由于担心饲料中抗生素的添加可能导致病原菌对抗生素的耐药性和抗生素在动物产品中的残留，许多国家已经禁止了抗生素在饲料中的添加。例如，欧盟已经在2006年禁止在饲料中添加抗生素[1]。因此，寻找有效的抗生素替代产品以促进动物生长和健康具有重要意义。植物精油(essential oils，EO)和有机酸(organic acids，OA)具有良好的抗氧化和抗菌作用，可以改善动物肠道健康，促进营养物质的吸收，是目前常用的抗生素替代物[2-3]。研究表明，EO和OA可以改善动物生长性能，减少病原菌对肠道的黏附，改善肠道形态[4-6]。但EO和OA作为饲料添加剂应用于生产中存在以下问题：EO易挥发氧化、成分不明确及有刺激性；OA易刺激消化道黏膜、不能过胃等，以至于EO和OA无法发挥更好的功效。而经过微胶囊技术包被的EO和OA能够使营养成分在肠道中缓慢释放出来，同时减少刺激性气味，消除对动物适口性的影响，正好克服了未包被EO和OA的缺陷[7-8]。目前文献中对于微胶囊包被的EO和OA用于改善肉鸡生长性能的报道较少[9]，因此，本试验旨在研究不同剂量的有机酸和精油复合微囊包被物(microencapsulated organic acids and essential oils, MOAEO)对肉鸡生长性能、免疫器官指数、屠宰性能、肉品质和血清生化指标的影响，从而为MOAEO在肉鸡生产上的应用提供参考依据。
1 材料与方法 1.1 试验材料MOAEO由意大利Vetagro公司生产，其组分含量为：25%柠檬酸、16.7%山梨酸、1.7%百里香酚、1.0%香兰素，载体为脂肪(55.6%)。产品质量标准编号：SJK120058；生产批号：8902011。
1.2 试验设计试验选取体质健康的1日龄黄羽肉公鸡300只(购自莆田温氏家禽有限公司)，随机分成5个组，每个组5个重复，每个重复12只。Ⅰ组为对照组，饲喂基础饲粮；Ⅱ组为抗生素组，在基础饲粮中添加30 mg/kg杆菌肽锌和6 mg/kg硫酸黏杆菌素；Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组为试验组，分别在基础饲粮中添加150、200、250 mg/kg的MOAEO。基础饲粮根据我国《肉鸡饲养标准》(NY/T 33—2004) 配制，其组成及营养水平见表 1。试验鸡只每天人工喂料2次，自由采食、饮水。免疫、消毒按肉鸡常规程序进行。试验期70 d。在试验第21天和第70天时，每重复选取2只接近平均体重的肉鸡采血并屠宰采样。
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表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis) |
试验开始时记录每只鸡初生重，而后在第21天和第70天08:00逐只称重，称重前空腹12 h，计算各阶段平均日增重。以重复为单位，准确称量并记录各重复的日投料量、余料量及损耗量，计算各阶段平均日采食量，进而根据平均日采食量和平均日增重计算各阶段料重比。同时，每天记录死亡鸡只数，计算各阶段成活率。
1.3.2 免疫器官指数的测定试验鸡只在第21天和第70天屠宰后，取脾脏、胸腺和法氏囊，用滤纸吸去各器官上的血液，剥离脂肪并称重，按以下公式计算：
脾脏指数(%)=(脾脏重/活重)×100；
胸腺指数(%)=(胸腺重/活重)×100；
法氏囊指数(%)=(法氏囊重/活重)×100。
1.3.3 屠宰性能的测定试验鸡只在第70天屠宰后，将试验鸡放血屠宰，采用湿拔法拔毛，放血拔完羽毛后沥干水称屠体重；屠体重去气管、食道、嗉囊、肠脏、脾脏、胰脏、生殖器官，留下心脏、肝脏(去胆)、肺脏、肾脏、腺胃、肌胃(去内容物和角质膜)、腹脂称半净膛重；在半净膛基础上，去心脏、肝脏、腺胃、肌胃、腹脂及头、颈、脚的重量，称全净膛重；取腹脂、胸肌、腿肌，称重。按以下公式计算：
屠宰率(%)=(屠体重/宰前体重)×100；
半净膛率(%)=(半净膛重/宰前体重)×100；
全净膛率(%)=(全净膛重/宰前体重)×100；
腹脂率(%)=[腹脂重/(全净膛重+腹脂重)]×100；
胸肌率(%)=(两侧胸肌重/全净膛重)×100；
腿肌率(%)=(两侧腿肌重/全净膛重)×100。
1.3.4 血清生化指标的测定试验鸡只第21天和第70天08:00逐只称重后，用真空采血管进行翅静脉采血5 mL，倾斜静置，待血清渗出后，3 000 r/min离心15 min，取上清液，分装于EP管中，置于-80 ℃冻存。血清生化指标的测定采用南京建成生物工程研究所的试剂盒，测定指标包括血清总蛋白、白蛋白、尿酸含量，分别采用考马斯亮蓝法、溴甲酚绿法和比色法进行测定。
1.3.5 肉品质的测定试验鸡只在第70天屠宰后，测定左侧胸肌pH、剪切力、失水率，方法如下：测定胸肌内侧3个不同点45 min的pH(pH45 min)和24 h的pH(pH24 h)，按NY/T 1333—2007《畜禽肉质的测定》规定的方法进行测定；剪切力的测定按NY/T 1180—2006《肉嫩度的测定剪切力测定法》规定的方法进行测定；失水率的测定按NY/T 1333—2007《畜禽肉质的测定》规定的方法进行测定。
1.4 数据分析应用SPSS 16.0统计软件进行单因素方差分析，多重比较采用LSD法，试验结果用平均值±标准差(mean±SD)表示，以P < 0.05为差异显著。
2 结果 2.1 MOAEO对肉鸡生长性能的影响由表 2可知，在1~21日龄、22~70日龄和1~70日龄，各组间平均日采食量和成活率差异不显著(P > 0.05)。Ⅱ组1~21日龄的平均日增重显著高于Ⅰ组(P < 0.05)，各组间其他阶段的平均日增重差异不显著(P > 0.05)。Ⅳ组1~21日龄和1~70日龄的料重比显著低于Ⅰ组(P < 0.05)，各组间其他阶段的料重比差异不显著(P > 0.05)。
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表 2 MOAEO对肉鸡生长性能的影响 Table 2 Effects of microencapsulated essential oils and organic acids on growth performance of broilers |
由表 3可知，在21和70日龄，各组间胸腺指数和法氏囊指数差异不显著(P > 0.05)。Ⅳ组21和70日龄的脾脏指数显著高于Ⅰ组(P < 0.05)，Ⅴ组21日龄的脾脏指数也显著高于Ⅰ组(P < 0.05)。
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表 3 MOAEO对肉鸡免疫器官指数的影响 Table 3 Effects of microencapsulated essential oils and organic acids on immune organ indexes of broilers |
由表 4可知，70日龄时，各组间肉鸡的屠宰率、半净膛率、全净膛率、腹脂率差异不显著(P > 0.05)。Ⅳ组的胸肌率和腿肌率显著高于Ⅰ组(P < 0.05)。
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表 4 MOAEO对肉鸡屠宰性能的影响 Table 4 Effects of microencapsulated essential oils and organic acids on slaughter performance of broilers |
由表 5可知，Ⅲ组的胸肌pH45 min和pH24 h显著低于Ⅰ组(P < 0.05)。Ⅳ组的胸肌失水率显著低于Ⅰ组(P < 0.05)。各组间剪切力差异不显著(P < 0.05)。
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表 5 MOAEO对肉鸡胸肌肉品质的影响 Table 5 Effects of microencapsulated essential oils and organic acids on breast meat quality of broilers |
由表 6可知，在21和70日龄，各组间血清白蛋白含量差异不显著(P > 0.05)。Ⅱ和Ⅳ组70日龄的血清总蛋白含量显著高于Ⅰ组(P < 0.05)。Ⅴ组21日龄的血清尿酸含量显著低于Ⅰ组(P < 0.05)，Ⅱ和Ⅳ组70日龄的血清尿酸含量显著低于Ⅰ组(P < 0.05)。
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表 6 MOAEO对肉鸡血清生化指标的影响 Table 6 Effects of microencapsulated essential oils and organic acids on serum biochemical indexes of broilers |
本试验研究表明，在肉鸡饲粮中添加适量的MOAEO有助于降低肉鸡料重比，改善饲料转化率。一些研究也表明EO和OA复合物可以改善畜禽的平均日增重和饲料转化率，例如火鸡饲粮中添加百里香酚和苯甲酸提高了平均日增重和饲料转化率[1]；肉鸡饲粮中添加甲酸、丙酸、牛至油、丁香精油和茴香油改善了平均日增重和饲料转化率，而对平均日采食量没有显著影响[9]；断奶仔猪饲粮中添加柠檬酸、山梨酸、百里香酚和香兰素提高了平均日增重[10]。对肉仔鸡而言，EO和OA复合物(百里香酚、丁子香酚、苯甲酸)对公雏的效果要好于母雏，这可能与公雏的生长速度较快有关[11]。饲料转化率的改善可能与EO和OA促进营养物质在肠道的吸收有关[6]。微胶囊包被可以保护EO和OA免受光、储存、饲料加工和肠道各种理化因素的作用[7-8]，同时微胶囊包被具有在肠道缓慢和定点释放的作用，因此，微胶囊包被能够改善EO和OA稳定性，使之更持久的发挥作用，因此能增强EO和OA的效果[7, 12]，从而促进肉鸡生长性能。
3.2 MOAEO对肉鸡免疫器官指数的影响禽类免疫器官主要有胸腺、脾脏和法氏囊。胸腺、法氏囊为中枢免疫器官，脾脏参与全身的细胞免疫和体液免疫，它是家禽最大的外周免疫器官[13-14]。Rivas等[15]指出，雏鸡的免疫状态可用胸腺、脾脏和法氏囊的重量来评价。免疫器官是机体免疫功能的产生者和维持者，其发育、成熟及结构变化可使肉鸡的整体免疫机能增强[16]。本试验中，在肉鸡饲粮中添加MOAEO可提高肉鸡的脾脏指数。免疫器官指数的提高说明MOAEO能够刺激肉鸡的免疫应答，增强免疫功能，促使肉鸡整体免疫机能的增强。黄晓亮等[17]报道，在肉鸡饲粮中添加复合酸化剂(乳酸、柠檬酸和富马酸)可显著提高雏鸡脾脏指数。Walter等[18]研究表明，在生长猪饲粮中添加牛至EO可提高生长肥育猪的免疫功能。
3.3 MOAEO对肉鸡屠宰性能和胸肌肉品质的影响肉品质主要包括肉的化学组成、肉的组织学和组织化学特点、肌肉物理性质和感官品质等。肉的pH、系水力和嫩度等为肉的理化特性。其中肌肉pH与肌肉酸味呈正相关，即随着肌肉pH的下降，肌肉酸味越浓，进而影响肌肉品质，它是肌肉品质测定的最重要的指标之一[19]。系水力通常用肌肉失水率或滴水损失来衡量，指的是当肌肉受到外力作用时，保持水分的能力。系水力低意味水分流失，肌肉重量减少，容易造成经济损失。嫩度是评价肉品质的重要指标，常用剪切力来表示。
本研究发现，在屠宰性能方面，饲粮添加200 mg/kg MOAEO能显著提高70日龄肉鸡的胸肌率和腿肌率。金晓君等[20]和张文静等[21]研究也表明，OA或EO显著提高了肉鸡的胸肌率和腿肌率。朱晓磊等[22]研究表明，百里香EO对屠宰性能具有一定程度的改善作用。王盼盼等[23]研究表明，有机酸对肉鸡屠宰性能没有影响。以上结果的不同可能与所使用的EO、OA的种类和剂量有关。在肉品质方面，MOAEO降低了胸肌pH45 min、pH24 h和胸肌失水率，对肉品质具有一定的改善作用。一些研究也表明了相似的结果，刘大林等[24]研究表明，迷迭香EO可以降低胸肌失水率、剪切力和腿肌肉色，从而改善肉鸡肉品质。王盼盼等[25]研究表明，有机酸可以显著降低胸肌和腿肌的滴水损失，同时有降低肌肉剪切力的趋势。
3.4 MOAEO对肉鸡血清生化指标的影响血清中总蛋白和白蛋白含量可以反映动物机体营养、代谢及健康状况，当机体营养状况良好时，机体内的蛋白质合成增加，总蛋白和白蛋白含量升高。反之，蛋白质摄入量不足，可引起总蛋白和白蛋白含量下降[26]。本试验结果表明，在肉鸡饲粮中添加MOAEO和抗生素可以提高血清总蛋白含量，从而表明MOAEO和抗生素能促进蛋白质在肉鸡体内的沉积，从而促进肉鸡的生长。这与王盼盼等[23]的报道结果一致。尿酸是家禽体内蛋白质代谢的一个重要产物，它可直接反映动物机体的营养和蛋白质代谢状况，是测定机体内蛋白质代谢变化最敏感的外部指标[27]。尿酸在血液中溶解度很低，如果体内嘌呤代谢发生紊乱(产生过量尿酸，长期滞留体内)或者尿酸排泄受阻，其结果是血液中尿酸含量过高，形成高尿酸症，长期尿酸含量过高就容易引发痛风和关节炎[28]。本试验研究表明，MOAEO和抗生素能降低血清尿酸含量，说明MOAEO和抗生素能提高机体对蛋白质的利用率，促进蛋白质在机体内的沉积。其他研究也表明植物提取物[29]或者OA[30]可以降低肉鸡血清尿酸的含量。
4 结论MOAEO在一定程度上改善了肉鸡生长性能、免疫器官指数、屠宰性能、肌肉品质和血清生化指标，且适宜添加量为200 mg/kg。
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