锌、锰都是动物体内的必需微量元素，能够促进动物骨骼发育，参与机体多种酶的合成。动物体内的锌、锰含量都很低，不能满足动物对锌、锰的利用，而肉鸡生长周期短，代谢速度快，相对于其他动物对锌、锰的需求量更高，很容易造成锌、锰的缺乏。植物性饲料中含有的植酸具有很强的螯合能力，与锌、锰结合形成难以解离的络合物，影响肉鸡对锌、锰的吸收。研究发现，植酸酶在肉鸡的回肠可酶解植酸复合物，释放植酸结合的矿物元素，改善肉鸡对营养物质的利用率，节约饲料资源^[1]。因此，本试验在不同锌、锰水平饲粮中添加植酸酶，通过对肉鸡生长性能、血清生化指标以及血清中锌、锰含量的测定，探究饲粮中添加植酸酶是否能提高锌、锰的吸收利用率，从而降低饲粮中锌、锰的添加量，以达到节约饲料原料的目的。

1 材料与方法 1.1 试验材料

植酸酶活性为10 000 FTY/g；饲料级一水硫酸锌，含量为34.5%；饲料级一水硫酸锰，含量为31.8%。

1.2 试验设计与基础饲粮

试验采用2×3双因子试验设计，分别在基础饲粮中添加2个水平的植酸酶(0和2 000 FTY/kg)和3个水平的锌+锰组合，具体试验设计见表 1。

选择14日龄体重相近、健康的爱拔益加(AA)肉鸡696只，随机分为6个组，每组12个重复，每个重复10只鸡(公母各占1/2)。基础饲粮按14~28日龄和29~42日龄2阶段配制，基础饲粮组成及营养水平见表 2。按照试验设计，分别在基础饲粮中添加不同水平的植酸酶和锌、锰组合，配制6种试验饲粮，各组试验饲粮中锌、锰含量的实测值见表 3。

1.3 饲养管理

试验在辽宁省新民市前当堡镇新农丰肉鸡养殖场进行。采用3层笼养方式进行饲养，试验期间按照养殖场管理模式进行饲养，自由采食和饮水，常规免疫程序进行免疫。试验期为28 d。

1.4 测定指标和方法 1.4.1 生长性能指标

每天观察肉鸡日常生长情况，并记录死亡鸡只数和淘汰鸡只数。分别在28和42日龄以重复为单位对空腹12 h以上肉鸡进行称重，并记录每个重复的饲料消耗量，计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)和死淘率。

1.4.2 血清生化指标

试验结束早上空腹称重后，每个重复抓取接近平均体重的2只鸡进行颈静脉采血，室温倾斜静置数小时待血清析出，3 000 r/min离心10 min，分离血清，置于-20 ℃冰箱保存待测。血清乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase, LDH)、磷酸肌酸激酶(creatine phosphate kinase, CPK)、谷丙转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase, ALT)、谷草转氨酶(glutamic oxalacetic transaminase, AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, AKP)活性和尿素氮(urea nitrogen, UN)含量的测定工作委托试验鸡场测试中心完成。采用黄嘌呤氧化酶法测定血清总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase, T-SOD)和锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase, Mn-SOD)活性。采用火焰原子吸收光谱法和石墨法测定血清中锌和锰含量。

1.5 数据整理

采用Excel 2010软件进行数据整理，采用SPSS 17.0统计分析软件中的GLM法对数据进行双因子方差分析，主效应包括锌+锰效应、植酸酶效应及二者间的交互效应，并进行组间单因素方差分析(one-way ANOVA)，对差异显著者作Duncan氏法多重比较检验。P < 0.05为差异显著，P < 0.01为差异极显著，0.05≤P < 0.10为有趋势。

2 结果 2.1 饲粮中锌、锰和植酸酶水平对肉鸡生长性能的影响

饲粮中锌、锰和植酸酶水平对14~28日龄肉鸡生长性能的影响见表 4。多重比较显示，Ⅵ组肉鸡的平均日增重显著高于Ⅱ和Ⅲ组(P < 0.05)，Ⅳ组显著高于Ⅲ组(P < 0.05)，其他组间差异不显著(P>0.05)。Ⅵ组肉鸡的料重比显著低于Ⅱ和Ⅲ组(P < 0.05)，其他组间差异不显著(P>0.05)。Ⅵ组肉鸡的平均日增重最高且料重比最低。主效应分析显示，饲粮中添加植酸酶极显著提高肉鸡的平均日增重(P=0.001)，显著降低肉鸡的料重比(P=0.022)。植酸酶和锌、锰的交互作用具有提高肉鸡的平均日采食量(P=0.068)和降低料重比的趋势(P=0.062)，但对肉鸡其他生长性能指标未产生显著影响(P>0.05)。

饲粮中锌、锰和植酸酶水平对29~42日龄肉鸡生长性能的影响见表 5。多重比较显示，Ⅴ和Ⅵ组肉鸡的平均日增重显著高于Ⅱ组(P < 0.05)，其他组间差异不显著(P>0.05)。Ⅴ组肉鸡的平均日采食量显著高于Ⅱ和Ⅲ组(P < 0.05)，Ⅵ组显著高于Ⅱ组(P < 0.05)，其他组间差异不显著(P>0.05)。主效应分析显示，饲粮中添加植酸酶显著提高了肉鸡的平均日增重(P=0.038)，极显著提高了肉鸡的平均日采食量(P=0.001)。植酸酶和锌、锰的交互作用对肉鸡的生长性能指标均未产生显著影响(P>0.05)。

2.2 饲粮中锌、锰和植酸酶水平对肉鸡血清生化指标的影响

饲粮中锌、锰和植酸酶水平对肉鸡血清生化指标的影响见表 6。多重比较显示，Ⅴ和Ⅵ组肉鸡血清中T-SOD、Mn-SOD活性显著高于Ⅲ组(P < 0.05)，其他组间差异不显著(P>0.05)。Ⅵ组肉鸡血清中ALT活性显著高于Ⅲ组(P < 0.05)，其他组间差异不显著(P>0.05)。Ⅳ组肉鸡血清中AST活性显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ组(P < 0.05)，其他组间差异不显著(P>0.05)。Ⅰ组肉鸡血清中CPK活性显著低于其他各组(P < 0.05)。Ⅴ组肉鸡血清中UN含量显著低于Ⅳ组(P < 0.05)，其他组间差异不显著(P>0.05)。各组间肉鸡血清中LDH和AKP活性差异不显著(P>0.05)。主效应分析显示，饲粮中添加植酸酶显著提高了肉鸡血清中ALT和T-SOD活性(P=0.027、P=0.037)，极显著提高了血清中AST、CPK和Mn-SOD的活性(P=0.003、P=0.001、P=0.007)；饲粮中添加锌、锰显著降低了肉鸡血清中UN含量(P=0.041)；植酸酶和锌、锰的交互作用显著影响了肉鸡血清中CPK活性(P=0.010)，极显著影响了血清中T-SOD活性(P=0.006)。

2.3 饲粮中锌、锰和植酸酶水平对肉鸡血清中锌、锰含量的影响

饲粮中锌、锰和植酸酶水平对肉鸡血清中锌、锰含量的影响见表 7。多重比较显示，Ⅵ组肉鸡血清中锌含量显著高于Ⅰ和Ⅱ组(P < 0.05)，其他组间差异不显著(P>0.05)。各组间肉鸡血清中锰含量差异不显著(P>0.05)。主效应分析显示，饲粮中添加锌、锰显著提高了肉鸡血清中锌含量(P=0.033)，饲粮中添加植酸酶显著提高了肉鸡血清中锌含量(P=0.047)。植酸酶和锌、锰的交互作用对肉鸡血清中锌、锰含量均未产生显著影响(P>0.05)。

3 讨论 3.1 饲粮中锌、锰和植酸酶水平对肉鸡生长性能的影响

生长性能可以反映动物生长发育的好坏。植物性饲料中含有的植酸进入动物的胃肠道后，与锌、锰等微量元素络合成植酸盐复合物，影响动物的吸收利用。饲粮中添加植酸酶，可将植酸盐复合物水解为肌醇和磷酸单酯酶，使络合的锌、锰等微量元素以无机离子态的形式游离出来，提高微量元素的生物利用率，促进动物生长发育，提高生长性能。马芳^[2]研究发现，饲粮不同锌水平对公、母AA肉鸡的生长性能无显著影响；对于3~6周龄的肉鸡，饲粮中额外添加80 mg/kg锌，肉鸡生长速度更快。陈仲建等^[3]研究发现，饲粮中锰水平对4~6周龄肉鸡的料重比有显著影响，额外加100 mg/kg锰的试验组料重比最低。而本试验结果表明，饲粮中添加锌、锰对各阶段肉鸡生长性能没有影响显著。Ao等^[4]、黄艳玲等^[5]、赵润梅等^[6]以及冯江^[7]研究结果均显示，随着饲粮锌添加水平的增加，肉鸡的体增重和饲料转化率得到改善，只是获得最佳生长性能时的饲粮锌添加水平差异较大。因此，饲粮中添加适宜水平的锌、锰有助于提高动物的生长性能。Attia等^[8]研究发现，在雏鸡饲粮中添加500 U/kg微生物来源植酸酶极显著提高了雏鸡的生长性能。王明发^[9]在不同锌源及锌水平的肉鸡饲粮中添加微生物植酸酶，结果显示植酸酶极显著提高了肉鸡各阶段体增重，植酸酶和锌水平对2~3周龄肉鸡的体增重和料重比存在显著交互效应。在本试验中，饲粮中添加植酸酶显著提高了14~28日龄和29~42日龄肉鸡的平均日增重，显著降低了14~28日龄肉鸡的料重比。植酸酶和锌、锰的交互作用具有降低14~28日龄肉鸡料重比的趋势。与上述报道结果基本一致。本试验中，饲粮中锌、锰添加水平分别为90、100 mg/kg组的肉鸡平均日增重最高、料重比最低。而王明发^[9]研究发现饲粮添加60 mg/kg锌时2~3周龄肉鸡体增重最高，而对于4~6周龄、2~6周龄的肉鸡，饲粮添加120 mg/kg锌时体增重最高。这与本试验的研究结果有一定区别，可能是由于鸡的品种和锌源不同对肉鸡的生长性能的影响不同，也可能和饲养周期有关。

3.2 饲粮中锌、锰和植酸酶水平对肉鸡血清中T-SOD和Mn-SOD活性的影响

超氧化物歧化酶(SOD)是一种含有金属元素的活性蛋白酶，广泛分布于各种生物体内，是生物体内清除自由基的首要物质。按其所含金属辅基不同可分为铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)、Mn-SOD和铁超氧化物歧化酶(Fe-SOD)。在动物营养研究中，Mn-SOD活性是反映锰营养状况的敏感指标。陈寒青等^[10]研究表明，不同锰源及锰水平对产蛋母鸡血清中Mn-SOD活性无显著影响。王夕国^[11]研究发现，饲粮中锰水平对水貂血清中T-SOD和Mn-SOD活性影响不显著。本试验结果表明，随着饲粮中锌、锰水平的升高，血清中T-SOD和Mn-SOD活性有升高的趋势。添加植酸酶组的血清中T-SOD和Mn-SOD活性都高于未加植酸酶组，说明饲粮中添加植酸酶提高了肉鸡血清中抗氧化酶活性，减缓动物机体细胞的老化。

3.3 饲粮中锌、锰和植酸酶水平对肉鸡血清ALT、AST、LDH、CPK、AKP活性和UN的影响

ALT和AST是维持机体正常代谢的2种重要的转氨酶，不仅可以反映肝脏和心脏功能的状况，而且可在一定程度上反映体内蛋白质的代谢情况。CPK参与体内的能量代谢，血清中CPK活性升高，说明组织中有细胞坏死，是临床上反映心血管疾病的重要指标。刘泽辉^[12]研究发现，不同锌源和锌水平对肉鸡血清中ALT、AST和CPK活性均没有显著影响，也没有出现规律性的变化。王淑梅等^[13]研究发现，饲粮中添加锰不影响育成期蛋鸭血清AST和ALT活性，血清AST和ALT活性在饲粮中添加30 mg/kg锰时最高。本试验结果与上述研究结果一致，饲粮中添加锌、锰对肉鸡血清中ALT、AST和CPK活性无显著影响，说明饲粮中添加锌、锰不会对肉鸡肝脏及心脏功能造成损害。添加植酸酶可使络合的锌、锰等微量元素以无机离子态的形式游离出来，提高了肉鸡对微量元素的生物利用率，肉鸡血清中ALT和AST活性显著增加，这2种酶活性的提高有利于蛋白质代谢率的提高，然而这2种酶活性过高就意味着肝脏和心脏可能有损害，还需要进一步的试验进行验证。本试验中，饲粮中添加植酸酶极显著提高了肉鸡血清中CPK活性，促进肉鸡体内的能量代谢，动物血清中CPK活性的变化代表肌组织可能发生变化或者受损，需要进一步的试验验证。

锌是LDH的激活因子，血清中的LDH活性会随着饲粮中锌水平的变化而变化。在本试验中，饲粮中添加植酸酶和锌、锰对肉鸡血清中LDH活性均无显著影响，并且不存在交互作用，与马芳^[2]报道的饲粮中锌水平对肉鸡血清中LDH活性无显著影响的结果基本一致。本试验中，肉鸡血清中LDH活性在锌、锰添加水平分别为90、100 mg/kg时最高。

血清中UN含量是衡量氨基酸平衡和蛋白质利用率的敏感指标。本试验结果表明，饲粮中添加锌锰显著降低了肉鸡血清中UN含量。血清中UN含量越低，表明蛋白质的合成率越高，机体对氮的利用率越好。因此，饲粮中锌、锰水平的增加促进了机体蛋白质的合成，提高了肉鸡的生长性能。

AKP是反映骨骼生长好坏的典型指标。研究发现，AKP是典型的含锌酶，除了锌以外，锰也是AKP的激活因子^[1]。Yang等^[14]研究发现，饲粮中添加不同水平锌对蛋鸭血清中AKP活性无显著影响。王淑梅等^[13]研究发现，饲粮中添加不同水平锰对蛋鸭血清中AKP活性无显著影响，血清中AKP活性随饲粮锰添加水平的升高有升高的趋势，饲粮中添加90 mg/kg锰组血清中AKP活性最高。本试验结果与上述报道基本一致，饲粮中添加植酸酶和锌、锰对肉鸡血清中AKP活性没有显著影响，肉鸡血清中AKP活性随着饲粮中锌、锰水平的升高而升高，且血清中AKP活性在锌、锰添加水平分别为90、100 mg/kg时最高。

3.4 饲粮中锌、锰和植酸酶水平对肉鸡血清中锌、锰含量的影响

周宁等^[15]研究发现，随着饲粮中锌水平增加，水貂血清中锌含量增加。冯玉兰等^[16]研究表明，饲粮中添加500 U/kg的植酸酶可显著提高肉鸡血清中锌含量。上述研究与本试验结果相一致，饲粮中添加植酸酶和锌、锰均能显著提高肉鸡血清中锌含量，血清中锌含量随着锌、锰添加水平的升高而升高，但对血清中锰含量没有显著影响。马元山等^[17]研究发现，饲粮中锰添加水平为0~120 mg/kg时，肉鸡血清中锰含量逐渐升高。研究结果出现差异的原因可能与锰的来源及添加水平不同有关。

4 结论

① 饲粮中添加植酸酶显著提高了14~28日龄和29~42日龄肉鸡的平均日增重，显著降低14~28日龄肉鸡的料重比。

② 饲粮中添加植酸酶提高肉鸡血清中抗氧化酶活性，饲粮中添加锌、锰可提高粗蛋白质的利用率。

③ 饲粮中添加植酸酶并没有达到降低锌、锰添加量的目的。