过瘤胃胆碱和过瘤胃葡萄糖对围产期母羊健康、血清生化指标及产羔性能的影响

引用本文

涂远璐, 汤海江, 张凯, 贾学敬, 白云峰, 洪伟. 过瘤胃胆碱和过瘤胃葡萄糖对围产期母羊健康、血清生化指标及产羔性能的影响[J]. 动物营养学报, 2022, 34(12): 7935-7944.

TU Yuanlu, TANG Haijiang, ZHANG Kai, JIA Xuejing, BAI Yunfeng, HONG Wei. Effects of Rumen-Protected Choline and Rumen-Protected Glucose on Health, Serum Biochemical Indices and Lambing Performance of Perinatal Ewes[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2022, 34(12): 7935-7944.

过瘤胃胆碱和过瘤胃葡萄糖对围产期母羊健康、血清生化指标及产羔性能的影响

涂远璐^1,2 , 汤海江³ , 张凯^1,2 , 贾学敬¹ , 白云峰^1,2 , 洪伟⁴

1. 江苏省农业科学院畜牧研究所, 南京 210014;
2. 农业部种养结合重点实验室, 南京 210014;
3. 邳州市小河科技发展有限公司, 徐州 221300;
4. 上海美农生物科技股份有限公司, 上海 200157

收稿日期: 2022-05-25

基金项目: “十三五”国家重点研发计划"智慧牧场生产关键技术研究与营养"（2019YFE0125600）

作者简介: 涂远璐(1983—), 女, 江西南昌人, 助理研究员, 硕士, 从事家畜营养与生态研究。E-mail: 121663004@qq.com.

通信作者: 白云峰, 研究员, 硕士生导师, E-mail: Blinkeye@126.com.

摘要: 本研究旨在评估过瘤胃胆碱（RPC）和过瘤胃葡萄糖（RPG）对围产期母羊能量负平衡及其产羔性能的影响。选取80头湖羊，随机分为4组，每组20头，对照组饲喂基础饲粮，RPG组、RPC组和RPC+RPG组每头每天分别添加15 g RPG、3 g RPC、15 g RPG+3 g RPC。试验期50 d，结果表明：1）各组间妊娠毒血症的发病率无显著差异（P>0.05），但与对照组相比，试验组有提高羔羊断奶成活率的趋势（0.10>P>0.05），且RPC+RPG组羔羊初生重显著提高（P < 0.05）。2）与对照组相比，添加RPG显著降低了分娩当天母羊血清中β-羟基丁酸含量（P < 0.05），同时血清中总蛋白含量也显著提高（P < 0.05），还显著提高了产后10 d时血清甲状腺素（T4）含量（P < 0.05），对血清葡萄糖含量影响不显著（P>0.05）。3）与对照组相比，添加RPC对血清葡萄糖和β-羟基丁酸含量影响均不显著（P>0.05），相反还显著提高了分娩当天和产后20 d的血清谷丙转氨酶活性（P < 0.05），添加RPC+RPG对血清生化指标无显著交互作用（P>0.05）。综上所述，围产期母羊饲粮中添加15 g/（d·头）RPG有助于缓解能量负平衡，而3 g/（d·头）RPC添加效果不显著，但添加RPC+RPG均可以提升羔羊断奶成活率，提高羔羊初生重。

关键词: 母羊妊娠毒血症葡萄糖胆碱过瘤胃

Effects of Rumen-Protected Choline and Rumen-Protected Glucose on Health, Serum Biochemical Indices and Lambing Performance of Perinatal Ewes

TU Yuanlu^1,2 , TANG Haijiang³ , ZHANG Kai^1,2 , JIA Xuejing¹ , BAI Yunfeng^1,2 , HONG Wei⁴

1. Institute of Animal Science, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China;
2. Key Laboratory of Crop and Livestock Integrated Farming, Ministry of Agriculture, Nanjing 210014, China;
3. Xiaohe Technology Co., Ltd., Xuzhou 221300, China;
4. Shanghai Menon Animal Nutrition Technology Co., Ltd., Shanghai 200157, China

Corresponding author: BAI Yunfeng, professor, E-mail: Blinkeye@126.com.

Abstract: The aim of this study was to evaluate the effects of rumen-protected choline (RPC) and rumen- protected glucose (RPG) on negative energy balance and lambing performance of perinatal ewes. A total of 80 Hu sheep were selected and randomly divided into 4 groups with 20 sheep in each group. The control group was fed a basal diet. The RPG group, RPC group and RPC+RPG group were given 15 g RPG, 3 g RPC, 15 g RPG+3 g per day, respectively. The experimental period was 50 days. The results showed as follows: 1) there was no significant difference in the incidence of pregnancy toxemia among groups (P>0.05), but the experimental group had a tendency to improve the survival rate of lambs weaning (0.10>P>0.05) and the birth weight of lambs increased significantly (P < 0.05). 2) Compared with the control group, adding RPG significantly decreased the β-hydroxybutyric acid (BHBA) content in serum of the ewes on the day of delivery (P < 0.05) and the total protein content in the serum also significantly increased (P < 0.05), it also significantly increased the content of thyroxine (T4) at 10 days postpartum (P < 0.05), but had no significant effect on serum glucose content (P>0.05). 3) Compared with the control group, the addition of RPC had no significant effect on serum glucose and BHBA contents (P>0.05), on the contrary, serum glutamic-pyruvic transaminase activity on the day of delivery and 20 days after delivery were also significantly improved (P < 0.05), and the combination of RPC and RPG had no significant interaction on serum biochemical parameters (P>0.05). In conclusion, adding 15 g/d RPG per head to the perinatal ewe diet can help alleviate the negative energy balance, while the addition of 3 g/d of RPC per head has no significant effect, but the addition of RPC and RPG can improve lamb weaning survival rate and increase the birth weight of lambs.

Key words: ewe pregnancy toxemia glucose choline rumen-protected

目前我国规模化羊场以妊娠毒血症为代表的营养代谢疾病频发，据报道，2015年至2020年，浙江省海盐县多家规模羊场持续出现妊娠后期绵羊大量死亡情况，经调查，诊断为妊娠毒血症，母羊发病率达20%以上，死亡率达70%以上^[1]。妊娠毒血症在母羊怀孕后期较为常见，高产多胎母羊发病最为严重，绵羊比山羊高发^[2-3]，它的发病机制与围产期奶牛能量负平衡(NEB)相似^[4]。母羊怀孕后期，胎儿发育快，对葡萄糖(GLU)需求大幅增加，但由于饲料单一、精料比例低，从饲粮中摄入的糖类不足以满足自身和胎儿需要，加之活动量少，以及胎儿对腹腔的压迫，干物质采食量持续下降，机体十分容易处于能量负平衡状态，导致大量体脂动员，产生大量β-羟基丁酸(BHBA)和游离脂肪酸(NEFA)，超出肝脏氧化能力，进而引发代谢紊乱而发病^[5-6]。

妊娠毒血症没有特效药物，预防意义远大于治疗^[7]。通过营养调控措施改善NEB是奶牛生产中最普遍也最有效的方法^[8]。研究发现，补充过瘤胃葡萄糖(RPG)，增加小肠可利用GLU含量，对调节奶牛脂类代谢有积极作用^[9-10]；过瘤胃胆碱(RPC)可以减少甘油三酯在肝脏中的异常沉积，促进NEFA的完全氧化，近年来也得到很多学者重视^[11-12]，但它们在养羊生产上应用很少。刘春海等^[13-14]发现添加25 g/(d·头) RPG有助于提高母羊妊娠期血清GLU含量，对缓解母羊产后失重有较好的效果。赵政等^[15]研究表明，整个妊娠期添加1% RPC可以改善乳山羊繁殖性能。张凯等^[16]研究发现，育肥羊饲粮中添加0.4% RPC可以提高湖羊生长性能。本试验通过研究RPC和RPG添加对于缓解母羊围产期能量负平衡，预防妊娠毒血症的效果，并考察其对母羊产羔、血清生化指标和羔羊生长情况的影响，以期为其在生产中应用提供科学依据。

1 材料与方法 1.1 试验设计

选取80头胎次、预产期、体重相近妊娠后期母羊(湖羊)，妊娠期(120~130日龄)随机分为4组，每组20头。对照组饲喂基础饲粮，RPC组添加3 g/(d·头)RPC，PRG组添加15 g/(d·头)RPG，PRC+PRG组则是组合添加3 g/(d·头) PRC和15 g/(d·头)RPG。RPC中氯化胆碱含量≥25%，过瘤胃率≥80%，小肠释放率≥90%，RPG中GLU含量≥50%，过瘤胃率≥80%，小肠释放率≥90%。

试验预试期7 d，正试期50 d(母羊产前30 d到产后20 d)。每天08:00和16:00各饲喂1次，各组添加剂均于采食基础饲粮前单独饲喂，为了减少添加剂气味，取少量饲粮与添加剂混匀，待母羊采食完再投喂当日饲粮。羔羊出生后与母羊同栏直至其45日龄断奶。

1.2 试验饲粮

参照NRC(2007)中50 kg绵羊母羊妊娠后期(2胎)营养需要标准，结合试验羊场实际情况，设计低能水平饲粮，加工成全混合日粮(TMR)作为基础饲粮，其组成及营养水平见表 1。

表 1 基础饲粮组成及营养水平(干物质基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (DM basis)

%
项目Items	含量Content
原料Ingredients
玉米青贮Corn silage	53.3
油菜秸秆Rapeseed straw	6.7
花生秧Peanut vine	6.7
豆秸Soy stalks	6.7
玉米Corn	6.9
豆粕Soybean meal	2.1
麸皮Bran	4.0
玉米胚芽粕Corn germ meal	10.7
石粉Limestone	0.2
磷酸氢钙CaHPO₄	0.5
氯化钠NaCl	0.1
小苏打Na₂HCO₃	0.5
膨化尿素Extruded urea	0.3
预混料Premix¹⁾	1.3
合计Total	100.0
营养水平Nutrient levels²⁾
代谢能ME/(MJ/kg)	7.49
干物质DM	56.42
粗蛋白质CP	12.55
粗脂肪EE	3.13
粗灰分Ash	12.17
中性洗涤纤维NDF	49.87
酸性洗涤纤维ADF	30.91
钙Ca	0.34
总磷TP	0.21
1)预混料为每千克饲粮提供The premix provided the following per kg of the diet：VA 4 000 IU，VD₃ 4 000 IU，VE 30 mg，烟酰胺nicotinamide 62.5 mg，Cu 8.75 mg，Fe 30 mg，Mn 37.5 mg，Zn 37.5 mg，Se 0.25 mg，Co 0.05 mg，I 0.3 mg。 2)代谢能为计算值^[17]，其他为测定值。ME was a calculated value^[17], while the others were measured values.

表 1 基础饲粮组成及营养水平(干物质基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (DM basis)

1.3 样品采集及测定指标 1.3.1 妊娠毒血症发病率

试验期间，每日观察母羊情况，统计各组妊娠毒血症发病数，计算临床发病率、亚临床发病率、总发病率和病死率，计算公式如下：

发病诊断一方面依据临床症状，主要表现为精神萎靡不振，卧地不起，食欲下降，排尿量减少，呼出气体有丙酮气味；另一方面则依据血清中BHBA含量，当BHBA含量＜2 mmol/L时羊只健康，2 mmol/L＜BHBA含量＜3 mmol/L时为亚临床型妊娠毒血症，BHBA含量≤3 mmol/L时为临床型妊娠毒血症。

1.3.2 产羔性能

母羊产羔时详细记录其产羔状态(顺产、难产、流产、早产)，奶水情况(优、良、差)及产羔数(活羔数、死羔数、弱羔数)，其中弱羔定义为出生体重小于2 kg且无法自然吮吸母乳的羔羊。分别计算单羔率、双羔率、多羔率、流产率、早产率、奶水不良率、羔羊出生成活率、弱羔率和产羔率，计算公式如下：

1.3.3 血清生化指标

正式试验第15天早晨对所有母羊集中空腹采血，而后母羊分娩当天和产后第10、20天分3次单独采血。血液样品经3 500 r/min离心10 min后分离血清，-20 ℃保存待测。血清中BHBA含量使用怡成-Ⅱ奶牛酮病快速检测仪测定，其余样品送至北京瑞格博科技股份有限公司测定血清GLU、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性，血清三碘甲状腺原氨基酸(T3)和甲状腺素(T4)含量采用放射免疫法测定。

1.3.4 羔羊生长情况

羔羊出生后上耳标，记录其初生重，45日龄断奶，记录断奶重，统计羔羊存活情况，计算羔羊平均日增重和断奶成活率，计算公式如下：

1.4 统计与分析

试验数据采用SPSS 21.0软件进行统计分析，计数资料如样本数以数值表示，发病率等则以数值百分率(计算公式)表示，计量资料数据以平均值±标准差表示，差异性统计计数数据采用卡方检验Fisher精确概率法，计量数据采用GLM双因素方差分析，用Duncan氏法进行多重比较，显著水平为P＜0.05。

2 结果与分析 2.1 添加RPC和RPG对母羊妊娠毒血症发病情况影响

由表 2可知，各组间妊娠毒血症的亚临床发病率、临床发病率、病死率均无显著差异(P＞0.05)。

表 2 添加PRC和RPG对母羊妊娠毒血症发病的影响 Table 2 Effects of adding RPC and RPG on incidence of pregnancy toxemia of ewes

2.2 添加RPC和RPG对母羊产羔性能的影响

由表 3可知，各组间母羊的早产率、流产率、奶水情况、单羔率、双羔率和多羔率差异均不显著(P＞0.05)。湖羊多胎性能好，产羔率达到250.00%以上，各组间羔羊出生成活率和弱羔率差异不显著(P＞0.05)，但试验组有提高羔羊断奶成活率趋势(0.10>P＞0.05)。

表 3 添加PRC和RPG对母羊产羔性能的影响 Table 3 Effects of adding RPC and RPG on lambing performance of ewes

2.3 添加RPC和RPG对母羊血清生化指标的影响

由表 4可知，试验第15天，发病母羊血清中BHBA含量显著高于健康母羊(P＜0.05)，但血清GLU含量及ALT和AST活性并未表现出显著变化(P＞0.05)，根据观察，此时母羊也没有表现出明显的妊娠毒血症临床症状。

表 4 发病母羊与健康母羊试验第15天时血清中BHBA、GLU含量及AST和ALT活性 Table 4 Serum BHBA, GLU contents and AST, ALT activities between sick and healthy ewes on the 15th day of experiment

由表 5可见，从不同时间点的结果来看，各组中的血清BHBA含量在产前(试验第15天)到分娩当天呈升高趋势，在分娩当天达到峰值，产后10 d时均降至1.80 mmol/L以下，但仅PRG组血清BHBA含量在4个时间点间差异不显著(P＞0.05)；血清中的GLU含量，各组均为产前最低，显著低于其他时间点(P＜0.05)。

表 5 添加PRC和PRG对母羊血清中BHBA和GLU含量的影响 Table 5 Effects of adding RPC and RPG on serum BHBA and GLU contents of ewes

项目 Items	组别 Groups	试验第15天 Day 15 of experiment	分娩当天 Day of delivery	产后10 d Day 10 after delivery	产后20 d Day 20 after delivery
β-羟基丁酸 BHBA/(mmol/L)	对照组CON group	1.93±1.38^ab	2.95±1.57^a	1.79±1.25^ab	1.08±1.03^b
	RPC组RPC group	1.52±1.36^ab	2.45±1.71^a	1.00±0.75^b	1.40±1.09^ab
	RPG组RPG group	1.25±0.74	1.53±0.80	1.20±0.46	1.69±0.89
	RPC+RPG组RPC+RPG group	1.08±1.32^b	2.12±1.31^a	1.32±1.14^ab	1.18±0.92^ab
P值 P-value	PRC	0.373	0.905	0.243	0.742
	RPG	0.088	0.020	0.622	0.520
	RPC×PRG	0.716	0.141	0.107	0.168
葡萄糖 GLU/(mmol/L)	对照组CON group	2.23±0.40^b	3.59±0.60^a	3.41±0.51^a	3.90±0.68^a
	RPC组RPC group	2.58±0.54^b	3.58±0.78^a	3.76±0.77^a	3.96±0.64^a
	RPG组RPG group	2.33±0.47^b	3.58±0.88^a	3.79±0.61^a	4.00±0.93^a
	RPC+RPG组RPC+RPG group	2.45±0.57^b	3.97±1.20^a	3.99±0.83^a	3.85±0.66^a
P值 P-value	PRC	0.083	0.433	0.214	0.868
	RPG	0.957	0.452	0.166	0.981
	RPC×PRG	0.392	0.403	0.745	0.674
PRC为过瘤胃胆碱添加主效应，RPG为过瘤胃葡萄糖添加主效应，PRC×PRG为PRC和RPG之间的交互作用。下表同。 The PRC represents the main effect of RPC supplementation, RPG represents the main effect of RPG supplementation, RPC×PRG represents the interaction effect between RPC and RPG. The same as below.

表 5 添加PRC和PRG对母羊血清中BHBA和GLU含量的影响 Table 5 Effects of adding RPC and RPG on serum BHBA and GLU contents of ewes

进一步从不同组间的双因素方差分析结果来看，在分娩当天，添加RPG显著降低血清中BHBA含量(P＜0.05)，其他时间点，添加RPC和RPG对血清BHBA和GLU含量影响均不显著(P＞0.05)，添加RPC+RPG对血清BHBA和GLU含量的影响也无显著交互作用(P＞0.05)。

由表 6可知，从不同时间点的结果来看，各组中母羊在分娩当天血清中TP含量最低，显著低于其余3个时间点(P＜0.05)，产后开始逐渐升高；血清中ALB含量，对照组和RPC组在各时间点的差异不显著(P＞0.05)，RPG组产后10 d最低，显著低于其他时间点(P＜0.05)，RPC+RPG组分娩当天最低，显著低于产前和产后20 d(P＜0.05)。从不同组间的双因素方差分析结果来看，在母羊分娩当天，与对照组相比，添加PRC和PRG均显著提高了血清中TP含量(P＜0.05)，添加RPC还显著降低了血清中ALB含量(P＜0.05)，产后20 d时，添加RPC显著降低了血清中的TP含量(P＜0.05)，其他时间点，各组间的差异均不显著(P＞0.05)；添加RPC+RPG对血清TP和ALB含量影响也无显著交互作用(P＞0.05)。

表 6 添加PRC和PRG对母羊血清中TP和ALB含量的影响 Table 6 Effects of adding RPC and RPG on serum TP and ALB contents of ewes

g/L
项目 Items	组别 Groups	试验第15天 Day 15 of experiment	分娩当天 Day of delivery	产后10 d Day 10 after delivery	产后20 d Day 20 after delivery
总蛋白 TP	对照组CON group	63.89±3.80^a	42.45±6.01^c	55.97±8.65^b	59.16±3.97^ab
	RPC组RPC group	63.52±10.27^a	43.78±2.85^c	57.62±5.01^b	56.71±3.17^b
	RPG组RPG group	62.66±4.70^a	44.43±2.94^c	57.50±6.30^b	60.45±3.54^b
	RPC+RPG组RPC+RPG group	63.53±4.77^a	48.88±5.58^c	55.59±6.50^b	57.96±3.77^b
P值 P-value	PRC	0.883	0.024	0.789	0.04
	RPG	0.725	0.006	0.744	0.234
	RPC×PRG	0.720	0.215	0.293	0.986
白蛋白 ALB	对照组CON group	30.21±3.98	28.47±7.11	27.34±8.74	27.60±4.33
	RPC组RPC group	29.38±3.44	25.61±3.64	25.31±4.77	27.64±6.79
	RPG组RPG group	31.51±4.56^a	27.82±3.42^b	25.07±2.87^c	28.69±4.26^b
	RPC+RPG组RPC+RPG group	30.16±3.94^a	23.89±3.16^b	27.47±7.14^ab	30.87±7.33^a
P值 P-value	PRC	0.315	0.008	0.921	0.542
	RPG	0.336	0.341	0.974	0.236
	RPC×PRG	0.807	0.665	0.245	0.556

表 6 添加PRC和PRG对母羊血清中TP和ALB含量的影响 Table 6 Effects of adding RPC and RPG on serum TP and ALB contents of ewes

由表 7可知，从不同时间点的结果来看，对照组在4个时间点血清中的T3和T4含量差异均不显著(P＞0.05)，而3个试验组产前的血清T3含量均显著高于产后10 d(P＜0.05)，血清T4含量产后10 d时均显著高于产前(P＜0.05)，RPG组分娩当天和产后10 d时血清中ALT活性显著低于产前(P＜0.05)，4组的血清AST活性均在产后10 d达到最高，显著高于产前(P＜0.05)。

表 7 添加PRC和PRG对母羊血清中T3和T4含量和AST和ALT活性的影响 Table 7 Effects of adding RPC and RPG on serum T3, T4 contents and AST, ALT activities of ewes

项目 Items	组别 Groups	试验第15天 Day 15 of experiment	分娩当天 Day of delivery	产后10 d Day 10 after delivery	产后20 d Day 20 after delivery
三碘甲状腺原氨基酸T3/(ng/mL)	对照组CON group	5.49±1.58	3.77±1.90	4.47±2.66	3.99±1.60
	RPC组RPC group	6.19±2.30^a	4.65±2.66^ab	3.89±0.91^b	5.55±2.56^ab
	RPG组RPG group	5.03±1.28^a	3.00±1.23^b	3.65±0.91^b	4.19±2.04^ab
	RPC+RPG组RPC+RPG group	6.27±2.34^a	4.36±1.96^b	4.22±1.50^b	4.54±1.73^b
P值 P-value	PRC	0.072	0.045	0.990	0.471
	RPG	0.719	0.337	0.620	0.975
	RPC×PRG	0.610	0.658	0.239	0.220
甲状腺素 T4/(ng/mL)	对照组CON group	70.72±12.06	89.27±29.02	124.08±28.21	75.02±28.38
	RPC组RPC group	75.32±12.62^b	93.68±20.00^b	143.05±43.95^a	87.92±47.29^b
	RPG组RPG group	72.84±12.90^c	97.03±19.06^b	168.69±34.88^a	95.54±55.70^bc
	RPC+RPG组RPC+RPG group	80.16±18.26^c	108.56±23.42^b	159.50±36.51^a	100.47±22.64^bc
P值 P-value	PRC	0.135	0.215	0.669	0.512
	RPG	0.379	0.080	0.011	0.227
	RPC×PRG	0.731	0.577	0.223	0.769
谷丙转氨酶 ALT/(U/L)	对照组CON group	15.03±3.02	13.09±2.32	14.54±6.33	13.64±3.57
	RPC组RPC group	16.13±2.63	15.97±5.24	14.73±3.46	17.40±3.99
	RPG组RPG group	16.00±3.16^a	12.78±2.52^b	12.71±2.19^b	14.36±3.94^ab
	RPC+RPG组RPC+RPG group	15.04±3.08	15.28±4.27	14.66±2.80	15.61±3.97
P值 P-value	PRC	0.926	0.013	0.361	0.031
	RPG	0.938	0.632	0.413	0.538
	RPC×PRG	0.198	0.856	0.450	0.248
谷草转氨酶 AST/(U/L)	对照组CON group	69.52±8.13^b	135.48±61.47^b	249.78±136.88^a	137.04±108.63^b
	RPC组RPC group	66.58±16.09^c	149.20±76.30^ab	195.73±115.93^a	103.83±31.74^bc
	RPG组RPG group	79.67±4.92^b	118.48±42.68^a	151.68±41.29^a	124.44±48.45^a
	RPC+RPG组RPC+RPG group	72.10±6.67^b	126.44±59.94^ab	179.71±106.46^a	150.07±148.42^a
P值 P-value	PRC	0.309	0.518	0.681	0.899
	RPG	0.132	0.237	0.077	0.572
	RPC×PRG	0.653	0.863	0.199	0.326

表 7 添加PRC和PRG对母羊血清中T3和T4含量和AST和ALT活性的影响 Table 7 Effects of adding RPC and RPG on serum T3, T4 contents and AST, ALT activities of ewes

从不同组间的双因素方差分析结果来看，添加RPC显著提高分娩当天母羊血清中T3含量(P＜0.05)，还显著提高分娩当天和产后20 d血清ALT活性(P＜0.05)，添加RPG显著提高母羊产后10 d血清T4含量(P＜0.05)，对其他指标的影响不显著(P＞0.05)；添加RPC+PRG对血清T3和T4含量及ALT和AST活性无显著交互作用(P＞0.05)。

2.4 添加RPC和RPG对羔羊生长性能的影响

由表 8可见，RPC+RPG组初生重显著高于其他组(P＜0.05)；对照组断奶重和平均日增重显著高于其他组(P＜0.05)，这主要由于对照组羔羊断奶存活率低，羔羊死亡数多导致。添加RPC和RPG对羔羊初生重均有显著影响(P＜0.05)，有效提高了羔羊初生重，但两者间交互作用不显著(P＞0.05)。

表 8 添加PRC和PRG对羔羊初生重和平均日增重的影响 Table 8 Effects of adding RPC and RPG on birth weight and average daily weight gain of lambs

3 讨论 3.1 湖羊母羊围产期妊娠毒血症早期诊断

奶牛酮病诊断通常以血清BHBA和NEFA含量显著升高，GLU含量显著降低为依据^[18]。妊娠毒血症的严重程度会导致血清生化指标发生变化^[19]。当母羊表现出临床症状时，往往已是晚期，治疗效果差，因此早期诊断至关重要。本试验中发现试验开始第15天，生病母羊还未表现出临床症状时，其血清中BHBA含量已显著高于健康母羊，达到4.40 mmol/L，远高于3 mmol/L临界值^[20]，而血清AST和ALT活性此时差异并不显著，很容易被忽视，因此，我们认为羊妊娠毒血症早期诊断应以血清BHBA含量显著增高为主要特征。

3.2 添加RPC和RPG对母羊血清生化指标的影响

血清BHBA和GLU含量直接反映了母羊的体脂动员和能量状况。本试验中，母羊分娩前血清中BHBA含量不断升高，分娩当天达到峰值，产前血糖值也一直低于正常水平(3.33~4.99 mmol/L)^[1]，说明临产前母羊身体负担很重，处于能量负平衡状态，GLU供给量小于需求量，血液中GLU含量下降，此时母羊动用体脂供能，大量游离脂肪酸进入血液，使得血液中NEFA含量升高，肝脏内糖的缺乏使得脂肪酸β-氧化过程增强，乙酰辅酶A的生成量增加，进而血清BHBA含量升高。RPG组母羊分娩当天血清BHBA含量显著降低，这对于缓解母羊能量负平衡十分关键，说明RPG添加起到了补糖的效果，减少了脂肪动用，避免了过量酮体产生，但从提升血糖效果来看并不显著，这可能与RPG添加时间短或添加量偏低有关。除此之外，RPG添加还显著提高了分娩当天母羊血清中TP含量，说明蛋白质利用效率得到提高，血清T4含量产后10 d也显著高于其他组，T4可以刺激细胞内氧气消耗和热量产生，从而提高基础代谢率，增加GLU利用率并改变脂质代谢^[21]，说明母羊产后机体代谢加强。Wang等^[22]通过代谢组学分析了RPG对泌乳早期奶牛代谢的影响，发现RPG主要是通过减少脂肪动用来改善能量平衡，与本试验结果一致。李妍等^[23]研究发现，奶牛饲粮中200和400 g/d RPG均可以提高血液中GLU含量，降低酮体水平，改善能量负平衡，本试验中RPG添加量设计偏低，最初主要是考虑到经济可行性，未来研究中将就其最适宜添加量开展进一步研究。

RPC添加对血清GLU和BHBA含量影响均不显著，表明它并没有改变围产期母羊能量负平衡状态，这点与张凡建等^[24]对围产期奶牛产前添加RPC的结果一致。Humer等^[12]通过评估2018年以前发表的数据得出，RPC对奶牛产后干物质采食量有积极影响，但它并不会改善奶牛能量负平衡和代谢情况，也证明了这一点。但从张凡建^[24]的研究结果来看RPC仍显著提高了母牛泌乳量同时改善了肝脏功能，有关RPC补充对能量负平衡改善的研究大都集中在奶牛，奶牛上添加量有15^[25]、30 g/d^[24]，但围产期母羊的适宜添加量暂无参考值，从本试验结果来看，3 g/d的RPC添加对肝脏功能指标血清ALT和AST活性的改善效果并不好，而孙菲菲^[25]研究却发现，围产期奶牛添加RPC可以调控肝细胞能量和脂质代谢，缓解能量负平衡，降低血清中NEFA和BHBA含量，改善肝脏功能。这可能与饲粮组成、RPC添加时间、添加水平和试验动物品种有关。

有关RPC和RPG组合添加研究较少，本试验中未观察到RPC和RPG对母羊血清生化指标的显著交互效应。刘春海等^[13]分析了过瘤胃组合物(25 g RPG+3 g RPC+15 g过瘤胃赖氨酸+5 g过瘤胃蛋氨酸)对绒山羊血清生化指标的影响，发现RPG对血清BHBA含量影响较大，而组合物对其影响较小，这点与本试验结果一致，但其缓解围产期GLU供能不足，单纯添加RPG效果不如组合物效果好，与其组合物中还额外补充了赖氨酸和蛋氨酸也有关系。

3.3 添加RPC和RPG对围产母羊产羔和羔羊生长的影响

本试验中，PRC和PRG添加对降低妊娠毒血症、改善母羊流产、早产和奶水情况效果并不显著，但从羔羊存活情况来看，试验组均表现出较好的正面效应，RPC和RPG添加提高了羔羊断奶成活率，RPG组效果最好，除此之外，它们的添加还显著提高了羔羊初生重，PRC+RPG组最佳。研究指出，饲喂RPG可以显著提高产奶量，有利于促进奶牛产后泌乳，而且RPG对为奶牛提供大量外源性GLU，改善奶牛能量负平衡，节约生糖氨基酸，还可以促进乳蛋白合成，有助于提高母乳中乳蛋白水平^[23]，这可能是RPG组羔羊断奶成活率高的原因之一。妊娠后期母体营养变化可以对子代产生永久性影响，改变后代生长性能^[26]，羔羊初生重增加也进一步佐证了RPG添加对母羊围产期的能量负平衡的营养调控有作用，但其适宜添加量还有待进一步研究。

4 结论

母羊围产期(产前30 d到产后20 d)饲粮中添加15 g/(d·头) RPG有助于降低血清中BHBA含量，减少脂肪动员，缓解能量负平衡，而3 g/(d·头) RPC添加效果不显著，但添加RPC和RPG均可以提升羔羊断奶成活率，提高羔羊初生重。

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