2. 宁夏文茂生态草源饲料有限公司, 中宁 755100;
3. 宁夏盐池滩羊选育场, 盐池 751500;
4. 宁夏彭阳县畜牧技术推广服务中心, 彭阳 756500
2. Ningxia Wenmao Ecological Grass Source Feed Co. Ltd., Zhongning 755100, China;
3. Tan Sheep Breeding Farm of Ningxia, Yanchi 751500, China;
4. Ningxia Animal Husbandry Technology Extension Service Center, Pengyang 756500, China
枸杞在宁夏、甘肃、新疆、内蒙古、青海和河北等适宜分布区已成为农业产业结构调整、农民脱贫致富和生态环境建设的重要树种[1]。枸杞果中富含氨基酸、枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharide, LBP)、黄酮以及甜菜碱等多种活性物质(约占46.5%)[2]。LBP是一种复合型多糖[3]，含量为2.10%~6.03%，是枸杞当中主要的活性成分，具有促进生长发育、抗菌、提高抗氧化能力和免疫性能、降血糖等多种功能[4]。
每年在枸杞收获后瘪果和茎秆等副产品并未得到有效利用，造成了饲料资源的浪费。而枸杞副产品富含多种营养物质，因此枸杞渣、枸杞粉或其提取物添加到饲粮中可以提高动物的生长或生产性能，是动物优质的饲料原料。韩占兵等[5]报道，蛋鸡饲粮中添加5%的枸杞渣可使产蛋率增加、料蛋比降低。Long等[6]研究表明，饲粮添加2 g/kg的LBP可以增强肉鸡消化酶活性、抗氧化能力和免疫性能，进而提高生长性能。另有研究表明，在肉兔饲粮中添加1%的LBP可以有效促进肉兔的生长发育，提高生产性能[7]。枸杞渣作为饲料添加剂除了应用于禽类和兔类生产，在猪和反刍动物的应用中也有相关报道。黄红卫等[8]在育肥猪饲粮中添加5%的枸杞渣后发现育肥猪日增重显著增加、料重比降低，猪的抗病力增强，同时提高了牧场经济效益。许洪福[9]给育肥肉羊饲喂枸杞中草药渣后发现肉羊生长发育较好，日增重增加。Abdallah等[10]在其研究中也提到枸杞渣及中草药副产品绿色无公害、无耐药性，可作为饲料原料代替抗生素应用于畜牧业，以提高动物生产性能。2016年有学者发现枸杞渣可以提高藏羊血清中免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白G(IgG)含量，提高免疫力的同时促进营养物质表观消化率、降低胆固醇含量[11]。鉴于枸杞渣的诸多优点和无耐药性等特点，本试验在全混合颗粒料和全混合粉料的基础上分别添加5%和10%的枸杞渣，旨在研究枸杞渣不同饲喂方式对育肥滩羊消化代谢、抗氧化能力和免疫性能的影响，为合理利用枸杞渣饲料资源提供理论依据和方法。
1 材料与方法 1.1 试验材料本试验所用枸杞渣果实∶叶约为4 ∶ 6，其营养成分含量见表 1。所用饲粮由宁夏某饲料有限公司制成全混合颗粒料和全混合粉料。试验羊只购于宁夏中宁伊清牛羊肉加工购销专业合作社。
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表 1 枸杞渣的营养成分含量(干物质基础) Table 1 Nutritional component contents of Lycium barbarum residue (DM basis) |
饲养试验于2020年6—9月在宁夏中宁文茂生态草源饲料有限公司进行。选择健康、体重(25±1) kg的公羔滩羊32只，编号并随机分成4组，每组8只羊。4组试验羊分别饲喂添加5%枸杞渣的全混合颗粒料(5%枸杞渣颗粒料组)、添加5%枸杞渣的全混合粉料(5%枸杞渣粉料组)、添加10%枸杞渣的全混合颗粒料(10%枸杞渣颗粒料组)和添加10%枸杞渣的全混合粉料(10%枸杞渣粉料组)。各组饲粮营养水平相近。试验分前期、中期和后期，共计95 d。其中，前期预试期为15 d，正试期为30 d；中期和后期预试期均为5 d，正试期均为20 d。各期所用基础饲粮参照《肉羊饲养标准》(NY/T 816—2004)并结合实际生产配制，其组成及营养水平见表 2。
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表 2 基础饲粮组成及营养水平(干物质基础) Table 2 Composition and nutrient levels of basal diets (DM basis) |
消化代谢试验于饲养试验中期进行，每组选择体重相近的3只试验羊于代谢笼中独笼饲喂。预试期7 d，正试期6 d，采用全收粪收尿法，在每天的07:00和17:00饲喂并收集粪、尿样品。
1.3 饲养管理羔羊在入舍前对整个羊舍和食槽进行彻底消毒，并对羊只进行驱虫。试验在全舍饲条件下进行，试验期间定期对圈舍打扫消毒。所有试验羊每天饲喂2次(07:00和17:00)，自由饮水。
1.4 测定指标与方法 1.4.1 消化代谢指标的测定消化代谢试验期间记录每只羊每天的采食量、剩料量和粪、尿排出量，混匀后按总排出量的10%收集粪、尿样，其中一份粪、尿样不做任何处理，另一份加入10%H2SO4固氮，于-20 ℃保存待测[12]。
饲料、粪样中干物质(DM)、粗蛋白质(CP)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、粗灰分(Ash)及尿氮(UN)参照《饲料分析及饲料质量检测技术》测定。
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分别于试验开始的第1、20、40、60和第80天对试验羊进行颈静脉采血10 mL，在离心管中静置30 min后用离心机于3 000 r/min离心10 min，取上清液在-20 ℃的条件下保存供实验室分析用。测定时按照相应试剂盒说明书(试剂盒购于南京建成生物工程研究所)，使用酶标仪(SYNER GY H11，Bio Tek，美国)测定总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性与总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量。
1.4.3 血清免疫指标的测定血液采集和血清制备同抗氧化指标。按照相应试剂盒说明书(试剂盒购于南京建成生物工程研究所)，使用酶标仪(SYNER GY H11，Bio Tek，美国)测定血清IgA、IgG和免疫球蛋白M(IgM)含量。
1.5 数据统计与分析试验数据用Excel 2010进行初步整理，用SAS 8.2进行方差分析，数据分析包括枸杞渣添加量和饲粮状态以及二者之间的交互作用，当存在显著差异时，利用LSD法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P < 0.05表示差异显著，P>0.05表示差异不显著。
2 结果与分析 2.1 枸杞渣不同饲喂方式对育肥滩羊消化代谢的影响 2.1.1 枸杞渣不同饲喂方式对育肥滩羊养分表观消化率的影响枸杞渣不同饲喂方式对育肥滩羊养分表观消化率的影响见表 3。各组间DM、NDF和ADF的表观消化率差异不显著(P>0.05)，枸杞渣添加量和饲粮状态之间无显著交互作用(P>0.05)。相比较之下，5%枸杞渣颗粒料组各养分的表观消化率均高于其他试验组，与10%枸杞渣颗粒料组相比，5%枸杞渣颗粒料组DM表观消化率提高5.12%，NDF表观消化率提高6.22%，ADF表观消化率提高2.30%。
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表 3 枸杞渣不同饲喂方式对育肥滩羊养分表观消化率的影响 Table 3 Effects of different feeding methods of Lycium barbarum residue on apparent digestibility of nutrients of fattening Tan sheep |
枸杞渣不同饲喂方式对育肥滩羊氮代谢的影响见表 4。粪氮和尿氮排出量各组间无显著差异(P>0.05)。在相同枸杞渣添加量下，颗粒料组摄入氮、沉积氮和氮沉积率显著高于粉料组(P < 0.05)。枸杞渣添加量和饲粮状态对氮表观消化率的影响有交互作用(P < 0.05)，颗粒料组氮的表观消化率显著高于粉料组(P < 0.05)，且5%枸杞渣组显著高于10%枸杞渣组(P < 0.05)。其中，5%枸杞渣颗粒料组的氮表观消化率为64.48%，比添加5%枸杞渣粉料组和10%枸杞渣粉料组分别提高6.28%和13.28%，差异显著(P < 0.05)。
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表 4 枸杞渣不同饲喂方式对育肥滩羊氮代谢的影响 Table 4 Effects of different feeding methods of Lycium barbarum residue on nitrogen metabolism of fattening Tan sheep |
枸杞渣不同饲喂方式对育肥滩羊能量代谢的影响见表 5。枸杞渣添加量和饲粮状态对育肥滩羊食入总能、粪能、尿能以及消化能均无显著影响(P>0.05)。枸杞渣添加量和饲粮状态对育肥滩羊总能表观消化率的影响有交互作用(P < 0.05)，颗粒料组的总能消化率显著高于粉料组(P < 0.05)，且5%枸杞渣组显著高于10%枸杞渣组(P < 0.05)。其中，5%枸杞渣颗粒料组总能表观消化率分别比10%枸杞渣颗粒料组、5%枸杞渣粉料组、10%枸杞渣粉料组提高4.77%、2.95%和4.85%，差异显著(P < 0.05)。
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表 5 枸杞渣不同饲喂方式对育肥滩羊能量代谢的影响 Table 5 Effects of different feeding methods of Lycium barbarum residue on energy metabolism of fattening Tan sheep |
由表 6可知，枸杞渣饲喂方式对第20天时血清GSH-Px活性有显著影响(P < 0.05)，第20天时5%枸杞渣组血清GSH-Px活性显著高于10%枸杞渣组(P < 0.05)，且颗粒料组显著高于粉料组(P < 0.05)。枸杞渣饲喂方式对血清其他抗氧化指标均无显著差异(P>0.05)，同时枸杞渣添加量和饲粮状态之间也无显著的交互作用(P>0.05)。整体来看，随着试验天数的增加，滩羊血清中GSH-Px和T-SOD活性逐渐增加，MDA含量逐渐降低，说明滩羊的抗氧化能力逐渐提高。
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表 6 枸杞渣不同饲喂方式对育肥滩羊抗氧化能力的影响 Table 6 Effects of different feeding methods of Lycium barbarum residue on antioxidant ability of fattening Tan sheep |
由表 7可知，滩羊血清IgM含量各组之间差异不显著(P>0.05)，且枸杞渣添加量和饲粮状态之间也无显著的交互作用(P>0.05)。随着试验天数的增加，血清IgA和IgM含量呈现增加趋势。在相同枸杞渣添加量下，第40天时粉料组血清IgA含量显著高于颗粒料组(P < 0.05)，而第40天时颗粒料组血清IgG含量显著高于粉料组(P < 0.05)。在饲粮状态相同情况下，第80天时5%枸杞渣组血清IgA含量显著高于10%枸杞渣组(P < 0.05)。
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表 7 枸杞渣不同饲喂方式对育肥滩羊免疫性能的影响 Table 7 Effects of different feeding methods of Lycium barbarum residue on immune performance of fattening Tan sheep |
DM的消化率反映的是动物对饲粮的消化程度[13]，而ADF和NDF的消化率是衡量家畜对粗纤维的利用能力[14]。研究表明，饲粮中添加LBP可提高獭兔的养分表观消化率和氮代谢能力[15]。王启菊等[11]给藏羊饲粮中添加2%的枸杞后发现CP、粗纤维(CF)等养分的表观消化率增加。本试验中5%枸杞渣颗粒料组DM、NDF和ADF的表观消化率较其他组高，说明饲粮添加枸杞渣对育肥滩羊养分的消化率有一定的影响，可能是枸杞渣中的LBP改善了机体肠道黏膜形态结构的完整性，促进肠道对养分的消化与吸收[16]。另外，颗粒料制粒过程中有些营养成分的理化性质发生了改变，从而促进了动物机体对饲粮的利用[17]。本试验在全混合颗粒料的基础上添加5%的枸杞渣提高了饲粮的适口性，保证饲粮不被浪费的情况下促进滩羊的采食量，因此养分的摄入量也高。另外，枸杞渣本身富含蛋白质，而粉料在投喂和采食过程中会产生灰尘，还有羊只挑食等情况并不能保证枸杞渣完全被试验羊吸收利用，造成浪费，因此粉料组养分的表观消化率相比颗粒料组较低。
3.1.2 枸杞渣不同饲喂方式对育肥滩羊氮代谢的影响氮代谢是反映动物对食入蛋白质和氨基酸吸收利用情况的指标[18]，其与瘤胃中微生物降解作用、粪氮及尿氮的排出量有关[19]。研究报道，饲粮添加0.2%的LBP组獭兔氮沉积量比对照组提高了0.15~0.27 g/d[15]。本试验中，在滩羊饲粮添加枸杞渣不同程度地提高了滩羊的沉积氮和氮代谢能力，与上述结果一致。石玉祥等[16]研究表明，枸杞渣中的主要成分LBP能增加小鼠小肠绒毛上杯状细胞(GC)数量，改善肠黏膜屏障结构，进而提高肠道对营养物质的吸收。本试验中枸杞渣提高了滩羊的氮代谢能力，可能与上述原因有关；另外，LBP增加了肠道对蛋白质的吸收能力，进而提高了氮的利用率。在相同枸杞渣添加量下，颗粒料组氮的表观消化率高于粉料组，这可能是因为颗粒料在制粒过程中部分纤维素经高温被破坏、软化，导致植物性蛋白质与消化酶能较好地接触，增加了CP的利用率，进而提高了氮的消化率。粪氮排出量反映动物对氮的消化情况，尿氮的排出量反映氮的吸收状况[20]，如果动物摄入氮超出正常生理需求量，多出的氮会以粪氮和尿氮的形式排出[19]。另外，动物粪、尿排出量过多还会加剧氮、磷的排放，破坏水体和环境。本试验中4组滩羊的粪氮和尿氮排出量均无显著差异，说明各组滩羊对氮的消化吸收状况大体一致。
3.1.3 枸杞渣不同饲喂方式对育肥滩羊能量代谢的影响消化能可较为准确地表示反刍动物的能量需要。李宇敏等[15]通过给獭兔饲喂添加0.2%的饲粮发现獭兔总能表观消化率提高了3.95%。本试验中，颗粒料组总能表观消化率显著高于粉料组，其中5%枸杞渣颗粒料组总能表观消化率分别比10%枸杞渣颗粒料组、5%枸杞渣粉料组、10%枸杞渣粉料组提高4.77%、2.95%和4.85%，差异显著。这说明饲粮添加枸杞渣对滩羊总能的消化率有积极影响，这可能与枸杞渣中的营养成分有关。研究报道，枸杞渣中含有丰富的果糖、麦芽糖、葡萄糖和蔗糖，并含有苏氨酸、缬氨酸等12种游离氨基酸成分[21-22]。另外，枸杞子中含有胡萝卜素、核黄素、抗坏血酸、烟酸、硫胺素等的维生素以及牛磺酸等多种营养物质[23]，可以提高饲料的营养价值。本试验中，饲粮添加枸杞渣为试验羊提供了诸多的营养成分和适宜的能量，因此能量利用率较高。另外，5%枸杞渣颗粒料组食入总能较其他组高，可能是颗粒料加工时枸杞子经高温熟化有诱食作用[14]，饲料适口性较好，浪费少，增加了羊对饲粮中能量物质(葡萄糖、果糖、氨基酸等)的摄入，进而提高了能量的吸收利用。
3.2 枸杞渣不同饲喂方式对育肥滩羊抗氧化能力的影响研究表明枸杞果中的LBP可增加肠道抗氧化酶的活性[24]，清除氧自由基，改善氧化应激状态，进而提高组织抗氧化能力[25]。Chen等[26]研究发现，枸杞渣提取物具有抗氧化、抗炎和降低胆固醇的作用。MDA含量可以反映机体的氧化水平和自由基攻击的程度[27]。尹业鑫等[28]给断奶大鼠饲粮中添加4 g/kg的LBP后发现其可提高空肠黏膜与血清中GSH-Px活性和T-AOC，降低MDA含量，清除自由基的同时抑制脂质过氧化，提高抗氧化能力，说明枸杞果中的LBP具有提高动物抗氧化能力的作用。本试验总体来看，随着试验天数的增加，滩羊血清GSH-Px和T-SOD活性逐渐增加，MDA含量逐渐降低，抗氧化能力不断增强；但第60天时血清T-AOC和T-SOD活性小幅度降低，MDA含量反而增加，抗氧化能力减弱，这可能与试验羊分组和更换饲粮等有关，也可能是受天气因素影响，试验初期天气炎热加上10%枸杞渣组添加量过大，试验后期当地降雨量增多，连续阴天加上羊圈积水使羊只采食量降低，使得枸杞渣中的酚类化合物抗氧化机能可能发挥的较少。
3.3 枸杞渣不同饲喂方式对育肥滩羊免疫性能的影响动物血液中免疫球蛋白含量的高低能反映动物机体的免疫功能。马吉锋等[29]在西门塔尔架子牛饲粮中添加500 g LBP免疫增效剂后发现血清中IgG、IgA含量以及白细胞数均显著或极显著提高。由此可见，枸杞中的LBP可以通过调节肠道黏膜免疫球蛋白的含量，增强抗体活性、减弱细菌毒素的毒性来增强机体的免疫功能[30]。王启菊等[11]发现给藏羊饲粮中添加2%的枸杞可以显著提高血清IgG和IgA含量，同时降低胆固醇含量。本试验中，饲粮中添加枸杞渣可以不同程度地提高滩羊血清IgA和IgM含量，提高免疫性能，这与上述结果相符。Gan等[31]报道，枸杞中的枸杞多糖蛋白复合物(LBP3P)可以促进白细胞介素和肿瘤坏死因子-α在mRNA和蛋白质水平的表达，以调节免疫反应和提高免疫性能。本试验中颗粒料组血清免疫球蛋白含量高于粉料组，并且在枸杞渣添加量为5%时滩羊免疫性能最佳。
4 结论① 饲喂添加5%枸杞渣的全混合颗粒料可提高育肥滩羊对饲粮中养分的消化率。
② 随着试验天数的增加，滩羊血清GSH-Px和T-SOD活性逐渐增加，MDA含量逐渐降低，抗氧化能力逐渐增强。
③ 相同枸杞渣添加量下，颗粒料组血清免疫球蛋白含量高于粉料组，并且在枸杞渣添加量为5%时滩羊的免疫性能最佳。
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