钙和磷是动物体内必需、含量最多的常量矿物元素，约占马机体矿物质含量的70%。相比其他矿物元素，马更容易缺乏钙、磷。合适的钙磷比对马骨骼的正常发育非常重要，钙、磷供应不足或比例失当，易导致骨骼变形^[1]。马饲粮钙、磷水平的理想比例为(1.2~1.6):1.0^[2]。母马的矿物质需求包括胎儿的形成、泌乳及母马本身的生长与维持等，其在妊娠的最后3个月和哺乳期对矿物质的需求明显增加。母马的泌乳高峰在产后第3月，哺乳期间钙摄入不足可能会动员骨钙以满足需求，如果在数周内未得到改善，可能产生不可逆的影响^[3]。母畜在泌乳早期每天净损失大量的钙，在泌乳中、后期钙的缺乏会影响磷的需要^[4]。研究发现，饲粮钙、磷水平不仅影响钙、磷的消化代谢，也影响饲粮其他营养物质，如中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)的消化代谢^[5-6]，而关于饲粮钙、磷水平对泌乳期伊犁母马消化代谢的影响还未见报道。

研究发现，在妊娠后期增加饲粮钙、磷水平不影响妊娠后期伊犁母马营养物质的消化代谢，但血浆中雌二醇(E₂)和雌酮(E₁)水平降低，而生长激素水平增加^[7]。而泌乳期饲粮钙、磷水平对伊犁母马营养物质的消化代谢和血液生理生化指标有何影响还未见报道。鉴于钙、磷营养的重要性，本试验将探讨饲粮钙、磷水平对泌乳期伊犁母马体重、胸围、消化代谢和血浆生理生化指标的影响，为确定泌乳期伊犁母马钙、磷适宜需要量提供基础数据。

1 材料与方法 1.1 试验动物、饲粮及饲养管理

选取年龄(11~14周岁)、体重[（371 ± 21）kg]和胎次(4~6胎)接近的处于第2月泌乳月末的伊犁母马25匹，随机分为5组，每组5匹。试验为期90 d，每30 d为1个试验周期，其中第3泌乳月预试期12 d，每个泌乳月最后12 d为采样期。试验期间各组饲粮组成及营养水平见表 1，动物的饲养管理、各泌乳月饲粮饲喂量与于全平等^[8]的报道相同。根据饲粮组成和饲喂量计算，第3泌乳月时，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组母马钙饲喂水平分别为45.03、48.50、51.96、55.43和58.89 g/d，磷饲喂水平分别为30.05、32.03、34.01、35.99和37.97 g/d；第4和第5泌乳月时，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组母马钙饲喂水平分别为43.60、46.42、49.25、52.07和54.92 g/d，磷饲喂水平分别为27.63、29.24、30.86、32.47和34.12 g/d。

1.2 样品采集

试验期内每7 d收集饲草料各200 g称重后密封保存。采用全收粪法收集马匹24 h的排粪量，混匀后每天称取200 g的鲜粪自然阴干后备用；采用专门的孕马尿收集装置收集马匹24 h的排尿量，混匀后经4层纱布过滤，每天称取80 g于-20 ℃冷冻保存备用。粪样、尿样共收集6 d，每个采样周期为连续采样2 d后，停止2 d，共3个采样周期。

在每期试验结束后的第2天08:00—09:00时将马匹固定，采集空腹颈静脉血10 mL至肝素钠抗凝管中，于3 500 r/min离心10 min，取血浆于-20 ℃冷冻保存待测。

1.3 测定指标与方法

每个试验周期末测定母马体重和胸围。饲草料和粪样中干物质(DM)、有机物(OM)、粗蛋白质(CP)、钙、磷以及尿样中钙、磷含量的测定均参照张丽英^[9]的方法；饲草料和粪样中总能(GE)采用OR2014型量热仪测定，NDF含量采用ANKOM A2000i型纤维测定仪测定。

血浆中离子钙(Ca²⁺)、磷水平采用比色法测定，甲状旁腺素(PTH)、降钙素(CT)、骨钙素(BGP)、胎盘催乳素(PL)、垂体泌乳素(PRL)、E₂、孕酮(P)、E₁水平均采用放射免疫法测定。所有试剂盒均由北京华英生物技术研究所提供。

1.4 数据处理与统计分析

数据采用SPSS 18.0软件的一般线性模型(GLM)模块进行双因素单响应变量方差分析。当因素水平达到显著后采用Duncan氏法对组间进行多重比较，显著水平为P＜0.05。

2 结果与分析 2.1 饲粮钙、磷水平对泌乳期伊犁母马体重、胸围的影响

由表 2可知，饲粮钙、磷水平对母马的体重和胸围无显著影响(P＞0.05)；泌乳月份对母马的体重和胸围有显著影响(P＜0.05)，随着泌乳期的延长，母马的体重和胸围增加；对于母马的体重和胸围，饲粮与泌乳月份间无显著的互作效应(P＞0.05)。

2.2 饲粮钙、磷水平对泌乳期伊犁母马营养物质表观消化率的影响

由表 3可知，饲粮钙、磷水平对母马DM、OM和NDF的表观消化率无显著影响(P＞0.05)，随饲粮钙、磷水平的增加，DM和OM的表观消化率呈下降趋势(P=0.061和P=0.094)。Ⅴ组的CP表观消化率最高，分别比Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组高12.26%、12.37%和18.28%(P＜0.05)；Ⅰ组的GE表观消化率最高，分别比Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组高8.32%、7.19%和11.24%(P＜0.05)；Ⅰ和Ⅲ组的钙表观消化率分别较Ⅳ组提高17.74%和14.49%(P＜0.05)；Ⅲ组的磷表观消化率最高，比Ⅱ组高35.39%(P＜0.05)。除GE和钙的表观消化率外，泌乳月份对其他营养物质的表观消化率均有显著影响(P＜0.05)，其中第4泌乳月的营养物质(CP和NDF除外)表观消化率均显著低于第3和第5泌乳月(P＜0.05)。饲粮与泌乳月份对CP、GE、钙和磷的表观消化率存在显著的互作效应(P＜0.05)。

2.3 饲粮钙、磷水平对泌乳期伊犁马营养物质代谢的影响

由表 4可知，饲粮钙、磷水平对母马氮和钙的代谢均无显著影响(P＞0.05)。Ⅰ组的代谢能(ME)较Ⅱ和Ⅳ组分别增加7.95%和11.33%(P＜0.05)；Ⅰ组的能量沉积率较Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组分别提高9.30%、8.50%和12.10%(P＜0.05)；Ⅰ、Ⅲ和Ⅴ组的磷沉积量显著高于Ⅱ组(P＜0.05)，其中Ⅲ组在各组中最高，比Ⅱ组提高42.59%；Ⅰ和Ⅲ组的磷沉积率显著高于Ⅱ和Ⅳ组(P＜0.05)，其中Ⅰ组在各组中最高，分别比Ⅱ和Ⅳ组提高49.67%和46.32%；Ⅰ、Ⅲ和Ⅴ组的磷利用率显著高于Ⅱ组(P＜0.05)，分别比Ⅱ组提高17.74%、18.80%和16.79%。除氮代谢外，泌乳月份对其他营养物质的代谢均有显著影响(P＜0.05)，其中第4泌乳月的ME、能量沉积率、钙沉积量、钙沉积率、钙利用率、磷沉积量、磷沉积率均显著低于第3和第5泌乳月(P＜0.05)；第4泌乳月的可消化能利用率显著低于第5泌乳月(P＜0.05)；第4和第5泌乳月的磷利用率显著低于第3泌乳月(P＜0.05)。除磷代谢外，其他营养物质的代谢在饲粮与泌乳月份间均存在显著的互作效应(P＜0.05)。由此可见，本试验条件下，Ⅰ组饲粮的钙、磷水平已能满足泌乳期伊犁母马的需要。

2.4 饲粮钙、磷水平对泌乳期伊犁母马血浆中离子钙、磷及钙离子代谢相关激素水平的影响

由表 5可知，饲粮钙、磷水平对母马血浆中离子钙、磷、CT和BGP水平均无显著影响(P＞0.05)。Ⅲ组血浆中PTH水平显著高于Ⅳ和Ⅴ组(P＜0.05)，分别高70.61%和47.58%。泌乳月份对血浆中磷、PTH和CT水平均有显著影响(P＜0.05)，其中第3泌乳月的磷和CT水平最高，而PTH水平最低。饲粮与母马泌乳月份间对血浆中离子钙水平存在显著的互作效应(P＜0.05)。

2.5 饲粮钙、磷水平对泌乳期伊犁母马血浆中生殖激素水平的影响

由表 5可知，饲粮钙、磷水平对伊犁马血浆中PL、PRL、E₂、P和E₁水平均无显著影响(P＞0.05)，随饲粮钙、磷水平的增加，血浆中PRL水平呈升高趋势(P=0.059)。泌乳月份对血浆中PL、E₂、P和E₁水平有显著影响(P＜0.05)，其中第4泌乳月的PL水平最高，而E₁、E₂和P水平最低。饲粮与泌乳月份对血浆中PL、PRL和P水平存在显著的互作效应(P＜0.05)。

3 讨论 3.1 饲粮钙、磷水平对泌乳期伊犁马体重、胸围的影响

本试验阶段母马已完成配种工作，随着泌乳期的延长，妊娠期也随之延长，子宫和子宫内容物重量增加，而胎儿前期增长缓慢、中后期增长较快。已有研究显示，饲喂不同钙、磷水平的饲粮对水牛^[10]体重以及梅花鹿^[11]的生长无显著影响。本研究结果表明，饲粮钙、磷水平对母马体重和胸围无显著影响，这与上述前人研究结果相似，说明饲粮钙、磷水平并不是影响泌乳期和妊娠早期母畜体增重的关键因素。随着泌乳期的延长，母马的体重和胸围在逐渐增加，这是由于处于泌乳期的母马同时也处于妊娠期，其体重和胸围的增加应归因于妊娠期间母马有较强的贮存营养物质的能力及胎儿的发育。通过对猪的研究发现，母体增重以前期为主，至妊娠中、后期，由于胎儿发育超过母体增重，此时母体能量和营养物质的沉积量显著下降^[12]。

3.2 饲粮钙、磷水平对泌乳期伊犁母马营养物质消化代谢的影响

研究发现，饲粮中DM摄入量及营养物质的消化利用率等因素影响青年奶牛的生长发育速度，不同饲粮磷水平对DM、CP和NDF等的表观消化率均无显著影响^[13]。本研究结果表明，饲粮钙、磷水平对伊犁母马DM、OM和NDF的表观消化率无显著影响，但是以Ⅴ组的CP表观消化率最高，可能是由于Ⅴ组饲粮钙、磷水平改善了进入动物体内营养物质的平衡，有效减少了粪氮及尿氮排出量，增加了氮的消化及沉积，从而提高了氮的利用率^[14]。尚未见有关饲粮钙、磷水平对泌乳马能量消化代谢的报道，但本研究发现，Ⅰ组饲粮能量的表观消化率和马匹获得的ME较高，说明适宜的饲粮钙、磷水平有助于能量的消化和沉积。研究发现，随着饲粮钙、磷水平的升高，泌乳奶牛钙表观消化率显著下降，两者之间存在显著的线性负相关^[15]。本研究表明Ⅲ组饲粮的钙、磷表观消化率均较高，与上述结果存在一定的差异，其原因有待进一步研究。

Kegley等^[16]研究表明，肉牛饲喂高钙饲粮时氮表观消化率、氮沉积量及氮沉积率均下降；而Wheeler等^[i]报道饲粮钙水平对肉牛的CP表观消化率无显著影响，但高钙组较低钙组其钙、磷的沉积量高。本试验结果表明饲粮钙、磷水平对氮代谢无显著影响，这可能与试验动物种类、生理状态及钙、磷水平等有关。在母羊泌乳早期和妊娠末期提高饲粮钙、磷水平，其钙、磷的沉积量均增加，磷沉积量的增加可能与钙沉积量的增加有关^[18]。当水牛机体钙或磷出现负平衡时会动员骨骼钙或磷，而摄入过量钙或磷时钙、磷的利用率呈下降趋势^[10]。另外，由于母马个体对饲料的消化力差异、生理状态和产奶量多少不同，动物对CP、钙、磷等营养元素的消化利用受内源性循环代谢的影响亦较大。

3.3 饲粮钙、磷水平对泌乳期伊犁母马血浆中离子钙、磷及钙离子代谢相关激素水平的影响

血浆钙受PTH、CT和维生素D₃的精密调节。血液中钙水平发生变化时，骨盐可随时动员以维持血液钙水平正常，而当血液磷水平发生变化时，骨盐动员较慢^[19]。血液钙水平是调节PTH、CT分泌的最主要因素，以负反馈的方式进行调节，甲状旁腺主细胞对血液钙水平极为敏感，只要有轻微下降，PTH的分泌即可在1 min内迅速增加，使骨钙释放。研究表明，随着饲粮钙水平的升高，泌乳牛PTH的分泌量显著下降，而CT的分泌量则呈现明显的上升趋势^[10]。但另有研究表明，饲粮钙、磷水平对梅花鹿血清钙、磷和镁水平无显著影响^[11]。本试验结果发现，Ⅲ组母马血浆中PTH水平较高，而血浆离子钙、磷水平各组间均无显著差异，可能是PTH发挥了升血钙降血磷作用，以维持血钙和血磷的稳态。

BGP仅由成骨细胞合成和分泌，是骨骼形成和更新的标志物，骨更新率越快，血液骨钙素水平越高；此外，PTH下调BGP的合成^[20]。无论是水牛还是处于妊娠后期的伊犁马^[7]，饲粮钙、磷水平对血浆BGP水平均无显著影响。本研究也发现，饲粮钙、磷水平对泌乳期伊犁母马血浆BGP水平也无显著影响，这表明本试验中钙、磷的饲喂水平已足以满足母马对钙、磷的维持和生产需要，在PTH和BGP的双重作用下维持血钙和血磷的稳态。

3.4 饲粮钙、磷水平对泌乳期伊犁母马血浆中生殖激素水平的影响

矿物质和维生素的缺乏会导致动物乏情，从而导致不孕。饲粮缺钙时，可引起母畜骨质疏松，严重时可导致胎儿发育受阻。奶牛若缺磷可导致卵巢萎缩、屡配不孕，其原因是磷不足使得胡萝卜素转化为维生素A的能力降低^[12]。给母猪饲喂低钙、磷水平饲粮会减少窝产仔数kj 21，而为放牧奶牛补饲钙磷结合素可明显改善繁殖性能^[22]。有关饲粮钙、磷营养对泌乳马生殖激素水平影响的研究报道较少。研究发现，当饲粮钙水平在36.00~48.00 g/d、磷水平在26.30~34.30 g/d之间时，增加饲粮钙、磷水平使妊娠后期伊犁马血浆中E₁和E₂水平降低^[7]。然而，在本研究中并未发现这一现象。这与马匹所处生理阶段和对钙、磷需要的特点有密切关系。一方面，与妊娠后期相比，泌乳期母马血浆中E₁和E₂等雌激素水平急剧下降；另一方面，母马在泌乳期对钙、磷的需要量显著增加，大量离子钙以乳钙形式排出，导致泌乳期母马血液中离子钙的水平明显低于妊娠后期。此外，高钙具有加速E₁分解的作用^[23]，由于在泌乳期母马血浆中E₁等雌激素水平已经较低，因此对饲粮钙水平的响应不如妊娠期明显。

4 结论

① 饲粮钙、磷水平对泌乳期伊犁母马体重、胸围，DM、OM和NDF的表观消化率，氮和钙的代谢以及血浆中离子钙、磷、CT、BGP、PL、PRL、E₂、P和E₁水平均无显著影响。

② Ⅰ组饲粮(在第3泌乳月钙、磷饲喂水平分别为45.03和30.05 g/d，第4和第5泌乳月钙、磷饲喂水平为43.60和27.63 g/d)即可满足伊犁母马泌乳期的钙、磷需要。

③ 适宜的饲粮钙、磷水平有助于维持较高水平的能量和钙的表观消化率以及能量和磷的沉积和利用。