2. 华南农业大学动物科学学院, 华农联佑饲用油脂研究中心, 广州 510642
2. SCAU-Unioil Feeding Oil & Fat Research Centre, College of Animal Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China
铁是畜禽机体生长发育最重要的微量元素之一,同时也是多种酶的重要组分及活化因子,其参与机体多种生化反应,对于促进动物生长、增强机体免疫、提高抗氧化等方面具有重要功能[1-2]。幼畜对铁的需要尤为突出,缺铁易出现缺铁性贫血,甚至导致死亡[3-5]。
目前,由于使用成本低,添加无机铁(硫酸亚铁)在母仔猪饲粮中比较普遍,但存在带有结晶水、易氧化、消化利用率低和污染环境等缺点。氨基酸螯合铁是近年来国内外发展较快的第3代铁源添加剂,如赖氨酸铁、蛋氨酸铁、甘氨酸亚铁等,其接近于动物体内天然形态的铁元素补充剂,不仅具有生物学效价高、吸收效率好及绿色环保等特点,还能起到补充氨基酸、微量元素的双重作用[6-7],同时在吸收代谢、提高动物生产性能等方面业具有明显的优势,微量元素氨基酸螯合铁的研究推动了饲料铁添加剂在断奶仔猪应用的健康、快速发展,是当前国内研制开发应用的热点[8-9]。
氨基酸螯合铁是指金属铁元素以配位键及离子键和氨基酸结合形成的具有环状结构的络合物。甘氨酸易溶于水,且是氨基酸中分子量最小的,从理论上讲由甘氨酸和亚铁螯合成的甘氨酸亚铁更容易穿过小肠上皮细胞而被整体吸收。目前,国内外关于甘氨酸亚铁在仔猪上的应用却鲜有报道,因此,本试验研究了甘氨酸亚铁对仔猪生长性能、铁表观消化率及血清铁相关指标的影响,旨在为其在仔猪饲粮中的应用提供理论参考。
1 材料与方法 1.1 试验材料硫酸亚铁含铁量为31%,为广西兴腾科饲料公司提供;甘氨酸亚铁含铁为17%,为山东和实公司提供,均为饲料级。
1.2 试验设计与饲养管理选取12头(28±1) 日龄体重8.0 kg左右的“杜×长×大”三元杂交仔公猪,随机分成2组,每组6个重复,每个重复1头仔猪,单个饲养于不锈钢的消化代谢笼,2组均饲喂缺铁基础饲粮10 d,使仔猪处于临近贫血状态。然后,对照组在缺铁基础饲粮中额外添加100 mg/kg的硫酸亚铁(以铁计),试验组额外添加100 mg/kg的甘氨酸亚铁(以铁计),饲养5 d摸索每头采食量后,以正常饲喂量的80%进行限饲,进行5 d全收粪、尿试验,试验全期为20 d。
试验在华南农业大学动物科学学院试验场进行,配套设施齐全,满足本试验的要求。试验用猪饲养在消化代谢笼内,全程自由饮用去离子水,日常管理及防疫按照常规程序进行。
1.3 试验饲粮试验饲粮为玉米-豆粕型基础饲粮,其各项营养指标均满足断奶仔猪的营养需求[NRC(2012)],其组成及营养水平见表 1。
![]() |
表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) |
在试验结束时分别对每头仔猪进行前腔静脉采血,每头采血2份,一份(5 mL)置于装有肝素钠抗凝剂的离心管,制作全血;另一份(10 mL)置于无抗凝剂的离心管中,静置30 min后,离心10 min(3 000 r/min)制备血清,分装于1 mL EP离心管中,转移至-20 ℃冰箱保存待测。
1.4.2 粪尿样品全收粪、尿试验期间,分别收集每头仔猪每天的粪和尿,粪样收集后充分搅拌均匀,采用四分法,按每头的总粪量的25%取样,每100 g加5.0 mL 10%酒石酸,再加少量的甲苯防腐,置于-20 ℃冰箱保存待测;尿样收集后记录总体积,按10%取样装入棕色瓶内,并加入10%的硫酸(比例为2:1 000),再加少量甲苯防腐,置于-20 ℃冰箱保存。
1.4.3 屠宰采样试验结束后进行屠宰,分别取仔猪的肝脏、脾脏、心脏、肾脏和背最长肌,分别称重和记录后,用滤纸吸干表面水分后装入预先编号的封口袋后并迅速投入液氮中冻存,然后转移至-80 ℃冰箱保存。
1.5 指标测定及方法 1.5.1 仔猪生长性能分别于试验开始第10天和第21天空腹称重,计算断奶仔猪平均日增重;记录采食量,计算断奶仔猪平均日采食量,计算试验阶段的料重比。
1.5.2 血清铁相关指标血清铁含量、血清总铁结合力、血清不饱和铁结合力、血清铁饱和度以及血液铁含量测定试剂盒均购于南京建成生物工程研究所,操作按说明书进行。
1.5.3 饲粮、组织、粪便中铁元素含量的测定采用国家标准GB/T 13885—2003的方法测定。
1.6 数据处理及分析试验数据采用SPSS 17.0统计软件进行独立样本t检验分析,结果均以平均值±标准误表示,P < 0.01表示差异极显著,P < 0.05表示差异显著,P < 0.10表示有显著差异趋势。
2 结果与分析 2.1 甘氨酸亚铁对断奶仔猪生长性能的影响由表 2可知,与硫酸亚铁组相比,甘氨酸亚铁组料重比有降低的趋势(P < 0.10),降低了4.57%,2组仔猪的平均日增重、平均日采食量无显著差异(P>0.05)。
![]() |
表 2 甘氨酸亚铁对断奶仔猪生长性能的影响 Table 2 Effects of ferrous glycine sulfate (Fe-Gly) on growth performance of weaned piglets |
由表 3可知,与硫酸亚铁组相比,甘氨酸亚铁组粪中铁排出量、铁排出总量显著降低(P<0.05),分别降低了23.11%、22.09%;铁表观消化率和表观代谢率极显著提高(P<0.01),分别提高了13.34%、22.42%。
![]() |
表 3 甘氨酸亚铁对断奶仔猪铁的表观消化率和表观代谢率的影响 Table 3 Effects of Fe-Gly on iron apparent digestibility and metabolic rate of weaned piglets |
由表 4可知,甘氨酸亚铁对断奶仔猪组织器官中铁含量无显著影响(P > 0.05)。
![]() |
表 4 甘氨酸亚铁对断奶仔猪组织器官中铁含量的影响 Table 4 Effects of Fe-Gly on tissue iron content of weaned piglets |
由表 5可知,与硫酸亚铁组相比,甘氨酸亚铁组血清铁饱和度显著提高(P<0.05),提高了15.57%;血液铁含量显著提高(P<0.05),提高了37.05%;血清总铁结合力降低了4.65%,但差异不显著(P > 0.05)。
![]() |
表 5 甘氨酸亚铁对断奶仔猪血清铁相关指标的影响 Table 5 Effects of Fe-Gly on serum iron related indices of weaned piglets |
微量元素是动物机体必需的营养素,直接参于机体几乎所有的生理和生化功能,是多种酶的重要组分及活化因子,对生命活动起着极其重要的作用[1]。动物缺铁易导致机体出现贫血,免疫机能受损,代谢紊乱而引起生长发育缓慢、皮肤苍白、被毛粗糙等。
补铁剂的发展经历了3个阶段:第1代为无机铁盐,包括硫酸亚铁、碳酸亚铁、磷酸亚铁、氯化亚铁等[10],生产上常用的为硫酸亚铁。但是,这类补铁剂存在消化吸收率低、易受饲料pH、粗纤维和植酸含量等因素的影响,造成矿物资源的浪费和对环境的污染。第2代为有机铁盐类添加剂。此类添加剂是铁与蛋白质(如酪蛋白)、有机酸(如柠檬酸、富马酸、乳酸等)等螯合而成,但存在改善效果不显著、经济成本较高等问题。氨基酸螯合铁被称为第3代含铁饲料添加剂[11],是金属元素以配位键、离子键的形式与氨基酸结合形成的具有环状结构的螯合物。
与无机铁盐以及简单的有机酸铁盐比较,氨基酸螯合铁具有良好的稳定性,在动物胃肠道中溶解度高,不仅能缓解矿物质之间的拮抗以及铁与饲料中抗营养因子的络合作用,而且易被消化吸收、利用率高,还能起到补充氨基酸和铁的双重作用[12-13]。
断奶仔猪对铁元素的需要量高但吸收率低[14],而有机铁具有口服吸收好、生物学效价高等特点,成为不错的选择。许多研究表明与硫酸亚铁相比,甘氨酸亚铁更容易被转运吸收[15],生物学利用率为同水平硫酸亚铁的125%~185%[16]。
Feng等[17]研究报道,与添加120 mg/kg的铁硫酸亚铁相比,断奶仔猪饲粮中添加等量的甘氨酸螯合铁可降低粪中铁含量,Creech等[18]也得出一致结果;Muniz等[19]比较有机矿物质元素和无机矿物质元素在24~57日龄仔猪阶段的效果,结果表眀,添加有机微量元素能提高仔猪的生长性能,但对肝脏、心脏、脾脏和肾脏中矿物质元素沉积的影响差异不显著。刘卫东等[20]在断奶仔猪试验组饲粮中添加0.05%的甘氨酸亚铁,试验组较对照组(无机铁)腹泻率降低56.3%,日增重提高9.1%,差异达到显著水平,料重比降低6.2%。Cocato等[21]对44头21日龄断奶仔猪研究发现,饲粮中添加蛋氨酸铁比添加硫酸亚铁更能提高饲料的转化率。冯国强等[22]研究表明,饲粮中添加甘氨酸亚铁与硫酸亚铁相比,能显著改善肉鸡的生长性能,显著提高血清中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量以及血清中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性。
本试验中,研究结果与前人基本一致。与添加硫酸亚铁相比,添加甘氨酸亚铁有降低料重比的趋势,降低了4.57%,对其他生长性能无显著影响;对组织器官中铁的沉积影响不显著;显著降低了粪便中铁的排出量,对保护环境具有积极的作用。
杨敏[23]研究证明甘氨酸亚铁可显著提高血清CAT活性,降低血清丙二醛含量,显著提高血清IgM含量;赖氨酸亚铁、蛋氨酸亚铁、富马酸亚铁可提高二价金属离子转运体1(DMT1)在十二指肠的表达量,促进铁的吸收。李伟[24]研究证明,铁添加量相同的有机铁组血清IgM含量高于无机组。陈凤芹等[25]在25日龄断奶仔猪饲粮中分别添加硫酸亚铁、富马酸亚铁和甘氨酸亚铁,发现添加甘氨酸亚铁的仔猪血清IgG含量比添加硫酸亚铁组和富马酸铁组分别提高了12.2%和10.6%。张一鸣等[26]研究报道,与添加同剂量硫酸亚铁比较,添加二肽螯合铁能显著提高的仔猪的平均日增重,降低料重比,显著提高血清铁含量。
铁吸收的主要场所是十二指肠和空肠近端,由绒毛上成熟的肠细胞介导完成。现认为氨基酸螯合铁在小肠中吸收可能存在2种不同的机制:1) 氨基酸螯合微量元素在肠道中被解离,以离子形式被吸收利用,如铁离子通过位于小肠刷状缘膜的DMT1介导转运至肠细胞,再通过位于基底膜的膜铁转运蛋白1(FP1) 转运进入血液,同时分离出的氨基酸也通过肠上皮细胞被机体利用[27-29];2) 氨基酸螯合盐以小肽形式通过特异或非特性转运载体[如小肽转运蛋白1(PepT1)]进入机体组织,整体被小肠吸收[30]。
本试验中,与添加硫酸亚铁相比,添加甘氨酸亚铁极显著提高了铁表观消化率和表观代谢率,提高血液铁含量,与前人的研究结果一致。
4 结论与添加无机铁(硫酸亚铁)相比,饲粮中添加有机铁(甘氨酸亚铁)可提高断奶仔猪的生长性能,提高血液铁含量,极显著改善仔猪铁代谢状况,显著降低粪便铁排出量,其是一种绿色高效的新型补铁剂。
[1] | 李德发. 猪的营养[M]. 北京: 北京农业大学出版社, 1996: 197-200. |
[2] | BEARD J L. Iron biology in immune function, muscle metabolism and neuronal functioning[J]. Journal of Nutrition, 2001, 131(2): 568S–580S. |
[3] | SVOBODA M, DRABEK J, KREJCI J, et al. Impairment of the peripheral lymphoid compartment in iron-deficient piglets[J]. Journal of Veterinary Medicine.B:Infectious Diseases and Veterinary Public Health, 2004, 51(5): 231–237. DOI: 10.1111/jvb.2004.51.issue-5 |
[4] | ETTLE T, SCHLEGEL P, ROTH F X. Investigations on iron bioavailability of different sources and supply levels in piglets[J]. Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition, 2008, 92(1): 35–43. |
[5] | 孙效名, 吴信, 印遇龙, 等. 幼龄动物铁吸收及其调控[J]. 动物营养学报, 2012, 24(6) :1001–1006. |
[6] | 王进波, 吴天星. 氨基酸螯合铁在养猪生产中的应用研究进展[J]. 中国畜牧杂志, 2004, 40(7) :42–45. |
[7] | 吴信, 印遇龙, 邢芳芳, 等. 国内外微量元素氨基酸螯合物的应用研究进展[J]. 猪业科学, 2008, 35(3) :68–71. |
[8] | KEGLEY E B, SPEARS J W, FLOWERS W L, et al. Iron methionine as a source of iron for the neonatal pig[J]. Nutrition Research, 2002, 22(10): 1209–1217. DOI: 10.1016/S0271-5317(02)00434-7 |
[9] | 蔡超, 魏艳红, 曲湘勇, 等. 有机微量元素替代无机微量元素在猪与鸡粪便减排中的研究进展[J]. 湖南饲料, 2015(2) :20–23. |
[10] | 孙晓光. 日粮添加螯合铜、铁、锰和锌对生长肥育猪增重, 胴体特性和矿物元素消化率的影响[D]. 硕士学位论文. 南京: 南京农业大学, 2009. |
[11] | 钟国清. 第三代微量元素添加剂的研究进展[J]. 饲料工业, 1996, 17(2) :23–26. |
[12] | 胡培, 程茂基, 江涛, 等. 甘氨酸铁对断奶仔猪生长性能的影响[J]. 饲料工业, 2011, 32(13) :29–32. DOI: 10.3969/j.issn.1001-991X.2011.13.009 |
[13] | 郭建来, 李梦云, 朱宽佑, 等. 添加不同比例复合有机微量元素对仔猪生产性能、养分利用率及血清生化指标的影响[J]. 饲料工业, 2014, 35(19) :18–21. |
[14] | YU B, HUANG W J, CHIOU P W S. Bioavailability of iron from amino acid complex in weanling pigs[J]. Animal Feed Science and Technology, 2000, 86(1/2): 39–52. |
[15] | PINEDA O, ASHMEAD D W. Effectiveness of treatment of iron-deficiency anemia in infants and young children with ferrous bis-glycinate chelate[J]. Nutrition, 2001, 17(5): 381–384. DOI: 10.1016/S0899-9007(01)00519-6 |
[16] | LAYRISSE M, GARCÍA-CASAL M N, SOLANO L, et al. Iron bioavailability in humans from breakfasts enriched with iron bis-glycine chelate, phytates and polyphenols[J]. Journal of Nutrition, 2000, 130(9): 2195–2199. |
[17] | FENG J, MA W Q, XU Z R, et al. The effect of iron glycine chelate on tissue mineral levels, fecal mineral concentration, and liver antioxidant enzyme activity in weanling pigs[J]. Animal Feed Science and Technology, 2009, 150(1/2): 106–113. |
[18] | CREECH B L, SPEARS J W, FLOWERS W L, et al. Effect of dietary trace mineral concentration and source (inorganic vs. chelated) on performance, mineral status, and fecal mineral excretion in pigs from weaning through finishing[J]. Journal of Animal Science, 2004, 82(7): 2140–2147. DOI: 10.2527/2004.8272140x |
[19] | MUNIZ M H B, BERTO D A, AUGUSTO R M N, et al. Organic and inorganic mineral sources for weanling piglets[J]. Ciência Rural, 2010, 40(10): 2163–2168. DOI: 10.1590/S0103-84782010001000018 |
[20] | 刘卫东, 王雷, 程璞, 等. 甘氨酸螯合铁对断奶仔猪生产性能的影响[J]. 安徽农业科学, 2008, 36(3) :1048. |
[21] | COCATO M L, DA TRINDADE NETO M A, BERTO D A, et al. Biodisponibilidade de ferro em diferentes compostos para leitões desmamados aos 21 dias de idade[J]. Revista Brasileira de Zootecnia, 2008, 37(12): 2129–2135. DOI: 10.1590/S1516-35982008001200008 |
[22] | 冯国强, 吴静, 方翠林, 等. 甘氨酸亚铁对肉仔鸡生产性能和免疫机能及抗氧化指标的影响[J]. 中国畜牧杂志, 2012, 48(11) :42–46. DOI: 10.3969/j.issn.0258-7033.2012.11.010 |
[23] | 杨敏. 饲粮添加不同类型有机铁对断奶仔猪生产性能及铁吸收利用的影响[D]. 硕士学位论文. 雅安: 四川农业大学, 2012. |
[24] | 李伟. 不同铁源和添加水平对断奶仔猪健康生长的营养调控研究[D]. 硕士学位论文. 南京: 南京农业大学, 2012. |
[25] | 陈凤芹, 计峰, 程茂基, 等. 不同铁源对断奶仔猪生长性能、免疫功能及铁营养状况的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2008, 35(7) :11–14. |
[26] | 张一鸣, 孙效名, 万丹, 等. 二肽螯合铁对仔猪生长性能、血清铁和抗氧化指标的影响[J]. 动物营养学报, 2016, 28(8) :2551–2555. |
[27] | YEUNG C K, GLAHN R P, MILLER D D. Inhibition of iron uptake from iron salts and chelates by divalent metal cations in intestinal epithelial cells[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2005, 53(1): 132–136. DOI: 10.1021/jf049255c |
[28] | FOOT N J, DALTON H E, SHEARWIN-WHYATT L M, et al. Regulation of the divalent metal ion transporter DMT1 and iron homeostasis by a ubiquitin-dependent mechanism involving Ndfips and WWP2[J]. Blood, 2008, 112(10): 4268–4275. DOI: 10.1182/blood-2008-04-150953 |
[29] | MAZARIEGOS D I, PIZARRO F, OLIVARE M, et al. The mechanisms for regulating absorption of Fe bis-glycine chelate and Fe-ascorbate in caco-2 cells are similar[J]. Journal of Nutrition, 2004, 134(2): 395–398. |
[30] | FANG C L, ZHUO Z, FANG S L, et al. Iron sources on iron status and gene expression of iron related transporters in iron-deficient piglets[J]. Animal Feed Science and Technology, 2013, 182(1/2/3/4): 121–125. |