试验用维生素B₂购自广济药业(孟州)有限公司，其有效成分为80%。试验鹅由国家水禽产业技术体系育种基地莱阳天森豁眼鹅繁育中心提供。

选用29日龄体重相近、健康的五龙鹅360只。采用随机分配编号法，分为6个组，每组6个重复，每个重复10只(公母各占1/2)。Ⅰ组为对照组，饲喂玉米-豆粕型基础饲粮(维生素B₂含量为2.47 mg/kg)，Ⅱ~Ⅵ组分别饲喂在基础饲粮中添加2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 mg/kg维生素B₂的试验饲粮。试验期为12周。

基础饲粮的营养水平参照NRC(1994)家禽营养需要量设计，其组成及营养水平见表1。采用高效液相色谱法^[11]测得基础饲粮中维生素B₂含量为2.47 mg/kg。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) % 原料 Ingredients 含量 Content 营养水平 Nutrient levels2) 含量 Content 玉米 Corn 61.97 代谢能 ME/(MJ/kg) 11.29 豆粕 Soybean meal 22.00 粗蛋白质 CP 16.00 玉米秸秆 Maize straw 8.00 钙 Ca 0.70 次粉 Wheat middling 4.00 有效磷 AP 0.32 鱼粉 Fish meal 1.50 食盐 NaCl 0.38 磷酸氢钙 CaHPO4 0.78 粗纤维 CF 4.98 食盐 NaCl 0.30 赖氨酸 Lys 0.82 石粉 Limestone 0.95 蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys 0.53 多维 Multivitamin1) 0.30 蛋氨酸 Met 0.26 微量元素 Trace elements1) 0.20 苏氨酸 Thr 0.58 合计 Total 100.00 维生素B2 Vitamin B2/(mg/kg) 2.47 1)多维和微量元素(不含维生素B2)为每千克饲粮提供 The multivitamin and trace elements (without vitamin B2) provided the following per kg of the diet: VA 1 500 mg，VD3 200 IU，VE 12.5 mg，VK3 1.5 mg，VB1 2.2 mg，烟酸 nicotinic acid 65 mg，泛酸 pantothenate 15 mg，VB6 2 mg，生物素 biotin 0.2 mg，叶酸 folic acid 0.5 mg，胆碱 choline 1 000 mg，Fe 85 mg，Cu 5 mg，Mn 80 mg，Zn 80 mg，I 0.42 mg，Se 0.3 mg，Co 2.5 mg。 2)维生素B2为实测值，其他营养水平为计算值。Vitamin B2 was a measured value, while the other nutrient levels were calculated values.

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %

试验前对鹅舍进行全面消毒；全期采取舍饲，采用地面分栏平养方式。试验鹅自由采食及饮水，少添勤饲，注意观察鹅群的生长状况。

采用SPSS 17.0软件中单因素方差分析(one-way ANOVA)中的LSD法进行多重比较。试验数据以“平均值±标准差”表示。用不相关比较法(orthogonal)分析各指标随饲粮中维生素B₂添加水平增加的线性或曲线方程，采用曲线拟合法确定5～16周龄鹅饲粮中维生素B₂的适宜添加水平，并进行生长性能、激素与肠道组织间的相关性分析。P＜0.05和P＜0.01分别为差异显著和极显著水平。

由表2可知，5～16周龄，末重、ADG随着饲粮维生素B₂添加水平的增加先升高后降低，其中Ⅱ、Ⅲ组显著高于Ⅰ组(P<0.05)。F/G随着饲粮维生素B₂添加水平的增加先降低后升高，其中Ⅱ~Ⅵ组F/G均显著低于Ⅰ组(P<0.05)。ADFI、死淘率各组间差异不显著(P>0.05)。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 饲粮维生素B2添加水平对五龙鹅生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary vitamin B2 supplemental level on growth performance of Wulong geese 组别 Groups 初重 IBW/kg 末重 FBW/kg 平均日增重 ADG/g 平均日采食量 ADFI/g 料重比 F/G 死淘率 Mortality rate/% Ⅰ 1.18±0.26 3.05±0.26a 22.12±0.31a 156.55±13.80 7.17±1.06a 1.67 Ⅱ 1.21±0.34 4.09±0.56b 34.42±0.67b 154.90±30.20 4.63±0.99b 0.00 Ⅲ 1.24±0.28 4.15±0.21b 35.12±0.25b 151.03±11.20 4.31±0.32b 0.00 Ⅳ 1.20±0.32 3.67±0.59ab 29.46±0.70ab 156.59±31.50 5.56±1.33b 0.00 Ⅴ 1.21±0.30 3.52±0.48ab 27.68±0.57ab 154.55±25.80 5.74±1.04b 0.00 Ⅵ 1.20±0.29 3.49±0.33ab 27.28±0.40ab 155.77±17.90 5.79±0.88b 0.00 同列数据肩标相同小写字母或无字母表示差异不显著(P＞0.05)，相邻小写字母表示差异显著(P＜0.05)，相间小写字母表示差异极显著(P＜0.01)。表3、表4同。 In the same column，values with the same small or no letter superscripts mean no significant difference (P＞0.05)， while with adjacent small letter superscripts mean significant difference (P＜0.05)， and with alternate small letter superscripts mean significant difference (P＜0.01)．The same as Table 3 and Table 4．

表2 饲粮维生素B2添加水平对五龙鹅生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary vitamin B2 supplemental level on growth performance of Wulong geese

以上结果表明，Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组5～16周龄鹅ADG、F/G均无显著差异，表明饲粮维生素B₂添加水平超过10 mg/kg时对ADG、F/G均无显著影响。因此，以Ⅰ～Ⅲ组ADG(Y₁)和F/G(Y₂)分别与饲粮维生素B₂添加水平(X)进行二次曲线拟合，建立回归方程如下：

Y₁=22.403+4.497X-0.395X²
(R²=0.792，PQ=0.004)；
Y₂=0.096X²-1.084 4X+7.011
(R²=0.762，PQ=0.002)。

由上述曲线回归方程得出：饲粮维生素B₂添加水平为5.69 mg/kg时ADG最大，饲粮维生素B₂添加水平为5.64 mg/kg时F/G最低；饲粮维生素B₂添加水平超过10 mg/kg时末重和ADG降低，F/G提高。从综合效益角度分析，建议最佳生长性能饲粮中维生素B₂添加水平为5.64～5.69 mg/kg。

由表3可知，5～16周龄，血清GH、FT₃、FT₄、INS含量整体呈先增加后降低的趋势，其中Ⅲ组最高，稍高于Ⅴ组，但差异不显著(P>0.05)。Ⅲ组血清GH、FT₃、FT₄、INS含量均显著高于I组(P<0.05)，Ⅴ组与Ⅵ组之间差异不显著(P>0.05)。

以上结果表明，饲粮添加5.0 mg/kg维生素B₂能提高显著五龙鹅血清GH、FT₃、FT₄、INS含量，饲粮维生素B₂添加水平超过10 mg/kg时，血清GH、FT₃、FT₄、INS含量开始逐渐下降。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 饲粮维生素B2添加水平对五龙鹅血清激素含量的影响 Table 3 Effects of dietary vitamin B2 supplemental level on serum hormone content of Wulong geese 组别 Groups 生长激素 GH/(ng/mL) 游离三碘甲腺原氨酸 FT3/(pmol/L) 游离甲状腺素 FT4/(pmol/L) 胰岛素 INS/(mIU/L) Ⅰ 0.57±0.17a 6.35±1.04a 5.77±2.12a 6.37±2.19a Ⅱ 0.78±0.30ab 9.40±1.44ab 7.03±1.90ab 15.45±2.87b Ⅲ 0.88±0.25b 12.23±2.76b 7.27±3.57b 19.72±4.49b Ⅳ 0.84±0.49b 11.08±3.11b 6.94±3.06b 19.42±3.25b Ⅴ 0.80±0.32b 9.58±3.52ab 6.87±2.15ab 14.40±2.37b Ⅵ 0.80±0.38b 8.65±2.33ab 6.36±2.15ab 14.25±7.96b

表3 饲粮维生素B2添加水平对五龙鹅血清激素含量的影响 Table 3 Effects of dietary vitamin B2 supplemental level on serum hormone content of Wulong geese

由表4可知，16周龄时，饲粮维生素B₂添加水平对五龙鹅肠道绒毛高度、隐窝深度、绒毛高度/隐窝深度(V/C)有显著影响(P<0.05)。Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组肠道绒毛高度显著或极显著高于Ⅰ组(P<0.05或P<0.01)，维生素B₂添加水平为5.0 mg/kg时，肠道绒毛高度最高，隐窝深度最浅，V/C最高。Ⅱ~Ⅵ组隐窝深度显著或极显著低于对照组(P<0.05或P<0.01)；Ⅲ组V/C显著高于Ⅰ组(P<0.05)。肠壁厚度各组间无显著差异(P>0.05)。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 维生素B2对五龙鹅肠道组织结构的影响 Table 4 Effects of dietary vitamin B2 supplemental level on intestinal tissue structure of Wulong geese 组别 Groups 绒毛高度 Villus height/μm 隐窝深度 Crypt depth/μm 肠壁厚度 Intestinal thickness/μm 绒毛高度/隐窝深度 V/C Ⅰ 324.63±21.52a 116.93±3.50a 161.06±38.13 2.79±0.22a Ⅱ 367.22±67.78a 104.77±2.12b 195.00±9.54 3.50±0.67a Ⅲ 612.91±27.35c 77.95±5.70c 205.39±72.18 7.85±0.39b Ⅳ 488.03±9.15b 103.40±3.33b 202.67±15.30 4.74±0.12ab Ⅴ 469.92±18.79b 107.88±4.99b 181.04±10.31 4.35±0.26ab Ⅵ 350.70±57.96a 110.29±3.93bc 187.05±4.27 3.18±0.58a

表4 维生素B2对五龙鹅肠道组织结构的影响 Table 4 Effects of dietary vitamin B2 supplemental level on intestinal tissue structure of Wulong geese

以上结果表明，16周龄时，在饲粮维生素B₂添加水平对五龙鹅肠道绒毛高度、隐窝深度、V/C有显著影响。饲粮添加5.0 mg/kg维生素B₂能显著提高绒毛高度和V/C，降低隐窝深度。饲粮维生素B₂添加水平超过10 mg/kg时，肠道绒毛高度、肠壁厚度和V/C开始逐渐降低，隐窝深度开始逐渐提高。

由图 1可见，16周龄时，Ⅱ~Ⅵ组回肠绒毛高度高于Ⅰ组，Ⅱ、Ⅲ组五龙鹅的回肠绒毛高度最高，隐窝最浅。Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组回肠绒毛高度较Ⅲ组低，隐窝深度较Ⅲ组深，且Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组之间差异不明显。

图 1(Figure 1)

Fig. 1

图 1 回肠组织结构 Fig.1 Ileum tissue structure (100×)

以上结果表明，饲粮中添加2.5～5.0 mg/kg维生素B₂对五龙鹅的回肠发育有直接影响。

生长性能是研究动物营养需要量的重要指标之一。维生素B₂在动物体内存在形式有3种：游离的核黄素、黄素单核苷酸(FMN)和黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)，在生物氧化过程中作为各种酶类的重要组成，促进碳水化合物、蛋白质和脂肪的合成代谢。据前人研究，维生素B₂对肉鸡生长性能有影响^[12,13]。王丹莉^[14]在玉米-豆粕型基础饲粮中添加不同水平维生素B₂显著增加了肉仔鸡ADG，但对F/G无显著影响。唐淑珍^[15]研究表明，维生素B₂显著提高7～28日龄肉仔鸡ADG。霍思远^[16]研究表明，蛋鸭饲粮中添加10 mg/kg维生素B₂显著影响了ADG、F/G，但对ADFI影响不显著。唐静^[17]研究表明，饲粮维生素B₂水平对1～21日龄北京鸭ADG、ADFI和F/G有显著影响。芦燕^[18]研究表明，饲粮维生素B₂水平对蛋鸭ADFI没有显著影响，但极显著影响体重、ADG和F/G。王艳辉^[19]研究表明，饲粮维生素B₂水平的升高对ADFI的影响不显著，添加10 mg维生素B₂显著提高了蛋雏鸭的ADG和F/G。本研究结果表明，玉米-豆粕型饲粮中维生素B₂添加水平对五龙鹅体重、ADG、F/G有显著影响，上述研究结果一致。

本试验中，饲喂玉米-豆粕型饲粮(维生素B₂含量为2.47 mg/kg)的对照组试验鹅表现为生长缓慢、相关激素分泌量低、肠道组织发育差，但没有出现维生素B₂缺乏症和死亡率高的现象，说明基础饲粮中2.47 mg/kg的维生素B₂能满足鹅维持生命的最低要求，但却远远达不到高效和优质生产的要求。为此，在采用其他类型饲料配方时，由于饲粮维生素B₂水平低，更要注意调整维生素B₂的添加水平。

GH能促进脂肪分解，使组织脂肪含量减少。FT₃和FT₄能够促进脂肪酸合成和胆固醇分解。INS能够促进脂肪细胞膜对葡萄糖的转运和脂肪酸的合成^[20]。维生素B₂在机体中主要以游离的核黄素、FMN和FAD形式存在，而FMN和FAD是脂肪代谢中必不可少的复合体，维生素B₂能为上述激素在调节脂肪代谢时，提供传递电子能力的复合体。

王艳辉^[19]研究表明，维生素B₂对蛋雏鸭三碘甲状原氨酸(T₃)和GH的含量有显著影响。霍思远^[16]研究表明，在添加不同水平维生素B₂条件下，蛋鸭的血清GH和INS含量显著高于对照组。芦燕^[18]研究表明，维生素B₂对蛋鸭FT₃和FT₄含量有显著影响，对GH、INS含量均有极显著影响。唐静等^[21]研究表明，基础饲粮中添加维生素B₂能显著提高肉鸭血清FT₃、GH含量。孟铭伦等^[22]研究表明，补充维生素B₂不仅可使大鼠血清FT₄含量升高，而且有可能提高甲状腺素对某些黄素酶的诱导作用，并缩短FT₄含量恢复到正常水平的时间。康世良^[23]研究表明，维生素B₂还参与GH和INS等激素的合成。INS含量与体脂、腹脂的合成有一定关系，INS是家禽促进生长，调节脂肪代谢较重要的激素^[24]。脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A酸化酶(ACC)活性受INS的调节^[25]，表明INS与脂肪代谢有直接关系。本试验结果表明，对照组生长性能各项指标都与试验组有显著差别，相应的各组INS含量差别较大，维生素B₂对机体INS分泌有明显调控作用。添加维生素B₂对血清中GH、FT₃、FT₄、INS含量有显著影响，表明添加维生素B₂能够促进激素的分泌，从而促进鹅机体物质代谢和生长发育，其有关调控机理还需进一步研究。

饲粮中的维生素B₂大多以FAD和FMN的形式存在，广泛参与机体的生理生化反应，发挥代谢调节作用，从而维护组织、器官、细胞结构和功能的完整，保证各项生命活动的正常进行。维生素B₂在肠道近端以游离形式被吸收，进入小肠黏膜细胞后再次被磷酸酸化，生成FMN。当维生素B₂缺乏时，引起各种黏膜炎症。Williams等^[26]研究表明，雏鸡采食缺乏维生素B₂饲粮大约1周后，继生长缓慢之后发生腹泻，而腹泻是微生物入侵造成肠炎导致黏膜受损的表现。Stefan等^[27]研究表明，维生素B₂对近端结肠癌症有抑制作用。Gianguido等^[28]研究表明，维生素B₂对肠道组织有显著影响。本试验结果表明，16周龄时，在饲粮中添加维生素B₂对5～16周龄五龙鹅肠道绒毛高度、隐窝深度、V/C有显著影响。肠道绒毛的长短与肠管的吸收面积有直接关系，即肠道绒毛越长，吸收面积越大，本试验结果表明，维生素B₂对肠道发育和吸收有促进作用。另外，王俐^[29]研究表明，肠壁变薄也不能说明营养物质吸收作用加强。本试验结果表明，肠壁厚度各组间无显著差异，与王俐^[29]研究结果一致。鹅肠道细菌合成的维生素B₂不能满足机体需要，需要从饲粮中获得，但添加维生素B₂促进鹅肠道组织的途径和分子机制还需进一步研究。

维生素B₂促进动物体生长发育过程中，激素调节起着重要的作用。目前，关于维生素B₂对生长性能与血清激素含量、肠道组织结构相关性的研究还处于空白。本试验表明，5～16周龄五龙鹅的ADG与FT₃含量及F/G与血清激素含量有显著相关性，表明饲粮中维生素B₂能促进机体促生长类激素的分泌、激素再调节和机体生长发育。

维生素B₂在体内消化吸收分解都是在肠道内，小肠黏膜细胞的发育情况直接影响到维生素B₂吸收和利用。Subramanian等^[30]研究表明，维生素B₂能在人肠道上皮细胞的细胞表面表达。Lu等^[31]研究表明，ADG和空肠、回肠的隐窝深度成正比。本试验结果表明，5～16周龄五龙鹅的ADG与肠道绒毛高度呈正相关；F/G与肠道绒毛高度、隐窝深度有显著相关性。机体可以通过采食饲料获得维生素B₂，满足自身对维生素B₂的需求。当维生素B₂的摄取量适宜时，维生素B₂能到达肠道，促进肠道发育，使肠道吸收面积加大，从而有利于机体吸收各种营养物质，促进机体营养代谢和生长发育，所以生长性能与肠道组织之间存在着相关性。本试验结论与Lu等^[31]研究结果相一致。

营养需要也称营养需要量，是指动物在最适宜环境条件下，正常、健康生长或达到理想生产成绩对各种营养物质种类和数量的最低要求。过量添加会对动物生长发育、生理生化指标和生产成本等产生不良影响。NRC(1994)制订的4～8周鹅维生素B₂需求量为2.5 mg/kg，生产中采用玉米-豆粕型基础饲粮中维生素B₂含量基本达到了NRC(1994)要求，然而实践表明，随着鹅品种的改良和饲养环境的改善，鹅生长发育加快，所需营养逐渐增加，NRC(1994)标准不能满足快速和优质生产的营养需要。本试验中有效评定维生素B₂营养需要量的敏感指标为生长性能、血清激素含量和肠道组织结构。肉鹅实际养殖中多以ADG和F/G为主要参考依据，因此，本试验以ADG和F/G为主要衡量指标，通过二次曲线拟合确定最佳ADG和F/G下，5～15周龄五龙鹅玉米-豆粕型饲粮中维生素B₂添加水平为5.64～5.69 mg/kg。