2. 甘肃农业大学动物科学技术学院, 兰州 730070;
3. 河南农业大学牧医工程学院, 郑州 450002
2. College of Animal Science and Technology, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, China;
3. College of Animal Husbandry and Veterinary Science, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China
目前,非常规饲料的利用已经得到了广泛关注。据报道,我国每年生产的非常规饲料资源达10亿t以上,其中各类饼粕的年产量可达1 500万t以上,但用于饲料的只有30%左右[1],已经满足不了畜牧业生产发展的需要,同时,畜牧业规模化生产与环境污染的矛盾也日渐突出。因此,如何既合理利用资源促进畜牧业发展又能保护生态环境,成为当前急需破解的难题。非常规饲料为上述矛盾的解决做出了重要贡献。这些饼粕类饲料原料大多为工农业加工副产品,如棕榈仁粕、油茶籽粕、茶籽粕等由于价格低廉及营养成分丰富,不仅可以用作反刍动物饲料,而且可以为工厂处理这些副产品节约成本,减少环境污染[2]。但是油茶籽粕和茶籽粕中含有较高浓度的茶皂素、单宁、生物碱和黄酮等物质,其中茶皂素和单宁是油茶籽粕和茶籽粕中的主要抗营养因子,同时茶皂素具有苦涩味道,会一定程度上影响动物的适口性[3-5],在饲粮中添加后会产生什么样的效果不可预期。前人对于棕榈仁粕、油茶籽粕、茶籽粕等饲料原料的营养成分影响动物生产性能的研究较多,但是,关于其消化率的研究多是基于体外或半体内方法的基础上进行,对于其在体内消化率及血清生化指标的报道较少。因此,本试验研究添加棕榈仁粕、油茶籽粕或茶籽粕对断奶后犊牛生长性能、消化代谢和血清生化指标的影响,为非常规饲料在畜牧生产上的利用提供科学依据。
1 材料与方法 1.1 试验时间与地点本试验于2016年10月至2017年1月在河南农业大学许昌动物科学与动物医学实践教学基地进行。
1.2 试验材料本试验采用单因素试验设计。选用48头夏杂牛(夏洛莱♂×南阳黄牛♀)(46±3)日龄断奶公犊牛,平均体重为(79.5±0.79) kg,随机分成4组,每组12头。A、B、C、D组分别饲喂含豆粕、豆粕+棕榈仁粕、豆粕+油茶籽粕、豆粕+茶籽粕的4种全混合日粮,其中A组为对照组,B、C、D组通过调整干酒糟及其可溶物、麸皮、豆粕等的用量达到与A组饲粮等能等蛋白质。试验期104 d,其中预试期14 d,正试期90 d。基饲粮营养水平参照李岚捷等[6]的报道设置。试验饲粮组成及营养水平见表 1。
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表 1 试验饲粮组成及营养水平(干物质基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (DM basis) |
犊牛到场后清晨空腹称重,佩戴耳标和进行驱虫处理,再置于犊牛岛(4.5 m×1.5 m)内单栏饲养。给每头犊牛提供单独的水槽、食槽,每日08:00、16:00各饲喂1次,自由饮水。每周清理圈舍粪便和栏位消毒1次。按体重的3.5%干物质供给饲粮。
1.4 样品收集与测定 1.4.1 生长性能测定每天晨饲前收集每头牛的剩料量,计算干物质采食量(DMI);试验开始后分别在60、90、120和150日龄晨饲前单独称量每头牛体重并计算每组平均日增重(ADG)。
测定饲粮和剩料样品中干物质(DM)、粗蛋白质(CP)、粗脂肪(EE)、粗灰分(Ash)、钙(Ca)、磷(P)含量,参照张丽英[8]的方法进行。
1.4.2 粪、尿样品的采集与分析在犊牛90和150日龄时采用全收粪尿法用消化代谢笼进行2次消化代谢试验。每次试验期6 d,预试期2 d,正试期4 d,每组选取6头牛,记录每头犊牛每天采食量、总排粪量和总排尿量。将每天收集的牛粪便样品混匀后取100 g,加10%的硫酸50 mL固氮;将每天收集的牛尿样品混匀后取100 mL,加10%的硫酸10 mL固氮。所有样品-20 ℃冷冻保存待测。
粪样:CP含量用凯氏定氮仪测定,NDF和ADF含量以ANKOM 200 Fiber Analyzer测定,总能(GE)采用PARR-6400全自动氧弹量热仪测定,同时测定样品的DM、Ash含量,计算有机物(OM)含量[8]。
尿样:尿氮用凯氏定氮仪测定,尿能采用PARR-6400全自动氧弹量热仪测定。
按以下公式计算能量利用率:
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在试验开始时,及每30 d晨饲前每组以体重接近组平均体重为原则选取6头牛,颈静脉采血于10 mL的真空离心管(不含抗凝剂)中,4 000 r/min离心30 min,收集上层血清于2个1.5 mL的离心管中,将血清冷藏在-20 ℃冰柜中待测。
血清生化指标采用标准试剂盒(北京金海科隅生物科技发展有限公司)测定。采用比色法(科华ZY KHB-1280全自动生化仪)对血清中的葡萄糖(GLU)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、总蛋白(TP)、尿素氮(UN)和甘油三酯(TG)浓度进行测定;用酶免法(ST-360全自动酶标仪)测定生长激素(GH)、瘦素(LEP)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和β-羟丁酸(β-HB)浓度。
1.5 数据统计分析试验数据采用SAS 9.2统计处理软件MIXED和GLM程序处理数据,结果差异显著则用LSD法和Duncan氏法进行多重比较检验,P<0.05为差异显著,0.05≤P<0.10为有显著差异的趋势。
2 结果与分析 2.1 生长性能由表 2可知,试验全期(61~150日龄)B组ADG和DMI显著高于C、D组(P<0.05),与A组差异不显著(P>0.05);D组料重比显著高于其他3组(P<0.05)。B组ADG(61~90日龄、91~120日龄、121~150日龄)和DMI(61~90日龄、91~120日龄)显著高于C、D组(P<0.05),与A组差异不显著(P>0.05);B组DMI(121~150日龄)显著高于其他3组(P<0.05);D组料重比(61~90日龄、91~120日龄、121~150日龄)显著高于A、B组(P<0.05),与C组差异不显著(P>0.05)。
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表 2 含棕榈仁粕、油茶籽粕或茶籽粕饲粮对断奶犊牛生长性能的影响 Table 2 Effects of diets containing palm kernel meal, oil tea seed meal and tea seed meal on growth performance of weaned calves |
试验全期犊牛ADG、DMI和料重比均受日龄影响显著(P<0.05);ADG不受组别与日龄交互作用的影响(P>0.05),DMI和料重比受组别与日龄交互作用影响显著(P<0.05)。
2.2 营养物质的表观消化率由表 3可知,犊牛90日龄时,各组各营养物质的表观消化率均无显著差异(P>0.05)。150日龄时,A、B、C组采食量显著高于D组(P<0.05);A、B组粪排出量显著高于D组(P<0.05),与C组无显著差异(P>0.05);A组干物质的表观消化率显著高于C、D组(P<0.05),与B组无显著差异(P>0.05);A组中性洗涤纤维的表观消化率显著高于B、C、D组(P<0.05);A组酸性洗涤纤维显著高于B、D组(P<0.05),与C组无显著差异(P>0.05),C组显著高于D组(P<0.05)。90和150日龄,各组间代谢体重、采食量/代谢体重和有机物表观消化率均无显著差异(P>0.05)。
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表 3 含棕榈仁粕、油茶籽粕或茶籽粕饲粮对断奶犊营养物质采食和表观消化率的影响 Table 3 Effects of diets containing palm kernel meal, oil tea seed meal and tea seed meal on nutrient intake and apparent digestibility of weaned calves |
由表 4可知,90日龄时,各组各项能量指标均无显著差异(P>0.05)。150日龄时,A、B、C组的食入GE分别高出D组36.14%、35.54%、25.30%, 差异显著(P<0.05);A和C组的粪能分别高出D组27.08%和29.17%,差异显著(P<0.05),与B组无显著差异(P>0.05);A、B、C组的甲烷能分别高出D组38.46%、20.08%、38.46%,差异显著(P<0.05);A、B、C组的总能代谢率分别高出D组9.25%、12.89%、7.20%,差异显著(P<0.05);A、B、C组的消化能代谢率分别高出D组5.44%、8.18%、6.57%,差异显著(P<0.05);各组间的尿能和总能消化率无显著差异(P>0.05)。
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表 4 含棕榈仁粕、油茶籽粕或茶籽粕饲粮对断奶犊牛能量利用率的影响 Table 4 Effects of diets containing palm kernel meal, oil tea seed meal and tea seed meal on energy utilization rate of weaned calves |
由表 5可知,90日龄时,各组犊牛的氮代谢指标无显著差异(P>0.05)。150日龄时,A、B组的食入氮显著高于C和D组(P<0.05),C组显著高于D组(P<0.05);A、C组的粪氮显著高于D组(P<0.05),与B组无显著差异(P>0.05);B组氮沉积显著高于C、D组(P<0.05),与A组差异不显著(P>0.05);B组的氮沉积率显著高于D组(P<0.05),与A、C组差异不显著(P>0.05);A、B组的消化氮显著高于C和D组(P<0.05),C组显著高于D组(P<0.05);B组的氮表观消化率显著高于C、D组(P<0.05),与A组无显著差异(P>0.05);各组间的尿氮差异不显著(P>0.05)。
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表 5 含棕榈仁粕、油茶籽粕或茶籽粕饲粮对断奶犊牛氮代谢的影响 Table 5 Effects of diets containing palm kernel meal, oil tea seed meal and tea seed meal on nitrogen metabolism of weaned calves |
由表 6可知,各组血清中ALB、GLB、β-HB、GH、LEP和IGF-Ⅰ浓度无显著差异(P>0.05)。B组血清GLU浓度平均值显著高于A和C组(P<0.05),与D组差异不显著(P>0.05);A组血清TG浓度显著低于D组(P<0.05),与其他各组无显著差异(P>0.05);C组血清UN浓度显著高于A、B、D组(P<0.05)。
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表 6 含棕榈仁粕、油茶籽粕或茶籽粕饲粮对断奶犊牛血清生化指标的影响 Table 6 Effects of diets containing palm kernel meal, oil tea seed meal and tea seed meal on serum biochemical indexes of weaned calves |
90和150日龄时,B组血清GLU浓度显著高于A和C组(P<0.05),与D组差异不显著(P>0.05)。90日龄时,B和C组血清TP浓度显著高于A组(P<0.05),与D组无显著差异(P>0.05)。90日龄时,A组血清UN浓度显著低于B、C、D组(P<0.05),B、C和D组之间无显著差异(P>0.05)。120日龄时,C组血清TG浓度显著低于D组(P<0.05),与其他各组差异不显著(P>0.05)。150日龄时,A组血清GLB浓度显著高于C组(P<0.05),与B和D组差异不显著(P>0.05)。
犊牛血清GLU和UN浓度显著受到日龄的影响(P<0.05),但是日龄对血清TG、TP、ALB、GLB、β-HB、GH、LEP和IGF-Ⅰ浓度无显著影响(P>0.05)。
犊牛血清中GLU、TP、GLB和UN浓度显著受组别与日龄交互作用的影响(P<0.05),而血清TG、ALB、β-HB、GH、LEP和IGH-Ⅰ均不受组别与日龄交互作用的显著影响(P>0.05)。
3 讨论 3.1 含棕榈仁粕、油茶籽粕或茶籽粕饲粮对犊牛生长性能的影响生产实践中,动物的生产性能是反映动物生长状况的重要指标之一。有研究表明,在瑞士阉犊牛饲粮中添加1.5、2.5和3.5 kg/d棕榈仁粕时,不同棕榈仁粕添加水平间牛的ADG和DMI均没有显著差异,但均高于饲喂纯牧草的对照组[9]。本试验中,添加棕榈仁粕饲粮的组采食量显著高于添加油茶籽粕或茶籽粕饲粮的组,添加棕榈仁粕后采食量提高的原因可能是棕榈仁粕的消化速度高于油茶籽粕和茶籽粕。有研究表明,与饲粮的消化率本身相比,反刍动物的釆食量与饲粮的消化速度的相关性更高[10]。另外,棕榈仁粕无毒副作用,带有类似巧克力的味道,具有良好的适口性,这也是导致采食量提高的原因之一[11]。DMI与犊牛ADG息息相关,本试验中,饲粮添加棕榈仁粕犊牛ADG最高,达到了1.21 kg/d。本试验中,添加棕榈仁粕饲粮的组有机物等养分消化率高于添加油茶籽粕或茶籽粕饲粮的组,这也是该组ADG最高的原因之一。本试验促进犊牛生长的结果与赖景涛等[12]的研究结果一致,但与Carvalho等[13]结果不太一致,可能是因为饲粮组成和营养水平不同,也可能是因为棕榈仁粕产地不同,营养成分存在差异,同时试验动物品种、性别和年龄也是造成结果出现差异的原因。
3.2 含棕榈仁粕、油茶籽粕或茶籽粕饲粮对犊牛消化代谢的影响DM和OM的采食与消化可以衡量机体健康状况和对饲粮的利用效率,并且衡量胃肠道结构和机能的发育[14-15]。本试验中,豆粕型饲粮和添加棕榈仁粕饲粮的2组的DM表观消化率无显著差异,且显著高于其他2组,各组间的OM表观消化率有出现差异显著的趋势,豆粕型饲粮和添加棕榈仁粕饲粮的2组高于其他2组,表明在肉犊牛饲粮中棕榈仁粕可部分替代豆粕。棕榈仁粕中较高的粗纤维含量改变了微生物区系,或是刺激胃肠道蠕动和粪便排泄,提高新陈代谢速率,引起犊牛对营养成分的需求增加,DM表观消化率提高。NDF和ADF是犊牛瘤胃纤维分解菌等的作用底物,经发酵后产生的挥发性脂肪酸又可为犊牛提供大量能量。因此,NDF和ADF的消化程度可反映瘤胃消化机能发育的优劣[16-17]。本试验中,饲喂豆粕型饲粮的犊牛NDF和ADF表观消化率都显著高于其他3组犊牛,其原因可能是棕榈仁粕、油茶籽粕和茶籽粕中存在一些抗营养因子,其中棕榈仁粕中主要含有甘露聚糖等非淀粉多糖[18],油茶籽粕中含有较高浓度的差皂素、单宁等,在一定程度上影响动物的适口性[4],茶籽粕中含有的茶皂素味苦,适口性差,且产生毒害作用,添加过量会影响动物的采食量和生产性能[19]。这些抗营养因子的存在降低了对NDF和ADF的采食量,使其通过胃肠道的速度加快,NDF与ADF与纤维降解菌的作用时间缩短;此外,这些抗营养因子的存在降低了饲粮能量浓度,减慢了断奶犊牛新陈代谢速率,降低了瘤胃对挥发性脂肪酸的吸收,纤维分解菌对NDF和ADF的降解速率减慢,从而引起消化率的降低[20]。
3.3 含棕榈仁粕、油茶籽粕或茶籽粕饲粮对犊牛能量利用率的影响饲粮提供的能量超出维持需要的部分将用于不同形式的生产。幼龄生长动物主要将能量贮存于新生的组织蛋白质中,而成年动物则会在脂肪中存积更多的能量,泌乳动物则把饲粮能量转化为乳成分中的能量[20]。本试验阶段的犊牛对能量利用主要集中在生长。研究报道,要提高能量的利用效率关键是提高能量的代谢率[21]。本试验4组的总能消化率维持在72%左右,受组别的影响较小,与Khan等[22]报道结果(71.7%)相近。本试验中,随粪尿及甲烷排出的能量约占41%,总能代谢率和消化能代谢率平均值分别为57.11%和78.99%,消化能和代谢能变化规律同总能摄入量,可能是因为经90 d的饲养后,犊牛由于采食不同饲粮胃肠道已发生改变,从而影响了能量的利用率。
3.4 含棕榈仁粕、油茶籽粕或茶籽粕饲粮对犊牛氮代谢的影响能量维持机体生命活动,蛋白质则是构成机体的重要成分,两者相互作用,共同促进机体生长发育。反刍动物对氮的利用主要是通过氮代谢途径[14],氮源主要来自未被瘤胃消化吸收的食物蛋白质和脱落的肠黏膜细胞及肠道细菌等所含的氮。本试验4组饲粮蛋白质水平相近,由于150日龄饲喂豆粕型饲粮和添加棕榈仁粕饲粮的2组食入氮较高,消化氮和氮表观消化率都显著高于饲喂添加油茶籽粕或茶籽粕饲粮的2组。其原因可能是,油茶籽粕和茶籽粕中的茶皂素、单宁等抗营养因子影响犊牛适口性,造成采食氮减少,瘤胃微生物缺少氮源,从而影响其数量,经瘤胃微生物作用进入小肠的蛋白质量降低,引起氮的表观消化率显著降低。而且饲粮中能量与蛋白质含量应保持合适的比例,不当的比例也会降低犊牛对营养物质的利用效率[23]。本试验中,沉积氮和氮沉积率以添加棕榈仁粕饲粮的组最高,且与豆粕型饲粮的组差异不显著。可能是部分棕榈仁粕替代豆粕,其较高的纤维、糖含量和略低的蛋白质含量平衡了饲粮营养,更适合该阶段犊牛瘤胃及瘤胃微生物的生长发育,使经瘤胃微生物作用进入小肠的蛋白质增多,氮沉积率上升,用于合成体蛋白质含量增加,这与61~150日龄较高的ADG相对应。
3.5 含棕榈仁粕、油茶籽粕或茶籽粕饲粮对犊牛血清生化指标的影响血清生化指标能综合反映家畜营养满足、新陈代谢、体内外环境平衡、机体健康生长及其生产性能[24]。血清尿素氮浓度可以准确地反映饲粮氨基酸的平衡情况和动物体内蛋白质的代谢情况,代表了动物机体短期的蛋白质营养状态[25],一般与体内氮沉积、蛋白质或氨基酸的利用率呈显著的负相关关系[26]。对反刍动物来讲,瘤胃内的氨氮浓度在氨的释放速度与饲粮中的各种含氮物质在瘤胃内的降解速度以及瘤胃微生物利用氨合成菌体蛋白的速度达到平衡时,会保持一个相对稳定的值,这时血液中的氨浓度会降低,血清尿素氮的浓度也随之降低[27]。本试验中,添加棕榈仁粕饲粮和豆粕型饲粮的2组血清UN浓度显著降低,表明添加棕榈仁粕饲粮和豆粕型饲粮的氨基酸平衡状况或氮沉积优于其他2组,蛋白质的利用率高,与犊牛氮表观消化率、氮沉积率和增重趋势一致。GLU是动物机体能量平衡的重要指标,其变化是动物机体对糖吸收、转运、代谢的反映,血液GLU浓度升高表明脂肪的沉积和蛋白质的合成增强[28-29]。血液中TP是ALB和GLB之和,其中TP反映机体蛋白质吸收和代谢状况,ALB具有作为营养物质的载体、维持血浆渗透压、提供机体蛋白质等功能,GLB浓度可反映机体的免疫能力[30]。TG是反映机体脂肪沉积的重要指标,当脂类消化吸收不好时,血清中总胆固醇酯和TG浓度均下降。本试验结果显示,添加棕榈仁粕饲粮的组相比其他3组显著提高血清GLU和TP浓度,与犊牛消化代谢和增重趋势一致,可能由于棕榈仁粕不含有毒性的抗营养因子,促进采食量,使得肉犊牛摄入的可消化养分相对较高,促进了GLU和TP的生成,从而促进了脂肪的沉积和蛋白质的生成,利于犊牛生长。
IGF-Ⅰ经肝脏分泌进入血液后与其结合蛋白质结合,然后运输到其靶器官(如肌肉、骨骼等)上发挥作用。GH与IGF-Ⅰ构成GH-IGF-Ⅰ轴共同调节机体的生长发育,GH可刺激肝脏生成IGF-Ⅰ,同时IGF-Ⅰ对GH的生成有一定的抑制作用[31]。但在本试验中GH和IGF-Ⅰ之间并未呈现相互影响的关系,并且各组之间未出现显著性差异。Breier[32]和Louveau[33]研究发现,动物的营养状况在调节机体GH和IGF-Ⅰ循环上起重要作用,随着动物采食蛋白质的增加,血清中GH波峰频率也相应增加。本试验中,各组间血清GH和IGF-Ⅰ浓度没有出现显著差异,说明饲喂4种饼粕类饲粮对犊牛GH分泌没有显著影响,但这与棕榈仁粕组显著提高犊牛生长性能的结果不符,还有待进一步研究。LEP的本质是由脂肪细胞分泌的一种蛋白质,主要作用是调节能量的平衡,进入血液后参与糖、脂肪和能量等的代谢,同时对其他激素的分泌也有一定的影响。本试验中,各组之间的血清LEP浓度无显著差异。本试验中多项激素指标难以形成规律,且没有出现显著差异,可能与环境、动物年龄及临时应激状态有关,不同饼粕类饲粮对犊牛激素水平的影响还有待进一步研究。
4 结论含5%棕榈仁粕的饲粮可以满足断奶夏杂牛对营养物质的需求,采食该饲粮不但可以使肉犊牛保持较高的ADG,而且此饲粮易消化利用,采食后相关血清生化指标均在正常范围内,并未影响犊牛健康;而含5%茶籽粕和油茶籽粕的饲粮因降低犊牛采食量而影响体重增长,而且此饲粮不易消化利用。
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