粒体呼吸链复合酶的重要辅助因子，可保护线粒体免于氧化应激。硫胺素可以清除自由基，并抑制活性氧过度产生，增强线粒体功能，对机体抗氧化功能有提高作用^[22-23]。硫胺素缺乏可引起氧化应激并导致蛋白质糖基化及DNA链断裂升高，诱导内质网应激、自噬及凋亡^[9]。GSH和GSH-Px具有清除活性氧簇和过氧化物以及减少羟基自由基形成的功能^[24-25]。T-AOC是反映机体总抗氧化能力高低的重要指标，MDA是机体脂质过氧化的最终产物，含量升高提示机体脂质过氧化程度增加^[26]。刘秀玲等^[12]在H₂O₂诱导人脐静脉内皮细胞EV304中添加不同水平硫胺素和核黄素预处理后，EV304拖尾细胞率显著降低，DNA氧化损伤相关指标也下降。Chen等^[27]报道，饲粮添加1.0~5.0 mg/kg硫胺素对产蛋期蛋鸭血浆和肝脏总超氧化物歧化酶和GSH-Px活性无显著影响，但血浆MDA含量有降低趋势。在幼年剑鱼中，饲料添加0.25~2.65 mg/kg硫胺素显著提高了血浆过氧化氢酶、谷胱甘肽硫转移酶、GSH-Px活性，增加了血浆GSH含量^[10]。硫胺素缺乏会降低幼年草鱼抗氧化酶以及核因子E2相关因子2的表达水平和活性^[11]。本试验结果显示，饲粮添加硫胺素线性降低了21和42日龄黄羽肉鸡血浆GSSG含量，并升高了GSH/GSSG值，其中以4.2 mg/kg硫胺素添加水平组血浆GSH/GSSG值最高；21日龄，黄羽肉鸡血浆MDA含量随饲粮硫胺素水平的升高而呈先升高后降低的二次曲线变化；但饲粮硫胺素水平对63日龄血浆T-AOC、GSH-Px活性和GSH含量则无显著影响。综上所述，饲粮添加硫胺素可改善黄羽肉鸡机体抗氧化能力，且呈剂量效应关系，并以小鸡阶段较为明显。

3.3 饲粮硫胺素水平对1~63日龄快速型黄羽肉鸡辅酶功能的影响

硫胺素在动物体内以主要以TPP的生物活性形式存在，游离的硫胺素含量很低。转酮醇酶、PDH和KGDH是以TPP为辅酶的酶，是调节机体碳水化合物、蛋白质和脂质代谢的重要物质^[2]。PDH和KGDH是线粒体能量代谢的关键酶，直接参与能量合成、抗氧化应激等过程。硫胺素缺乏会使PDH和KGDH活性下降，导致机体能量代谢和生物合成障碍、产生大量自由基导致机体氧化损伤和胆碱能神经元变性^[28]。由于大脑严重依赖线粒体ATP的产生，因此它极易受到硫胺素缺乏的影响。赵艳玲等^[29]研究了硫胺素缺乏时小鼠韦尼克脑区转酮醇酶及其他硫胺素相关酶活性的影响，结果表明，硫胺素缺乏显著降低小鼠脑转酮醇酶活性，但对PDH和KGDH活性未产生显著影响。Olkowski等^{[6, 16]}研究了母体饲粮硫胺素水平对后代肉仔鸡生长发育的影响，结果表明，母体饲粮中添加2.0~32.0 mg/kg硫胺素可显著增加出生后1~21日龄肉仔鸡心脏硫胺素含量，并且提高心脏中KGDH活性；同时，肉仔鸡在生长过程中心脏组织硫胺素沉积明显高于肝脏和大脑等组织。本试验结果也显示，饲粮添加硫胺素对1~63日龄黄羽肉鸡大脑PDH和KGDH活性也无显著影响，这与前人研究结果基本相符，说明不同酶对硫胺素缺乏敏感性不一致，其中转酮醇酶相对于PDH和KGDH对硫胺素缺乏更敏感。

3.4 饲粮硫胺素水平对63日龄快速型黄羽肉鸡肉品质和风味品尝评分的影响

肉品质是肉鸡十分重要的经济性状，适宜的营养水平能够改善肌肉品质。pH、肉色、剪切力和滴水损失等指标能直接反映肉品质。剪切力越小，肉质越嫩；滴水损失越小，系水力越高；肉色亮度(L^*)值越低，肉色越暗；肉色红度(a^*)值越高，红度越高；肉色黄度(b^*)值越高，黄度越高；而当L^*值超过60说明肉色苍白^[30]。本试验结果显示，与对照组相比，饲粮添加3.0和4.2 mg/kg硫胺素显著降低了肉鸡胸肌剪切力，24 h滴水损失有降低趋势，提示硫胺素可有效改善黄羽肉鸡胸肌肉品质。研究表明，当动物机体处于氧化应激状态时，其产生的活性氧和活性氮等自由基会损伤蛋白质、脂质和DNA结构，导致肌肉品质下降^[31-32]。因此，我们推测这可能与硫胺素缓解肌肉氧化应激状态有关，但相关作用机制仍需进一步研究。

鸡肉风味的感官指标包括颜色、气味、鲜味、咀嚼嫩度和多汁性等。一般根据评分标准及规则，分数越高说明鸡肉风味越好。硫胺素是水溶性风味前体物质，可改善鸡肉风味^[5]。王克华等^[7]、聂晓庆等^[8]、谢恺舟等^[33]发现不同品种黄羽肉鸡(如皋鸡、文昌鸡、泸宁鸡和京海黄鸡等)及组织中硫胺素含量存在差异，均随周龄增加而下降，腿肌硫胺素含量明显高于胸肌。孟春玲^[34]研究报道，胸肌硫胺素含量与肉鸡体重间表现较高的遗传相关性，呈显著负相关。本试验结果显示，饲粮添加硫胺素可改善63日龄快速型黄羽肉鸡胸肌口感风味，且呈剂量效应关系。因此，以上研究说明，黄羽肉鸡的肉质风味与品种、日龄及饲粮硫胺素水平有关。

3.5 黄羽肉鸡饲粮硫胺素需要量

本试验条件下，通过剂量-效应二次曲线回归方程拟合进行估测，以平均日增重为效应指标，1~21日龄、22~42日龄和43~63日龄快速型黄羽肉鸡饲粮硫胺素适宜水平分别为3.2、2.4和1.8 mg/kg；以料重比为效应指标，1~21日龄、22~42日龄和43~63日龄快速型黄羽肉鸡饲粮硫胺素适宜水平分别为3.0、2.0和1.6 mg/kg。而NRC(1994)^[35]中，1~56日龄肉仔鸡硫胺素需要量为1.8 mg/kg。我国《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)^[13]中，1~63日龄黄羽肉鸡硫胺素需要量同样为1.8 mg/kg。本试验结果中，1~21日龄和22~42日龄阶段硫胺素需要量比NRC(1994)和《鸡饲养标准》(2004)要偏高。这可能与黄羽肉鸡营养物质(能量、蛋白质等)摄入量及消化代谢差异有关。有研究发现，饲粮中糖类物质含量的增加会显著提高动物对硫胺素的需要量^[36]。此外，黄羽肉鸡生长性能、抗氧化能力和消化代谢等指标对饲粮硫胺素水平反应较敏感，使其对硫胺素的需要量存在较明显差异，这可能也是本试验所得黄羽肉鸡硫胺素需要量高于NRC(1994)的主要原因。

4 结论

本试验条件下，饲粮添加硫胺素可改善快速型黄羽肉鸡生长性能、抗氧化能力和肉品质。通过二次曲线回归方程估测，以平均日增重为效应指标，1~21日龄、22~42日龄和43~63日龄快速型黄羽肉鸡饲粮硫胺素适宜水平分别为3.2、2.4和1.8 mg/kg；以料重比为效应指标，1~21日龄、22~42日龄和43~63日龄快速型黄羽肉鸡饲粮硫胺素适宜水平分别为3.0、2.0和1.6 mg/kg。

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