2. 潍坊新希望六和饲料科技有限公司, 潍坊 261100
2. Weifang New Hope Liuhe Feed Technology Co., Ltd., Weifang 261100, China
碘(iodine，I)是动物体内的必需微量元素，在动物的许多代谢途径和生长发育中具有重要作用。正常饲养条件下，动物体内碘含量的70%~80%在甲状腺中，肌肉和骨骼大约各含3%，其他组织和器官含5%~10%[1]。碘在调节动物机体代谢、生长发育、繁殖性能和促进家禽免疫器官和免疫细胞成熟等多个方面发挥重要的作用[2]。饲粮中添加适宜水平碘可提高蛋鸡血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和四碘甲腺原氨酸(T4)含量[3-4]。低碘饲粮条件下，大鼠血清抗氧化酶活性降低，血清丙二醛(MDA)含量升高，进而导致氧化损伤；高碘饲粮条件下，大鼠血清T4含量升高，血清三碘甲腺原氨酸(T3)含量降低，免疫功能亢进，同时短期饲喂高碘饲粮引发T4的释放减少，促甲状腺激素(TSH)含量增加[5-8]。鉴于以上情况，科学适量的碘摄入成为保持机体健康要解决的重要问题。
NRC(1994)家禽营养标准中碘的营养需要量为：种鹅0.42 mg/kg，肉鸡0.35 mg/kg，火鸡0.40 mg/kg；日本家禽饲养标准(2003)中碘的营养需要量为：蛋鸡0.2 mg/kg，鹌鹑0.3 mg/kg，可见推荐的碘的营养需要量有一定差异。本实验室前期研究表明，饲粮中添加0.3 mg/kg碘可提高5~16周龄五龙鹅平均末重(AFW)、平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)，降低料重比(F/G)[9]。本试验进一步研究饲粮中添加不同水平碘的对5~16周龄五龙鹅免疫性能、抗氧化性能及血清激素指标的影响，确定饲粮中碘的适宜添加水平，为碘在五龙鹅生产中的合理应用提供理论基础。
1 材料与方法 1.1 试验材料和基础饲粮试验碘源选用碘化钾(KI)，其中碘的有效含量为99%，购自山东某生物科技有限公司。
基础饲粮原料以玉米和豆粕为主，纤维源采用玉米秸秆。参照NRC(1994)家禽营养需要、中国鹅生产实际设计饲粮配方，基础饲粮组成及营养水平见表 1。
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表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) |
选用28日龄体重相近的五龙鹅360只，随机分为6个组(Ⅰ~Ⅵ组)，每组6个重复，每个重复10只，公母各占1/2。Ⅰ组(对照组)饲喂基础饲粮，Ⅱ~Ⅵ组在基础饲粮中分别添加0.15、0.30、0.60、1.20、2.40 mg/kg的碘(碘化钾形式)。试验期12周。
1.3 测定指标 1.3.1 免疫器官指数试验期结束后，每个重复随机选取2只鹅，公母各1只，共72只，摘取胸腺、脾脏和法氏囊，称重后计算免疫器官指数，公式如下：
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36日龄，每只鹅注射禽流感疫苗，分别于注射后第7、14、21和28天，每组随机选取6只母鹅，每个重复1只，左翅下静脉采血10 mL，3 000 r/min离心10 min吸取上清液，于-70 ℃冰箱保存。鹅禽流感抗体效价以血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)方法测定。
1.3.3 血清抗氧化指标及血液激素含量试验期结束后，每个重复随机选取2只鹅，公母各1只，共72只，左翅下静脉采血10 mL，3 000 r/min离心10 min吸取上清液，于-70 ℃冰箱保存。严格以试剂盒操作流程测定血清MDA含量、总抗氧化能力(T-AOC)及T-SOD、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性等抗氧化指标，以及血清T3、T4和TSH含量。MDA、T-AOC、CAT、GSH-Px和T-SOD检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所，T3、T4和TSH检测试剂盒购自北京冬歌博业生物科技有限公司。
1.4 统计分析试验数据采用SPSS 25.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，并使用Duncan氏法进行多重比较。试验数据采用“平均值±标准差”表示，P < 0.05为差异显著。
2 结果 2.1 碘对鹅免疫性能的影响 2.1.1 碘对鹅免疫器官指数的影响由表 2可知，Ⅲ组的胸腺指数显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组(P < 0.05)；Ⅲ组的脾脏指数显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ和Ⅵ组(P < 0.05)，与Ⅳ组差异不显著(P>0.05)；Ⅲ组的法氏囊指数显著高于Ⅰ和Ⅵ组(P < 0.05)，与Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ组差异不显著(P>0.05)。
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表 2 碘对鹅免疫器官指数的影响 Table 2 Effects of iodine on immune organ indexes of geese |
由表 3可知，免疫前和免疫后第7、14、21、28天，禽流感抗体效价随饲粮碘添加水平的升高大体上呈先上升后降低的趋势，但各组之间差异不显著(P>0.05)。
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表 3 碘对鹅禽流感抗体效价的影响 Table 3 Effects of iodine on avian influenza antibody titer of geese |
由表 4可知，Ⅲ组的血清MDA含量显著低于Ⅰ和Ⅱ组(P < 0.05)，与Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组差异不显著(P>0.05)；Ⅲ组的血清CAT活性显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ和Ⅵ组(P < 0.05)，与Ⅳ组差异不显著(P>0.05)；Ⅲ组的血清T-AOC显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ和Ⅵ组(P < 0.05)，与Ⅳ组差异不显著(P>0.05)；Ⅲ组的血清T-SOD活性显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组(P < 0.05)；Ⅲ组的血清GSH-Px活性显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ和Ⅵ组(P < 0.05)，与Ⅳ组差异不显著(P>0.05)。
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表 4 碘对鹅血清抗氧化指标的影响 Table 4 Effects of iodine on serum antioxidant indexes of geese |
由表 5可知，各组之间血清T3、T4和TSH含量差异不显著(P>0.05)，但Ⅲ组的血清T3和T4含量最高，血清TSH含量最低。
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表 5 碘对鹅血清激素指标的影响 Table 5 Effects of iodine on serum hormone indexes of geese |
合成甲状腺激素(TH)是碘在机体内最重要的生理功能，对代谢途径和生长发育产生影响。本课题前期已发表文献中已经对鹅生长性能做出相关研究[9]，试验表明，饲粮碘添加水平为0.30 mg/kg时，显著提高了5~16周龄五龙鹅的AFW、ADG和ADFI，并显著降低了F/G。这说明饲粮中适宜碘水平可以在合成TH的基础上，提高体内代谢水平，促进生长发育，为后续试验提供合理的理论基础，证明其来自正常的可比较的群体。
3.2 碘对鹅免疫性能的影响胸腺、脾脏和法氏囊是五龙鹅重要的免疫器官，免疫器官指数和自身免疫性能呈正相关。研究发现，TH对胸腺免疫功能有促进作用，低碘和高碘都能导致怀孕大鼠胸腺指数呈下降趋势[10]。饲粮中适宜碘水平可明显增强雏鸡细胞免疫，但是摄入过量碘会导致小鼠脾脏指数下降，这可能是过量碘导致脾脏出现了免疫功能紊乱[11-12]。本试验结果表明，胸腺指数、脾脏指数呈先升高后降低的趋势，在饲粮碘添加水平为0.3 mg/kg时，胸腺指数、脾脏指数达到最高，显著高于对照组，说明饲粮中添加适宜水平碘能促进五龙鹅的免疫器官发育。张伟等[13]对獭兔的试验研究表明，饲粮中添加不同水平碘对獭兔的胸腺指数和脾脏指数均无显著影响，可能是一定时间范围内獭兔对不同水平碘的耐受力比较强，但继续增加饲喂时间研究还需要进一步开展。这说明碘合成TH，在低碘或者高碘饲喂情况下，甲状腺功能出现降低，免疫亢进，影响免疫器官发育，进而对免疫功能产生影响。
禽流感抗体效价可反映机体抵御疾病能力的强弱，体现试验鹅体液免疫水平[14-15]。血清免疫球蛋白(IgG)含量和甲状腺萎缩程度呈正相关，免疫器官的异常易诱发自身免疫反应[10]。试验鹅接种禽流感疫苗后，第7、14、21和28天各组鹅体内均产生了的特异性禽流感抗体，但各组之间禽流感抗体效价差异均不显著，说明碘对禽流感抗体效价无显著影响。鉴于国内外关于饲粮碘添加水平对家禽禽流感抗体效价影响方面的研究较少，无显著影响的原因有待进一步探究。
3.3 碘对鹅血清抗氧化指标的影响碘在改善动物抗氧化性能方面发挥重要作用[16]。MDA破坏生物膜的完整性，影响生物膜的流动性和通透性，导致机体疾病，也是反映机体和组织器官过氧化作用强弱的指标[17-19]。本试验中，血清MDA含量随饲粮碘添加水平的增加先降低后升高。王杰等[20]和谢文琴等[21]研究表明，随饲粮碘添加水平增加，9月龄大鼠血清MDA含量先降低后升高，并对血清抗氧化酶活性产生影响。碘能被机体利用合成TH，经体内血液循环到达组织器官进而对其抗氧化自由基的功能产生影响，起到清除自由基保护机体的作用。本试验中，血清CAT、GSH-Px、T-SOD活性和T-AOC均先升高后降低，饲粮碘添加水平为0.3 mg/kg时达到最高，说明饲粮中添加适宜水平的碘可以促进TH的分泌，进而提高血清抗氧化酶活性，增强对自由基的清除能力，降低过氧损伤。研究发现，随饲粮碘添加水平的增加，大鼠血清SOD和GSH-Px活性呈先升高后降低的趋势，小鼠30周龄时血清MDA含量极显著高于对照组，但是饲喂0.6 mg/kg碘的卡苍山羊没有引起血清GSH-Px活性显著变化[16, 22-23]。可见过量添加碘能使机体合成TH并参与机体代谢途径中生成自由基，导致对甲状腺抗氧化功能的损伤，进一步降低机体抗氧化性能。
3.4 碘对鹅血清激素指标的影响TSH主要是T4和T3，而碘的生物学必要性主要与甲状腺功能有关，也是T4和T3的组成部分[24]。研究表明，随饲粮碘添加水平的提高，血清T3含量无明显变化[3, 25]。本试验中，血清T3和T4含量随饲粮碘添加水平的增加呈先升高后降低的趋势，当饲粮碘添加水平为0.3 mg/kg达到最高，此时血清TSH含量最低，但各组之间血清T3、T4和TSH含量差异不显著。房辉等[26]研究发现，高碘组大鼠血清T3、T4含量相比对照组差异不显著，与本试验一致。但也有研究表明，獭兔血清T3、T4含量随饲粮碘添加水平增加呈先升高后降低的趋势，血清TSH含量先降低后升高[27]。饲喂大鼠碘剂后导致血清T4含量增高，血清TSH含量未出现明显变化，但血清T4含量升高会反馈性抑制垂体分泌TSH并降低其含量，进而甲状腺上皮细胞对碘的摄取收到影响[28]。本试验中，饲粮碘添加水平对五龙鹅血清中T3、T4和TSH含量无显著影响，这有可能说明本试验设定的碘添加水平对五龙鹅的甲状腺功能和垂体分泌并未产生较大影响。
4 结论饲粮中添加适宜水平碘可提高5~16周龄五龙鹅生长性能、免疫器官指数和抗氧化性能。本试验条件下，饲粮中碘的适宜添加水平为0.3 mg/kg。
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