反刍动物饲粮中蛋白质不仅是机体所需氨基酸的重要来源,同时也是瘤胃微生物蛋白合成的重要原料[1]。蛋白质资源不足一直是养殖业面临的重大问题之一,而反刍动物可以利用非蛋白氮(NPN)缓解畜牧业发展与蛋白质资源不足的问题,因此,NPN的开发一直是国际反刍动物营养研究的重要领域[2]。综合经济性、转化效率等因素,到目前为止尿素仍是反刍动物生产中首选的NPN,但是在瘤胃内尿素水解为氨态氮(NH3-N)的速率较瘤胃细菌利用NH3-N的速率快[3,4,5],容易引起氨中毒,而不能被细菌利用的氮(N)经尿液排出,造成环境污染,限制了其在生产中的推广和应用[6,7,8,9]。过去几十年,关于尿素缓(控)释技术的研究日益增多,如物理缓释法、化学缓释法、抑制脲酶法和近年出现的包被尿素法,以期能使尿素在瘤胃内的降解速率与瘤胃细菌利用NH3-N的速率平衡[3]。
奶山羊单产较低是我国奶山羊产业发展的制约因素之一,加强营养,尤其是增加饲粮蛋白质水平可以提高奶山羊产奶量,因此,探讨廉价高效NPN资源的合理利用十分必要。本试验采用的缓释非蛋白氮(slow-release NPN,srNPN)是以尿素、大豆油、柠檬酸和二丁基羟基甲苯混合制成的包被尿素,据前人研究报道,利用该srNPN替代奶牛饲粮中的尿素可以提高奶牛产奶量并降低血液尿素氮(urea nitrogen,UN)含量[9,10,11,12,13,14],但其对奶山羊泌乳性能的影响研究却鲜有报道。本试验选用西农萨能奶山羊,研究饲粮中添加不同水平srNPN对奶山羊泌乳性能及血液生化指标的影响,旨在筛选出合适的添加水平,为奶山羊科学养殖提供依据。
srNPN购自美国Alltech公司,是以尿素、大豆油、柠檬酸和二丁基羟基甲苯混合制成的包被尿素,粗蛋白质(CP)含量为256%。
试验采用单因子完全随机等重复试验设计,选择48头2~3胎、泌乳天数(DIM) (60±4) d、体重(60.00±8.98) kg的健康西农萨能奶山羊,随机分为4组,每组12只。各组饲粮srNPN添加水平分别为0(对照组)、0.25%、0.50%、0.75%。
试验饲粮设计参考NRC(2007)山羊饲养标准,其组成及营养水平见表1。
![]() | 表1 试验饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) % |
试验于2013年3月2日开始,2013年6月29日结束,共17周,其中预试期1周,正试期16周,于西北农林科技大学萨能羊原种场进行。试验羊按组分别饲养,所有试验羊日喂2次(07:00和18:00),以体重60.00 kg为标准,干物质(DM)饲喂量为体重的4%,即2.4 kg/d;剩料在每天07:00喂料之前收集称重。试验羊自由饮水、采食和运动。每天06:30和17:30机器挤奶。观察羊群健康状况及采食情况,做好各项记录。
试验期间,每天测定采食量和剩料量,计算日均采食量(ADFI)。试验羊每天机器挤奶2次,记录羊产奶量,计算日均产奶量。
每2周采集1次试验饲粮和剩料样品,每次采集0.5 kg,置于-20 ℃保存待分析。将试验期间采集的全部饲粮样品混匀,在60 ℃干燥,称重风干样,冷却后粉碎过40目筛,以备DM、CP、粗脂肪(EE)含量和净能(NE)的测定。饲粮样品于105 ℃烘干8 h测得DM含量,CP含量使用全自动凯氏定氮仪(Kjeltec 8400,FOSS公司)测定,EE含量使用索氏脂肪提取器测定。
每4周采集1次乳样,每只羊早晚各采集20 mL制成混合样(共40 mL),用全自动乳样分析仪(MilkoScanTMFT-120,FOSS公司)分析乳常规成分。测定项目:乳脂(milk fat)、乳蛋白(milk protein)、乳非脂固形物(milk SNF)及乳糖(lactose)。
试验期内每4周采集1次血样,清晨空腹颈静脉采血每次6 mL/只,置于加有0.6 mL柠檬酸钠抗凝剂的离心管中,在4 ℃下,4 300 r/min离心10 min,转移上清液于2 mL离心管中,于-80 ℃冰箱保存待分析。利用MTN-658A半自动生化分析仪测定血液UN、总蛋白(TP)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量,所用试剂盒均购自中生北控生物科技股份有限公司,测定方法按照说明书进行。
利用Excel 2010初步整理数据,然后使用SPSS 17.0软件进行单因素方差分析,利用LSD法与Duncan氏法进行多重比较,结果以“平均值±标准误”表示,差异显著水平为P<0.05。
由表2可知,各组泌乳羊在整个试验期间ADFI无显著差异(P>0.05)。试验初始(第0周)各组间日均产奶量无显著差异(P>0.05),试验组(0.25%组、0.50%组、0.75%组)日均产奶量在第4、8、12和16周时均显著高于对照组(P<0.05),且0.50%组显著高于0.25%组和0.75%组(P<0.05),0.25%组和0.75%组在试验期间日均产奶量差异不显著(P>0.05)。
![]() | 表2 rsNPN添加水平对奶山羊生产性能的影响 Table 2 Effects of supplemental level of rsNPN on performance of lactating goats kg/d |
由表3可知,初始乳脂、乳蛋白、乳糖和乳非脂固形物含量无显著差异(P>0.05)。在第4、8、12和16周时,试验组乳脂含量均显著高于对照组(P<0.05),其中,0.50%组的乳脂含量最高,但与0.25%组和0.75%组差异不显著(P>0.05)。4组奶山羊在各时间点的乳蛋白、乳糖及乳非脂固形物含量差异不显著(P>0.05)。
![]() | 表3 rsNPN添加水平对奶山羊乳成分的影响 Table 3 Effects of supplemental level of rsNPN on milk composition of lactating goats % |
由表4可知,试验初始血液UN、TG、TC和TP含量差异不显著(P>0.05)。在试验期间,试验组血液UN含量显著低于对照组(P<0.05),各试验组间也差异显著(P<0.05),其中,0.50%组最低,显著低于0.25%组和0.75%组(P<0.05)。各组各时间点血液TG、TC及TP含量差异均不显著(P>0.05)。
![]() | 表4 rsNPN添加水平对奶山羊血液生化指标的影响 Table 4 Effects of supplemental level of rsNPN on blood biochemical indices of lactating goats mmol/L |
本试验采用的srNPN是以尿素、大豆油、柠檬酸和二丁基羟基甲苯混合制成的包被尿素,因其主要成分是尿素,而尿素味苦极浓,奶山羊可能不喜食而影响采食量。本试验通过在西农萨能奶山羊饲粮中添加不同水平的srNPN,发现饲粮添加0.75%以下的srNPN对奶山羊采食量无显著影响。srNPN在奶牛和肉牛饲粮中应用的研究也获得了相似的结果。Bourg等[15]研究表明,在奶牛饲粮中添加0.75%和1.50%的该srNPN,对奶牛干物质采食量(DMI)无影响。Pinos-Rodriguez等[3]在肉牛饲粮中添加1.1%的该srNPN,发现其对肉牛的干物质采食量也无影响。Holder等[11]利用该srNPN分别设计了CP水平为12.1%和10.9%的饲粮,结果发现其不会影响肉牛干物质采食量。由此推测,包被成功掩盖了尿素的味道,本srNPN的添加不会影响饲粮适口性和采食量。
饲粮蛋白水平对瘤胃微生物蛋白合成有显著影响,同时也关系动物的生产水平[16]。本试验结果显示,添加srNPN可显著提高奶山羊日均产奶量,0.25%组、0.50%组、0.75%组日均产奶量在第4、8、12和16周时均显著高于对照组,而且,0.50%组日均产奶量在第4、8、12和16周时显著高于0.25%组和0.75%组。在奶牛上,也发现使用srNPN有提高产奶量的作用。Inostroza等[9]对每头荷斯坦奶牛饲喂114 g/d的该srNPN,结果发现奶牛日均产奶量提高了0.5 kg/d。据Tikofsky等[14]研究报道,在奶牛饲粮中添加该srNPN,有提高产奶量的趋势。尿素在瘤胃内降解为NH3-N的速率快于菌体利用NH3-N的速率[3,4,5],而srNPN可以使NH3-N的释放速率更加接近降解速率,从而长时间稳定地为瘤胃微生物提供氮源[14,17-18],使瘤胃内微生物能够大量合成菌体蛋白,从而提高产奶量[8,9]。
Russell等[19]和Cherdthong等[20]研究表明,瘤胃纤维素分解菌的比例变化将会导致挥发性脂肪酸(VFA)的合成发生变化,从而影响乳脂的合成。当瘤胃液pH保持在正常范围内时,乙酸的形成较丙酸容易些,由于乙酸含量的增多,奶牛的产奶量和乳脂率都将得到提高。Grummer等[21]瘤胃灌注氯化铵使瘤胃内NH3-N浓度由4.8 mg/dL升高到17.3 mg/dL时,结果总挥发性脂肪酸(TVFA)浓度增加,乙酸比例下降。Song等[22]发现,瘤胃灌注氯化铵时,TVFA浓度并不受NH3-N的影响,乙酸比例反而下降。本试验通过在奶山羊饲粮中添加不同水平srNPN,结果表明,0.25%组、0.50%组和0.75%组乳脂含量相对于对照组显著增加,可能是srNPN作为一种缓释蛋白可以降低瘤胃内NH3-N浓度并使NH3-N长时间地保持在一个较高的水平,使瘤胃内乙酸比例增加,从而增加乳中乳脂含量。本试验结果表明,srNPN对乳中乳蛋白含量无显著影响,Inostroza等[9]对每头荷斯坦奶牛饲喂srNPN 114 g/d得到了类似的结果,发现srNPN对牛奶中乳蛋白含量无显著影响。总的来说,在饲粮中添加srNPN提高产奶量的同时也提高了乳汁中乳脂率,为提高我国羊奶品质提供了方向。
饲粮中添加srNPN能够提高奶山羊乳中乳脂含量,降低血液UN含量,添加水平为0.50%时奶山羊日均产奶量最高。
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