2. 江苏省东辛农场有限公司, 连云港 222000;
3. 北京英惠尔生物技术有限公司, 北京 100083
2. Jiangsu Dongxin Farm Co., Ltd., Lianyungang 222000, China;
3. Beijing Enhalor Biotechnology Co., Ltd., Beijing 100083, China
近年来，随着人们对食品安全问题的关注及抗生素禁用范围的扩大，酵母培养物(yeast culture，YC)作为一种安全环保的饲料添加剂，越来越受到生产者和学者的重视，已在反刍动物养殖中得到了广泛应用和研究[1-2]。其中，YC在奶牛上的研究较为广泛，具有提高奶牛生长性能、改善饲料消化率、调节瘤胃内环境和提高免疫功能等作用[2]，但在肉牛和肉羊中的研究相对比较少，并且研究结果差异较大。研究表明，YC在提高育肥牛生长性能方面作用有限[3-6]，对屠宰性能没有显著影响，但在改善肉品质方面具有一定的作用[6-7]。如Swyers等[6]研究指出，饲粮中添加56 g/d YC在改善肉品质方面具有一定的积极作用，可以使牛肉分级指数得到提高。Geng等[7]研究得出，饲粮中添加50 g/d YC对育肥牛采食量、增重及屠宰性能没有显著影响，但可以改善牛肉的嫩度，提升牛肉的风味。
目前，关于YC在肉羊上的研究应用效果报道不一。寇慧娟等[8]在羔羊饲粮中添加2%的YC，发现YC能够提高羔羊的干物质采食量(DMI)和平均日增重(ADG)，并且在高精料饲粮中效果更为显著。Malekkhahi等[9]发现，饲粮中添加4 g/d YC对育肥羊的干物质采食量和生长性能没有显著影响。闫佰鹏等[10]以育肥湖羊为研究对象，在高淀粉饲粮中添加1%的YC，发现试验各组的末重、平均日增重、干物质采食量和料重比(F/G)均差异不显著，YC对屠宰率和GR值没有显著影响，但增加了眼肌面积。关于YC的适宜添加水平，在奶牛[11-12]和肉牛[3]中的研究表明，高添加水平的YC没有表现出剂量的效应；但Özsoy等[13]在育肥期山羊饲粮中分别添加0、1.0%、3.0%和4.5%的YC，结果表明，添加水平为4.5%时山羊生长性能较好。以上研究表明，YC在育肥羊上的研究差异较大，关于YC的作用效果和适宜添加水平尚不明确。此外，关于不同添加水平YC对育肥湖羊肉用性能的研究鲜有报道。因此，本试验旨在研究相同营养水平条件下，饲粮添加不同水平YC对育肥湖羊生长性能、屠宰性能、内脏器官发育及肉品质的影响，确定其适宜的添加水平，为YC在肉羊生产中的应用提供理论研究和生产实践依据。
1 材料与方法 1.1 试验时间和地点试验于2018年4—8月在泰州西来原生态农业有限公司进行。
1.2 试验材料YC由北京某生物技术有限公司提供，产品成分含量：粗蛋白质≥15%，粗灰分≤8%，甘露聚糖≥1%，水分≤10%。
1.3 试验设计采用单因素试验设计，选取3~4月龄体重约38 kg的育肥湖羊公羊120只，随机分为4组，每组5个重复，每个重复6只羊。试验分为育肥前期(1~60 d)和育肥后期(61~90 d)2个阶段，育肥前期和育肥后期基础饲粮精粗比分别为60 : 40和75 : 25。育肥全期(1~90 d)对照组均饲喂基础饲粮；育肥前期，试验组在基础饲粮中分别添加5(A组)、10(B组)、20 g/d(C组)的YC；育肥后期，试验组在基础饲粮中分别添加10(A组)、20(B组)、40 g/d(C组)的YC。预试期7 d，正试期90 d。
1.4 基础饲粮根据肉羊日增重为300 g的营养需要量[14-18]标准配制基础饲粮，在羊场自行配制成全混合日粮(TMR)。基础饲粮组成及营养水平见表 1。
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表 1 基础饲粮组成及营养水平(干物质基础) Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (DM basis) |
试验场地为封闭式羊圈，试验开始前对圈舍、食槽等进行冲洗和消毒，提前打好耳号、驱虫并按正常免疫程序做好免疫。试验全期采用TMR形式进行饲喂，每天饲喂2次(07:00和16:00)，且在每天07:00将提前称量好的YC撒在TMR中，混合均匀后饲喂给试验羊。正试期开始后，每天收集1次剩料，计算羊只在此阶段的平均采食量。试验全期自由饮水，按照自由采食的要求，以剩料占投料量的10%调整后续的投料量，保证均为自由采食。
1.6 测定指标及方法 1.6.1 生长性能每天饲喂前，记录投料量和前1天剩料量，每天收集1次饲粮和剩料，计算干物质含量，用于计算整个试验期各组羊的干物质采食量。每30 d对试验羊进行1次称重，计算每个阶段的平均日增重和料重比。
1.6.2 屠宰性能和内脏器官发育试验结束时，每组选取5只羊进行屠宰，用于测定其屠宰性能、内脏器官重量和肉品质指标。待宰试验羊禁食12 h，屠宰前称重，颈静脉放血屠宰。屠宰后去头、蹄、内脏，剥皮后称量胴体重和内脏各器官重量。将瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃分离，清除内容物并冲洗干净后称重。用硫酸纸描绘倒数第1与第2肋骨之间脊椎上眼肌(背最长肌)的轮廓，待测眼肌面积；用游标卡尺测量在第12与第13肋骨之间、距离背脊中线11 cm处的组织厚度，即GR值。主要指标计算公式如下：
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pH测定：使用便携式pH计测定屠宰24 h后背最长肌的pH，分别测定背最长肌上、中、下3个部位的pH，取平均值为该样品的pH。
滴水损失率：屠宰后取眼肌2块，规格为5 cm×3 cm×2 cm，称取初样重，之后分别悬挂于一次性纸杯中，保持密闭且肉样不与杯壁接触，置于4 ℃的冰箱中24 h后取出，用滤纸吸干表面水分并称取末样重。滴水损失率计算公式如下：
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肉色指标：现场采用柯尼卡美能达CR-10色差计测定每只羊相同部位背最长肌的亮度(L*)、红度(a*)和黄度(b*)值，每个样品测定3次后取平均值作为最终结果。
1.7 数据处理分析采用SAS 9.1统计软件的ANOVA过程进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，差异显著则用Duncan氏法进行多重比较检验，以P＜0.05为差异显著性判断标准，0.05≤P＜0.10为有趋势的显著性判断标准。
2 结果 2.1 饲粮添加不同水平YC对育肥湖羊生长性能的影响由表 2可知，试验羊在初始体重差异不显著(P＞0.05)的情况下，在育肥前期，饲粮添加不同水平YC对育肥湖羊的60 d体重及平均日增重均无显著影响(P＞0.05)，但A组料重比有低于对照组的趋势(P=0.077)；在育肥后期，A组平均日增重显著高于对照组(P＜0.05)，A组料重比显著低于对照组和C组(P＜0.05)，B组料重比显著低于对照组(P＜0.05)；在育肥全期，A组平均日增重显著高于对照组(P＜0.05)，料重比显著低于对照组(P＜0.05)。此外，在育肥后期，A组干物质采食量有高于其他3组的趋势(P=0.080)；在育肥前期和育肥全期，各组之间干物质采食量均无显著差异(P＞0.05)。
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表 2 饲粮添加不同水平YC对育肥湖羊生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary different supplemental levels of YC on growth performance of fattening Hu sheep |
由表 3可知，各组之间宰前活重、胴体重、屠宰率、眼肌面积、GR值差异均不显著(P＞0.05)。
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表 3 饲粮添加不同水平YC对育肥湖羊屠宰性能的影响 Table 3 Effects of dietary different supplemental levels of YC on slaughter performance of fattening Hu sheep |
由表 4可知，A组肾脏重量显著高于对照组(P＜0.05)，但肾脏占宰前活重比例与对照组差异不显著(P＞0.05)。各组之间心脏、肝脏、肺脏、脾脏重量及其占宰前活重比例差异均不显著(P＞0.05)。
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表 4 饲粮添加不同水平YC对育肥湖羊内脏器官发育的影响 Table 4 Effects of dietary different supplemental levels of YC on visceral organ development of fattening Hu sheep |
由表 5可知，各组之间瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃重量及其占宰前活重比例差异均不显著(P＞0.05)。
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表 5 饲粮添加不同水平YC对育肥湖羊复胃发育的影响 Table 5 Effects of dietary different supplemental levels of YC on complex stomach development of fattening Hu sheep |
由表 6可知，各组之间肌肉pH、滴水损失率、肉色差异均不显著(P＞0.05)。
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表 6 饲粮添加不同水平YC对育肥湖羊肉品质的影响 Table 6 Effects of dietary different supplemental levels of YC on meat quality of fattening Hu sheep |
YC作为一种安全环保的饲料添加剂，具有提高饲料消化率、促进采食和提高生长性能的作用，已在畜禽养殖中得到了广泛应用和研究。在反刍动物体内、体外进行的试验均表明，YC能够提高饲粮在瘤胃内的消化率，促进饲粮中有机物和纤维的降解[20-22]。但由于YC生产工艺不同，产品质量存在差异，目前在实际应用中尚没有统一标准的添加量，不同管理模式以及不同的饲粮组成，导致其在反刍动物上的使用效果并不一致。本试验采用育肥中常用的营养模式，即高精料饲粮条件下，在育肥前期精粗比为60 : 40的饲粮中，各组育肥羊平均日增重在200 g/d左右，干物质采食量在1 500 g/d左右，饲粮中添加YC没有提高育肥湖羊的平均日增重和干物质采食量，仅在料重比方面有降低的趋势。这与那日苏等[23]研究在育肥羊饲粮中添加10 g/d YC对其平均日增重没有影响的结果一致。与之类似的，耿春银[24]在杂交育肥牛精粗比为60 : 40的饲粮中添加50 g/d YC，发现YC对肉牛的平均日采食量、平均日增重及料重比均无显著影响。
Dias等[22]研究发现，在高精料饲粮或低精料向高精料饲粮过渡期间，YC对反刍动物生长性能和维持瘤胃功能方面效果更为显著。本试验中，育肥后期饲粮精粗比由60 : 40调整为75 : 25后，A组有提高育肥后期干物质采食量的趋势，且平均日增重显著提高，料重比显著降低。这与Tripathi等[25]研究精粗比为75 : 25的饲粮条件下，酿酒YC可以显著提高羔羊平均日增重的结果一致。研究表明，当饲粮能量水平低时(如粗饲料为主的饲粮)，干物质采食量随能量水平增加而增加；但当饲粮能量水平高时(如以高精料为主的饲粮)，干物质采食量随能量水平增加而降低[26]。但在本试验以高精料饲喂的研究中，A组育肥湖羊在育肥后期更换为高精料饲粮时，干物质采食量有高于其他3组的趋势，并且相比育肥前期干物质采食量并没有降低，这说明添加YC有促进采食的作用。这与寇慧娟等[8]的研究结果一致；同时，Bach等[27]研究也表明YC可以通过影响反刍动物的采食行为，如通过增加采食频率等来抑制采食后瘤胃pH的降低，从而保持瘤胃的健康状态，达到最佳的生长性能。
从育肥全期看，低添加水平的YC提高了育肥羊生长性能，高添加水平却没有表现出显著的效果，这与在奶牛[11-12]和肉牛[3]中添加高水平的YC并没有表现出剂量效应的结果相似，其原因可能是与YC中的β-葡聚糖有关。据报道，YC中的酵母细胞壁的有效成分主要由β-葡聚糖(30%~34%)、甘露寡糖(30%)、糖蛋白(22.0%)和几丁质组成[28]。在本试验所使用的YC中甘露寡糖的含量≥1%。通过添加剂量估算，A、B、C组中β-葡聚糖含量在育肥前期分别为27.6、55.6和111.1 mg/kg，试验后期分别为55.6、111.1和222.2 mg/kg。魏占虎等[29]研究表明，在71~91日龄的羔羊饲粮中分别添加37.5、75.0、112.5和150.0 mg/kg的β-葡聚糖，以37.5 mg/kg添加组的平均日增重最高，75.0 mg/kg添加组次之，但两者之间差异不显著；且周怿等[30]研究表明，在犊牛饲粮中添加100和200 mg/kg的β-葡聚糖反而降低了犊牛的生长性能。这说明饲粮中YC添加水平过高有可能会导致提供的β-葡聚糖含量过高，从而对动物机体健康产生不利影响。这可能是因为过量饲喂YC，其中的活性成分可能会刺激白细胞的吞噬作用，增加活性氧、炎症介质和细胞因子的产生[31]，但其具体原因还需进一步研究证实。
3.2 饲粮添加不同水平YC对育肥湖羊屠宰性能及肉品质的影响屠宰性能和肉品质分别是生产者和消费者关注的重要指标。本试验通过检测屠宰率、眼肌面积和GR值等指标研究了饲粮添加不同水平YC对屠宰性能的影响，通过检测肌肉pH、肉色、滴水损失率等指标研究了饲粮添加不同水平YC对肉品质的影响，结果发现，育肥湖羊屠宰率为52.62%~53.98%，饲粮添加不同水平YC对育肥湖羊的屠宰性能和肉品质指标均无显著影响。其他研究者也发现了类似的现象。闫佰鹏等[10]以育肥湖羊为研究对象，发现在饲粮中添加1%的YC对其屠宰率、GR值均无显著影响，但提高了眼肌面积；耿春银[24]研究表明，在杂交育肥牛饲粮中添加50 g/d YC，对屠宰性能和肉品质均无显著影响；黄文明等[32]在育肥牛饲粮中添加YC对牛肉的肉色和滴水损失率无显著影响。综合前人及本试验结果，表明当羔羊达到一定日龄阶段时，其胴体及肉品质达到稳定的生理状态[33]，饲粮添加YC对屠宰性能和肉品质无改善作用。
3.3 饲粮添加不同水平YC对育肥湖羊内脏器官及复胃发育的影响内脏器官的重量和指数在一定程度上反映了动物机体的机能状况，对于理论研究和生产实践有重要的意义[34-35]。在本试验中，各组试验羊的内脏器官重量占宰前活重比例均在正常数值范围内。各组之间心脏、肝脏、脾脏、肺脏重量及其占宰前活重比例均没有显著差异，表明饲粮中添加不同水平YC未影响育肥湖羊内脏器官的正常生长发育，符合动物具有调控内脏器官与机体生长发育相适应的本能。肾脏的重要功能是通过尿液的形式排泄代谢废物，本试验发现A组肾脏重量显著提高，但肾脏重量占宰前活重比例并没有显著提高。可能是随着干物质采食量的升高，被消化的营养物质增多，代谢废物增加，使得肾脏质量不断增加以满足这种不平衡，肾脏快速生长，达到与体重相适应的比例，才能承担起新陈代谢作用，具体原因有待于进一步研究证实。
瘤胃是反刍动物充分发挥生长性能，提高饲料转化效率的基础。反刍动物从出生到成年，瘤胃重量和体积发生了巨大变化，这与饲粮组成息息相关。精饲料发酵产生的挥发性脂肪酸(VFA)等物质的化学刺激促进瘤胃上皮细胞增殖，这种细胞水平的增殖是瘤胃体积和重量变化的基础[36]。在本试验中，各组之间瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃重量及其占宰前活重比例均没有显著差异，说明在营养水平一致的饲粮条件下，饲粮中添加YC未影响复胃的正常生长发育，羊只的胃部发育与机体的增长相协调。
4 结论本试验条件下，在精粗比为75 : 25高精料饲粮中添加10 g/d YC，可提高育肥后期湖羊的生长性能。饲粮添加不同水平YC对育肥湖羊屠宰性能、肉品质及内脏器官和复胃发育均无显著影响。
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