水产动物饲料中，蛋白质是必需的核心营养物质，是相对最昂贵的原料，饲料蛋白质水平直接影响到饲料产品的价格和鱼类的生长。当饲料中蛋白质水平较低时，鱼类难以达到其最佳的生长速率^[1]，同时还会影响成活率(survival rate，SR)^[2]；当饲料中蛋白质水平过高时，鱼类会通过氧化脱氨基作用把过量的蛋白质分解代谢用于能量消耗，会产生较多的氨氮排泄物从而导致养殖水体污染加重，同时还会增加饲料成本，不利于鱼类的生长和生态的可持续发展^[3-5]。为了保证良好的养殖经济效益，人工配合饲料中的蛋白质水平必须根据养殖鱼类的实际蛋白质需求来进行合理的设定。目前，学者已经确定了鳅科鱼类中泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)^[6-7]对蛋白质的需求量。

台湾泥鳅(Taiwan loach)是我国台湾省改良的泥鳅新品种，隶属于鲤形目(Cypriniformes)，鳅科(Cobitidae)，花鳅亚科(Cobitinae)，副泥鳅属(Paramis gurnus)，其具体分类地位暂不明确^[8-9]。台湾泥鳅具有生长快速、抗病力强、养殖密度高、有个体大、养殖周期短、容易捕捞等优势^[10]，因此备受养殖户的欢迎和消费者青睐。近年来，台湾泥鳅引进大陆，已在各地推广养殖。2014年在广东省台湾泥鳅养殖水面已达万亩(1亩≈667 m²)^[11]。随着台湾泥鳅养殖规模括大，对配合饲料的质量要求也不断提高。目前有关台湾泥鳅的研究主要集中在人工繁殖^{[9, 12]}、早期发育^[9]及形态学^[13]上，有关台湾泥鳅对饲料主要营养物质需求量的研究尚未见报道，缺乏营养需求方面的研究资料。本试验旨在研究台湾泥鳅对饲料蛋白质的最适需求量，并探讨不同蛋白质水平饲料对台湾泥鳅生长性能、形体指标及体成分的影响，为台湾泥鳅人工配合饲料的科学配制提供理论依据。

1 材料与方法 1.1 试验饲料

以鱼粉、豆粕、菜籽粕等为蛋白质源，以大豆油为脂肪源，以玉米粉和次粉为糖源, 设计出蛋白质水平分别为25%、30%、35%、40%的4种等脂等能试验饲料。饲料原料经粉碎后过60目筛，按照配比称重并混合均匀后将粉料置于-4 ℃冰箱中保存备用。试验饲料组成及营养水平见表 1。

1.2 试验设计及饲养管理

试验台湾泥鳅购自荣昌祥光泥鳅养殖场，为同一批繁殖的幼鱼。购回后先用3%的食盐水消毒后于暂养池(暂养池尺寸1.2 m×0.5 m×0.8 m)中暂养7 d，选择健康、无伤病，体重为(8.57±0.35) g的台湾泥鳅720尾，随机分为4个组，每组3个重复，每个重复60尾鱼，以重复为单位分别放入12个水泥池(1.2 m×0.5 m×0.8 m)中，分别投喂蛋白质水平不同的4种试验饲料，每天按试验鱼体重3%~5%表观饱食投喂3次(07: 00、12: 00、17: 00)，投饵1 h后将残饵及粪便捞出烘干称重并记录，整个试验持续60 d。养殖期间，每天于17:00—19:00用曝气后的自来水换水1/3。每日监测水质、水温、试验鱼的死亡数量和摄食行为等。养殖期间水温20.0~24.0 ℃，pH 7.0~7.5，溶氧浓度≥ 6.0 mg/L。

1.3 样品采集及指标测定

试验结束后对试验鱼饥饿24 h，然后对每组进行计数、称重。分别在各组中随机取10尾试验鱼用50 mg/L的MS-222溶液麻醉，测定体长和体质量后解剖取出内脏及肝胰脏，分别称重用于计算肝体比(hepaticsomatic index，HSI)及脏体比(viscerasomatic index，VSI)；另外从每组中随机取5尾鱼，保存于-20 ℃冰箱，用于测定体成分。

饲料及全鱼、水分、粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分的含量测定参照AOAC(1995)^[14]的方法。粗蛋白质的含量采用凯氏定氮法测定；粗脂肪的含量采用索氏抽提法(乙醚为溶剂)测定；水分含量采用常压干燥法，在105 ℃条件下将样品烘干至恒重而测定；粗灰分含量采用将样品电炉上碳化后，在550 ℃马福炉中灼烧12 h后测定。

1.4 计算公式

式中：W₀、W_t分别为试验鱼的初始体质量和终末体质量(g)；F为饲料摄入量(g)；BP₁、BP₂分别为试验鱼初始体粗蛋白质含量和终末体粗蛋白质含量(%)；P为饲料粗蛋白质含量(%)；N_f、N_i分别为试验开始和结束时试验鱼的尾数；L为体长(cm)；W_v、W_h分别为试验鱼内脏团及肝脏的质量(g)。

1.5 数据统计

试验结果采用平均值±标准差(mean±SD)表示。采用SPSS 19.0统计软件中one-way ANOVA进行单因素方差分析，若差异显著，则采用Duncan氏法进行多重比较，差异显著水平为P＜0.05。

2 结果与分析 2.1 饲料蛋白质水平对台湾泥鳅生长性能的影响

饲料蛋白质水平对台湾泥鳅生长性能的影响见表 2。随着饲料蛋白质水平的增加，台湾泥鳅末重和增重率均呈先升高后趋于稳定的变化趋势，且均在饲料蛋白质水平为35%时达到最大，分别为31.22 g和259.87%。当饲料蛋白质水平从35%增加到40%，末重和增重率无显著变化(P＞0.05)。蛋白质效率、蛋白质沉积率和成活率均呈先升高后降低的变化趋势，且均在饲料蛋白质水平为35%时取得最大值，分别为2.77、44.73%和98.89%。饲料系数随着饲料蛋白质水平的升高呈先降低后趋于稳定的变化趋势，且在饲料蛋白质水平为40%时最低，为0.99。当饲料蛋白质水平从35%增加到40%，试验鱼饲料系数无显著变化(P＞0.05)。基于增重率和饲料系数的折线模拟结果(图 1、图 2)表明，台湾泥鳅达到最大增重率的饲料蛋白质水平分别为34.57%，饲料系数最低的饲料蛋白质水平为35.47%。以二次曲线来拟合饲料蛋白质水平(X)与蛋白质效率(Y₁)和蛋白质沉积率(Y₂)的关系(图 3、图 4)，得到回归方程方程：Y₁=-38X²+25.54X-1.583(R²=0.809 4)，Y₂=-724X²+502.12X-43.669(R²=0.863 6)，则蛋白质效率和蛋白质沉积率最高时饲料蛋白质水平分别为33.61%和34.68%。

2.2 饲料蛋白质水平对台湾泥鳅形体指标的影响

饲料蛋白质水平对台湾泥鳅形体指标的影响见表 3。随着饲料蛋白质水平的升高，台湾泥鳅脏体比和肝体比均呈先降低后趋于稳定的变化趋势。脏体比在饲料蛋白质水平为40%时最低，为6.50%；肝体比在饲料蛋白质水平为35%时最低，为2.54%。饲料蛋白质水平从35%增加到40%，脏体比和肝体比无显著变化(P＞0.05)。各组肥满度差异不显著(P＞0.05)。

2.3 饲料蛋白质水平对台湾泥鳅体成分的影响

饲料蛋白质水平对台湾泥鳅体成分的影响见表 4。随着饲料蛋白质水平的升高台湾泥鳅粗蛋白质含量呈先升高后趋于稳定的变化趋势，且在饲料蛋白质水平为35%时达到最高，为16.15%；体粗脂肪含量随饲料蛋白质水平的升高呈先降低后趋于稳定的变化趋势，且在蛋白质水平为40%时达到最低，为4.50%。饲料蛋白质水平从35%增加到40%，台湾泥鳅粗蛋白质和粗脂肪含量无显著变化(P＞0.05)。随着饲料蛋白质水平的升高，各试验组鱼体水分和粗灰分含量无显著变化(P＞0.05)。

3 讨论 3.1 饲料蛋白质水平对台湾泥鳅生长性能的影响

饲料蛋白质水平是影响鱼类生长的关键因素。增加蛋白质水平通常可以改善鱼类的生长，但过量的蛋白质会通过脱氨基作用作为能源消耗掉，由于目前蛋白质源价格较为昂贵，这就大大提高了饲料的成本^[15]。在本试验中台湾泥鳅末重、增重率、蛋白质沉积率和蛋白质效率均与饲料蛋白质有较强的相关性；随饲料蛋白质水平的升高，试验鱼末重和增重率均在呈先升高后趋于稳定的变化趋势，当饲料蛋白质水平继续升高至40%，二者变化不大。李彬等^[16]对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)的研究也发现，过高的饲料蛋白质水平不会完全用于鱼体生长。其原因可能是：第一，蛋白质是鱼体重要组成部分，适量增加饲料蛋白质能满足鱼体的营养需求，可促进鱼体生长，当饲料蛋白质水平达到鱼体所需最大值后，多余的蛋白质便作为能量被分解消耗。第二，由于本试验饲料是等能饲料，高蛋白质水平组饲料非蛋白质能较少，因此在高蛋白质水平组中大量蛋白质作为能源被消耗^[17]，因此不会再有促生长作用。Salhi等^[18]对克林雷氏鲶(Rhamdia quelen)、Chen等^[19]对草鱼研究也均有类似发现。但Papaparaskeva-Papoutsoglou等^[20]对鲻鱼(Mugil capito)、Tibbetts等^[21]对美洲鳗(Anguilla rostrata)、Chou等^[22]对军曹鱼(Rachycentron canadum)的研究均发现饲料蛋白质水平超过一定水平后，会降低鱼的生长性能，这与本试验结果存在一定差异。这可能与鱼的种类、规格、饲料能量水平等有关。可见，在一定范围内增加饲料蛋白质水平可促进鱼体生长，降低饲料系数；但当饲料蛋白质超过一定水平时，其蛋白质沉积率和蛋白质效率降低，同时蛋白质在分解代谢过程中会产生大量的氨氮代谢产物，污染水体，并且由于蛋白质原料价格昂贵，导致饲料成本增加。

本试验通过对增重率和饲料系数与饲料蛋白质的折线模型以及蛋白质沉积率和蛋白质效率的二次回归得出，平均体重为8.57 g的台湾泥鳅最佳蛋白质水平为33.61%~35.47%。叶文娟等^[6]对平均体重为1.72 g泥鳅研究发现，其最适生长的饲料蛋白质水平为45.5%。沈斌乾等^[7]用不同蛋白质水平饲料饲养4.7 g的泥鳅8周后发现，其饲料中最佳蛋白质水平为39.55%。本试验得出的台湾泥鳅最佳饲料蛋白质水平显著低于叶文娟等^[6]和沈斌乾等^[7]得出的泥鳅饲料最佳蛋白质水平，这可能与鱼的种类、规格和养殖水温有关。李彬等^[16]对草鱼研究发现，随着鱼体的生长，其蛋白质需求量逐渐降低。Chen等^[23]研究表明1.5 g左右的石斑鱼(Epinephelus malabaricus)的适宜的饲料蛋白质水平为54%，而20~30 g时则为40%~50%。有关研究表明，鱼类蛋白质需求量随水温升高而增加。在水温分别为22~26 ℃和26~33 ℃时，拟石首鱼(Sciaenops ocellatus)的蛋白质需求量分别为35%和44%^[24]。

本试验中折线模拟结果表明台湾泥鳅生长速度最快、饲料系数最低的饲料蛋白质水平为34.57%~35.47%;通过二次回归结果表明，台湾泥鳅蛋白质沉积率及蛋白质效率最高时饲料蛋白质水平分别为33.61%~34.68%，二者存在交叉，说明适量的饲料蛋白质不但能提高鱼体生长性能，还能提高蛋白质沉积率，提高鱼体粗蛋白质含量。

3.2 饲料蛋白质水平对台湾泥鳅形体指标的影响

在本试验中，随着饲料蛋白质水平的升高，台湾泥鳅脏体比和肝体比呈降低趋势。丁立云等^[25]对星斑川鲽幼鱼研究表明，肝体比和脏体比随着饲料蛋白质水平的增加呈现下降的趋势，与本试验结果一致。鱼类在摄食较低水平的饲料蛋白质时，摄进了较高水平的碳水化合物，使鱼类某些组织的脂肪合成酶的活性提高，促进了糖源转变为脂肪，并转运贮存于肝脏、腹腔内的脂肪组织等部位^[26-27]，从而增加内脏团和肝脏质量。但邱金海等^[28]对黄姑鱼(Nibea albiflora)、杨弘等^[29]对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)幼鱼研究均发现饲料蛋白质水平对鱼体肝体比和脏体比无显著影响，与本试验结果存在差异，这可能与鱼的种类、饲料营养成分等有关，具体原因有待进一步研究。本试验结果表明，台湾泥鳅摄食高蛋白质饲料后，可降低内脏团和肝脏比例，增加鱼体可食用部分比例。

3.3 饲料蛋白质水平对台湾泥鳅体成分的影响

大部分研究发现，随着饲料蛋白质水平的提高，鱼体粗蛋白质水平逐渐增加，鱼体粗脂肪含量逐渐降低^{[22, 30-31]}。田娟等^[32]对草鱼、陈壮等^[33]对鲈鱼(Lateolabrax japonicus)的研究均发现，全鱼粗蛋白质含量随着饲料蛋白质水平的升高而显著升高。陈建明等^[34]对青鱼(Mylopharngodon piceus)的研究发现，在摄食低蛋白质水平饲料后，全鱼粗脂肪含量较高。本试验中，随着饲料蛋白质水平的升高，台湾泥鳅全鱼粗蛋白质含量呈先升高后趋于稳定的变化趋势，粗脂肪呈先降低后趋于稳定的变化趋势，与上述研究结果基本一致。随着饲料中蛋白质水平的提高，鱼体对饲料蛋白质的摄入量也逐渐提高，更多摄入并消化吸收的蛋白质可作为鱼体的构建蛋白质，用于鱼体的组织修复和新的组织形成^[35]；马国军等^[36]对乌苏里拟鲿(Pseudobagrus ussuriensis)研究发现饲料蛋白质水平较低时，饲料的能量与蛋白质比值较高，鱼体摄食能量与蛋白质比值较高的饲料会提高肝脏中脂肪合成酶的活性，使未被分解代谢作为能源的糖类在肝细胞内转变为脂肪，并通过血液循环等转运到肝外贮存，促进了脂肪的沉积。因此适量增加饲料蛋白质水平能提高鱼体粗蛋白质含量，降低鱼体粗脂肪含量。

4 结论

① 适量增加饲料蛋白质可满足台湾泥鳅的的营养需求，促进生长，降低脏体比，增加可食用部分含量，增加饲料蛋白质的摄入量，摄入并消化吸收的蛋白质可作为鱼体的构件蛋白质，从而提高蛋白质沉积率，提高鱼体粗蛋白质含量。

② 饲料蛋白质水平过高，会降低台湾泥鳅的蛋白质沉积率和蛋白质效率。

③ 在本试验条件下，综合考虑生长性能指标和蛋白质利用情况，台湾泥鳅适宜饲料蛋白质水平为33.61%~35.47%。