2. 湖南家禽安全生产工程技术研究中心, 长沙 410128;
3. 怀化市畜牧水产事务中心, 怀化 418000;
4. 邵阳县畜牧水产事务中心, 邵阳 422000
2. Hunan Engineering Research Center of Poultry Production Safety, Changsha 410128, China;
3. Huaihua Animal Husbandry and Aquatic Transaction Center, Huaihua 418000, China;
4. Shaoyang Animal Husbandry and Aquatic Transaction Center, Shaoyang 422000, China
维生素E(vitamin E)是一种天然强效抗氧化剂,能清除自由基、阻断脂质过氧化反应、消除氧化应激等造成的不良影响[1]。硒(Se)是家禽必需的微量元素,与家禽生长、繁殖、免疫力及种蛋孵化等密切相关[2]。与无机硒相比,有机硒具有毒性低、吸收利用率高、抗氧化能力强等特点[3],因此有机硒(酵母硒、硒代蛋氨酸等)已逐渐成为无机硒(亚硒酸钠)的替代品[4]。研究表明,禽类缺乏硒同时伴随维生素E供给不足,会导致渗出性素质、脑软化症和白肌病等营养代谢性疾病发生[5]。另外有研究认为维生素E和硒之间存在协同增效作用[6],饲粮中添加硒可适当降低维生素E的添加水平,硒和维生素E同时使用可协同维持细胞膜完整性,保护细胞免受活性氧损伤,阻断脂质氧化,提高机体的抗氧化性能[7]。诸多研究表明,饲粮中添加适宜水平维生素E[8]和硒[4]可提高蛋鸡的产蛋率、种蛋孵化率以及蛋中维生素E和硒含量。咸蛋腌制过程中常通过在泥料中添加茶多酚、虾青素和酵母硒等抗氧化剂,从而降低食盐腌渍造成的蛋黄脂质氧化分解,减少硬心和白心等问题[9]。目前关于产蛋高峰期蛋鸭饲粮中维生素E和硒推荐量的研究发现,20~40 IU/kg维生素E和0.20 mg/kg硒可满足其生产需要[10],而对维生素E和硒的协同效应以及高添加水平对蛋鸭抗氧化能力的研究较少,特别是饲粮中高添加水平的维生素E和硒联用对后期咸蛋品质的影响尚未见报道,因此有必要开展深入研究。鉴于此,本试验以产蛋高峰期攸县麻鸭作为试验动物,研究饲粮中添加维生素E、有机硒及二者联用对产蛋高峰期攸县麻鸭产蛋性能、蛋品质、血清抗氧化指标及咸蛋蛋黄品质的影响,为维生素E和硒在蛋鸭饲料生产中科学应用提供理论依据。
1 材料与方法 1.1 试验设计选用200只健康的产蛋高峰期攸县麻鸭,随机分成4个组,每组5个重复,每个重复10只鸭。基础饲粮参照小型蛋鸭营养需要量并结合本研究室已确定的攸县麻鸭营养需要量参数配制。对照组(Ⅰ组)饲喂基础饲粮(含维生素E 4.87 IU/kg,硒0.12 mg/kg),试验组(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组)分别在基础饲粮中添加50 IU/kg维生素E、0.2 mg/kg硒、0.2 mg/kg硒+50 IU/kg维生素E。在保持其他营养水平一致基础上,维生素E和有机硒添加剂量等量替代预混料中的沸石粉。试验期为63 d。试验采用玉米-豆粕型基础饲粮,基础饲粮组成及营养水平见表 1。试验用维生素E为维生素E乙酸酯,有效含量为50%;有机硒为亚硒酸二葡萄糖酯,硒含量为2 000 mg/kg。
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表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) |
试验在湖南省畜牧兽医研究所试验鸭场进行,采用双层笼上饲养。试验全期自由采食和饮水(计量不限量),按常规方法进行饲养管理。
1.3 样品采集及指标测定 1.3.1 产蛋性能试验期间每天按重复记录产蛋总数、总蛋重、采食量,以组为单位统计平均蛋重、日产蛋重、产蛋率和平均日采食量,并计算料蛋比。
料蛋比=平均日采食量/日产蛋重。
1.3.2 蛋品质每组抽取接近平均蛋重的鸭蛋15枚(每个重复3枚),4 ℃保存,在24 h之内测定蛋黄比率(蛋黄重/蛋重)、蛋白比率、蛋壳厚度(蛋壳厚度测定仪)、蛋壳强度(蛋壳强度测定仪)、蛋形指数(游标卡尺测量,蛋纵径/蛋横径)、蛋黄颜色(蛋黄比色卡)及蛋白高度(蛋白高度测定仪),并计算哈氏单位,计算公式为:
哈氏单位=100×log(H-1.7W0.37+7.57)。
式中:H为蛋白高度(mm);W为蛋重(g)。
试验结束时,每个重复收集2枚鸭蛋,利用氢化物-原子荧光光谱法(GB 5009.93—2017)测定饲粮和蛋黄中硒含量,利用高效液相色谱法(NY/T 1598—2008)测定饲粮和蛋黄中维生素E含量。
1.3.3 咸蛋蛋黄品质试验结束时,每个重复选100枚新鲜鸭蛋,先将其放入黄泥浆中(含盐率20.00%)浸泡,使蛋壳粘满盐泥,取出后滚上草木灰套上塑料袋置于竹篓码放,腌制温度控制在(20±5) ℃。腌制35 d后,每个重复随机选取4枚咸蛋,参照GB/T 12457—2008测定蛋黄含盐率,参照何美[11]的方法测定蛋黄出油率,参照GB 5009.3—2010测定蛋黄含水量。每个重复随机取30枚咸蛋,煮熟后对半切开,统计硬心和白心的数量,硬心率和白心率分别为硬心和白心咸蛋个数与咸蛋总数(30枚)的比值。采用质构分析仪(CTX,博勒飞,美国)测定煮熟后的蛋黄质构性质(硬度和咀嚼性)。
1.3.4 血清生化指标在试验结束时,每个重复随机选取体重相近的试验鸭2只,空腹12 h后,翅下静脉采血5 mL,静置30 min后,3 000 r/min离心15 min,分离血清,-20 ℃保存。用全自动生化分析仪(URIT-8000,优利特,美国)检测血清中总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿酸(UA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)含量以及碱性磷酸酶(ALP)活性。采用比色法检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量以及总抗氧化能力(T-AOC)。试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
1.4 数据处理试验数据利用Excel 2019初步处理,并用SPSS 19.0软件进行单因素方差分析,然后通过Duncan氏法进行多重比较。试验结果用平均值和均值标准误(SEM)表示,P < 0.05为差异显著,P < 0.01为差异极显著。
2 结果 2.1 饲粮中添加维生素E和有机硒对攸县麻鸭产蛋性能的影响由表 2可知,饲粮中添加维生素E和有机硒对试验鸭的平均日采食量和平均蛋重均无显著影响(P>0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组的产蛋率和日产蛋重均显著高于对照组(P < 0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组的料蛋比均显著低于对照组(P < 0.05),其中Ⅳ组料蛋比最低。
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表 2 饲粮中添加维生素E和有机硒对攸县麻鸭产蛋性能的影响 Table 2 Effects of dietary vitamin E and organic selenium on laying performance of Youxian partridge ducks |
由表 3可知,饲粮中添加维生素E和有机硒对试验鸭蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋黄比例、蛋形指数、蛋黄颜色、哈夫单位和蛋白高度均无显著影响(P>0.05)。Ⅲ和Ⅳ组的蛋黄硒含量显著高于对照组(P < 0.05)。Ⅱ和Ⅳ组的蛋黄维生素E含量显著高于对照组(P < 0.05)。
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表 3 饲粮中添加维生素E和有机硒对攸县麻鸭蛋品质及蛋黄中维生素E和硒含量的影响 Table 3 Effects of dietary vitamin E and organic selenium on egg quality and contents of vitamin E and selenium in yolk of Youxian partridge ducks |
由表 4可知,饲粮中添加维生素E和有机硒对试验鸭血清中GLU、TG、TC、HDL、LDL、TP、ALB、UA含量和ALP、CAT、SOD活性以及T-AOC均无显著影响(P>0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组的血清中MDA含量显著低于对照组(P < 0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组的血清中GSH含量和GSH-Px活性均显著高于对照组(P < 0.05)。
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表 4 饲粮中添加维生素E和有机硒对攸县麻鸭血清生化指标的影响 Table 4 Effects of dietary vitamin E and organic selenium on serum biochemical parameters of Youxian partridge ducks |
由表 5可见,饲粮中添加维生素E和有机硒对试验鸭咸蛋蛋黄含盐率、出油率、水分含量、硬度、咀嚼性、白心率均无显著影响(P>0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组的咸蛋蛋黄硬心率显著低于对照组(P < 0.05),Ⅳ组硬心率显著低于Ⅱ和Ⅲ组(P < 0.05)。
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表 5 饲粮中添加维生素E和有机硒对咸蛋蛋黄品质的影响 Table 5 Effects of dietary vitamin E and organic selenium on yolk quality of salted eggs |
诸多研究表明,饲粮中添加硒对蛋禽平均日采食量、日产蛋量和平均蛋重均无显著影响[12-15]。然而也有报道指出,当饲粮硒含量低于蛋禽最低需要量时,其对产蛋性能才有显著影响[2]。张宏馨[16]研究发现,0~80 IU/kg维生素E对海兰褐种母鸡产蛋性能无显著影响,但饲粮中添加160和320 IU/kg维生素E可显著提高产蛋率。另外关于饲粮中同时添加维生素E和硒的饲用效果,石慧芹等[17]报道饲粮中添加50 IU/kg维生素E、0.5 mg/kg酵母硒及二者联用可显著提高海兰灰蛋鸡的平均蛋重。本试验结果显示,饲粮中添加50 IU/kg维生素E、0.2 mg/kg有机硒和二者联用可显著提高产蛋率和日产蛋重,且显著降低料蛋比,但对平均日采食量和平均蛋重无显著影响。本试验结果与上述的结果存在一定差异,分析其原因可能是本试验饲粮中维生素E和有机硒均为高添加水平,均高于我国《肉鸭饲养标准》(NY/T 2122—2012)中肉蛋兼用型鸭维生素E(20 IU/kg)和硒(0.2 mg/kg)的推荐水平,且有机硒利用效率高于亚硒酸钠,所以试验鸭表现出产蛋率显著提高和料蛋比显著降低。
石慧芹等[17]研究表明,饲粮中添加50 IU/kg维生素E可提高蛋黄颜色,但饲粮中添加0.50 mg/kg酵母硒对蛋鸡的蛋黄颜色、哈氏单位和蛋壳厚度等蛋品质指标均无显著影响。另外有研究发现,蛋鸡饲粮中添加不同水平的酵母硒[18](0.20~1.00 mg/kg)或维生素E[12](0~400 IU/kg)对蛋品质无显著影响。本试验显示,饲粮中添加维生素E和有机硒对攸县麻鸭的蛋壳强度、蛋壳厚度、哈夫单位、蛋黄颜色、蛋白高度等均无显著影响。本试验结果与Mohiti-Asli等[13]和Pan等[18]的报道基本一致,提示高添加水平维生素E、有机硒以及二者联用对蛋品质无显著影响。
3.2 饲粮中添加维生素E和有机硒对攸县麻鸭咸蛋蛋黄品质的影响为解决咸蛋蛋黄硬心、白心和出油出沙的比例不高等问题,常在泥料中添加茶多酚、维生素C和酵母硒等抗氧化剂来改善[9]。维生素E和有机硒均具有良好抗氧化作用,可应用于食品保鲜。诸多研究认为饲粮中添加维生素E和硒可提高蛋中维生素E和硒的含量,延长其货架期[13-15, 17]。本试验研究发现,在相同腌制条件下,饲粮中添加维生素E和有机硒可显著降低咸蛋蛋黄硬心率,且二者联用组硬心率最低,显著低于其他3组。这可能与饲粮中高添加水平的维生素E和有机硒提高了其在蛋中沉积量,从而降低蛋黄在腌制过程中脂质过氧化物的形成,增加蛋黄脂质的稳定性,促使蛋黄在腌制过程中出油均匀,从而降低蛋黄的硬心和白心的发生,而二者联用对蛋黄脂肪酸氧化的抑制可起到协同增效作用。另外,从血清中MDA含量来看,维生素E、有机硒以及二者联用时试验鸭血清中MAD含量显著降低,说明维生素E和有机硒可减少机体自由基作用于脂质发生过氧化反应。
3.3 饲粮中添加维生素E和有机硒对攸县麻鸭血清生化指标的影响硒具有脂蛋白调节功能,机体缺硒血清中TC和TG含量会升高[19]。Dou等[20]研究表明,在糖尿病模型大鼠高能饲粮中添加750 IU/kg维生素E可显著降低血清中TC和LDL含量。在本试验条件下,饲粮中添加维生素E、有机硒以及二者联用对攸县麻鸭血清中TP、GLU、UA、TC、TG、HDL和LDL等含量均无显著影响。因此,我们认为基础饲粮(含维生素E 4.87 IU/kg,硒0.12 mg/kg)即可平衡机体氮和脂质代谢,可满足攸县麻鸭生产需要。
维生素E广泛分布于机体组织中,其抗氧化功能主要作用在生物膜上[1];硒参与GSH-Px的合成,GSH-Px催化GSH清除自由基保护细胞膜[3]。有研究认为,在抗氧化功能方面,维生素E和微量元素硒具有协同增效作用[6, 21]。本研究中,饲粮中添加维生素E和有机硒可显著提高血清中GSH含量和GSH-Px活性,降低血清中MDA含量。虽二者联用时血清中GSH含量以及GSH-Px活性最高,血清中MDA含量最低,但与单独添加维生素E和有机硒组相比,二者联用未见显著协同作用。因此从本试验结果来看,维生素E和有机硒可能通过提高血清中GSH-Px活性,保护细胞膜免受氧化损伤,防止机体细胞膜脂质结构遭到破坏。这一结果与Sun等[22]和Ghanaatparast-Rashti等[23]的研究结果基本一致,然而维生素E和有机硒互作关系和作用机理还有待进一步研究。
4 结论① 饲粮中添加维生素E、有机硒以及二者联用可提高产蛋高峰期攸县麻鸭的产蛋性能和抗氧化能力。
② 饲粮中添加维生素E、有机硒可显著降低咸蛋蛋黄硬心率,且二者联用存在协同增效作用。
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