点篮子鱼(Siganus guttatus)隶属于鲈形目(Perciformes), 篮子鱼科(Siganidae), 篮子鱼属，主要产于热带、亚热带的印度-太平洋及我国南海海域，从珊瑚礁到河口水域均有分布[1]。点篮子鱼作为一种杂食、广盐、暖水性鱼类，对环境适应能力强，养殖技术简单，病害少，生长速度快，具有可观的经济效益[2]；其还具有喜食养殖网箱上附着藻类的习性，在保持网箱清洁、水质良好等方面也发挥着重要作用，具有较好的生态效益。点篮子鱼良好的经济与生态效益已引起人们的广泛关注[3]。
浒苔(Enteromorpha prolifra，E. prolifra)俗称苔条、青海苔等，隶属绿藻门(Chlorophyta)，石莼目(Ulvales)，石莼科(Ulvaceae)，浒苔属[4]。广泛分布于世界海洋、河口以及海陆结合部的咸淡水生境中[5]，我国南、北方各海区均有分布，属东海海域优势种[6]。近年来，由于全球变暖，水体富营养化，浒苔等海洋绿藻大量增殖，引起“绿潮”频发，对周边养殖业造成相应危害，尤其对海参的危害严重[7]。
目前，我国北方地区正尝试利用点篮子鱼喜食浒苔等藻类的习性来控制刺参(Stichopus japonicus)等养殖水体中过度滋生的浒苔，防止浒苔的过度生长对养殖水环境危害，达到生态健康养殖的目的。目前已对摄食浒苔点篮子鱼的生长习性、消化酶活性和抗氧化酶活性等进行了系统研究[8-10]，但对其摄食浒苔后的肌肉营养成分组成状况未知。因此，本研究采用生化分析的手段，对浒苔和人工饵料饲喂的点篮子鱼幼鱼的肌肉营养品质进行评价，以明确点篮子鱼摄食浒苔后的营养状况，进一步探讨浒苔作为点篮子鱼饵料的应用潜力。
1 材料与方法 1.1 试验用鱼试验用鱼为东海水产研究所海南琼海研究中心人工繁育的点篮子鱼幼鱼，空运至山东威海，选取体质健壮、规格一致的幼鱼用于试验，其体长为(39.9±2.3) mm，体质量为(2.1±0.2) g。
1.2 试验设计与饲养管理试验在山东省威海市小石岛国家级海洋特别保护区海域海参养殖海湾进行。在海区选取规格为2.5 m×1.5 m×1.5 m、网目0.5 mm的网箱进行试验，选择180尾点篮子鱼幼鱼，设置2个饵料组(浒苔组和人工饵料组)，分别投喂浒苔鲜样和人工饵料，每组3个重复，每个重复30尾鱼，试验时间为2014年6月24日至2014年9月19日，为期90 d。每天05:30、09:00、13:00、17:00投喂，观察其摄食情况，做到饱食投喂，并及时清理食物残渣，换水随当地潮汐自然进行。试验期间水温23.0~26.5 ℃，盐度28~30，pH 8.0±0.5，溶氧浓度在5 mg/L以上。2种不同饵料(浒苔和人工饵料)的常规营养组成见表 1，脂肪酸组成见表 2。
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表 1 2种不同饵料的常规营养组成(干物质基础) Table 1 General nutritional composition of two different feeds (DM basis) |
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表 2 2种不同饵料的脂肪酸组成 Table 2 Fatty acid composition of two different feeds |
试验结束后，对试验鱼禁食24 h后，从每个网箱内随机抽取样品10尾，每个饵料组3个网箱共取样30尾，用200 mg/L间氨基苯甲酸乙酯甲磺酸盐(MS-222) 进行麻醉，测量体长和体质量，其中浒苔组体长为(6.60±0.58) cm，体质量为(9.61±0.61) g；人工饵料组体长为(7.87±0.48) cm，体质量为(15.44±0.38) g，检测分析时随机从30尾鱼中选取5尾鱼组成1组，共6组，随即于冰盘上解剖，取每组的新鲜肌肉样品，取样后捣碎，混合均匀，用于肌肉常规成分、氨基酸和脂肪酸含量测定。
1.4 样品测定方法按GB 5009.5—1985的方法分别测定水分、粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分含量；按GB/T 14965—1994的方法使用Biochrom-20型氨基酸自动分析仪测定各氨基酸含量；按GB/T 5009.168—2003的方法使用Agilent-6890型气相色谱仪测定各脂肪酸含量。
1.5 营养品质评价方法根据联合国粮农组织(FAO)/世界卫生组织(WHO)(1973) 建议的氨基酸评分标准模式(%，干物质基础)和全鸡蛋蛋白质的氨基酸模式(%，干物质基础)分别按以下公式计算氨基酸评分(amino acid score, AAS)、化学评分(chemical score, CS)和必需氨基酸指数(essential amino acid index, EAAI)[11-13]：
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式中：aa为试验样品氨基酸含量(%)；AA(FAO/WHO)为FAO/WHO评分标准模式中同种氨基酸含量(%)；AA(Egg)为全鸡蛋蛋白质中同种氨基酸含量(%)；n为比较的必需氨基酸数；A、B、C…G为样品蛋白质的必需氨基酸含量(%)；AE、BE、CE…GE为全鸡蛋蛋白质的必需氨基酸含量(%)。
1.6 数据统计与处理所有数据在做统计分析前，采用SPSS 13.0统计软件中非参数统计分析(nonparametic tests)中的1-Sample K-S(Normal)过程进行正态性检验。经检验，原始数据均服从正态分布。用独立样本t-检验(independent samples t test)进行2组间的比较，同时用Levene’s test进行方差齐性检验；方差不齐时，用Independent Samples中的Mean-Whitney U作2组间进一步的比较。描述性统计值使用平均值±标准差(mean±SD)表示，P < 0.05为具有显著性差异。
2 结果 2.1 生长指标及营养组成浒苔组和人工饵料组点篮子鱼幼鱼的生长指标及营养组成测定结果如表 3所示。浒苔组点篮子鱼幼鱼的末体质量、增重率、特定生长率、相对增长率均显著低于人工饵料组(P < 0.05)。浒苔组点篮子鱼幼鱼肌肉中粗蛋白质和粗灰分含量显著高于人工饵料组(P < 0.05)，而粗脂肪含量显著低于人工饵料组(P < 0.05)，水分含量在2组间差异不显著(P > 0.05)。
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表 3 2种饵料组点篮子鱼幼鱼的生长指标及营养组成 Table 3 Growth indexes and nutritional composition of juvenile Siganus guttatus in two feed groups |
浒苔组和人工饵料组点篮子鱼幼鱼肌肉中氨基酸组成如表 4所示。共检出17种常见氨基酸，其中参与蛋白质合成的包括7种必需氨基酸(EAA)：苏氨酸(Thr)、缬氨酸(Val)、蛋氨酸(Met)、苯丙氨酸(Phe)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)和赖氨酸(Lys)；2种半必需氨基酸(HEAA)：组氨酸(His)和精氨酸(Arg)；7种非必需氨基酸(NEAA)：酪氨酸(Tyr)、天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、丝氨酸(Ser)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)；以及1种以游离状态存在的牛磺酸(Tau)。测定结果显示，除Gly、Met和Leu的含量在2组间差异不显著(P > 0.05) 外，其他氨基酸含量在2组间均存在显著性差异(P < 0.05)。浒苔组的氨基酸总量(WTAA)、必需氨基酸总量(WEAA)、半必需氨基酸总量(WHEAA)、非必需氨基酸总量(WNEAA)和鲜味氨基酸总量(WDAA)均显著高于人工饵料组(P < 0.05)。比较2组间各种氨基酸的含量，除Gly含量在人工饵料组较高外，其他氨基酸含量均是在浒苔组中较高。在所测得的17种氨基酸中，Glu含量最高，其次为Asp、Lys、Leu含量，而Tau含量最低。
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表 4 2种饵料组点篮子鱼幼鱼肌肉中氨基酸组成(干物质基础) Table 4 Amino acids composition in muscles of juvenile Siganus guttatus in two feed groups (DM basis) |
将表 4中的数据换算成每克氮中含氨基酸毫克数(乘以62.50%)后，分别计算出浒苔组和人工饵料组的AAS、CS和EAAI，结果见表 5。根据表中的AAS和CS，浒苔组和人工饵料组都是Lys最高，而2组中最低的均为Met+Cys。因而，2组第一限制性氨基酸均为Met+Cys。浒苔组和人工饵料组的EAAI分别为76.71和70.05，从EAAI来看，浒苔组的必需氨基酸组成优于人工饵料组。
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表 5 2种饵料组点篮子鱼幼鱼的AAS、CS及EAAI的比较 Table 5 Comparative analysis of AAS, CS and EAAI of juvenile Siganus guttatus in two feed groups |
如表 6所示，浒苔组点篮子鱼幼鱼肌肉中检测到7种饱和脂肪酸(SFA)，4种单不饱和脂肪酸(MUFA)和11种多不饱和脂肪酸(PUFA)；人工饵料组点篮子鱼肌肉中检测到9种SFA，7种MUFA和12种PUFA。测定结果除C16 : 0、C20 : 0、C22 : 0、C18 : 3ω6、C20 : 3 ω6这5种脂肪酸含量在2组间差异不显著(P > 0.05) 外，其他脂肪酸在2组间均具有显著性差异(P < 0.05)。从脂肪酸组成上看，浒苔组点篮子鱼幼鱼的∑MUFA含量显著的低于人工饵料组(P < 0.05)；而∑PUFA含量正好相反，浒苔组显著高于人工饵料组(P < 0.05)，∑SFA含量在2组间差异不显著(P > 0.05)。PUFA比较，浒苔组点篮子鱼幼鱼的二十碳五烯酸(EPA)+二十二碳六烯酸(DHA)和∑ω3PUFA的含量均显著高于人工饵料组(P < 0.05)；而∑ω6PUFA含量正好相反，浒苔组显著低于人工饵料组(P < 0.05)。
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表 6 2种饵料组点篮子鱼幼鱼肌肉的脂肪酸组成 Table 6 Fatty acid relative composition in muscle of juvenile Siganus guttatus in two feed groups |
本试验对摄食浒苔和人工饵料的点篮子鱼幼鱼的生长及肌肉常规营养组成进行比较发现，浒苔组点篮子鱼幼鱼的增重率、特定生长率、相对增长率和粗脂肪含量均相对较低，但其粗蛋白质和粗灰分含量较高。摄食不同饵料组点篮子鱼的生长速率和营养组成不同，与其饵料的营养组成和对不同饵料的摄食方式密切相关。本研究中2种饵料的营养组成均不在点篮子鱼的最适水平，但通过分析可知人工饵料的营养组成更接近其最适水平，故人工饵料组幼鱼的生长快于浒苔组[9]。同时，浒苔组所摄食的浒苔中的脂肪含量较低，并且在摄食浒苔过程中要不断的切割藻丝，并随藻丝的断裂在水中做沉浮运动[8]，其活跃的摄食活动消耗了大量能量，从而避免了脂肪在体内的过度积累，故浒苔组肌肉中脂肪含量相对较低；反之，点篮子鱼获取人工饵料较为容易，摄食能耗低，人工饵料中脂肪含量也相对较高，因此人工饵料组肌肉中会有较多的脂肪积累，脂肪含量相对较高。鱼肉品质评价通常以蛋白质和脂肪含量的高低为标准。肌肉中脂肪含量过高一方面会使人食用后过多摄入脂肪，另一方面过高的脂肪含量会导致肌肉质地疏松，也不利于肉质口感的体现[14-15]。综合来看，浒苔组点篮子鱼虽然生长相对较慢，但其蛋白质含量较高而脂肪含量较低，其肌肉品质更符合鱼肉营养中“高蛋白质、低脂肪”的优质特点。
3.2 摄食浒苔和人工饵料的点篮子鱼幼鱼肌肉氨基酸组成比较氨基酸是蛋白质的基本组成单位，通常用于蛋白质、酶类以及激素的合成，有些可直接用作药物，或在剧烈运动时作为燃料产生能量，并能促进体内新陈代谢作用。研究表明，蛋白质的营养价值和优良程度主要由氨基酸的种类及必需氨基酸的含量所决定[13]。本研究中浒苔组和人工饵料组点篮子鱼肌肉中必需氨基酸总量与氨基酸总量的比值(WEAA/WTAA)和必需氨基酸总量与非必需氨基酸总量的比值(WEAA/WNEAA)均符合FAO/WHO的理想模式中质量较好的蛋白质的氨基酸WEAA/WTAA为40%左右、WEAA/WNEAA在60%以上的标准[13]，可见2组点篮子鱼的肌肉氨基酸的平衡效果均较好。从氨基酸含量来看，本研究中2组点篮子鱼肌肉中含量最高的氨基酸均为Glu，它不仅是重要的鲜味氨基酸，而且是一种重要的渗透调节物，在鱼类的渗透压和离子调节等过程发挥重要作用[16]，同时它还是脑组织生化代谢中的重要氨基酸，参与多种生理活性物质的合成[17]。其次，含量较高的氨基酸为Asp，它也是一种鲜味氨基酸，它在细胞内线粒体的能量代谢、氮代谢，中枢神经系统兴奋神经递质产生，体内尿素循环等方面起着重要作用[18-19]。在必需氨基酸中含量最高的均为Lys，其在浒苔组和人工饵料组的AAS和CS值均超过FAO/WHO氨基酸标准，分别为其1.54倍和1.41倍。Lys可增强胃液分泌，促进机体造血，缺乏Lys会导致蛋白质代谢障碍和机能障碍[20]。除此之外，在2组点篮子鱼肌肉中均检测到Tau，它具广泛的生物功能，机体内几乎所有正常生理活动的维持和调节都需要Tau的参与[21]。综合来看，在2组点篮子鱼肌肉氨基酸组成中WEAA/WTAA和WEAA/WNEAA，必需氨基酸、鲜味氨基酸总量以及Glu、Asp、Lys和Tau等重要氨基酸含量比较，均是浒苔组显著高于人工饵料组，可见摄食浒苔的点篮子鱼具有更好的鲜味、品质和保健功能。
3.3 摄食浒苔和人工饵料的点篮子鱼幼鱼肌肉脂肪酸组成比较脂肪是加热产生香气成分不可缺少的物质，尤其是高含量PUFA能显著地增加香味，同时在一定程度上反映肌肉的多汁性[13]。已有研究表明，PUFA具有明显的降血脂、抑制血小板凝集、降血压、提高生物膜液态性、抗肿瘤和免疫调节作用[13]。在PUFA中，ω3PUFA和ω6PUFA是2类与人体健康密切相关脂肪酸。本研究中，浒苔组和人工饵料组点篮子鱼肌肉中∑ω6PUFA/∑ω3PUFA分别为0.50和2.77，均低于英国卫生部建议的该比值最大不超过4.0的标准[22]。如果∑ω6PUFA/∑ω3PUFA高于4.0，则对人体健康不利，甚至可能提高心血管疾病的发病率[23]。鱼类脂肪酸组成的不同是由鱼类的大小、年龄、生殖状态、环境条件和饵料来源等共同决定的，本研究中2组点篮子鱼肌肉中脂肪酸含量的差异主要是由其饵料不同决定。浒苔含有丰富的蛋白质、脂肪酸、氨基酸及矿物质等多种营养物质，是一种重要的经济海藻，目前已作为新的饲料资源受到广泛关注[29-30]。很多研究已证实浒苔是一种高蛋白质、低脂肪、富含矿物质和生物活性物质、营养丰富的绿色藻类[31-32]。本研究中浒苔含有的EPA+DHA含量(8.76%)远高于人工饵料中含量(0.87%)，但浒苔中C18 : 2ω6c和C18 : 3ω3的含量(8.06%)远低于人工饵料中含量(52.80%)。根据已有研究证实，植食性海水鱼类能够将C18 : 2ω6c和C18 : 3ω3合成花生四烯酸(ARA)、EPA、DHA等高度不饱和脂肪酸[33-34]，并且这种合成能力在低盐度要比在高盐度的海水中强[34]。而本研究中点篮子鱼饲养在盐度(28‰~30‰)相对较高的水体中，浒苔中含有的C18 : 2ω6c和C18 : 3ω3等用于合成ARA、EPA、DHA等不饱和脂肪酸的前体物质较少，不利于浒苔组自身EPA和DHA的合成，但从本研究的结果来看，浒苔组中EPA+DHA含量(12.54%)却远大于摄食人工饵料组(4.32%)，进一步说明了浒苔组高含量的EPA和DHA等ω3PUFA主要是通过摄食从浒苔中富集而来。食用富含ω3PUFA的鱼类可以改善人体的健康和营养状况[24]，其中EPA和DHA主要存在于海洋鱼类脂肪内，是人和动物生长发育所必需的脂肪酸，对防治心脏疾病和糖尿病有明显效果[25-26]。因此，鱼类脂肪质量的优劣在很大程度上取决于高度不饱和脂肪酸EPA和DHA的含量[27]。另外，ALA作为ω3系的母体，人体自身不能合成，只能通过食物从体外摄取，它对脑神经及视网膜功能具有高度的保护作用，它能高度增强智力、高度抑制过敏反应、抑制脑出血、降血脂、降血压、抑制老化等[28]。综合来看，在2组点篮子鱼肌肉脂肪酸组成中∑ω6PUFA/∑ω3PUFA、ω3PUFA、EPA+DHA和ALA等重要多不饱和脂肪酸含量，均是浒苔组显著优于人工饵料组，故摄食浒苔的点篮子鱼具有更好的必需脂肪酸营养品质及免疫和保健功能。
4 结论① 摄食浒苔的点篮子鱼肌肉中蛋白质含量较高、脂肪含量较低，其肌肉品质具有“高蛋白质、低脂肪”的优质特点。
② 摄食浒苔的点篮子鱼肌肉的必需氨基酸和鲜味氨基酸含量较高，必需氨基酸组成比较平衡，富含多种重要氨基酸成分，具有更好的鲜味，良好品质和保健功能。
③ 摄食浒苔的点篮子鱼肌肉富含EPA、DPA、DHA和ALA等多种重要多不饱和脂肪酸成分，具有更好的必需脂肪酸营养品质及免疫和保健功能。
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