饲粮中蛋氨酸是一种重要的限制性氨基酸^[1]，也是家禽生长发育的必需氨基酸之一。机体内摄入的蛋氨酸可通过促进肝细胞膜磷脂甲基化，从而减少肝脏内胆汁酸聚积，缓解肝损伤，提高动物吸收代谢率^[2-3]。张健^[4]提出以玉米-豆粕为基础饲粮的蛋氨酸水平相对不足，蛋氨酸缺乏会引起肝细胞的炎症和凋亡反应，这会导致脂肪肝、肝癌等疾病。段晓翔^[5]在研究低蛋白质饲粮中蛋氨酸水平对初生肉雏鸡氮代谢影响时表明，肉鸡低蛋白质饲粮中蛋氨酸、总含硫氨基酸及赖氨酸水平与正常蛋白质饲粮保持一致时，可获得相同体重，但蛋氨酸缺乏或过量均影响生长。

北京油鸡(简称油鸡)作为北京地区的一种优良地方鸡种，于2005年被北京市政府认定为首批9个“北京市优质特色农产品”之一，并大力开发^[6]。2020年7月底“北京油鸡”品种正式获得国家农产品地理标志登记证书^[7]，充分表明了国家和北京市对油鸡的认可和重视。本课题组制定的《北京油鸡饲养技术规程》中提出产蛋期油鸡蛋氨酸需要量为0.34%^[8]，本研究目的是在此基础上，探讨不同蛋氨酸水平对油鸡产蛋高峰期生产性能、蛋品质和血清生化指标的影响，以期为油鸡产蛋高峰期饲粮蛋氨酸的添加水平提供参考依据。

1 材料与方法 1.1 试验设计与动物

试验在北京顺义区张镇的北京油鸡饲养基地的笼养舍内进行。采用单因子设计，选择体重无显著差异(P>0.05)的26周龄油鸡母鸡324只，随机分为3组，每组6个重复，每个重复6笼，每笼3只鸡。各组随机饲喂3种粉状试验饲粮，饲粮代谢能(11.31 MJ/kg)和粗蛋白质水平(15%)相同，蛋氨酸水平分别为0.34%、0.42%、0.48%。最低蛋氨酸水平的设置根据《北京油鸡饲养管理技术规程》(DB11/T 1378—2016)^[8]推荐值；另外，郭丹等^[9]研究表明，产蛋鸡对蛋氨酸水平反应极为强烈，蛋氨酸的添加水平在0.094%的较小空间变动时，其产蛋性能即可发生较大的变化。试验饲粮组成及营养水平见表 1。

1.2 饲养管理

试验鸡采用3层全阶梯式笼养，各组均匀分布在各层。试验鸡自由采食、充足饮水，按正常免疫程序进行免疫接种。饲养管理按照《北京油鸡饲养管理技术规程》(DB11/T 1378—2016)^[8]中有关产蛋鸡饲养管理规定进行。预试期1周，正试期为27~34周龄。

1.3 测定指标与方法

试验期间以笼为单位，每天记录鸡数、产蛋数、蛋重，每周记录采食量，计算27~30周龄、31~34周龄和27~34周龄的周平均采食量(WFI)、周平均蛋重(WEM)、产蛋率、料蛋比(FER)和死淘率。

30、34周龄随机从各重复中取鸡蛋5枚，每组30枚，待分析及测定蛋品质。蛋品质测定方法见本课题组前期文献[10]报道。蛋品质指标计算公式如下：

式中：蛋重为30枚鸡蛋重量的平均值。

34周末每个重复笼中取2只鸡翼静脉采促凝血3~5 mL，在4 ℃、3 000 r/min离心10 min，取血清-20 ℃保存，待测血清免疫、抗氧化指标等。血清免疫指标包括血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮、溶菌酶含量；血清抗氧化指标包括总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性及丙二醛(MDA)含量。采用分光光度计[Evolution 60，赛默飞世尔(上海)仪器有限公司]和酶标仪[Multiskan FC，赛默飞世尔(上海)仪器有限公司]进行测定。试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.4 数据统计分析

试验数据采用SPSS 25.0软件中的one-way ANOVA程序进行单因素方差分析，以Duncan氏法进行多重比较，以P < 0.05为差异显著性标准，0.05＜P＜0.10时认为有影响的趋势。生产性能、蛋品质、血清生化和抗氧化指标结果均采用平均值±标准差表示。

2 结果与分析 2.1 饲粮蛋氨酸水平对27~30周龄油鸡生产性能的影响

由表 2可知，27~30周龄油鸡周平均采食量、周平均蛋重、料蛋比、产蛋率、死淘率均不受饲粮蛋氨酸水平的显著影响(P>0.05)。不过蛋氨酸水平为0.34%组的周平均蛋重最高, 为(762.44±128.05) g，料蛋比最低，为3.94±0.57。

2.2 饲粮蛋氨酸水平对31~34周龄油鸡生产性能的影响

由表 3可知，31~34周龄油鸡产蛋鸡的周平均采食量、周平均蛋重、料蛋比、死淘率均不受饲粮蛋氨酸水平的显著影响(P>0.05)。不过蛋氨酸水平为0.48%组的周平均蛋重最高，料蛋比最低，死淘率最低。产蛋率受饲粮蛋氨酸水平影响显著(P < 0.05)，其中0.48%组显著高于0.42%组(P < 0.05)，与0.34%组差异不显著(P>0.05)。

2.3 饲粮蛋氨酸水平对27~34周龄油鸡生产性能的影响

由表 4可知，27~34周龄油鸡产蛋鸡的周平均采食量、周平均蛋重、料蛋比、死淘率均不受饲粮蛋氨酸水平的显著影响(P>0.05)。0.34%组的周平均蛋重最高，产蛋率较高，料蛋比较低。饲粮蛋氨酸水平有影响27~34周龄产蛋率的趋势(P=0.056)，其中0.34%组和0.48%组高于0.42%组。

2.4 饲粮蛋氨酸水平对30周龄油鸡蛋品质的影响

由表 5可知，饲粮蛋氨酸水平显著影响鸡蛋蛋白高度和哈氏单位(P < 0.05)，其中0.34%组的蛋白高度、哈氏单位均显著高于0.42%组(P < 0.05)，但与0.48%组差异不显著(P>0.05)。从数值来看，0.34%组蛋白高度和哈氏单位最高，鸡蛋等级最好，蛋黄色泽较高。

2.5 饲粮蛋氨酸水平对34周龄油鸡蛋品质的影响

由表 6可知，饲粮蛋氨酸水平对34周龄油鸡的其他蛋品质指标影响均不显著(P>0.05)，但对平均蛋重有影响趋势(P=0.054)，0.42%组的平均蛋重高于0.34%组和0.48%组。从数值来看，饲粮蛋氨酸水平为0.34%组的蛋壳强度、蛋白高度、哈氏单位、蛋黄色泽、鸡蛋等级均最高。

2.6 饲粮蛋氨酸水平对34周龄油鸡血清生化指标的影响

由表 7可知，饲粮蛋氨酸水平对34周龄油鸡血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、溶菌酶、甘油三酯、总胆固醇含量的影响均不显著(P>0.05)。血清尿素氮、甘油三酯、总胆固醇含量随饲粮蛋氨酸水平的升高有升高趋势。其中蛋氨酸水平为0.34%时，血清总蛋白、白蛋白和溶菌酶含量最高，尿素氮含量最低。

2.7 饲粮蛋氨酸水平对34周龄油鸡血清抗氧化指标的影响

由表 8可知，不同饲粮蛋氨酸水平对34周龄油鸡血清谷胱甘肽过氧化物酶活性有影响趋势(P=0.052)。其中蛋氨酸水平为0.42%时，血清谷胱甘肽过氧化物酶活性最高。但对血清总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、过氧化物酶活性及丙二醛含量影响均不显著(P>0.05)。从数值上来看，蛋氨酸水平为0.34%时，血清丙二醛含量最低，总抗氧化能力较高。

3 讨论 3.1 饲粮蛋氨酸水平对油鸡生产性能的影响

李亮^[11]在研究蛋氨酸对29日龄雉鸡的影响中表明，在低蛋白质饲粮中添加0.768% DL-蛋氨酸可显著提高42~49日龄雉鸡的平均日采食量。盛微等^[12]研究表明，饲粮蛋氨酸水平显著影响29~91日龄杂交鸡(隐形白羽肉鸡和大骨鸡)的采食量，其中低水平蛋氨酸组(29~49日龄0.31%、50~91日龄0.28%)采食量最高，高水平蛋氨酸组(29~49日龄0.47%、50~91日龄0.42%)采食量最低。段晓翔^[5]在研究低蛋白质饲粮中缺乏蛋氨酸(生长期0.505%，育肥期0.439%)时发现肉鸡生长明显被抑制。吴邦元^[13]的研究同样表明，蛋氨酸缺乏会导致0~6周龄艾维茵肉鸡生长受到抑制，食欲减少。本试验结果表明，27~30周龄油鸡在饲粮蛋氨酸水平为0.34%时周平均蛋重最高，料蛋比最低。31~34周龄油鸡在饲粮蛋氨酸水平为0.48%时，周平均蛋重和产蛋率最高，料蛋比和死淘率最低，但这些指标与0.34%组没有显著差异。因此综合来看，饲粮蛋氨酸水平0.34%即可满足27~34周龄油鸡生产性能的需求。洪平等^[14]研究46~53周龄黄羽肉种鸡时发现，饲粮蛋氨酸水平对黄羽肉种鸡的末重、平均日增重和料蛋比均无显著影响。这与本试验产蛋高峰期油鸡结果较为一致。这可能因为油鸡产蛋高峰期间产蛋率比前期升高许多，进入体内的营养物质主要用于产蛋，而对机体生长无显著影响。

3.2 饲粮蛋氨酸水平对油鸡蛋品质的影响

蛋氨酸是合成动物体蛋白质和向动物体提供有效甲基的物质，添加适量蛋氨酸可以有效改善饲粮蛋白质平衡，提高养分利用率^[15]。蛋品质是通过鸡蛋的蛋壳、营养价值、新鲜程度等来进行评定的。一般蛋壳强度、厚度和颜色是评价蛋壳的指标，蛋白高度、哈氏单位用来评价鸡蛋的新鲜程度。蛋形指数可以判断输卵管壁的生理状态和输卵管峡部的构造，且会随周龄逐渐减小。李灵平等^[15]研究发现，添加0.45%蛋氨酸在一定程度上提高了产蛋期白罗曼种鹅产蛋量、总蛋重、平均蛋重。黄璇等^[16]研究发现，饲粮中添加0.39%蛋氨酸可提高攸县麻鸭产蛋后期性能和蛋品质。当饲粮蛋氨酸水平为0.451%时哈氏单位可达最高，并可促进蛋白质沉积。Ruan等^[17]在研究饲粮蛋氨酸水平对19周龄龙岩鸭蛋重和抗氧化性能的影响时表明，饲粮蛋氨酸水平显著影响蛋重和蛋白重，且随饲粮蛋氨酸水平的升高呈先升高后降低的二次曲线变化趋势。本试验结果显示，饲粮中添加0.34%的蛋氨酸时，30周龄油鸡鸡蛋的蛋白高度和哈氏单位最高，蛋壳强度、蛋白高度、哈氏单位、蛋黄色泽、鸡蛋等级均为最高，饲粮中添加0.42%蛋氨酸时，平均蛋重较高，但与0.34%组差异不显著。此外饲料成本在养殖成本中约占70%^[15]，考虑经济性，饲粮蛋氨酸水平为0.34%时成本较低。

3.3 饲粮蛋氨酸对油鸡血清生化指标和抗氧化指标的影响

血清总蛋白、球蛋白、白蛋白是衡量家禽健康程度的重要指标。蛋氨酸水平可通过改变氨基酸平衡从而改变脂肪生成和脂肪分解的比例^[18]。总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶是一类可在体内清除多余氧负离子的生物抗氧化剂，具有重要的抗氧化作用，谷胱甘肽过氧化物酶在清除细胞内的过氧化氢及脂类过氧化物上发挥作用。丙二醛是脂质过氧化产物，其含量越低则过氧化程度越低^[13]。马景林等^[19]在研究饲粮蛋氨酸水平对17~20周龄京红商品代蛋鸡影响时表明，饲粮蛋氨酸水平对血清总蛋白、白蛋白含量及白球比均无显著影响，这与本试验结果较为相似。可能是产蛋高峰期产蛋数量迅速增加使油鸡的生理代谢加大，蛋氨酸水平对产蛋高峰期油鸡血清生化指标影响不显著。李亮^[11]提出添加0.768% DL-蛋氨酸可以极显著提高29日龄雉鸡血清和肝脏的总抗氧化能力。Fouad等^[20]研究表明，饲粮蛋氨酸水平在0.25%~0.50%时对产蛋鸭血清谷胱甘肽、丙二醛含量及谷胱甘肽过氧化物酶活性均无显著影响。Ruan等^[17]在研究不同饲粮蛋氨酸水平对19周龄龙岩鸭蛋重和抗氧化性能的影响时，发现饲粮蛋氨酸水平为0.40%时，肝脏谷胱甘肽过氧化物酶和核因子相关因子2表达量最佳，谷胱甘肽含量最高，脂质过氧化程度最低。本试验研究显示，饲粮蛋氨酸水平为0.48%时，血清谷胱甘肽过氧化物酶活性最高。由于蛋氨酸是谷胱甘肽合成前体物质，谷胱甘肽又作为谷胱甘肽过氧化物酶合成底物，因此饲粮蛋氨酸水平越高时谷胱甘肽过氧化物酶活性越高^[20]。饲粮蛋氨酸水平为0.34%时，血清总抗氧化能力最高，丙二醛含量最低。

4 结论

① 本试验条件下，27~34周龄油鸡的周平均采食量、周平均蛋重、料蛋比、死淘率均不受饲粮蛋氨酸水平的影响。但饲粮蛋氨酸水平有影响27~34周龄油鸡产蛋率的趋势，其中0.34%组和0.48%组高于0.42%组。

② 饲粮蛋氨酸水平显著影响30周龄油鸡鸡蛋的蛋白高度和哈氏单位，其中0.34%组的蛋白高度、哈氏单位均显著高于0.42%组；饲粮蛋氨酸水平有影响34周龄油鸡平均蛋重的趋势，0.42%组的平均蛋重高于0.48%组，但0.34%组与其他2组平均蛋重差异均不大。

③ 综合考虑生产性能、蛋品质和血清生化指标，提出油鸡产蛋高峰期(27~34周龄)饲粮蛋氨酸水平为0.34%即可满足其生产需要。