2. 天津市广源畜禽养殖有限公司, 天津 301824
2. Tianjin Guangyuan Livestock and Poultry Breeding Co., Ltd., Tianjin 301824, China
多不饱和脂肪酸(PUFAs)分为2个系列：ω-6 PUFAs和ω-3 PUFAs。PUFAs具有两亲性，拥有亲水性头部和疏水性尾部。因为这种结构和其他特性，使PUFAs具有以下生物作用：维持细胞膜流动性[1]，抑制炎症反应如克罗恩病[2]，降低炎症反应初期出现情绪症状的风险[3]，降低患2型糖尿病(T2D)的风险[4]，调节免疫功能[5]，降低血液甘油三酯(TG)、胆固醇含量以及降血压、降血小板聚集[6]。ω-6 PUFAs和ω-3 PUFAs属于必需脂肪酸，人体不能合成，需要从食物中获得。从20世纪90年代开始，PUFAs逐渐成为功能性食品研究的重点。而且PUFAs在医药保健、食品、化工等众多领域都有广泛的应用和关注[7]。
随着人们生活水平的提高，患心血管疾病的病人数量每年都不断攀升，2012年我国心血管病患者在2.9亿人左右，是2002年1.8倍，以中老年患者居多[8]。有研究证实，动物通过消化代谢过程将食物中PUFAs转化为自身的PUFAs[9]，而且膳食ω-6 PUFAs和ω-3 PUFAs水平与代谢综合征(MetS)之间关心密切[10]。长期摄入ω-6/ω-3值高的食物易导致肥胖、机体代谢紊乱，而且患心脑血管疾病概率也会增大。而居民膳食中的ω-6 PUFAs与ω-3 PUFAs比例失调已成常态。我国城市和农村居民膳食ω-6/ω-3值分别为7.6和8.0，远高于中国营养学会推荐膳食适宜摄入值(6.67)[11-12]。因此，调节膳食中ω-6/ω-3值对于现代居民的饮食起居意义重大。鸡肉、鸡蛋作为廉价的蛋白质来源，越来越受广大居民的青睐，已然成为我国居民饮食不可或缺的部分[13]。而雏鸡时期是鸡生长发育过程中的重要阶段，所以研究不同来源PUFAs对雏鸡机体ω-6/ω-3值的调节效果及对生长性能、血清生化指标的影响意义重大。目前，大多数研究主要集中于某一种油脂对机体的影响，对于不同油脂对机体的影响报道较少[14]。因此，本研究选取鱼油、紫苏籽油、亚麻籽油这3种富含ω-3的油脂进行试验，旨在对比不同来源PUFAs对机体ω-6/ω-3值的调节效果及对生长性能、内脏指数、养分表观代谢率及血清生化指标的影响。
1 材料与方法 1.1 试验设计选取1日龄雌性罗斯(Ross)褐壳蛋鸡200只，随机分成4组，每组5个重复，每个重复10只鸡。各组之间体重差异不显著(P < 0.05)。为了保证摄入能量一致，基础饲粮(含2.96%豆油)中添加油脂的质量占比均为1.5%。为了控制摄入ω-6/ω-3值一致，用豆油分别与鱼油、紫苏籽油、亚麻籽油按一定比例混合，将试验饲粮的ω-6/ω-3值均调到6.00。对照组(C组)在基础饲粮中添加1.500%豆油，试验组分别在基础饲粮中添加1.155%鱼油+0.345%豆油(Ⅰ组)、0.495%亚麻籽油+1.005%豆油(Ⅱ组)和0.525%紫苏籽油+0.975%豆油(Ⅲ组)。试验饲粮组成及营养水平见表 1。
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表 1 试验饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) |
雏鸡自由采食，充足饮水，按正常免疫程序进行免疫接种。试验期42 d。在试验开始前随机选取3只初始雏鸡，测其机体ω-6/ω-3值，试验期每天记录饲料添加量，每周结料，每2周测定雏鸡体重、管围、胫长。在饲养试验结束前1周收集粪便和饲粮用于测定养分代谢率，饲养试验结束后每组随机选取5只鸡进行屠宰，翅下采血，分离血清，用于测定血清生化指标；称取内脏，用于计算内脏指数；将屠宰后的整只雏鸡机体烘干磨粉，用于测定机体ω-6/ω-3值。
1.3 脂肪酸甲脂化与气相色谱测定参照GB 5009.168—2016对豆油、鱼油、亚麻籽油、紫苏籽油、饲粮风干样品和雏鸡机体冻干粉进行脂肪提取、皂化和甲脂化，制备的样液装入样品瓶，采用Agilent 7890B气相色谱仪(美国)分析脂肪酸含量和组成[15]。
色谱柱为SP-2560(100 m×250 μm×0.2 μm)，升温程序为140 ℃保持5 min，4 ℃/min升温至220 ℃，0.5 ℃/min升温至230 ℃，4 ℃/min升温至240 ℃并保持15 min。进样量为1 μL，分流比为50 : 1，进样口温度为250 ℃，检测器温度为280 ℃。载气为高纯氦气，流量为1 mL/min，分流比为50 : 1。
1.4 生长性能测定试验正式开始后，每周结料，每2周测定雏鸡体重、管围、胫长，统计数据计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)、料重比(F/G)。在饲养试验结束前1周收集粪便和饲粮用内源指示剂法测消化率，饲养试验结束后每组随机选取5只鸡进行屠宰，称取内脏用于计算内脏指数。相关指标计算公式如下：
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内源指示剂法计算饲粮养分(干物质、有机物、粗蛋白质、钙、磷、粗纤维、粗脂肪)表观代谢率公式为：
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饲养试验结束后每组随机选取5只鸡，翅下采血，用10 mL离心管收集血液。倾斜放置室温30 min后，4 ℃、3 000 r/min离心10 min，分离的血清分装后立即置于-80 ℃冰箱保存备用。
血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性及尿素(UREA)、总蛋白(TP)、免疫球蛋白G(IgG)、TG、总胆固醇(TCHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量均使用相应的试剂盒用GLAMOUR 3000全自动生化分析仪(美国Molecular Devices)测定。试剂盒均购自中生北控生物科技股份有限公司。
1.6 数据处理与统计分析试验数据采用Excel 2018进行整理，并采用SPSS 25.0软件进行统计分析。试验结果统计分析采用单因素方差分析(one-way ANOVA)，并对组间差异显著的指标采用Duncan氏法进行多重比较，P < 0.05表示差异显著。
2 结果 2.1 不同种类油脂对雏鸡机体ω-6/ω-3值的影响如表 2所示，C组雏鸡机体ω-6/ω-3值显著高于初始及Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组雏鸡(P < 0.05)，而Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组雏鸡机体ω-6/ω-3值显著低于初始雏鸡(P < 0.05)。
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表 2 不同种类油脂对雏鸡机体ω-6/ω-3值的影响 Table 2 Effects of different kinds of oil on body ω-6/ω-3 value of chickens |
如表 3所示，各组之间平均日增重、平均日采食量、胫长、管围均无显著差异(P>0.05)。Ⅰ组料重比与C组差异不显著(P>0.05)，但显著高于Ⅱ组、Ⅲ组(P < 0.05)；Ⅱ组料重比与Ⅲ组差异不显著(P>0.05)，但显著低于C组、Ⅰ组(P < 0.05)。Ⅱ组体斜长显著高于Ⅰ组、Ⅲ组(P < 0.05)，与C组差异不显著(P>0.05)。
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表 3 不同种类油脂对雏鸡生长性能的影响 Table 3 Effects of different kinds of oil on growth performance of chickens |
如表 4所示，各组之间心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胃、法氏囊指数以及肠道总长无显著差异(P>0.05)。Ⅱ组、Ⅲ组肺脏指数显著低于C组(P < 0.05)。
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表 4 不同种类油脂对雏鸡内脏指数的影响 Table 4 Effects of different kinds of oil on visceral indexes of chickens |
如表 5所示，各组之间有机物、粗蛋白质、钙、磷、粗纤维、粗脂肪表观代谢率均无显著差异(P>0.05)。C组干物质表观代谢率最低，显著低于其他各组(P < 0.05)；Ⅲ组干物质表观代谢率最高，显著高于C组和Ⅱ组(P < 0.05)。
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表 5 不同种类油脂对雏鸡养分表观代谢率的影响 Table 5 Effects of different kinds of oil on nutrient apparent metabolic rates of chickens |
如表 6所示，各组之间血清ALT、AST、ALP活性及UREA、TP、IgG和TG含量均无显著差异(P>0.05)。Ⅲ组血清TCHO含量最高，显著高于其他各组(P < 0.05)。Ⅰ组血清LDL-C含量最低，显著低于其他各组(P < 0.05)。
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表 6 不同种类油脂对雏鸡血清生化指标的影响 Table 6 Effects of different kinds of oil on serum biochemical indexes of chickens |
研究表明，饲粮中不饱和脂肪酸只有极少部分能转化到反刍动物的肉、奶中，主要是饲粮中脂肪酸被瘤胃微生物氢化、水解，再重新合成各种脂肪酸[16-17]。而单胃动物代谢不饱和脂肪酸的方式与反刍动物存在很大差异，鸡代谢脂肪酸主要是靠肠道吸收及肠道菌群代谢的相互作用[18]。本试验结果显示，饲粮中添加豆油会显著增加雏鸡机体ω-6/ω-3值，而在饲粮中添加鱼油、亚麻籽油、紫苏籽油都能显著降低雏鸡机体ω-6/ω-3值，并且饲粮中添加等量ω-6/ω-3值相同的鱼油+豆油、亚麻籽油+豆油、紫苏籽油+豆油对降低雏鸡机体ω-6/ω-3值的效果无显著差异。王雪[14]研究表明，饲粮中添加等量亚麻油、混合油(亚麻油+棕榈油)对饲粮ω-6/ω-3值影响不显著，上述2种饲粮饲喂羯羔对其脂肪组织各脂肪酸含量及ω-6/ω-3值影响不显著。这与本研究结果一致。Parvar等[19]研究结果显示，饲粮中分别添加等量鱼油+菜籽油(1 : 1)、鱼油+豆油(1 : 1)饲喂羔羊，鱼油+菜籽油组羔羊机体的ω-6/ω-3值显著低于鱼油+豆油组。Najafi等[20]研究表明，与豆油或棕榈油相比，补充鱼油导致马哈巴蒂山羊羔羊机体的ω-6/ω-3值更低，出现上述2种结果原因可能是鱼油ω-6/ω-3值低于豆油和棕榈油。在饲粮中添加等量不同种类油脂对动物机体ω-6/ω-3值的调节能力可能受油脂中ω-6/ω-3值的影响。
3.2 不同种类油脂对雏鸡生长性能、内脏指数和养分表观代谢率的影响本试验结果表明，饲粮中添加等量的鱼油+豆油、亚麻籽油+豆油、紫苏籽油+豆油对雏鸡的平均日增重和平均日采食量无显著影响，对雏鸡的有机物、粗蛋白质、钙、磷、粗纤维、粗脂肪表观代谢率均无显著影响，对雏鸡的心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胃、法氏囊指数以及肠道总长均无显著影响。Najafi等[20]研究表明，补充不同的脂肪源对羔羊的生长性能、采食量无显著影响。Roy等[21]研究结果显示，在饲粮中添加等量大豆油和葵花油对孟加拉黑山羊平均日增重和平均日采食量无显著影响，与本试验结果一致。王雪[14]、Toral等[22]、Ferreira等[23]关于不同油脂对机体平均日增重和平均日采食量的报道与本试验结果不一致，出现这种情况的原因可能与油脂的添加量有关，油脂添加过量会影响适口性，对机体消化代谢也可能产生影响。Ferreira等[23]研究表明，单独添加鱼油，或添加等量的鱼油+豆油混合油对马哈巴蒂山羊羔羊的消化率无显著影响。Roy等[21]研究表明，饲粮中添加等量大豆油和葵花油对孟加拉黑山羊各营养物质消化率无显著影响，与本试验结果一致。
3.3 不同种类油脂对雏鸡血清生化指标的影响血清生化指标能反映雏鸡肝肾功能、机体炎症反应及代谢状态，本试验测定雏鸡血清生化指标包括：ALT、AST、ALP活性及UREA、TP、IgG、TG、TCHO、LDL-C含量。其中，血清TG、TCHO、LDL-C含量反应机体脂代谢。本试验结果表明，饲粮中添加一定比例的油脂对雏鸡机体肝肾功能、免疫功能无显著影响，这与刘武等[24]试验结果相符。Lee等[25]研究表明，油脂种类对血清TG含量无显著影响，与本试验结果一致。本试验中，紫苏籽油+豆油组的血清TCHO含量显著高于亚麻籽油+豆油组，亚麻籽油+豆油组的血清TCHO含量显著高于鱼油+豆油组，鱼油+豆油组的血清LDL-C含量显著低于其他组，此结果与钟伟等[26]试验结果相符，出现这种结果的原因可能与机体对这3种油脂的代谢机理不同有关。汪鲲[27]研究表明，亚麻籽和鱼油对蛋鸡脂肪酸代谢途径的调控作用不同。
4 结论① 饲粮添加1.155%鱼油+0.345%豆油、0.495%亚麻籽油+1.005%豆油或0.525%紫苏籽油+0.975%豆油均可显著改善雏鸡机体ω-6/ω-3值，且不同种类油脂的调控效果差异不显著。
② 饲粮添加1.155%鱼油+0.345%豆油、0.495%亚麻籽油+1.005%豆油或0.525%紫苏籽油+0.975%豆油对雏鸡生长性能、器官指数、养分表观代谢率及血清生化指标无明显影响。
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