动物营养学报    2022, Vol. 34 Issue (12): 8038-8048    PDF    
引用本文
王子平, 尹达菲, 刘梅, 李建涛, 杨桂芹, 郭东新, 李方方. 饲粮中添加壳寡糖对肉兔生长性能、养分表观消化率、屠宰性能、血清生化指标及机体免疫功能的影响[J]. 动物营养学报, 2022, 34(12): 8038-8048.  
WANG Ziping, YIN Dafei, LIU Mei, LI Jiantao, YANG Guiqin, GUO Dongxin, LI Fangfang. Effects of Dietary Chito Oligosaccharides on Growth Performance, Nutrient Apparent Digestibility, Slaughter Performance, Serum Biochemical Indexes and Body Immune Function of Meat Rabbits[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2022, 34(12): 8038-8048.  
饲粮中添加壳寡糖对肉兔生长性能、养分表观消化率、屠宰性能、血清生化指标及机体免疫功能的影响
王子平 , 尹达菲 , 刘梅 , 李建涛 , 杨桂芹 , 郭东新 , 李方方     
沈阳农业大学动物科学与医学学院，沈阳 110866
收稿日期: 2022-05-13
基金项目: 现代农业产业技术体系建设专项(CARS-43-B-4)
作者简介: 王子平(1994—)，男，辽宁沈阳人，硕士研究生，从事动物营养与饲料科学研究。E-mail: 2019240337@stu.syau.edu.cn.
通信作者: 李方方，副教授，硕士生导师，E-mail: lffsyau@syau.edu.cn.
摘要: 本试验旨在探究饲粮中添加不同水平壳寡糖(COS)对肉兔生长性能、养分表观消化率、血清生化指标及机体免疫功能的影响。试验选取日龄[(35±2)日龄]相近、健康状况良好、体重相近的肉兔300只(公母各占1/2)，随机分为6组，每组5个重复，每个重复10只兔。试验采用单因素完全随机设计，对照组包括空白对照组(基础饲粮)、抗生素对照组(基础饲粮+20 mg/kg多黏菌素E)和4个COS组(基础饲粮+50、100、150和200 mg/kg COS)。预试期7 d，正试期35 d。结果表明：1)与空白对照组相比，饲粮添加50、100、150 mg/kg COS能有效提高肉兔平均日增重(ADG)(P＜0.05)；150 mg/kg COS组料重比(F/G)效果最好；50 mg/kg COS组腹泻率最低。2)添加COS对屠宰性能有较好的改善作用，150 mg/kg COS组肉兔全净膛重显著高于空白对照组(P＜0.05)；与空白对照组相比，各COS组肉兔全净膛率均显著提高(P＜0.05)。3)与空白对照组相比，添加COS显著提高肉兔对干物质(DM)、总能(GE)、粗蛋白质(CP)表观消化率(P＜0.05)，50 mg/kg COS组效果最好。4)与抗生素对照组相比，添加50 mg/kg COS可显著降低肉兔血清中葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)含量(P＜0.05)。5)与空白对照组、抗生素对照组相比，50和150 mg/kg COS组肉兔胸腺重均显著提高(P＜0.05)；100 mg/kg COS组肉兔血清中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)及补体4(C4)的含量最高；200 mg/kg COS组血清中免疫球蛋白A(IgA)含量最高。综上所述，饲粮中添加COS能够通过提高养分表观消化率及其在体内的代谢水平，从而改善肉兔的生长性能，同时可通过提高免疫器官重和血清免疫球蛋白含量来提高机体免疫功能。本试验条件下，饲粮中COS适宜添加水平为50~100 mg/kg。
关键词: 壳寡糖    抗生素    生长性能    免疫功能    肉兔    
Effects of Dietary Chito Oligosaccharides on Growth Performance, Nutrient Apparent Digestibility, Slaughter Performance, Serum Biochemical Indexes and Body Immune Function of Meat Rabbits
WANG Ziping , YIN Dafei , LIU Mei , LI Jiantao , YANG Guiqin , GUO Dongxin , LI Fangfang     
College of Animal Science and Medicine, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110866, China
Corresponding author: LI Fangfang, professor, E-mail: lffsyau@syau.edu.cn.
Abstract: This experiment was conducted to investigate the effects of dietary chito oligosaccharides (COS) on growth performance, nutrient apparent digestibility, serum biochemical indexes and body immune function of meat rabbits. A total of 300 rabbits at similar age [(35±2) days of age], healthy condition and body weight, which were randomly divided into 6 groups with 5 replicates per group and 10 rabbits per replicate. In a single factor completely randomized design, the control group consisted of blank control group (basal diet) and antibiotic control group (basal diet+20 mg/kg polymyxin E), and the four COS groups were fed a basal diet supplemented with COS at 50, 100, 150 and 200 mg/kg, respectively. The pre-trial period lasted for 7 days, and the trial period lasted for 35 days. The results showed as follows: 1) compared with blank control group, dietary 50, 100 and 150 mg/kg COS increased the average daily gain (ADG) of meat rabbits significantly (P < 0.05); feed/gain (F/G) in 150 mg/kg COS group had the best effect. The diarrhea rate in 50 mg/kg COS group was the lowest. 2) Dietary COS had a better effect on slaughter performance, and the carcass weight of rabbits in 150 mg/kg COS group was significantly higher (P < 0.05). Compared with blank control group, the evisceration ratio of meat rabbits in COS groups was significantly increased (P < 0.05). 3) Compared with blank control group, adding COS significantly increased the apparent digestibility of dry matter (DM), gross energy (GE), crude protein (CP) of meat rabbits (P < 0.05), and the best effect was in 50 mg/kg COS group. 4) Compared with antibiotic control group, the contents of glucose (GLU), triglycerides (TG) and total cholesterol (TC) in serum of meat rabbits in 50 mg/kg COS group were significantly decreased (P < 0.05). 5) Compared with blank control group and antibiotic control group, thymus weight of meat rabbits in 50 and 150 mg/kg COS groups was significantly increased (P < 0.05); the contents of immunoglobulin G (IgG), immunoglobulin M (IgM) and complement 4 (C4) in serum in 100 mg/kg COS group were the highest. The content of serum immunoglobulin A (IgA) in 200 mg/kg COS group was the highest. In summary, dietary COS can effectively improve the growth performance of meat rabbits by improving the nutrient apparent digestibility and the metabolic level of nutrients in the body. At the same time, it can improve the immune function of the body by increasing the gland weight of immune organs and the content of serum immunoglobulin. Under the experimental conditions, dietary COS in appropriate level is 50 to 100 mg/kg.
Key words: COS    antibiotics    growth performance    immune function    meat rabbits    

壳寡糖又称甲壳低聚糖(chito oligosaccharides, COS)，是壳聚糖化学水解或酶降解得到的产物，具有分子质量低、聚合度高、黏度低和完全溶于水等特性，并且具有抗菌、抗氧化、抗炎等生物学特性[1-2]。在2020年以前，抗生素常作为高效的生长促进剂被长期使用，造成了动物耐药[3-4]、环境污染[5-8]以及人体间接耐药[9-10]等诸多问题，国家全面禁止饲料中促生长类药物添加剂使用之后，COS作为替抗类添加剂候选者之一备受关注。研究表明，饲粮中添加寡糖可提高动物免疫力和生产性能，降低死亡率，改善动物消化道内环境，还可提高动物对养分消化率、初生动物存活率、母畜及其后代免疫功能[11-12]，增强动物机体抗应激的能力[13-14]，显著提高禽类宰前活重和免疫器官重[15-17]，提高生长性能和增强非特异性免疫功能[18-19]，提高繁殖性能和种蛋孵化率[20]，提高兔平均日增重(ADG)[21]，增强兔的抗病能力[22-23]。COS属于益生素类功能性寡糖，同样具有上述部分优点，广泛应用于畜禽生产中，在猪、鸡、牛和羊饲粮中的替抗效果显著，但在家兔饲养中鲜有应用报道。因此，本试验旨在通过肉兔饲粮中添加不同水平COS，探究其作为替抗添加剂对肉兔生长性能、血清生化指标以及机体免疫功能的影响，确定肉兔饲粮中COS的最适添加水平，为其在肉兔生产中的应用提供参考。

1 材料与方法 1.1 试验材料

多黏菌素E(19 000 IU/mg)和COS(脱乙酰度90%，相对分子质量＜2 000)购自江苏南通某生物科技有限公司。

1.2 试验设计、试验动物及饲粮

本试验采用单因素随机试验设计，选取日龄[(35±2)日龄]相近、健康状况良好、体重相近的日本大耳白肉兔300只(公母各占1/2)，随机分为6组，分别为空白对照组、抗生素对照组以及4个COS组，每组5个重复，每个重复10只兔。试验分组详情见表 1，预试期7 d，正试期35 d。基础饲粮组成及营养水平参照文献[24]配制(表 2)。

表 1 试验分组 Table 1 Experimental groups
表 2 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 2 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis)  
1.3 饲养管理

试验在河北省保定市涞水县永阳镇檀山村兔场进行，时间为2021年11月6日至2021年12月18日。各试验组舍内饲养管理条件保持一致，进兔前兔舍彻底消毒，按照兔场常规免疫程序对试验兔进行免疫接种。肉兔单笼饲养，每日2次固定时间投喂，自由采食和饮水。

1.4 检测指标 1.4.1 生长性能

试验开始和结束当天记录各组试验兔体重，统计全期饲喂量，计算ADG、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)，记录各组腹泻情况，参照李燕舞等[25]方法进行。

1.4.2 屠宰性能及免疫器官指数

饲养试验结束第2天，各组每个重复随机选取1只试验兔进行屠宰采样，记录宰前活重和全净膛重；称重并计算胸腺指数、脾脏指数[25]。

全净膛重：去除血液、头部、毛皮、四肢以及全部内脏器官后的胴体重[25]。

1.4.3 养分表观消化率

试验结束前3天，连续3 d记录每只兔每天实际采食量，收集所有处理兔的全部粪便，预处理后4 ℃保存。试验全部结束后，将粪样烘干粉碎，放入样品袋中备测。在实验室测定饲粮和粪样中总能(GE)、干物质(DM)、粗蛋白质(CP)以及粗脂肪(EE)的含量，计算表观消化率，参照陈丹丹[26]方法进行。

1.4.4 血清生化指标

试验结束当天，每组中每个重复取体重接近平均体重的兔2只进行心脏采血，室温静置，取血清3 000 r/min离心10 min，留上层血清转移至20 mL无菌离心管，-20 ℃冻存。参照试剂盒说明书检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)、尿素(UREA)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)以及补体4(C4)的含量及白球比(A/G)。试剂盒购自江苏宝来生物科技有限公司，为双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒。

1.5 数据统计分析

采用SPSS 28.0统计软件中的one-way ANOVA程序对数据进行方差分析，用LSD法进行多重比较。P＜0.05为差异显著，数据用“平均值±标准差”表示。

2 结果 2.1 饲粮添加COS对肉兔生长性能的影响

由表 3可知，与空白对照组相比，抗生素对照组、50、100、150和200 mg/kg COS组肉兔末重均显著提高(P＜0.05)，分别提高了3.78%、3.45%、5.27%、4.13%。与空白对照组相比，抗生素对照组、各COS组平均日增重显著提高(P＜0.05)，分别提高了3.49%、5.95%、4.80%、7.57%、5.07%。与空白对照组相比，抗生素对照组、各COS组料重比均显著降低(P＜0.05)，分别降低了3.28%、5.31%、4.51%、6.70%、4.50%。50 mg/kg COS组腹泻率最低，空白对照组和200 mg/kg COS组腹泻率最高。

表 3 饲粮添加COS对肉兔生长性能的影响 Table 3 Effects of dietary COS on growth performance of meat rabbits
2.2 饲粮添加COS对肉兔屠宰性能的影响

由表 4可知，各组间宰前活重差异不显著(P＞0.05)；与空白对照组相比，抗生素对照组、各COS组全净膛重显著提高(P＜0.05)，分别提高了14.53%、11.24%、7.80%、13.56%、8.70%。与空白对照组相比，抗生素对照组、50、100、150和200 mg/kg COS组全净膛率均显著提高(P＜0.05)，分别提高了12.97%、7.94%、7.01%、13.03%、9.82%。

表 4 饲粮添加COS对肉兔屠宰性能的影响 Table 4 Effects of dietary COS on slaughter performance of meat rabbits
2.3 饲粮添加COS对肉兔免疫器官指数的影响

由表 5可知，与空白对照组相比，150 mg/kg COS组胸腺重显著提高了39.10%(P＜0.05)；空白对照组、抗生素对照组、COS组之间的脾脏重、胸腺指数和脾脏指数差异均不显著(P＞0.05)。

表 5 饲粮添加COS对肉兔免疫器官指数的影响 Table 5 Effects of dietary COS on immune organ indexes of meat rabbits
2.4 饲粮添加COS对肉兔养分表观消化率的影响

由表 6可知，与空白和抗生素对照组相比，50 mg/kg COS组肉兔饲粮DM表观消化率分别显著提高了30.29%和18.83%(P＜0.05)。与空白和抗生素对照组相比，50 mg/kg COS组肉兔饲粮GE表观消化率分别显著提高了17.11%和20.57% (P＜0.05)。与空白和抗生素对照组相比，各COS组肉兔饲粮CP表观消化率均显著提高(P＜0.05)。各组间饲粮EE表观消化率差异不显著(P＞0.05)。与空白和抗生素对照组相比，50、100、150和200 mg/kg COS组饲粮CF表观消化率均显著提高(P＜0.05)。

表 6 饲粮添加COS对肉兔养分表观消化率的影响 Table 6 Effects of dietary COS on nutrient apparent digestibility of meat rabbits  
2.5 饲粮添加COS对肉兔血清免疫指标的影响

由表 7可知，与空白对照组相比，抗生素对照组、100、150和200 mg/kg COS组肉兔血清中IgA含量分别显著提高了19.95%、43.12%、22.59%、45.95%(P＜0.05)；与抗生素对照组相比，100和200 mg/kg COS组肉兔血清中IgA含量分别显著提高了19.33%和21.68%(P＜0.05)。与空白对照组相比，抗生素对照组、各COS组肉兔血清IgG含量分别显著提高了11.13%、16.52%、37.67%、39.95%、21.73%(P＜0.05)；100、150和200 mg/kg COS组的肉兔血清IgG含量较抗生素对照组分别显著提高了23.91%、25.95%、9.55%(P＜0.05)。抗生素对照组、100、150和200 mg/kg COS组肉兔血清中IgM含量比空白对照组分别显著提高了21.68%、48.47%、18.46%、39.89%(P＜0.05)；与抗生素对照组相比，100和200 mg/kg COS组肉兔血清中IgM含量分别显著提高了22.03%和14.97%(P＜0.05)。与空白对照组相比，抗生素对照组、各COS组血清中C4含量分别显著提高了50.83%、27.13%、57.32%、79.87%、74.65%(P＜0.05)；150和200 mg/kg COS组血清C4含量比抗生素对照组分别显著提高了19.17%和15.71%(P＜0.05)。

表 7 饲粮添加COS对肉兔血清免疫指标的影响 Table 7 Effects of dietary COS on serum immune indexes of meat rabbits  
2.6 饲粮添加COS对肉兔血清生化指标的影响

由表 8可知，与空白对照组相比，抗生素对照组、100、150和200 mg/kg COS组肉兔血清中ALB含量分别显著降低了44.51%、24.60%、32.37%、35.65%(P＜0.05)；与空白对照组相比，50 mg/kg COS组肉兔血清中ALB含量分别显著降低了16.64%(P＜0.05)；与抗生素对照组相比，50和100 mg/kg COS组肉兔血清中ALB含量分别显著提高了50.23%、35.88%(P＜0.03)。与空白对照组相比，抗生素对照组、各COS组肉兔血清中TP含量分别显著提高了95.03%、33.98%、83.76%、84.26%、98.64%(P＜0.05)。与空白对照组相比，100、150和200 mg/kg COS组血清中TG含量分别显著升高了25.85%、32.15%、39.07%(P＜0.05)；与抗生素对照组相比，100、150和200 mg/kg COS组肉兔血清中TG含量分别显著升高了15.55%、21.34%、27.69%(P＜0.05)；与抗生素对照组相比，50 mg/kg COS组肉兔血清中TG含量显著降低了7.88%(P＜0.05)。与空白对照组相比，50、100 mg/kg COS组肉兔血清中TC含量分别显著降低了13.97%和8.77%(P＜0.05)，150和200 mg/kg COS组肉兔血清中TC含量分别显著升高了13.96%和14.18%(P＜0.05)。与空白对照组相比，抗生素对照组、100、150和200 mg/kg COS组肉兔血清中UREA含量分别显著升高了12.46%、8.86%、15.85%、29.06%(P＜0.05)；与抗生素对照组相比，200 mg/kg COS组肉兔血清中UREA含量显著升高了14.76%(P＜0.05)。与空白对照组相比，抗生素对照组肉兔血清中GLU含量显著升高了25.20%(P＜0.05)；100和150 mg/kg COS组肉兔血清中GLU含量比空白对照组分别显著升高了22.04%和18.79%(P＜0.05)。

表 8 饲粮添加COS对肉兔血清生化指标的影响 Table 8 Effects of dietary COS on serum biochemical indices of meat rabbits
3 讨论 3.1 饲粮中添加COS对肉兔生长性能的影响

兔肉具有高蛋白质、低脂肪、高消化率、低胆固醇等特点，是老少皆宜的“保健肉”。陈中卫等[27]在肉鸭饲粮中添加50 mg/kg COS代替抗生素能显著提高肉鸭生长性能；Liu等[28]研究饲粮中COS对断奶仔猪生长性能、营养物质消化率、肠道形态及粪便脱落量的影响结果表明，COS能够有效改善仔猪的采食量和F/G且与金霉素组结果相似，本试验结果与之相似，COS可提高肉兔ADG、降低F/G且效果优于多黏菌素E。

COS能够有效降低生长期肉兔的腹泻率，本试验空白对照组腹泻兔最后均死亡，COS组及抗生素对照组腹泻兔在试验前期发生腹泻后经休养可恢复健康，故在加强饲养管理的同时补充COS可降低腹泻率，50 mg/kg COS组腹泻率最低。朱爱民等[29]探究不同水平COS对断奶仔猪生长性能的影响试验结果中表明，COS组仔猪末重显著高于空白对照组，F/G显著低于对照组，ADG显著升高，腹泻率显著降低，本试验结果与之相似。综上所述，COS可提高肉兔ADG，降低F/G和腹泻率，结合成本考虑，添加50 mg/kg COS时可得到最佳生长性能。

3.2 饲粮中添加COS对肉兔屠宰性能及免疫器官指数的影响

肉兔的屠宰性能是体现经济效益的重要指标。COS或低聚壳聚糖对兔屠宰性能的研究非常少，在本试验各组宰前活重不显著的前提下，试验组全净膛重和全净膛率均显著高于空白对照组，且试验组间全净膛重和全净膛率随COS添加水平增加而显著增加，150 mg/kg效果最好。免疫器官指数是反映动物免疫力强弱的重要指标，胸腺是脊椎动物产生功能性T细胞的主要器官[30]。肉仔鸡饲粮中添加COS替代金霉素的研究结果表明，100 mg/kg COS组胸腺指数和脾脏指数显著高于抗生素组[31]，与本试验结果在最佳添加水平上略有区别，推测是不同试验动物COS最适添加水平不同所导致。

3.3 饲粮中添加COS对肉兔养分表观消化率的影响

消化率可直观反映试验动物对饲粮中养分消化吸收水平。程万莲等[32]探究甘露寡糖对肉兔养分表观消化率的影响试验结果表明，400、800 mg/kg甘露寡糖组肉兔DM表观消化率显著高于对照组；寡糖对断奶仔猪养分表观消化率的影响试验研究结果表明，果寡糖组仔猪DM表观消化率显著高于抗生素组[33]，本试验结果与上述试验结果相似。本试验中，4个COS组肉兔DM表观消化率均显著高于空白对照组和抗生素对照组，COS添加水平为50 mg/kg时DM表观消化率最高。魔芋甘露寡糖对生长獭兔营养物质表观消化率的影响试验结果表明，添加魔芋甘露寡糖獭兔DM、CP和GE的消化率显著高于空白对照组[21]，本试验结果与其一致，说明COS能够有效提高肉兔对饲粮中DM、GE以及CP的表观消化率，且适宜添加水平为50和100 mg/kg。

3.4 饲粮中添加COS对肉兔血清生化指标的影响

何孟莲等[34]探究壳寡糖对泌乳中期奶牛生产性能、免疫及抗氧化功能的影响试验结果表明，COS组奶牛血清中UREA、TP、IgG和IgA含量均显著高于空白对照组，ALB含量显著降低；周巨旺[35]探究甘露寡糖对湖羊羔羊血清生化指标影响试验结果表明，甘露寡糖显著提高血清中TP的含量。本试验结果同样表明，与空白对照组相比，COS各组的血清IgA、IgG、IgM以及C4的含量均显著提高，100和200 mg/kg COS组血清IgA含量显著高于抗生素对照组。

血清中TG含量反映机体脂肪代谢状况，UREA含量体现饲粮中氮的利用效率。探究COS对白羽肉鸡血清生化指标的影响结果表明，COS组白羽肉鸡血清TG含量显著降低[36]；甘露寡糖对湖羊羔羊血清生化指标影响试验研究结果表明，在羔羊代乳品中添加甘露寡糖羊血清中TG含量显著升高，血清中TC、GLU、TP、ALB含量升高[35]。本试验结果表明，血清中TG含量与COS添加水平呈正相关，50 mg/kg COS组血清TG含量显著低于抗生素对照组；COS添加水平为50和100 mg/kg时，与空白对照组和抗生素对照组相比均能显著降低肉兔血清中TC的含量，50 mg/kg COS组与空白对照组相比能够显著提高血清中的UREA含量，与上述试验结果一致。结合生长性能和养分表观消化率结果，添加50和100 mg/kg COS可降低血清中TC、TG、GLU含量，提高UREA含量，从而提高肉兔对饲粮能量和CP的表观消化率，最终有效改善肉兔生长性能。

4 结论

①  饲粮中添加COS能够有效改善肉兔ADG和F/G等生长性能，提高DM、CP和粗纤维等养分表观消化率。

②   饲粮中添加COS可提高肉兔胸腺重及血清免疫球蛋白、C4的含量，降低血清中TG、TC和GLU的含量。

③   本试验条件下，肉兔饲粮中COS适宜添加水平为50~100 mg/kg。

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