长久以来，生长快、培育周期短、一次栽培只要管理得当便可长久利用[1]的竹材加工剩余物未得到工业化利用[2]。竹酢液又叫竹醋液，是竹材经热解、冷凝收集得到的棕褐色透明液体，低温条件下与食用糊精喷雾干燥即得竹酢粉。竹酢液/粉组分复杂，富含醋酸、酚类、酮类等有机活性物质，其在断奶仔猪和育肥猪方面的应用研究取得了一定成果。研究表明，竹醋液/粉在提高育肥猪生长性能与机体抵抗力及改善肉品质与肉色等方面发挥着重要作用[3-5]，并能提高断奶仔猪的生长性能、调节免疫器官中细胞因子白细胞介素-10、白细胞介素-22等的mRNA表达水平[6]，提高脱氧雪腐镰刀菌烯醇作用下的仔猪的生长性能、抗氧化性能和缓解小肠黏膜损伤等[7-8]。
随着绿色添加剂在畜禽养殖中的开发及应用，国内外学者开始关注竹酢液/粉在畜牧生产中的应用，并取得了一定成果，但研究多聚焦于断奶仔猪和育肥猪，在反刍动物上的研究却鲜有报道。近年来，随着人们生活水平的提高及对羊肉营养价值的广泛认可，羊肉消费量呈现逐年上涨态势，有关肉羊绿色生产的研究也开始受到关注。有研究显示，饲粮中添加2%竹酢粉能提高妊娠后期母羊血液中红细胞数量、血红蛋白浓度以及血清中总蛋白、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M含量与总抗氧化能力[9]。截至目前，竹酢液/粉对断奶湖羊影响的研究未见报道，故本试验拟以断奶湖羊为试验对象，探究竹酢粉对断奶湖羊生长性能、血液生理生化指标及血清抗氧化和免疫指标的影响，以期为竹酢粉在羊生产中的应用提供参考。
1 材料与方法 1.1 试验材料试验所用竹酢粉其主要活性物质为有机酸，含量为1.1%，其质量分数为10%的竹酢粉水溶液在25 ℃时的pH≤3.5。根据刘明美等[9]在妊娠后期母羊饲粮中添加2%的竹酢粉、蒋竹英等[7-8]在断奶仔猪饲粮中添加1%的竹醋液，考虑到断奶湖羊可能对饲料添加剂的适应性更强，故本试验确定5%作为饲粮中竹酢粉的添加量。
1.2 试验设计与饲粮选择体重相近、健康的2月龄断奶湖羊10只，随机分成2组，每组5只，分别饲喂羊场断奶湖羊基础饲粮(对照组)和基础饲粮+5%(质量比)竹酢粉(试验组)。基础饲粮为市售的育肥羊配合颗粒料，其营养指标见表 1。竹酢粉按照5%的质量比与育肥羊配合颗粒料搅拌均匀后饲喂。预试期7 d，正试期21 d。试验期内湖羊饲养管理同羊场其他羊只的常规管理，自由采食和饮水。
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表 1 育肥羊配合颗粒料营养指标(干物质基础) Table 1 Nutrition indexes of formula pelleted feed for fattening sheep (DM basis) |
正试期第1天和第21天晨饲前对湖羊逐只称重，统计初重和末重，计算平均日增重(ADG)；记录每组试验羊的采食量，根据总增重和总采食量计算料重比(F/G)。
1.3.2 血样采集及测定指标正试期第21天晨饲前每只羊颈静脉采血3份。其中，一份分装于乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管，使用PE-6800VET全自动动物血细胞分析仪检测血常规指标，包括白细胞数量、红细胞数量、血红蛋白浓度、红细胞压积、红细胞平均体积、平均红细胞血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度和血小板数量；另一份分装于肝素锂抗凝管，使用SMT-120V全自动生化分析仪检测血液生化指标，包括总蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯、葡萄糖、钙、无机磷、尿素氮、肌酐含量及天门冬氨基酸转移酶、丙氨酸氨基转移酶、淀粉酶、肌酸激酶活性；剩下的一份分装于普通管，室温放置2 h，4 ℃静置2~3 h，待血液凝固收缩后，3 000 r/min条件下离心10 min，收集上层血清，使用华卫德朗DR-200BS酶标分析仪以比色法测定血清中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性、细胞因子(白细胞介素-2、γ-干扰素)和免疫球蛋白(免疫球蛋白M、免疫球蛋白G和免疫球蛋白A)含量。
1.4 数据处理与统计分析使用Excel 2007对试验数据进行初步整理后，采用SPSS 22.0统计软件进行独立样本t检验。数据用平均值±标准差(mean±SD)表示，以P＜0.01作为差异极显著标准，以P＜0.05作为差异显著标准。
2 结果 2.1 竹酢粉对断奶湖羊生长性能的影响由表 2可知，饲粮中添加5%竹酢粉的试验组断奶湖羊的末重、平均日增重与对照组无显著差异(P＞0.05)，料重比比对照组增加了7.40%。
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表 2 断奶湖羊的生长性能 Table 2 Growth performance of weaned Hu sheep |
由表 3可知，试验组断奶湖羊血液中白细胞数量极显著高于对照组(P＜0.01)，红细胞数量、血红蛋白浓度、平均红细胞血红蛋白含量均显著高于对照组(P＜0.05)，其他指标与对照组虽无显著差异(P>0.05)，但也均高于对照组。
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表 3 断奶湖羊的血常规指标 Table 3 Blood routine indexes of weaned Hu sheep |
由表 4可知，试验组断奶湖羊血液中淀粉酶活性和尿素氮/肌酐显著低于对照组(P＜0.05)，天门冬氨基酸转移酶、丙氨酸氨基转移酶活性与尿素氮含量也低于对照组，但差异不显著(P＞0.05)，甘油三酯和肌酐含量高于对照组，差异亦不显著(P＞0.05)，其他指标与对照组均无显著差异(P＞0.05)。
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表 4 断奶湖羊的血液生化指标 Table 4 Serum biochemical indexes of weaned Hu sheep |
由表 5可知，试验组断奶湖羊血清中白细胞介素-2含量显著高于对照组(P＜0.05)，γ-干扰素含量有高于对照组的趋势(P=0.053)，其他指标与对照组均无显著差异(P>0.05)。
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表 5 断奶湖羊血清抗氧化和免疫指标 Table 5 Serum antioxidant and immune indexes of weaned Hu sheep |
竹酢粉能提高断奶仔猪[3, 5, 8, 10]和肉鸡[11]的生长性能，究其原因可能是竹酢粉中的酸、酚等成分对动物肠道微生物产生了有益影响，从而改善了肠道环境。本研究发现，饲粮中添加5%竹酢粉对断奶湖羊的生长性能无显著影响。这可能与牛、羊等反刍动物瘤胃内微生物数量庞大，竹酢粉对机体与其体内微生物的互利共生关系影响不大或者试验期较短或者瘤胃微生物对竹酢粉进行了降解等有关，具体原因还需进一步研究。
3.2 竹酢粉对断奶湖羊血液生理指标的影响白细胞数量的变化可以反映机体细胞免疫水平的高低，进而反映机体的免疫状态[12]。本试验发现，饲粮中添加5%竹酢粉能极显著提高断奶湖羊血液中白细胞数量，蒋竹英等[8]的研究也有类似发现，说明饲喂竹酢粉可提高湖羊的抗病能力。红细胞不仅是血液输送氧气的主要载体，还含有多种天然免疫分子，具有多种天然免疫功能，是一种重要的天然免疫细胞[13]。研究表明，在饲粮或脱氧雪腐镰刀菌烯醇污染下饲粮中添加竹醋液，可提高断奶仔猪血液中红细胞数量和血红蛋白浓度[7-8]；饲粮中添加2%竹酢粉能提高妊娠后期母羊血液中红细胞数量和血红蛋白浓度[9]。本试验得到了相似结果，这说明竹酢粉在预防动物贫血、提高新陈代谢和天然免疫等方面有一定作用。
3.3 竹酢粉对断奶湖羊血液生化指标的影响胰腺、唾液腺、胃、胆囊、空肠、回肠等是血清淀粉酶的主要来源，当其损伤或出现炎症时，会引起血液中淀粉酶活性升高[14]。天冬氨酸氨基转移酶和丙氨酸氨基转移酶作为评价肝功能的重要指标，可以反映肝脏的受损情况。当心脏和肝脏组织细胞发生炎症、坏死或在冷热应激状态时，血清转氨酶活性升高[15]。本试验中，竹酢粉可显著降低血液中淀粉酶活性，同时谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性也稍低于对照组，表明竹酢粉可能对湖羊的胰腺和肝脏具有一定的保护作用。
血液中的甘油三酯主要来源于食物摄入、消化吸收、转化或动物体内自身合成，甘油三酯的主要功能是供给与储存能源，还可固定和保护内脏。本试验发现，试验组断奶湖羊血液中甘油三酯含量略高于对照组，表明竹酢粉可能会提高湖羊对脂肪的吸收。肌酐是机体内肌肉代谢的产物，在肌肉中，肌酸主要通过不可逆的非酶脱水反应缓缓地形成肌酐，再释放到血液中，随尿排泄，因此血液中肌酐含量与体内肌肉总量关系密切。本试验发现，试验组断奶湖羊血液中肌酐含量略高于对照组，表明试验组湖羊的肌肉含量高于对照组或竹酢粉使湖羊肌肉代谢加强。
尿素氮是机体蛋白质代谢的主要终末产物，血液中尿素氮含量是反映蛋白质的代谢方向和饲料氨基酸平衡的一个指标。肝脏是体内生成尿素的最主要器官，因此肝脏尿素生成量的减少可为其他器官如肌肉的蛋白质沉积提供充足的氨基酸等原材料。陈代文等[16]的研究发现，血清尿素氮含量与猪的肌肉增长或日增重呈负相关。本试验中，试验组断奶湖羊血液中尿素氮含量略低于对照组，表明竹酢粉可能会提高湖羊对氮的利用率，增加肌肉蛋白质沉积。
3.4 竹酢粉对断奶湖羊血清抗氧化和免疫指标的影响总抗氧化力是反映机体对外来刺激的代偿能力和机体自由基代谢状态强弱的重要指标[17]，超氧化物歧化酶具有消除超氧阴离子毒性、保护细胞免受损伤的功能[18]。研究发现，竹醋液在清除氧自由基和提高油脂抗氧化能力方面具有与茶多酚相似的效果[19]，断奶仔猪饲粮中添加1%竹醋液能够提高血清总抗氧化力[8]。本试验结果显示，饲粮中添加5%竹酢粉后断奶湖羊血清总抗氧化力和超氧化物歧化酶活性无显著变化。
免疫球蛋白G是动物血清中的主要免疫球蛋白，在机体抗菌、抗病毒、抗感染方面发挥主要作用；免疫球蛋白M是机体初次接触抗原物质最早产生的抗体，具有激活补体等作用；血清免疫球蛋白A含量占总免疫球蛋白A的85%左右，其具有免疫球蛋白G、免疫球蛋白M的部分生物学功能[20]。本研究发现，饲粮中添加5%竹酢粉对断奶湖羊血清中免疫球蛋白M、免疫球蛋白G和免疫球蛋白A含量均无显著影响。
细胞因子在免疫调节中起重要作用。白细胞介素-2和γ-干扰素可由Th1型细胞分泌，主要促进T淋巴细胞增殖、介导细胞免疫和炎症反应[21]。本试验结果显示，饲粮中添加5%竹酢粉能显著提高断奶湖羊血清中白细胞介素-2，并有提高γ-干扰素含量的趋势，结合前面有关极显著提高其血液中白细胞数量的结果，初步得出5%竹酢粉可能在提高断奶湖羊抗病力和细胞免疫力方面发挥了一定作用。
4 结论本试验条件下，断奶湖羊饲粮中添加5%竹酢粉对其生长性能无显著影响，但可显著或极显著提高其血液中白细胞数量、红细胞数量、血红蛋白浓度、平均红细胞血红蛋白含量，显著降低血浆中淀粉酶活性和提高细胞免疫因子(白细胞介素-2、γ-干扰素)含量。综上可知，5%竹酢粉在提高断奶湖羊免疫力和抗病力方面发挥了一定作用。
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